A. 菌种选育的方法有哪些
较简单的方法 是生产筛选育种法，较复杂的方法是诱变育种法，最复杂的方法 是杂交育种法。
1。生产筛选育种法这种方法实际上和微生物菌种复壮一 样，只不过目的不同。
菌种复壮只要求菌种的性能恢复到原有的 水平就可以了，而生产筛选育种法要求其菌种是比原有菌种更佳 的新菌种，必须加大工作的重复性才能实现这个目的。
2。诱变育种法能显着诱发微生物细胞变异（基因突变） 的因素称为诱变剂。
诱变剂分为物理诱变剂及化学诱变剂。常用 的物理诱变剂有紫外线、X射线、y射线、6°CO和快中子，常用 的化学诱变剂有氮、芥子气、亚硝酸、磷酸二乙酯、甲基磺酸乙 酯、甲基硝基亚硝基胍、5—溴尿嘧啶、2 —氨基嘌呤。
诱变剂引 起微生物细胞变异的频率要比自然的变异高得多，所以诱变育种 能为我们提供更多的获得优良菌种的机会。
B. 菌种复壮的主要原理
首先，我们要知道为什么要菌种复壮。因为菌种保存久了，会自发的产生变异，自发突变对微生物来说很常见，发生变异后，微生物的特性就会改变，变成不是我们想要的特性。但是，在保存的菌种中，发生突变的微生物不可能是全部，总有一部分微生物还是原来的特性，所以复壮就是要把这些未变化的微生物再次筛选出来，再进行纯化、保存。筛选的标准是原保存菌种的特性。
C. 微生物菌种保藏的方法有哪些
菌种的优劣是食用菌生产成败的关键。菌种是国家重要的生物资源，也是微生物工厂首要的生产资料。由于微生物繁殖快、易变异，因此微生物菌种特别需要妥善保藏。世界各国对微生物菌种都很重视。中国科学院微生物研究所专门设立了菌种的保藏机构，为各生产单位收藏和供应各种优良菌种。当然就具体的生产单位而言，大量的生产用菌种还得靠自己来生产和保藏。
菌种保藏的目的：是使优良菌种经过较长时间后，仍能保持菌种的优良性状、生活能力及纯度，降低菌种的衰亡速度，确保菌种的纯一，防止杂菌污染及绝种。
保藏菌种的方法：人们在长期的生产实践中，积累了不少保藏菌种的经验，常用的保藏方法有：斜面低温保藏法、液体石蜡保藏法、砂土管保藏法、滤纸片保藏法、谷粒保藏法等。常用保藏菌种的方法有以下几种：
（1）斜面低温保藏法这是最简单最普通的保藏方法。首先将菌种在适宜的斜面培养基（一般PDA）上培养成熟后，选择菌丝生长粗壮，边缘保存。一般保存温度4～6℃，除草菇和银耳菌种外（10～15℃），此方法对其他食用菌都适宜，一般菌种可保藏2～4个月，所以需定时移接。此法保藏虽然方便，但是保藏时间短，需经常转管，也很容易发生衰退变异现象。因此，不能用作长期保藏，最好与其他方法结合起来保藏。
另外，为了减少保藏期间培养基水分蒸发，琼脂最好加到2.5%。为防止菌种在保藏过程中产酸分的积累，应加入0.2%的磷酸氢二钾、磷酸二氢钾等缓冲盐类，同时，培养成熟后，最好将棉塞管口外剪平，并用矿蜡封或换以无菌木塞，这样做也可以减少培养基水分的散失，延长保存时间。
在农村如果没有冰箱，可采用土法保藏。即把保藏用的斜面菌种换上无菌橡皮塞，并用矿烛蜡封后密闭的广口瓶中，悬入井底保藏。（2）贮藏室保藏法原种和栽培种一般只在贮藏室短期保藏，贮藏室温度0～10℃为好。室内应清洁、干燥、无光，应经常检查温度和湿度，以降低其生活力，减少变异退化，防止杂菌污染，避免过早出菇。温度越高，保存的时间越短。
