⑴ 狂犬病的簡史
原文地址：狂犬病疫苗發展史作者：路邊有樹人用狂犬病疫苗發展史
人用狂犬病疫苗的發展經歷了從傳統的神經組織疫苗到現行的以組織培養疫苗為主的過程，並且正在應用現代生物技術不斷改進和發展。
* 早期使用的傳統疫苗：
1882年，巴斯德在牛腦分離到一株狂犬病病毒，在兔腦內連續傳90代。該病毒傳至50代時，潛伏期由原來的15天縮短為固定的7天，而且毒力減弱，成為固定毒。1885年巴斯德嘗試用固定毒感染兔，發病7天後取出脊髓，乾燥後製成減毒活疫苗。該疫苗成功地治癒了一名9歲男孩。1908年，Fermi改進了巴斯德的方法，但殘餘毒力仍高達100MLD50。造成由固定毒引起的急性腦脊髓炎。1973年，WHO狂犬病專家委員會建議，不能將含有活毒的狂犬病疫苗用於人體，因此，狂犬病減毒活疫苗結束了歷史使命。1911年，Semple在此基礎上作了進一步改進，將腦組織滅活，制備了無毒性的Semple腦組織滅活疫苗。雖然與減活疫苗相比，安全性得到很大的改善，但使用Semple疫苗後，仍出現了嚴重的神經麻痹事故，其發生率在1/500～1/2000間。這種疫苗目前在發展中國家仍在廣泛使用。我國自1949年起，一直使用由羊腦制備的Semple疫苗，直至1980年停止使用，由原代地鼠腎細胞疫苗取代。1955年，Fuenjalida和Palacios制備新生鼠腦（SMBV）疫苗。該疫苗在過去40多年裡在南美洲廣泛使用。但是神經並發症發生率仍然高達1/8000。總結神經組織疫苗主要存在著下列問題：免疫原性弱，含有神經麻痹因子，其中有的含有殘余的活病毒。另外，山羊和綿羊用於疫苗生產可能會被潛伏病毒感染。因此，WHO專家委員會在第七次報告（1984年）中支持限制和放棄生產腦組織疫苗，並極力提倡使用滅活的細胞培養疫苗。* 禽胚疫苗：
為了降低神經麻痹事故的發生，1956年Peck研究制備鴨胚疫苗（DEV）。該疫苗在美國和其他國家用作狂犬病暴露後處理並廣泛使用了27年，很少觀察到嚴重的副作用，但中和性抗體水平不如腦組織疫苗。人二倍體細胞疫苗問世後，經比較顯示安全性和免疫效果均優於DEV，1982年很多國家已經停止使用DEV疫苗。*細胞培養疫苗—WHO推薦使用的疫苗：
1. 人二倍體細胞疫苗（HDCV）：
1964年，美國Wistar將Semple疫苗生產用PM狂犬病毒株適應到WI-38人二倍體細胞株，後來法國Merieun研究所又適應到MRC-5細胞株生產疫苗。病毒經培養、澄清、加熱和β-丙內酯滅活、凍干制備成疫苗。該疫苗於1974年首次獲准生產，並於1978年開始商品化。由於HDCV所具有的高免疫原性和良好的耐受性，目前在美國、加拿大、大多數歐洲國家和幾個亞洲國家使用。HDCV的缺點在於HDC不太容易培養，而且狂犬病毒在HDC上培養的病毒滴度相對較低，這使得疫苗的價格非常昂貴，這樣就限制了該疫苗在發展中國家的使用。2. 原代細胞培養疫苗：
原代細胞培養疫苗具有的一個優點是不必冷凍保存細胞種。但每批疫苗須檢查培養器官源的雜質（細菌、支原體、病毒），並且動物器官的可用量是限制工業化生產的因素。地鼠腎細胞疫苗（PHKCV）：1958年，Kissling提出並由Fenje進一步發展，將狂犬病毒固定毒適應到地鼠腎細胞（PHKC）上生產滅活疫苗，並獲得成功。1968年該疫苗在加拿大批准用於人體加強和暴露前接種。該疫苗於1980年在我國獲得國家衛生部批準的生產文號，取代Semple疫苗。狗腎細胞疫苗：1978年，Van Wezal等使用狂犬病毒PM株適應到狗腎細胞，並使用了微載體以使疫苗大規模生產。疫苗對暴露前後的人體接種實驗在荷蘭進行，獲得的免疫反應和HKCV具可比性，並於1980年獲准在荷蘭生產。雞胚細胞疫苗：Kando 1965年將Flary HEP株適應到雞胚細胞，培養病毒經β-丙內酯滅活、濃縮、凍干（後採用區帶離心純化加以改進）制備成疫苗並在日本商品化生產。1983年Barth等從上述日本疫苗分化出一種用Flary LEP株適應到雞胚細胞上的純化雞胚細胞疫苗（PCECV）。該疫苗目前由德國Chiro Behring GmbH公司生產。3. 傳代細胞系疫苗：
生物科技的進步，如傳代細胞在微載體上用發酵罐培養，使狂犬病疫苗工業化生產成為現實。1984年由法國Merieun研究所研製成功Vero細胞疫苗。制備過程中採用了微載體技術（細胞貼附在上懸浮培養）進行工業化大罐培養。80年代和最近的大量實驗證實無論用作暴露前人體免疫或暴露後處理，Vero疫苗均獲得很好的免疫效果。1984年11月，WHO和RF合作，採用微載體技術高密度灌流Vero細胞，工業化生產狂犬病疫苗，歷時15年，取得成功。目前，Vero細胞疫苗已經在世界上許多國家取得了安全有效的使用經驗。