化學發光法與蛋白晶元法哪個更高級

⑴ 電化學發光法和電化學方法哪個靈敏度更高

這根本就是一種方法。都是羅氏的電化學發光法，業內簡稱就說電化學。

⑵ 化學發光法和酶聯法哪個檢查准確

化學發光法檢查更准確

化學發光法採用化學發光燃料進行測試的方法，靈敏度高，分析方法簡單快捷，檢測時間短及診斷范圍寬等優點，相對於酶聯法，化學發光法檢查更准確。

化學發光法主要是依據化學檢測體系中待測物濃度與體系的化學發光強度在一定條件下呈線性定量關系的原理，利用儀器對體系化學發光強度的檢測，而確定待測物含量的一種痕量分析方法。

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一、化學發光法分類：

1、依據供能反應的特點，可將化學發光分析法分為：

1）普通化學發光分析法（供能反應為一般化學反應）；

2）生物化學發光分析法（供能反應為生物化學反應；簡稱BCL）；

3）電致化學發光分析法（供能反應為電化學反應，簡稱ECL）等。

2、根據測定方法該法又可分為：

1）直接測定CL分析法；

2）偶合反應CL分析法（通過反應的偶合，測定體系中某一組份）；

3）時間分辨CL分析法（即利用多組份對同一化學發光反應影響的時間差實現多組份測定）；

4）固相、氣相、液相CL分析法；

5）酵聯免疫CL分析法等

二、酶聯法實驗步驟

1、將待檢樣本和酶標抗原或抗體按不同步驟與固相載體表面吸附的抗體或抗原發生反應，後加入酶標抗體與免疫復合物結合，用洗滌的方法分離抗原抗體復合物和游離的未結合成分。

2、加入酶反應底物，根據底物被酶催化產生的顏色及其吸光度(A)值的大小進行定性或定量分析的方法, 步驟其實很簡單：ELISA用血清來檢測，首先血液要經過至少半個小時的凝集，然後取血清。

3、將酶復合物用稀釋液稀釋後，加血清及陰性、陽性對照，還有就是質控品,這是嚴格的要求，它的范圍必須在質控范圍內。

4、經過一個小時的孵育，然後洗板，加底物，半個小時避光反應後加終止液即完成反應部分，然後就是讀數。由數值來判斷結果的陰性或陽性。

⑶ 生物晶元的定義\原理\作用\應用領域

生物晶元技術是隨著"人類基因組計劃"（human genome project, HGP）的進展而發展起來的，它是90年代中期以來影響最深遠的重大科技進展之一，它融微電子學、生物學、物理學、化學、計算機科學為一體的高度交叉的新技術，具有重大的基礎研究價值，又具有明顯的產業化前景。生物晶元技術包括基因晶元、蛋白質晶元、細胞晶元、組織晶元、以及元件型微陣列晶元、通道型微陣列晶元、生物感測晶元等新型生物晶元（1）。本文主要討論基因晶元技術，它為"後基因組計劃"時期基因功能的研究提供了強有力的工具，將會使基因診斷、葯物篩選、給葯個性化等方面取得重大突破，該技術被評為1998年度世界十大科技進展之一。

1 基本概念

基因晶元（gene chip）也叫DNA晶元、DNA微陣列（DNA microarray）、寡核苷酸陣列（oligonucleotide array），是指採用原位合成（in situ synthesis）或顯微列印手段，將數以萬計的DNA探針固化於支持物表面上，產生二維DNA探針陣列，然後與標記的樣品進行雜交，通過檢測雜交信號來實現對生物樣品快速、並行、高效地檢測或醫學診斷，由於常用硅晶元作為固相支持物，且在制備過程運用了計算機晶元的制備技術，所以稱之為基因晶元技術。

