微生物的大肠菌群双料怎么算

❶ 微生物大肠菌群实验时双料管中的lst培养基是10毫升加小导管是吗还有单料管中加入的是多少呢

单料和双料lst都是分装10mL，都需要加入小倒管（用来收集气体），然后灭菌。使用时，单料里加1mL样品稀释液，如果加入多于1mL就得用双料。通常双料里加10mL，原因就在于MPN表里是三个连续的加样量。举例说明，对于固体样品如果用双料加入10mL0.1的样品稀释液，就相当加入了1，后面单料有1mL 0.1的和1mL 0.01的，就查1，0.1，0.01那个。液体的10mL原液就是10，1mL原液就是1，后面那个加0.1的，查10，1，0.1那个。以上仅仅是举例，完全可以根据需要调节加入哪个稀释度，然后根据MPN表注释2自行加倍或减倍。
9mL的生理盐水是用来稀释样品用的，1mL样品加到9mL生理盐水里就变成原来的十分之一了，逐级稀释就行。

❷ 关于微生物试验中大肠菌群的测定

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关于微生物试验中大肠菌群的测定
悬赏分：50 - 离问题结束还有 14 天 23 小时
问题一：国标中只是很笼统的介绍将检样25克放于含有225ml灭菌生理盐水中，成1：10的稀释液，然后是不是从这225ml的1：10的稀释液中吸取10ml接种到双料乳糖胆盐发酵管，共接种三管。然后仍然在这225ml的1：10的稀释液中吸取1ml接种到单料乳糖胆盐发酵管中，也接种三管。这样1：10这个稀释度就共接种了6管，其中3管是双料的，3管是单料的。是这样做吗，对吗？
问题二：假如我做了三个稀释度，分别是1：10、1：100、1：1000，这样是否共有乳糖胆盐发酵管12管，其中1：10有6管、1：100有3管、1：1000有3管，假设经过24小时培养后这12管均产气产酸，那么再接种到伊红美兰琼脂平板上，按每一管接种两个平板，是否要用24个平板？
问题三：假设这12管经过革兰氏染色均为革兰氏阴性无芽胞杆菌，乳糖发酵管也均产气，那么就为大肠杆菌阳性，可是报告怎么出呢，对照的检索表上最大值也只是阳性管数1 0.1 0.01 MPN
3 3 3 〉11000
可我1：10的有六管产酸产气啊，这到底怎么对照啊？

❸ 微生物大肠菌群检测为什么要用双料和单聊

出于培养基的营养物质是否满足微生物生长的最大需求的考虑，检测大肠菌群时需要区分单双料。
因为根据现行国标《GB 47893-2010 食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠菌群计数》的规定——“如接种量超过1 mL，则用双料LST肉汤”。因为接种量比较大，就要考虑到单料培养基不足以支持微生物的生长所需，所以要用双料培养基。

❹ 你好，老师！我有问题请教一下，做微生物大肠菌群实验的时候，单，双料管是怎么样加料的

所谓的单双料就是培养基加倍，水不变，接种量超过1mL就采用双料发酵，少于1mL就采用单料发酵。

❺ 微生物实验 水体中细菌总数的测定和大肠菌群的测定。

3倍乳糖蛋白胨液体培养基（三倍料）是用来接种100ml或者10ml的水样，而普通浓度的乳糖蛋白胨液体培养基（单倍料）是用来培养接种1ml及以下体积的水样。

这是为了保证在接种完水样之后，其浓度接近于单料的浓度。而单料的浓度是最适宜大肠菌群生长的。
例如：100ml水样+50ml三倍浓缩料，最后体积是150ml，三料被稀释了3倍，最后的浓度恰好是单倍料。
10ml水样可以加5ml单料也可以加10ml双料
1ml水样对浓度影响不大，就直接加单倍料里了。

❻ 做微生物大肠菌群实验的时候，单，双料管是怎么样加

现行国标《GB 47893-2010 食品安全国家标准 食品微生物学检验 大肠菌群计数》中对试管规格没有具体要求，但一般采用18×180mm的会多一些，或者双料18*180mm，单料15*150mm。还有产气实验要用到小导管，也没有具体型号，一般试管里装得下就行，建议不要太细，不然不好排气。
先把小管放进大管，然后再把大管倾斜，加入培养基。塞上棉花塞，煮沸灭菌。实验的时候打开棉花塞，接入样品。至于36正负1摄氏度恒温箱中培养，24，48，72小时各观察一次。迟缓反应者14-30天或补做5%乳糖发酵试验。

❼ 请问 微生物大肠菌群测定中 单料与双料管怎么配制

我们也在困惑这个问题，不问按目前的理解就是单料就是正常比例（1:1）的培养基，双料就是培养基与水的比例是2:1

❽ 微生物大肠杆菌检测,详述方法步骤,重点解释其中的单料,双料是什么意思以及最终的结果报告.