D. 何谓菌种的退化和复壮
简而言之,菌种退化就是基因变异的结果,菌种出现生长衰退.复壮就是找出未退化的菌种分离除来,重新培养,达到原来的生长水平不过哲学吧不该讨论这种问题
E. 怎样判断菌种已复壮
复壮的判断方法：
1.生化指标:比如一些能够利用特殊物质作为生长必须物质的菌株，你可以通过其生活过程中某些中间代谢物的产量作为指标。或者是这个菌株产生的酶或者是这个菌株产生的次生代谢物。
2.生理指标：菌株如果复壮，那么他的生长量就会恢复到原来的水平或者更高，适合用于群体研究。
3.通过特殊的生化反应筛选出复壮的菌株：比如说你的菌株能够分解淀粉，那么你可以使用淀粉培养基进行培养，培养后通过碘液显色，粗略判断其是否复壮。
F. 微生物学中菌种复壮的主要原理是什么
我们看到和使用的菌种都是由以亿计量的相同的细胞组成，与动物和人相比，微生物结构简单，很容易繁殖，也很容易变异，所以，随着时间，有些细胞的活性就会减弱，表现为“菌种”这个集合的活力就减弱了。在这种情况下，采用纯培养技术，把单个细胞分离开来，让他们在特定培养基上成长，把生长快，活性高的细胞挑出来，形成一个新的“菌种”集合体，也就是所谓的单细胞克隆吧。菌种复壮是发酵生产过程最常用的一个技术，也是靠微生物吃饭的企业赚钱的最基本方法。
G. 如何对微生物菌种进行活化
方法如下：
1 定期移植法的菌种复苏较简单，直接转接即可；
2 液体石蜡法保存的菌种在复苏时，挑取少量菌体转接在适宜的新鲜培养基上，生长繁殖后，再重新转接一次；
3 沙土管法保存菌种在复苏时，在无菌条件下打开沙土管，取部分沙土粒于适宜的斜面培养基上，长出菌落后再转接一次。或取沙土粒于适宜的液体培养基中，增殖培养后再转接斜面；
4 真空冷冻干燥法保存菌种在复苏时先用70%酒精棉花擦拭安瓿上部，将安瓿管顶部烧热， 用无菌棉签沾冷水，在顶部擦一圈，顶部出现裂纹，用挫刀或镊子颈部轻叩一下，敲下已开裂的安瓿管的顶端，用无菌水或培养液溶解菌块，使用无菌吸管移入新鲜培养基上，进行适温培养；
5 -80℃ 冰箱冻结法保存菌种复苏时，从冰箱中取出安瓿管或塑料冻存管，应立即放置38℃-40℃水浴中快速复苏并适当快速摇动。直到内部结冰全部溶解为止，约需50秒-100秒。开启安瓿管或塑料冻存管，将内容物移至适宜的培养基上进行培养
6 液氮超低温冻结法保存菌种复苏与-80℃ 冰箱冻结法保存菌种复苏相似，从液氮罐中取出安瓿管或塑料冻存管，应立即放置在38℃-40℃水浴中快速复苏并适当摇动。直到内部结冰全部溶解为止，一般约需50秒-100秒。开启安瓿管或塑料冻存管，将内容物移至适宜的培养基上进行培养。
H. 如何对退化的菌种进行复壮
如果一个菌种因遗传变异而呈现退化，我们是无法通过改变环境条件使其恢复原状的。因此，所谓“复壮”，是指从衰退的群体中找出尚未衰退的少数个体，以达到恢复菌种的优良性状的目的；或通过改变某些内（如菌种的生理状况）、外（如营养成分）因素，使因长期在人工条件（尤其是不适的条件）下培养，生活力和生理机能下降的菌种恢复生活力和正常生理机能的一种措施。