2 技術基本過程

2．1 DNA方陣的構建

選擇矽片、玻璃片、瓷片或聚丙烯膜、尼龍膜等支持物，並作相應處理，然後採用光導化學合成和照相平板印刷技術可在矽片等表面合成寡核苷酸探針;（2）或者通過液相化學合成寡核苷酸鏈探針，或PCR技術擴增基因序列，再純化、定量分析，由陣列復制器（arraying and replicating device ARD），或陣列機（arrayer）及電腦控制的機器人，准確、快速地將不同探針樣品定量點樣於帶正電荷的尼龍膜或矽片等相應位置上，再由紫外線交聯固定後即得到DNA微陣列或晶元（3）。

2．2 樣品DNA或mRNA的准備。

從血液或活組織中獲取的DNA/mRNA樣品在標記成為探針以前必須進行擴增提高閱讀靈敏度。Mosaic Technologies公司發展了一種固相PCR系統，好於傳統PCR技術，他們在靶DNA上設計一對雙向引物，將其排列在丙烯醯胺薄膜上，這種方法無交叉污染且省去液相處理的繁鎖；Lynx Therapeutics公司提出另一個革新的方法，即大規模平行固相剋隆（massively parallel solid-phase cloning）這個方法可以對一個樣品中數以萬計的DNA片段同時進行克隆，且不必分離和單獨處理每個克隆，使樣品擴增更為有效快速（4）。

在PCR擴增過程中，必須同時進行樣品標記，標記方法有熒游標記法、生物素標記法、同位素標記法等。

2．3 分子雜交

樣品DNA與探針DNA互補雜交要根據探針的類型和長度以及晶元的應用來選擇、優化雜交條件。如用於基因表達監測，雜交的嚴格性較低、低溫、時間長、鹽濃度高；若用於突變檢測，則雜交條件相反（5）。晶元分子雜交的特點是探針固化，樣品熒游標記，一次可以對大量生物樣品進行檢測分析，雜交過程只要30min。美國Nangon公司採用控制電場的方式，使分子雜交速度縮到1min，甚至幾秒鍾（6）。德國癌症研究院的Jorg Hoheisel等認為以肽核酸（PNA）為探針效果更好。

2．4 雜交圖譜的檢測和分析

用激光激發晶元上的樣品發射熒光，嚴格配對的雜交分子，其熱力學穩定性較高，熒光強；不完全雜交的雙鍵分子熱力學穩定性低，熒光信號弱（不到前者的1/35~1/5）（2），不雜交的無熒光。不同位點信號被激光共焦顯微鏡，或落射熒光顯微鏡等檢測到，由計算機軟體處理分析，得到有關基因圖譜。目前，如質譜法、化學發光法、光導纖維法等更靈敏`、快速，有取代熒光法的趨勢。

3 應用

3．1 測序

基因晶元利用固定探針與樣品進行分子雜交產生的雜交圖譜而排列出待測樣品的序列，這種測定方法快速而具有十分誘人的前景。Mark chee等用含135000個寡核苷酸探針的陣列測定了全長為16.6kb的人線粒體基因組序列，准確率達99%（7）。Hacia等用含有48000個寡核苷酸的高密度微陣列分析了黑猩猩和人BRCA1基因序列差異，結果發現在外顯子11約3.4kb長度范圍內的核酸序列同源性在98.2%到83.5%之間，提示了二者在進化上的高度相似性（8）。

3．2 基因表達水平的檢測。

用基因晶元進行的表達水平檢測可自動、快速地檢測出成千上萬個基因的表達情況。Schena等採用擬南芥基因組內共45個基因的cDNA微陣列（其中14個為完全序列，31個為EST），檢測該植物的根、葉組織內這些基因的表達水平，用不同顏色的熒光素標記逆轉錄產物後分別與該微陣列雜交，經激光共聚焦顯微掃描，發現該植物根和葉組織中存在26個基因的表達差異，而參與葉綠素合成的CAB1基因在葉組織較根組織表達高500倍。（9）Schena等用人外周血淋巴細胞的cDNA文庫構建一個代表1046個基因的cDNA微陣列，來檢測體外培養的T細胞對熱休克反應後不同基因表達的差異，發現有5個基因在處理後存在非常明顯的高表達，11個基因中度表達增加和6個基因表達明顯抑制。該結果還用熒光素交換標記對照和處理組及RNA印跡方法證實（10）。在HGP完成之後，用於檢測在不同生理、病理條件下的人類所有基因表達變化的基因組晶元為期不遠了（11）。

