微生物生理盐水如何灭菌

⑴ 微生物实验,用塑料瓶装生理盐水灭菌,塑料瓶需要旋紧,还是要松点,松开点会不会灭完菌后,又再次污染

我们从没用过塑料瓶装水灭菌,建议玻璃的
灭菌时不能装太多,比如说500瓶最多灭400,不能旋太紧,一般旋紧后往回旋半圈,灭完菌后在拿出灭菌过之前再拧紧,这样就没问题了

⑵ 微生物培养的无菌生理盐水该怎么配

无菌生理盐水：8.5g NaCl稀释到1000mL，然后还需要灭菌。

不同物种需要的生理盐水浓度不同：

1、哺乳类的生理盐水浓度是0.9%。称取9克氯化钠，溶解在少量蒸馏水中，稀释到1000毫升。

2、鸟类的生理盐水浓度是0.75%。称取7.5克氯化钠，溶解后用蒸馏水稀释到1000毫升。

3、两栖类的生理盐水浓度是0.65%。称取6.5克氯化钠，溶解后用蒸馏水稀释到1000毫升。

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1、乐氏（Locke’s）生理盐水的配制：氯化钠 9.0克；碳酸氢钠 0.1～0.3克；氯化钾 0.42克；氯化钙 0.24克。

把氯化钠、氯化钾、碳酸氢钠分别用少量蒸馏水溶解，混合后加蒸馏水到980毫升。把氯化钙溶解在20毫升蒸馏水里，逐滴加入上述溶液中。乐氏生理盐水用于恒温动物，尤其常用于哺乳类。

2、生理盐水就是0.9%的氯化钠水溶液，因为它的渗透压值和正常人的血浆、组织液都是大致一样的，所以可以用作补液以及其他医疗用途，也常用作体外培养活组织、细胞。是人体细胞所处的液体环境浓度。

⑶ 大家做微生物接触面时，是如何灭菌的，同事在装有10毫升生理盐水的塑料管中泡上棉签，盖上盖子，放入高

这样可以的！高温已完全灭菌。

⑷ 常用灭菌方法有哪些各有何特点

1、热灭菌法

热灭菌法利用高温使微生物细胞内的一切蛋白质变性，酶活性消失，致使细胞死亡。通常有干热、湿热和间歇加热灭菌等法。

2、干热灭菌

火焰灼烧法或烘箱内热空气灭菌法称为干热灭菌法（dryheatsterilization）。

把金属器械或洗净的玻璃器皿放入电热烘箱内，在150～170℃下维持1～2小时后，可达到彻底灭菌（包括细菌的芽孢）的目的。灼烧（incineration或combustion）是一种最彻底的干热灭菌法，应用范围仅限于接种环、接种针的灭菌或带病原菌的材料、动物尸体的烧毁等。

3、化学试剂灭菌

大多数化学药剂在低浓度下起抑菌作用,高浓度下起杀菌作用。常用5%石炭酸、70%乙醇和乙二醇等。化学灭菌剂必须有挥发性，以便清除灭菌后材料上残余的药物。

化学灭菌常用的试剂有表面消毒剂、抗代谢药物（磺胺类等）、抗生素、生物药物素抗生素是一类有微生物或其他生物生命活动过程中的合成的次生代谢产物或人工衍生物，他们在很低浓度时就能抑制或感染它种生物（包括病原菌，病毒，癌细胞等）的生命活动，因而可用作优良的化学治疗剂。

4、间歇灭菌

间歇灭菌连续3天,每天进行一次蒸气灭菌的方法。此法适用于不能耐 100℃以上温度的物质和一些糖类或蛋白质类物质。一般是在正常大气压下用蒸气灭菌1小时。灭菌温度不超过100℃,不致造成糖类等物质的破坏，而可将间歇培养期间萌发的孢子杀死，从而达到彻底灭菌的目的。

5、辐射灭菌

辐射灭菌在一定条件下利用射线进行灭菌的方法。较常用的有紫外线，其他还有电离辐射（射线加快中子等）。波长在25000～80000纳米之间的激光也有强烈的杀菌能力,以波长26500纳米最有效。辐射灭菌法仅限于某一定材料，因所需设备复杂，难于广泛使用。

