① 细胞保存液的特点
优点:
1、本试剂盒有裂解红细胞功能。能快速裂解采集样品中的红细胞,裂解能力强,能完全裂解体积比为1/10(血液/液基)红细胞量,相比同类产品裂解更完全,完全去除血液对检验结果造成的干扰。
2、试剂盒含有细胞固定剂成分,能快速对样品中的白细胞、脱落上皮细胞等有检验价值的细胞进行固定保存,防止有效细胞发生自溶。经试剂盒固定保存的细胞,细胞形态完好,能保持样品采集时细胞的原始形态,不会发生膨胀、固缩等形态变化,保证检验对有效细胞的数量和质量要求。
3、试剂盒能粘液具有稀释作用,能分离出大量包埋在粘液中的有效细胞。使更多有检验价值的细胞被保存下来,提供充足的细胞数量,为检验结果的准确提供保证;同时,处理后的样品经低速离心过滤后能彻底清除样本中的粘液,有效防止粘液对样品检验结果的干扰。
4、处理过的样本经过低速离心后可制成均匀单层的细胞薄片,达到检验要求。
5、经本试剂盒处理的脱落细胞对生物染色剂具有亲和性,有利于生物染色剂着色,为检验人员后续的工作提供方便。
6、本试剂盒使用简单,操作方便,大大节省了制备样品标本的时间,同时克服了传统检查方法的不足,是当前市场上推广TCT保存液的最好产品。
液基薄层细胞学检测技术(TCT技术)研究发展背景:液基薄层细胞学检测技术(Thin-Cytologic Test TCT),液基薄层细胞制片检查系统处理技术诞生于1991年美国等国家,率先应用于妇科细胞学检查,国内从2001年开始作液基细胞学筛查宫颈癌的研究,使该项技术得到迅速发展,被称之为一场细胞学制片技术的革命。
② 菌种保存方法甘油是什么
微生物在甘油中生长和代谢受到抑制的原理从而达到保藏目的。而且,甘油管冷冻保藏法适用于一般细菌的保存,同时也适用于链球菌、弧菌、真菌等需特殊方法保存的菌种,适用范围广,操作简便,效果好,无变异现象发生。
甘油-生理盐水保存液保存菌种优于甘油原液,其原因是加入生理盐水适当降低了甘油的高渗作用,且有肉汤培养物适量增加保存液的营养成分,从而更好地保护了待保存的菌株。
甘油管冷冻保藏法的具体步骤(供参考):
1、配制30%甘油(100%甘油:无菌水=3:7),高压灭菌后备用。
2、取lEP管一只,用接种环无菌刮取菌落若干,涮洗在盛有PBS的EP管中(也可用PBS洗涤培养基上的菌落制成悬液,再吸取悬液置于EP管中)。
3、在盛有菌悬液的EP管中加等量30%甘油。
4、封盖好,作好标记,置于-70℃冻存。也可以用生理盐水取代PBS。
③ 病毒保存液是什么
病毒保存液适用于病毒、流感病毒、手足口病毒等常见病毒样本采集保存运输工作,是采样管内浸末采样拭子病毒样本一种保护病毒的被检测物质的液体,可采集咽拭子、鼻拭子或特定部位组织样本,储存的样本可用于后续的核酸提取或纯化等临床实验。 通常分为两种,一种是非灭活型,能够保护病毒的蛋白和核酸,另一种是灭活型,通常含有灭活病毒的裂解盐,裂解蛋白而保护核酸。 1、灭活型:添加有裂解盐的病毒保存液就是灭活型的病毒保存液,里面含有的Tris、裂解盐、EDTA等主要目的是裂解核酸而释放出核酸,从而通过后续的实时荧光RT-PCR进行核酸检测,以此判断样本是否含病毒特征核酸,即是否感染病毒。核酸是由许多核苷酸聚合成的生物大分子化合物,包括脱氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA)两类,是生命的最基本物质之一。 病毒结构单一,就只含有一种核酸和蛋白质,因此检测出特征核酸就检测除了病毒。病毒属于寄生生物,采样后体外无法存活,如果不能及时检测,就需要放入病毒保存液中。为了保护病毒检测环境的安全性,就需要加入裂解盐来灭活病毒,释放出可以被检测的核酸即可。 2、非灭活型:除了灭活型的病毒保存液,此外还有非灭活型病毒保存液,不含裂解盐,但是保存的病毒完整性更好,检出率更高,除了核酸检测外还可以用于其他研究。 灭活型病毒保存液则使用上更安全,操作环境要求也不用那么严格,各有各的优势,目前研究的非灭活病毒保存液的成分主要为Hank's液基础,在Hank's液基础之上,还添加了诸如庆大霉素、真菌抗生素、BSA(牛血清白蛋白第五组分)、生物缓冲剂HEPES、氨基酸、冷冻保护剂、甘油等多种组分
④ 微生物的保藏技术各自特点
1.传代培养保藏,方法简便但是其缺点也很明显菌种管棉塞经常容易发霉,菌株遗传性状易变异,需定期转种,工作量大,且易被污染;2.冷冻保藏,适用抗冻能力强的微生物,注意保藏过程中菌种的退化。3.干燥保藏,主要适用于能形成孢子或孢子囊的微生物菌种,其中有包括沙土管保存和冷冻真空保藏。前者简单易行,适合实验室以及放线菌为菌种的保存,后者适合绝大部分菌种的保藏包括噬菌体和立克次氏体等的保藏。望采纳
⑤ 微生物学知识点
简述致病菌引起全身感染后,常见的几种类型?
