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微生物生长量测定的方法有哪些

发布时间:2022-06-26 00:32:28

❶ 高中测定微生物数量的方法

1、计数器测定法:
即用血细胞计数器进行计数。取一定体积的样品细胞悬液置于血细胞计数器的计数室内,用显微镜观察计数。由于计数室的容积是一定的(O.1mm3),因而根据计数器刻度内的细菌数,可计算样品中的含菌数。本法简便易行,可立即得出结果。
本法不仅适于细菌计数,也适用于酵母菌及霉菌孢子计数。
2、电子计数器计数法:
电子计数器的工作原理是测定小孔中液体的电阻变化,小孔仅能通过一个细胞,当一个细胞通过这个小孔时,电阻明显增加,形成一个脉冲,自动记录在电子记录装置上。
该法测定结果较准确,但它只识别颗粒大小,而不能区分是否为细菌。因此,要求菌悬液中不含任何碎片。
3、活细胞计数法
常用的有平板菌落计数法,是根据每个活的细菌能长出一个菌落的原理设计的。取一定容量的菌悬液,作一系列的倍比稀释,然后将定量的稀释液进行平板培养,根据培养出的菌落数,可算出培养物中的活菌数。此法灵敏度高,是一种检测污染活菌数的方法,也是目前国际上许多国家所采用的方法。使用该法应注意:①一般选取菌落数在30~300之间的平板进行计数,过多或过少均不准确;②为了防止菌落蔓延,影响计数,可在培养基中加入O.001%2,3,5一氯化三苯基四氮唑(TTC);③本法限用于形成菌落的微生物。
广泛应用于水、牛奶、食物、药品等各种材料的细菌检验,是最常用的活菌计数法。
4、比浊法
比浊法是根据菌悬液的透光量间接地测定细菌的数量。细菌悬浮液的浓度在一定范围内与透光度成反比,与光密度成正比,所以,可用光电比色计测定菌液,用光密度(OD值)表示样品菌液浓度。
此法简便快捷,但只能检测含有大量细菌的悬浮液,得出相对的细菌数目,对颜色太深的样品,不能用此法测定。
5、测定细胞重量法
此法分为湿重法和干重法。湿重法系单位体积培养物经离心后将湿菌体进行称重;干重法系单位体积培养物经离心后,以清水洗净放人干燥器加热烘干,使之失去水分然后称重。
此法适于菌体浓度较高的样品,是测定丝状真菌生长量的一种常用方法。
6、测定细胞总氮量或总碳量
氮、碳是细胞的主要成分,含量较稳定,测定氮、碳的含量可以推知细胞的质量。此法适于细胞浓度较高的样品。
7、颜色改变单位法(colour change unit,简称CCU)
这种方法通常用于很小,用一般的比浊法无法计数的微生物,比如支原体等,因为支原体的液体培养物是完全透明的,呈现为清亮透明红色,因此无法用比浊法来计数,由于支原体固体培养很困难,用cfu法也不容易计数,因此需要用特殊的计数方法,即CCU法。它是以微生物在培养基中的代谢活力为指标,来计数微生物的相对含量的,下面以解脲脲原体为例,简单介绍其操作:
(1).取12只无菌试管,每一管装1.8ml解脲脲原体培养基。
(2).在第一管加入0.2ml待测解脲脲原体菌液,充分混匀,从中吸取0.2ml加入第二管,依次类推,10倍梯度稀释,一直到最末一管
(3).于37度培养,以培养基颜色改变的最末一管作为待测菌液的CCU,也就是支原体的最大代谢活力,比如第六管出现颜色改变,他的相对浓度就是10的6次方CCU/ml.
一般来说,比浊法和菌落计数法就可以满足绝大多数细菌的计数,但是对支原体这样比较特殊的微生物,用CCU法比较合适。
测定微生物生长的方法很多,各种方法均有其优缺点,也不是在任何情况下都适用。在微生物学工作中一般常用的是平皿菌落计数法、计数器法和比浊法。至于哪种方法比较适合你,得根据你的具体条件而定。

❷ 测量微生物生长的方法有哪些

原发布者:568126398
2微生物生长量的测定微生物特别是单细胞微生物,体积很小,个体生长很难测定,意义也不大。通常测定微生物的生长是测群体的生长,而测定繁殖则都要建立在计数这一基础上。2.1测生长量测定生长量的方法有许多种,适用于一切微生物。2.1.1直接法2.1.1.1测体积它是一种较为粗放的方法,通常用于初步比较用。例如将待测培养液放在刻度离心管中作自然沉降或进行一定时间的离心,然后观察沉降物的体积。2.1.1.2称干重采用离心法或过滤法测定,一般干重为湿重的10%~20%。如用离心法,将待测培养液离心,再用清水洗涤离心1~5次后干燥,可用105℃、100℃或红外线烘干,也可在较低的温度(80℃或40℃)下进行真空干燥,然后称干重。如细菌一个细胞一般重10-12~10-13g。如为丝状真菌可用滤纸过滤,细菌可用醋酸纤维膜等滤膜进行过滤。过滤后,细胞可用少量水洗涤,再真空干燥(40℃以下),称干重。以乳酸菌为例,在液体培养基中,细胞的浓度大约为2×108个/ml。100ml培养物可得10~70mg干重的细胞。2.1.2间接法2.1.2.1生理指标法与生长量相平行的生理指标很多,它们均可用作生长测定的相对值。1)测定细胞总含氮量来确定细菌浓度大多数细菌的含氮量为干重的12.5%,酵母菌为7.5%,霉菌为6.0%。总氮量与细胞粗蛋白的含量(因其中包括了杂环氮和氧化型氮)的关系可用下式计算:粗蛋白总量=含氮量%×6.25含氮量的测定方法有很多,常用凯氏定氮法。此法适用于细胞浓度较高的样品,同时