3．3 基因診斷

從正常人的基因組中分離出DNA與DNA晶元雜交就可以得出標准圖譜。從病人的基因組中分離出DNA與DNA晶元雜交就可以得出病變圖譜。通過比較、分析這兩種圖譜，就可以得出病變的DNA信息。這種基因晶元診斷技術以其快速、高效、敏感、經濟、平行化、自動化等特點，將成為一項現代化診斷新技術。例如，Affymetrix公司，把P53基因全長序列和已知突變的探針集成在晶元上，製成P53基因晶元，將在癌症早期診斷中發揮作用。又如，Heller等構建了96個基因的cDNA微陣，用於檢測分析風濕性關節炎（RA）相關的基因，以探討DNA晶元在感染性疾病診斷方面的應用（12）。現在，肝炎病毒檢測診斷晶元、結核桿菌耐葯性檢測晶元、多種惡性腫瘤相關病毒基因晶元等一系列診斷晶元逐步開始進入市場。基因診斷是基因晶元中最具有商業化價值的應用。

3．4 葯物篩選

如何分離和鑒定葯的有效成份是目前中葯產業和傳統的西葯開發遇到的重大障礙，基因晶元技術是解決這一障礙的有效手段，它能夠大規模地篩選、通用性強，能夠從基因水平解釋葯物的作用機理，即可以利用基因晶元分析用葯前後機體的不同組織、器官基因表達的差異。如果再用m RNA 構建c DNA表達文庫,然後用得到的肽庫製作肽晶元,則可以從眾多的葯物成分中篩選到起作用的部分物質。或者,利用RNA、單鏈DNA有很大的柔性，能形成復雜的空間結構，更有利與靶分子相結合，可將核酸庫中的RNA或單鏈DNA固定在晶元上，然後與靶蛋白孵育，形成蛋白質-RNA或蛋白質-DNA復合物，可以篩選特異的葯物蛋白或核酸，因此晶元技術和RNA庫的結合在葯物篩選中將得到廣泛應用。在尋找HIV葯物中，Jellis等用組合化學合成及DNA晶元技術篩選了654536種硫代磷酸八聚核苷酸，並從中確定了具有XXG4XX樣結構的抑制物，實驗表明，這種篩選物對HIV感染細胞有明顯阻斷作用。（13）生物晶元技術使得葯物篩選，靶基因鑒別和新葯測試的速度大大提高，成本大大降低。基因晶元葯物篩選技術工作目前剛剛起步，美國很多制葯公司已開始前期工作，即正在建立表達譜資料庫，從而為葯物篩選提供各種靶基因及分析手段。這一技術具有很大的潛在應用價值。