⑸ 生理盐水灭菌温度

形状不变,可以染色

⑹ 生理盐水高温灭菌

高温灭菌后的话，一般细胞会破碎，所以应该会看到不规则的碎片。要看你的染料是什么，如果染细胞壁的话，可能会染上一些碎片。

⑺ 论述主要灭菌方法和原理

1、热力灭菌：利用高温使菌体蛋白质变性或凝固，代谢发生障碍， 导致细菌死亡。包括：

（1）焚烧法：用火焚烧，是很彻底的灭菌方法，适用于废弃的污染物品和有传染性的动物尸体等。

（2）烧灼法：直接再火焰上烧灼，用于接种环(针)和试管口或瓶口的灭菌。

（3）干烤法：在干烤箱通电后利用高热空气进行灭菌。一般加热160-170℃， 维持2小时即可杀灭包括芽胞在内的一切微生物。主要用于玻璃器皿、 磁器或需干燥的注射器等。

（4）煮沸法：煮沸100℃5分钟可杀死细菌的繁殖体，一般消毒以煮沸10分钟为宜。如需要杀死芽胞则要煮沸1-3小时。主要用于一般外科器械、注射器、胶管和食具等的消毒。

（5）间歇灭菌法：是利用反复多次的流通蒸汽， 杀死细菌所有繁殖体和芽胞的一种灭菌法。本法适用于耐热物品，也适用于不耐热(<100℃)的一些物质如某些培养基的灭菌。具体做法是将待灭菌的物品置于阿诺氏流通蒸汽灭菌器内，100℃加热15-30分钟杀死其中的细菌繁殖体，然后将物品置37℃温箱中过夜，使芽胞发育成繁殖体，次日再通过流通蒸汽加热，如此连续三次，可将所有繁殖体和芽胞全部杀死。若有某些物品不耐100℃，则可将温度降至75-80℃， 每次加热的时间延长至30-60分钟， 次数增至3次以上，也可达到灭菌目的，如用血清凝固器对血清培养基或卵黄培养基的灭菌。

（6）巴氏消毒法：由巴斯德创建，常用于牛奶和酒类的消毒。一般加热61.1-62.8℃半小时， 或71.7℃经15-30秒钟， 便可达到杀死病原菌或一般杂菌， 而不严重破坏物品的质量的目的。

（7）高压蒸汽灭菌法：是灭菌效果最好、目前应用最广的灭菌方法。利用高压蒸汽灭菌器锅进行灭菌，由于密闭容器加温所产生的高压饱和水蒸汽能获得较高的温度，通常在1.05kg/cm2的压力下， 温度达121.3℃， 维持15-30分钟， 可杀死包括细菌芽胞在内的所有微生物。此法适用于高温和不怕潮湿物品的灭菌，如普通培养基、生理盐水、手术器械、注射器、手术衣、敷料和橡皮手套等。

在同样温度下， 湿热灭菌的效果比干热灭菌好， 原因是：

A、湿热中菌体吸收水份， 蛋白质较易凝固。

B、湿热比干热的穿透力好， 这主要是由于水或饱和水蒸汽传导热能的效率明显高于空气。蒸汽容易穿透到物体的深部， 使灭菌的物体内部温度迅速上升。

C、蒸汽有潜热存在。每一克水在100℃时， 由气态变为液态可放出529卡的热量。当蒸汽与被灭菌的物体接触时凝结成水， 放出潜热， 能迅速提高灭菌物体的温度。

2、紫外线灭菌：紫外线杀菌原理是通过干扰细菌DNA的合成， 波长2650-2660A杀菌力最强。紫外线作用的特点是(1)穿透力弱， 只能用于房间空气、物体表面消毒;(2)杀菌效果与照射时间， 距离和强度有关;(3)对眼睛角膜和皮肤有损伤作用，工作人员切勿在紫外线灯照射下进行操作。

日光中含有大量紫外线。将病人的被褥、衣服、书报等放在强烈的日光下爆晒数小时， 可达到消毒的目的。

⑻ 请问生理盐水怎样消毒可不可以用高温高压的机器来灭菌呢

不能，高压锅为不密闭容器，高温加热后，虽然灭了菌，到加热前后导致水分少许蒸发，盐浓度增高，就不是生理盐水了。

⑼ 实验室所用的生理盐水和普通培养基常用什么方法灭菌

实验室所用的生理盐水和普通培养基常用高压蒸汽灭菌法灭菌：
高压蒸汽灭菌法适用于耐高温、耐湿物品的灭菌，如普通培养基、生理盐水、手术敷料等。