答:①毒血症②菌血症③败血症④内毒素血症⑤脓毒血症
试述构成细菌侵袭力的物质基础。
答:①荚膜②黏附素③侵袭性物质
简述病原菌感染机体后,机体如何发挥抗菌免疫功能?
答:首先遇到机体的非特异性免疫包括皮肤与粘膜构成的屏障结构,血脑屏障,胎盘屏障及吞噬细胞对细菌的非特异性的吞噬和体液中杀菌抑菌物质对细菌的攻击。7-10天后,机体产生特异的细胞免疫和体液免疫与非特异性免疫一起杀灭病原菌
简述细菌耐药性产生的主要机制。
答:①钝化酶的产生②药物作用靶位发生改变③胞壁通透性的改变和主动外排机制④抗菌药物的不合理使用形成了抗菌药物的选择压力,在这种压力的作用下,原来只占很少比例的耐药菌株被保留下来,并不断扩大。
举例说明细菌命名的原则。
答:细菌的命名一般采用国际上通用的拉丁文双命名法。一个细菌种的学名由两个拉丁字组成,属名在前,用名词,首字母大写;种名在后,用形容词,首字母小写;两者均用斜体字。中文译名种名在前,属名在后。如Mycobaterium tuberculosis (结核分枝杆菌)。属名亦可不将全文写出,只用第一个大写字母代表,如M. tuberculosis
如何确定从标本中分离的细菌为葡萄球菌?并确定其有无致病性。
答:①直接镜检,经革兰染色后镜检发现革兰染色阳性呈葡萄状排列的球菌,可初步报告疑为葡萄球菌,需进一步分离培养鉴定。②分离培养:血培养需经增菌后转种血平板进一步鉴定,若无细菌生长,需连续观察7天,并以血平板确定有无细菌的生长。脓液、尿道分泌物、脑脊液沉淀物可直接接种血平板,37℃过夜,可形成直径约2-3mm、产生不同色素的菌落。金葡菌菌落周围有透明溶血环。③试验鉴定:血浆凝固酶试验,甘露醇发酵试验,耐热核酸酶试验,肠毒素测定,SPA检测。致病性葡萄球菌菌落周围有透明溶血环,血浆凝固酶试验阳性,甘露醇发酵试验阳性,耐热核酸酶试验阳性,SPA检测有A蛋白的存在。
什么是不耐热肠毒素(LT)?它的物理性质、基本结构、致病机理及与霍乱毒素(CT)的关系如何。
答:LT是肠产毒型大肠杆菌产生的致病物质,因对热不稳定,故称为不耐热肠毒素。其65℃30min可被破坏。LT分为LT-Ⅰ和LT-Ⅱ,LT-Ⅱ与人类疾病无关,LT-Ⅰ是引起人来胃肠炎的致病物质。其结构包括1个A亚单位和5个B亚单位,其中A亚单位是毒素的活性部分。B亚单位与肠粘膜上皮细胞表面的GM1神经节苷脂结合后,使A亚单位穿越细胞膜与腺苷环化酶作用,令胞内ATP转变为cAMP。胞质内cAMP水平增高后,导致肠粘膜细胞内的水、氯和碳酸氢钾等过度分泌到肠腔,同时钠的吸收减少,导致可持续几天的腹泻。LT-Ⅰ与霍乱肠毒素两者间的氨基酸的同源性达75%,他们的抗原高度交叉。
⑥ 跪求:微生物保存方法,各种保存方法的保存时间
1斜面低温保藏法:有芽孢细菌存半年,无则一个月。2液体石蜡保藏:两年。3沙土保藏:十年。4麸皮保藏:一年。5悬液保藏:一到两年。6冷冻真空干燥法:五到十五年。7液氮超低温法:十到二十年。8低温保藏法:一年。9甘油保藏法:半年
⑦ 什么是微生物菌种保藏
1.传代培养保藏法
又有斜面培养、穿刺培养、疱肉培养基培养等(后者作保藏厌氧细菌用),培养后于4—6℃冰箱内保存。
2.液体石蜡覆盖保藏法
是传代培养的变相方法,能够适当延长保藏时间,它是在斜面培养物和穿刺培养物上面覆盖灭菌的液体石蜡,一方面可防止因培养基水分蒸发而引起菌种死亡,另一方面可阻止氧气进入,以减弱代谢作用。
3.载体保藏法
是将微生物吸附在适当的载体,如土壤、沙子、硅胶、滤纸上,而后进行干燥的保藏法,例如沙土保藏法和滤纸保藏法应用相当广泛。