3．5 給葯個性化

臨床上，同樣葯物的劑量對病人甲有效可能對病人乙不起作用，而對病人丙則可能有副作用。在葯物療效與副作用方面，病人的反應差異很大。這主要是由於病人遺傳學上存在差異，如葯物應答基因，導致對葯物產生不同的反應。例如細胞色素P450酶與大約25%廣泛使用的葯物的代謝有關，如果病人該酶的基因發生突變就會對降壓葯異喹胍產生明顯的副作用，大約5%~10%的高加索人缺乏該酶基因的活性。現已弄清楚這類基因存在廣泛變異，這些變異除對葯物產生不同反應外，還與易犯各種疾病如腫瘤、自身免疫病和帕金森病有關。如果利用基因晶元技術對患者先進行診斷，再開處方，就可對病人實施個體優化治療。另一方面，在治療中，很多同種疾病的具體病因是因人而異的，用葯也應因人而異。例如乙肝有較多亞型，HBV基因的多個位點如S,P及C基因區易發生變異。若用乙肝病毒基因多態性檢測晶元每隔一段時間就檢測一次，這對指導用葯防止乙肝病毒耐葯性很有意義。又如，現用於治療AIDS的葯物主要是病毒逆轉錄酶RT和蛋白酶PRO的抑制劑，但在用葯3-12月後常出現耐葯，其原因是rt、pro基因產生一個或多個點突變。Rt基因四個常見突變位點是Asp67→Asn、Lys70→Arg、Thr215→Phe、Tyr和Lys219→Glu,四個位點均突變較單一位點突變後對葯物的耐受能力成百倍增加（14）。如將這些基因突變部位的全部序列構建為DNA晶元，則可快速地檢測病人是這一個或那一個或多個基因發生突變，從而可對症下葯，所以對指導治療和預後有很大的意義。

此外，基因晶元在新基因發現、葯物基因組圖、中葯物種鑒定、DNA計算機研究等方面都有巨大應用價值。

4 基因晶元國內外現狀和前景

自從1996年美國Affymetrix公司成功地製作出世界上首批用於葯物篩選和實驗室試驗用的生物晶元，並製作出晶元系統（15），此後世界各國在晶元研究方面快速前進，不斷有新的突破。美國的Hyseq公司、Syntexi公司、Nanogen公司、Incyte公司及日本、歐洲各國都積極開展DNA晶元研究工作；摩托羅拉、惠普、IBM等跨國公司也相繼投以巨資開展晶元研究。98年12月Affymefrix公司和Molecular Dynamics公司宣布成立基因分析協會（Genetic Analysis Technology Consortium）以制定一個統一的技術平台生產更有效而價謙的設備，與此相呼應，英國的Amershcem Pharmacia Biotechnology公司也在同一天宣布將提供部分掌握的技術以推動這項技術的應用（16）。美國關於晶元技術召開了兩次會議，柯林頓總統在會上高度贊賞和肯定該技術，將基因晶元看作是保證一生健康的指南針（17）。預計在今後五年內生物晶元銷售可達200-300億美元；據《財富》雜志預測（97.3），在21世紀，生物晶元對人類的影響將可能超過微電子晶元。

⑷ 大哥們.請問化學發光法相當於幾代

大哥們.請問化學發光法相當於幾代幹嘛對「相當於」這個數詞這么偏執？

就是3代-4代

現在哪裡還有2代試劑？早停產了！

⑸ 和化學發光法哪個更准

這個具體看你要測什麼指標。 化學發光法：其是利用化學反應產生的能量進行激發發光，其具有儀器簡單、檢測限低、線性范圍寬等優點，在化學分析方面應用廣泛。與熒光法相比，化學發光法不需要外來的光源，從而減少了光散射，降低了噪音信號的干擾

⑹ 關於化學發光檢測法

化學發光檢測法有很多，不知你說的是不是焰色反應，如果是焰色反應，則是由於金屬原子內部電子能級躍遷導致的，不同金屬會發出不同顏色（波長）的光。這時一般只能作為定性檢測，不能作為定量檢測。
如果指的是原子發射光譜，其發光原理也是原子中最外層電子受到激發（可以是光致也可以是熱致等等），由基態轉化為激發態，然後躍遷回基態以光的形式輻射能量。這時可以作為定量分析（可定量必可以定性），這時可以看發射光譜譜圖曲線的高度，一般有幾種方法來測量，像外標法，內標法，標准曲線法等等，如果想知道更詳細的東西可以參考儀器分析的有關內容。

⑺ 化學發光法是幾代

化學發光法是四代。

HIV化學發光法一般是指第四代艾滋病檢測試劑，也就是艾滋病抗體聯合p24抗原的檢測。第三代是單純艾滋病抗體的檢測，P24抗原的產生要早於抗體，所以與第三代相比，第四代抗原抗體聯合檢測的結果更加精準。

