⑴ mq60prob全自動化學發光怎麼使用
1、打開儀器電源,等待儀器自檢,按鍵F3STARTUP啟動,查看庫存INVENTORY。
2、樣品預旁仔處理過程,將樣品放入樣品杯中。
3、樣品測試程序按樣品檢測進行。
4、選擇PRINT鍵,列印出結果。
5、待清洗完畢,返回主菜單,選型桐擇F2SHUTDOWN關機,關閉儀器電源。運租汪
⑵ 如何做好ECL發光檢測實驗
Western blot顯色的方法主要有以下幾種:一、放射自顯影,二、 底物化學發光ECL,三、底物熒光ECF,四、底物DAB呈色。現常用的有底物化學發光ECL和底物DAB呈色。大部分Western blot顯色底物是化學發光底物,發表文章通常也是用底物化學發光ECL。
ECL法檢測辣根過氧化物酶的原理是辣根過氧化物酶在H2O2存在下,氧化化學發光物質魯米諾(lumino,氨基苯二醯一肼)並發光,在化學增強劑存在下光強度可以增大1000倍,通過將印記放在照相底片上感光就可以檢測辣根過氧化物酶的存在。ECL法操作簡便,應用現成的試劑盒,按照說明,將兩種顯色底物等體積混合後將其覆蓋在膜表面使其均勻,用玻璃膠片把膜包起來,馬上在暗室中將X光片覆蓋在膜的上面,顯影、定影(或用熒光檢測儀檢測)
ECL Western特異發光檢測試劑盒用於辣根過氧化物酶(HRP)標記的蛋白或核酸檢測。下面以engreen的超敏型ECL發光液Enlight-Plus為例,說一下檢測 實驗步驟 。
1. 常規電泳、轉膜、HRP 標記抗體或核酸探針孵育、洗膜。以下操作在室溫進行。
注意:Enlight-Plus 推薦的抗體稀釋度為:
儲存液濃度為1mg/ml 的一抗推薦稀釋度 儲存液濃度為1mg/ml 的二抗推薦稀釋度
1:1000-1:5000 或 0.2-1.0μg/ml1:2000-1:10,000 或10-50ug/ml
2.新鮮配製發光工作液。將BufferA 和Buffer B 按1:1 比率混合,製成發光工作液(每1cm2膜需要0.125ml 發光工作液)。轉移到清潔的塑料小盒中。
3. 用鑷子將漂洗過的膜取出,將膜的下緣與濾紙輕輕接觸以除去膜上多餘的洗液,但勿使膜完全乾燥。將膜轉移至有發光工作液的塑料小盒中,使其完全浸泡,輕輕搖晃,室溫孵育幾十秒到1 分鍾。
4. 用鑷子將膜夾起5-10 秒,並將膜的下緣與濾紙輕輕接觸以除去膜上多餘的發光液,迅速將膜完全包裹於潔凈保鮮膜內,去除氣泡和褶皺,蛋白面朝上固定於X 片暗盒內。
5. 在黑暗中一次重疊放入3 張X 光膠片,30 分鍾或更長時間後全部取出顯影。
6. 對同一張膜進行多次蛋白雜交:用PBST 或TBST 洗滌掉發光液(10min×3 次),然後從開始一抗雜交即可。
ECL的使用注意事項 :
1. 發光液不宜暴露於強光下時間過久,請避光保存,在暗室操作。
2. 為了得到最佳的曝光效果,優化一抗、二抗的稀釋比例。
3. 請選擇高質量保鮮膜。
4. 對於Enlight發光液,應避免使用NaN3 回收HRP 偶聯的抗體,因為NaN3 能抑制HRP 的活性。
⑶ 化學發光試劑盒測定結果的驗證方法有哪些
將印跡膜置於封閉液中,室溫輕輕震盪20-60min,以封閉掉非特異性位點。
棄去封閉液,加入適量的一抗溶液,於搖床上輕輕震盪1h。(也可將印跡膜與一抗在2-8°C條件下孵育過棗橡配夜。)
將印跡膜於洗脫液中懸浮清洗5min以上如敏,並更換洗脫液4-6次。
4
將印跡膜與適量的HRP-結合物置於搖床上輕輕震盪,凳指室溫孵育1h。
5
重復步驟3以去除未結合的HRP-結合物
6
將A液和B液以1:1混合即得到超敏ECL化學發光工作液,推薦使用量為0.1mL/cm2。
7
將工作液與印跡膜於室溫孵育5min。
8
將膜從工作液中取出,並用吸水紙吸去多餘的液體,置於兩層干凈的保鮮膜之間,小心擠出印跡膜與保鮮膜之間的氣泡。
9
將印跡膜置於暗盒中,蛋白面朝上,於暗室中進行X-光膠片曝光。
10
建議首次曝光時間為60s,進而通過調整曝光時間獲得較好的實驗結果。
⑷ ecl化學發光試劑盒是干嗎用的
化學發光試劑盒是干嗎用的
我只聽說在研究分子表面蛋白質時會用到,最近還有一個華裔科學家因為發光蛋白得了諾貝爾獎的。
具梁基宏體的應鋒模用有:
細胞檢測中的應用
脂質過氧化物檢測的應用(自由基、活性氧分析)
生物感測器的研究應用
分子生物學研究的橡冊應用
衛生學檢測中的應用
環境檢測應用
葯物篩選
醫學應用
應用化學發光免疫分析法可用於對甲狀腺素類、腫瘤標記物、生殖-孕激素類、血清抗原抗體類、心臟指示類等項目檢測。
⑸ 安圖生物lumo化學發光怎麼使用
化學發光怎麼使用
化學發光現象是一種常見的自然現象,電子發光法是認為的物理發光。
1、化學發法。利用化學發光測定化學發光反應反應物、催化劑、增敏劑、抑制劑,偶合反應中的反應物、催化劑、增敏劑的方法叫做化學發光法。化學發光是物質在化學反應過
程中,其物質分子吸收化學能產生光的輻射現象,如:REK-20N型化學發光定氮儀是興化睿科採用化學發光檢測原理,待測樣品(或標樣)被引入到高溫裂解
爐後,在1050℃左右的高溫下,樣品被完全氣化並發生氧化裂解,其中的氮化物定量地轉化為一氧化氮(NO)。樣品氣經過膜式乾燥器脫去其中的水份。亞穩
態的一氧化氮在反應室內與來自臭氧發生器的O3氣體發生反應,轉化為激發態的NO2*。當激發態的NO2*躍遷到基態時發射出光子,光信號由光電倍增管按
特定波長檢測接收。再經微電流放大器放大、計算機數據處理,即可轉換為與光強度成正比的電信號。在一定的條件下,反應中的化學發光強度與一氧化氮的生成量
成正比,而一氧化氮的量又與樣品中的總氮含量成正比,故可以通過測定化學發光的強度來測定樣品中的總氮含量。
2、電子發光,主要技術特徵是:將至少兩只LED芯並聯後形成一組發光電路,通過金屬導線聯接電源腳座;也可以將上述一組發光電路設置成為多組發光電路,通
過金屬導線並聯後接電源腳座。其有益效果是造型小巧美觀,耗電量小,亮度高使用壽命長,大大降低了照明燈的製造和使用成本。現有應急燈如果以充電電池作為
電源,使用電子發光管則可延長照明時間5至10倍。