楼主：微生物大肠杆菌检测,在国标GB/T 4789.3－2003，GB/T 4789.3－2008，即国标03版与08版都有详细介绍，但两个版本现均作废，改用强制执行的2010版。其中，楼主强调的单料，双料，是对应与三个版本中均提到的“初发酵”时的接种量，当样品稀释液接种量为1ml或少于1ml时使用单料管，接种量大于1ml时使用双料管（详见2010版 6.2）。单料就是按照标准附录的培养基成分表正常配制出来的培养基，双料即是除水和PH值不变外，其余成分加倍。如果你买现成的固体培养基，更方便，按说明书配制，双料只要干粉重量加倍即可。结果报告。查阅MPN表格，先列出你初发酵时3个连续稀释度的阳性管管数，例如：我选用的10的负一次、10的负二次。10的负三次 三个稀释度，即三个稀释度相当与含有原样0.1g， 0.01g，0.001g，三个稀释度分别有阳性管数为1，1，0，对应MPN表格查出这个样品大肠菌群最有可能数为7.4cfu/g，95％可信限下限为1.3cfu/g，下限为20cfu/g，填写报告即可。附带三个版本的国标下载连接给楼主，无需注册。提醒楼主，2010版现为强制性标准，一定要按此标进行准检测工作。03版： http://down.foodmate.net/standard/sort/3/7627.html08版： http://down.foodmate.net/standard/sort/3/17550.html2010版： http://down.foodmate.net/standard/sort/3/21702.html

❾ 大肠杆菌的检测方法

多管发酵法。

多管发酵法是一种检测水体中大肠杆菌的传统方法，这种方法是在44.5℃的含有荧光底物的培养基上连续培养24h，而后能产生分解荧光底物——葡萄糖醛酸酶，从而释放出荧光产物，进而使培养基在紫外光照射下产生特征荧光。此方法可被用来对原样品中的菌落数作统计学估计。

在单料或双料乳糖胆盐发酵管内发酵，分离培养试验，利用伊红美蓝培养皿分离，接着是在乳糖发酵管中进行二次发酵，最后通过芽孢染色、革兰氏染色、显微镜观察等来完成。多管发酵法对试验条件要求不高，成本低，但是检测时间较长，容易受其他条件干扰，进而影响到测定结果的精确度。

(9)微生物的大肠菌群双料怎么算扩展阅读：

注意事项：

1、检样时注意无菌操作。

2、稀释时采用的稀释液可以用磷酸盐缓冲液或生理盐水，接种时可采用九管法，设置三个梯度，分别为0.1g/mL、0.01g/mL、0.001g/mL，每一个稀释度的试管应充分混匀。

3、每次实验需要有阴性对照。

4、使用小倒管培养基配制时，为排净气泡，灭菌时不要把试管的盖子盖的太紧，灭菌后注意观察一下倒管中的气体是否排完全、

5、高压灭菌后等高压灭菌锅的压力表达到0，取出培养基放到冰箱冷却，效果会比较好。

❿ 大肠菌群平板计数法怎么做

用无菌吸管吸取稀释度样品1 mL，然后将其放入无菌培养皿中，再加入温度于 45℃下的CDLJ JD 显色培养基中10 mL的量，并进行培养皿中溶液均匀混合，可以通过快速转动培养皿的方式，等溶液凝固以后，加入5 mL左右 ，使其均匀覆盖平板表面，凝固后翻转培养基，在37℃培养24h左右。

然后观察其形态，颜色等变化。除此之外，平行设置两个稀释度培养基，步骤是先稀释样本，通过稀释后，微生物可以分散为单个细胞，然后进行一定环境条件下培养，直到其长成菌落为止，然后进行计算大肠杆菌的数量，通过稀释度和样本数量进行计算

平板计数法操作简便，较适用于菌体大小和质量都相近的类群，如细菌、酵母菌等的计数。但它只能测定那些可培养的微生物，而且干扰因素很多，且采用的培养基或培养条件有选择性，难以平等地区分所有的微生物。

(10)微生物的大肠菌群双料怎么算扩展阅读：

发酵法检测大肠杆菌；可以进行统计学估计原来样品中的菌落。主要步骤包括发酵、分离培养、二次发酵、显微镜观察等，要点有：

1、在44.5℃下的培养基上进行大肠杆菌的培养，该培养基含有荧光底物，需要培养 24 h。

2、对荧光底物进行释放，需要采用葡萄糖醛酸进行，让培养基能够在紫外光的照射下发出荧光。