其窗口期是高危接觸後14天，我國有專家認為，在14天後，如果結果是陰性，基本就可以排除艾滋病病毒感染的可能，但更多的研究人員更傾向於兩周後初篩，六周後復檢。如果二者結果都為陰性，那麼就可以排除艾滋病感染了。

化學發光法分類：

依據供能反應的特點，可將化學發光分析法分為：

1、普通化學發光分析法（供能反應為一般化學反應）；

2、生物化學發光分析法（供能反應為生物化學反應；簡稱BCL）；

3、電致化學發光分析法（供能反應為電化學反應，簡稱ECL）等。

⑻ 化學發光法和酶聯免疫法的區別，哪個更准確

1、原理上的區別

化學發光法依據化學檢測體系中待測物濃度與體系的化學發光強度在一定條件下呈線性定量關系的原理，利用儀器對體系化學發光強度的檢測，而確定待測物含量。

酶聯免疫法原理是在測定時把受檢標本和酶標抗原或抗體與固相載體表面的抗原或抗體起反應加入酶反應的底物後，底物被酶催化變為有色產物，產物的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據顏色反應的深淺來進行定性或定量分析。

2、分類上的區別

化學發光法依據供能反應的特點，可將化學發光分析法分為普通化學發光分析法，供能反應為一般化學反應；生物化學發光分析法，供能反應為生物化學反應；電致化學發光分析法，供能反應為電化學反應。根據測定方法又可分為直接測定CL分析法、偶合反應CL分析法等。

酶聯免疫法根據測定方法可分為雙抗體夾心法；雙位點一步法；間接法測抗體法，利用酶標記的抗體以檢測已與固相結合的受檢抗體；競爭法，以測定抗原為例，受檢抗原和酶標抗原競爭與固相抗體結合，因此結合於固相的酶標抗原量與受檢抗原的量呈反比。

3、作用上的區別

化學發光法在痕量金屬離子、各類無機化合物、有機化合物分析及生物領域都有廣泛的應用。

酶聯免疫法可用於測定抗原，也可用於測定抗體，ELISA現在已成為目前分析化學領域中的前沿課題 。

⑼ 化學發光法（HIV定量檢測)和酶聯三代（HIV定性檢測)有什麼區別

化學發光法相當於酶聯四代試劑，這種方法既可以測出抗原，也可測出抗體。由於可以測定抗原，所以它比三代酶聯試劑更優越（因三代試劑僅能測抗體）。因此，化學發光法檢測4周基本可排除，但為了保險起見還是建議在6周後檢測一下，就徹底排除了。

⑽ 關於hiv化學發光法，求解答

1、首先，男性為女性WT主動KJ，假設對方有艾滋，只要你的口腔沒有新鮮的、出血的傷口，且對方沒有大量的分泌物噴射入你的口中，你是不可能感染HIV的。因為HIV無法通過正常的口腔黏膜感染人體，更重要地是，人的唾液中含有大量的酶和蛋白質，會抑制HIV的活性，到達你口腔的分泌物會被你的唾液中和，其中的HIV便無法構成感染。
2、化學發光法相當於4代酶聯法，HIV（p24+ab）的意思是檢查HIV的p24抗原和HIV抗體（ab是antibody）的縮寫。化學發光是目前精度最高的檢查之一，你的檢查是既查抗原，又查抗體的。通常認為4周=28天用化學發光法陰，即可基本排除了。所以你29天，數值0.17<1，說明是陰性，可以基本排除感染了。放心吧！
3、如果你2周後的症狀是HIV急性期症狀引起的，那麼29天檢查化學發光，是可以查出抗原或抗體陽性的，因為急性期症狀正是由於體內HIV大量復制所導致。所以你的症狀與HIV無關。
4、你本來就沒什麼風險，現在又29天陰，其實可以不必再檢查了。祝你健康！