4.寄主保藏法
用于目前尚不能在人工培养基上生长的微生物,如病毒、、螺旋体等,它们必须在生活的动物、昆虫、鸡胚内感染并传代,此法相当于一般微生物的传代培养保藏法。病毒等微生物亦可用其他方法如液氮保藏法与冷冻干燥保藏法进行保藏。
5.冷冻保藏法
可分低温冰箱(-20—-30℃,-50—-80℃)、干冰酒精快速冻结(约-70℃)和液氮(-196℃)等保藏法。
6.冷冻干燥保藏法
先使微生物在极低温度(-70℃左右)下快速冷冻,然后在减压下利用升华现象除去水分(真空干燥)。
⑧ 外泌体细胞保存液是做什么的
细胞保存液起到保持、固定细胞原形态结构的作用,是病理细胞诊断基础,因为如果细胞形态结构发生变化,可能会带来诊断结果的误差,所以需要细胞保存液进行固定细胞形态,细胞保存液也是液基细胞试剂的核心构成。
液基薄层细胞制片检查系统处理技术诞生于1991年美国等国家,率先应用于妇科细胞学检查,国内从2001年开始作液基细胞学筛查宫颈癌的研究,使该项技术得到迅速发展,被称之为一场细胞学制片技术的革命。
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细胞保存液适用于宫颈脱落细胞检查、胸腹水脱落细胞检查、尿沉渣检查、痰液脱落细胞检查、针吸细胞检查,基本上病理科、妇科、内科、外科、泌尿科等科室会用到。液基薄层胞学检测技术特别适用于所有的女性的宫颈癌的早期诊断,是一项非常值得推广应用的临床检验技术。
脱落细胞保存液适用于各类脱落细胞如宫颈粘液、阴道分泌物、痰、鼻咽分泌物及其它粘稠性标本的处理,以佳效果进行细胞形态学检查,可以溶解、去除各类脱落细胞标本中影响显微镜下可见的粘液、杂质,便于病理学及细胞学检查。
液基细胞检测试剂盒主要由细胞保存液、细胞裂解液、提取液、稀释液、消化酶、防腐剂等及必要的细胞承载或制片器具组成,用于临床检验分析前细胞或微生物的保存、运输、提取、分离、沉淀、固定、制片等,用于各类脱落细胞如宫颈粘液、阴道分泌物等标本的处理,以佳效果进行宫颈癌筛查、炎症、HPV滴虫、霉菌等细胞形态学检查。
综上所述,细胞保存液是液基细胞检测试剂盒的成分之一,主要作用是为了保存和稳固细胞。
⑨ 病毒保存液具体是做什么作用的呢
通常在病毒采样后,样本并不是都能在样本采集处进行PCR检测,因此需要对采集到的病毒拭子进行运输和保存,病毒在体外环境是很难长时间保留的,很快降解后就无法检测到核酸了,因此需要往采样管内加入病毒保存液,我们单位实验室用的德晟的保存液。
⑩ 细胞外泌体保存液是什么
外泌体细胞保存液
外泌体是指包含了复杂 RNA 和蛋白质的小膜泡 (30-150nm),现今,其特指直径在40-100nm的盘状囊泡。1983年,外泌体首次于绵羊网织红细胞中被发现, 1987年Johnstone将其命名为“exosome”。多种细胞在正常及病理状态下均可分泌外泌体。其主要来源于细胞内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体,经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中 。
液基细胞保存液 是液基细胞学检测技术(Thin-Cytologic Test TCT)主要耗材。液基薄层细胞制片检查系统处理技术诞生于1991年美国等国家,率先应用于妇科细胞学检查,国内从2001年开始作液基细胞学筛查宫颈癌的研究,使该项技术得到迅速发展,被称之为一场细胞学制片技术的革命。