菌种复壮最好在菌种的生产性能尚未衰退之前及时进行，并定期对菌种进行复壮处理，以防衰退。主要通过淘汰已衰退的个体和定期重新分离菌种措施来完成。常有以下几种方法：
（1）纯菌种分离
自然界里，食用菌大都与细菌、霉菌、酵母菌等微生物混杂生活在一起，因此，为了获得纯菌种，就必须进行纯菌种的分离培养。所谓纯菌种分离是指采用无菌操作技术，将食用菌的菌种从混杂的微生物群中单独地分离出来。常用的分离方法有孢子分离法、组织分离法、基内菌丝分离法和土中菌丝分离法。
在自然条件下，菌种的复壮，只有靠产生新一代才能实现，经有性繁殖所产生的孢子，是食用菌生活史的起点，具有丰富的遗传特性。要有计划的把无性繁殖和有性繁殖的方法交替使用，最好每年进行一次组织分离，3年进行一次有性繁殖。新分离的菌种，必须经过试验，性能符合要求后，方能用于生产。
（2）更换培养基
在菌种的培养、保藏、继代过程中，每隔一个时期，注意改变培养基成分（改变、调整、增加某种碳源、氮源或矿质元素等），或在原有的培养基中添加酵母膏、麦芽汁、氨基酸类物质和维生素等，或采用麦粒、谷粒、玉米粒等颗粒菌种，以刺激菌丝生长，提高菌种活力。
（3）适当添加维生素
在高温的夏季，培养双孢菇、凤尾菇等食用菌母种时，在琼脂培养基中加入适量维生素E或维生素B1，可延缓细胞衰老，而且产量还有增加的趋势。
（4）菌丝液培养
从已退化的菌群中分离出仍保持原菌种典型性状的单个菌体细胞，经生长测定后进行扩大培养，以恢复原菌种的优良性状。具体操作是：在无菌条件下，将试管中菌丝体刮下，放入装有100毫升无菌水的三角瓶中，充分振动摇匀，使菌丝分散，然后用注射器吸取10毫升菌丝液，注入装有90毫升无菌水的三角瓶内，充分摇匀后，接入平板培养基上，每个平板接入2～3滴菌丝液，使菌丝液分散在平板上，在适宜温度下培养使菌丝萌发，从中挑选健壮的菌丝接入斜面试管。等到菌丝长满斜面，经试验证明符合原菌种的性状后，即可用于生产。
（5）尖端菌丝切取复壮
菌丝体的生长点位于菌丝的尖端，取菌丝的尖端旺盛生长点，进行分离培养，以得到优良的菌种。
（6）原基复壮分离法
此法适宜木腐菌的菇类，原基分离能保持母本性状。由于原基形成的物质条件更优越化，因而更易筛选到优良菌株。如用灭菌的尖头镊子在无菌条件下镊取金针菇原基，接入斜面培养基中，恒温培养7～10天。选取菌丝浓密、气生菌丝旺盛的斜面种再转管，生长性状稳定的即为复壮后的分离种。
（7）芽孢复壮
吕作舟、蔡衍山（1992）提出，银耳菌种出耳率下降，可加入芽孢进行复壮。具体做法是：将约500毫升含5克葡萄糖和数滴乳酸灭菌营养液（pH5.5左右），分注入30～40支银耳芽孢试管中，将芽孢菌落洗脱，即得芽孢悬液。芽孢悬液应随配随用，每瓶木屑种加 20毫升芽孢悬液，段木栽培的出耳率可明显提高。
（8）种木分离
袋料栽培的木生菌类，要定期接入木材中，待长出子实体后，挑选菇木或耳木进行种木分离，从而达到复壮作用。
I. 菌种如何复壮呢
栽培种如果保存时间太长，是没有办法复壮的。如果菌丝体已经出现老化现象，最好不要再使用。