❸ 下列哪些是微生物生长的测定方法( ) A细胞总数计数法 B活菌计数法 C重量法 D

abc均可
主要的微生物数目检测方法包括了直接检测法,间接检测法和生理指标法。
直接检测法包括:显微镜配合血细胞计数板检测,膜过滤检测。
间接检测法包括:间接膜过滤检测,比浊法,单菌落分离检测。
生理指标法:主要包括耗氧量检测,粘度检测等等。

❹ 细菌生长测定方法包括哪几方面

一、生长量测定法
1.1体积测量法:又称测菌丝浓度法。 1.2称干重法 1.3比浊法 1.4生理指标法 如:测含氮,碳量
二、计繁殖数测定法
2.1血球计数板法 2.2染色计数法 2.3膜过滤培养计数法 2.4液体稀释法 2.5平板菌落计数法

网上有具体操作,你可以网络微生物生长测定法,挑选出适用于细菌的。希望对你有帮助

❺ 用来测定细菌生长量的直接计数法和间接计数法包含哪些具体的方法

显微镜直接计数法和稀释平板计数法是测定微生物数量的常用方 法。 直接计数法中常用的是显微镜直接计数法,这种方法是先将待 测样品制成悬液,然后取一定量的悬液放在显微镜下进行计数(图1- 3-1)。根据在显微镜下观察到的微生物数目来计算出单位体积内的微 生物总数。直接计数法所需设备简单,可迅速得到结果,而且在计数 的同时能观察到所研究微生物的形态特征,其缺点是难以计数微小的 细菌。这种方法一般适用于纯培养悬浮液中各种单细胞菌体的计数。 间接计数法最常用的是稀释平板计 数法,它是根据微生物的培养特征而设计 的计数方法。这种方法在样品中含菌数较 少的情形下,也可以完成计数。 应用稀释平板计数法计数时,需要 将待测样品配制成均匀的系列稀释液,尽 量使样品中的微生物细胞分散开。再取一 定稀释度、一定量的稀释液接种到平板 中,使其均匀分布于平板中的培养基内; 或是将一定量的稀释液,与溶化后冷却至 45℃左右的琼脂培养基混合,倾入无菌培 养皿中,摇匀、静置待凝。经过培养后, 就由单个微生物生长繁殖形成菌落,这样 的一个菌落就代表着一个微生物个体。统 计培养基中出现的菌落数,即可推算出检 测样品中的活菌数。 FOR EXAMPLE:] 土壤中好气性细菌的计数 土壤中生活的微生物种类和数量是极其丰富的,这些数量众多的 微生物对提高土壤肥力有重要作用。因此,测定土壤中的含菌量可以 作为判定土壤肥力的一个重要指标。 材料器具 土壤样品;牛肉膏蛋白胨琼脂培养基(附录二)、无菌水;培养皿、 移液管、天平、锥形瓶、试管、酒精灯、恒温培养箱、摇床等。 活动程序 1.制备土壤稀释液 取土壤表层5~10 cm 处的土样。准确称取1 g 土样,放入盛有 99 mL 无菌水的锥形瓶(250 mL,放有小玻璃珠)中,用手或摇床振荡 20 min,即制成102 倍的稀释液。 用1 mL无菌移液管,吸取10 2倍稀释液0.5 mL,移入装有4.5 mL 无菌水的试管中,配制成103 倍稀释液。 用同样的方法可制成稀释倍数为104、105、106 的系列稀释菌液 (图1-3-2)。 图 移液时,要将移液管插入液面,吹吸3 次,每次吸上的液面要高 于前一次,让菌液混合均匀并减少稀释中的误差。每配一个稀释度要 换用一支移液管。 2.取样及倒平板 将无菌培养皿编号,依次为104、105、106,每一号码设置三个 重复。 用无菌移液管三支,分别吸取稀释倍数为104、105、106的土壤稀释 液各0.2 mL,注入到相应编号的培养皿中(每个稀释倍数各三个培养皿)。 将已灭菌牛肉膏蛋白胨琼脂培养基溶化,待冷却至45~50 ℃左 右,倾入到无菌培养皿中,每皿约15 mL,轻轻转动培养皿,使土壤 稀释液与培养基混合均匀。 3.培养 将上述接种好的平板培养基冷却后,倒置放入28~30 ℃的恒温 培养箱中培养24~36 h,直至长出菌落为止。 4. 观察记录 将实验中得到的菌落数填入表1-3-1。 结果分析 1.选取具有合适菌落数的稀释倍数并计数。 在计算结果时,从接种的3 个稀释度中选择一个合适稀释倍数, 统计出菌落数(图1-3-3)。选择的原则是: 过 (1) 细菌、放线菌、酵母菌以每个培养皿内有30~300 个菌落为 宜。霉菌以每个培养皿内有10~100 个菌落为宜。 (2) 同一稀释倍数各个重复的菌落数相差不太悬殊。 2.将统计出的菌落数按下列公式计算,得出每克样品菌数。 每克土壤样品菌数= 某稀释倍数的菌落平均数×稀释倍数

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