❶ 微生物的测定怎么取样和培养基的制定和最后的观察
问题不够清楚哦,你要测定什么,微生物限度,还是已知菌的检测?
我只能举例说明哦,是关于药品的。不明白的你可以Hi我,或追问。
我根据你的问题按步骤来回答。
一、取样
1、供试品应随机抽样。一般抽样量(2个以上最小包装单位)为检验量的3倍量。
2、对异常的供试品应针对性的抽样。抽样时,凡发现有异常或可疑的样品,应选取有疑问的样品,但机械损伤、明显破裂的包装不得作为样品。凡能从药品、瓶口(外盖内侧及瓶口周围)、外观看出长螨、发霉、虫蛀及变质的药品,可直接判为不合格,无需在抽样检验。不能以外观有上述情况而检查内容物合格,来判断该药品合格。
3、供试品收检后应及时检验,若有困难,应存放在该品种规定的储存条件下(一般为阴凉干燥处),勿冷藏或冷冻,以防供试品内污染菌因保存条件不妥引起致死、损伤或繁殖。
4、供试品在检验之前,应保持原包装状态,严禁开启,包装已开启的样品不得作为供试品。
5、供试品的取样必须在净化条件下无菌操作,严防再污染。(原料药、装量大的药)
6、有剂型检验量均需取自2个以上包装单位(中药蜜丸、膜剂,除需取自2个以上包装外,还应取4丸、片以上样品)。
7、固体及半固体(粘稠性供试品)制剂检验量为10克。
8、液体制剂检验量为10毫升。
9、膜剂除另有规定外,中药膜剂检验量为30~50cm2 ,化学膜剂及生化药膜剂检验量为 100cm2 。
10、贵重的或微量包装的供试品检验量可以酌减,除另有规定外,口服固体制剂不低于3克,液体制剂采用原液者不得少于6毫升,采用供试液者不得少于3毫升,外用药品不得少于5克。
二、培养基的制定
1、一般如果是微生物限度的话,有两种培养基:检测细菌用营养琼脂培养基,检测霉菌及酵母菌用玫瑰红钠琼脂培养基。
2、另外,如果还有致病菌要求的话,通常革兰氏阴性肠道菌用伊红美蓝琼脂培养基(EMB琼脂),沙门氏菌用沙门氏志贺氏菌属琼脂(SS 琼脂),霍乱弧菌用硫代硫酸盐柠檬酸盐胆盐蔗糖琼脂培养基(TCBS琼脂),等等……
3、最后的观察:通常是计数,如楼上所说的数个数。然后就是菌落形态的观察,主要有大小、颜色、厚度、边缘状态等等。
不过看到你对楼上的追问,我在想,你是不是想问对未知微生物的鉴定,譬如泥土里的微生物种类、空气中的微生物种类等?
那是微生物的分离和鉴定,不叫检测吧。
那样的话一般是用营养琼脂培养基和马丁氏琼脂培养基。
❷ 检测空气微生物的采样方法有几种
检测空气中微生物有凝胶膜过滤方法和撞击法两种方式;
MD8 空气采样器
台式空气采样器MD8 Airscan 和便携式空气采样器 AirPort MD8 设计用于检测空气中最小的微生物。
BACTair: 不同凡响
预装的琼脂平板采用即用型无菌包装,可直接用撞击法采样。
凝胶膜过滤器:连续主动空气监测
凝胶膜与 MD8 空气采样器结合使用(凝胶膜过滤法),用于采集空气中的微生物和病毒。
❸ 微生物检测有哪些
1、体积测量法:又称测菌丝浓度法。原理:通过测定一定体积培养液中所含菌丝的量来反映微生物的生长状况。
菌丝浓度测定法是大规模工业发酵生产上微生物生长的一个重要监测指标。这种方法比较粗放,简便,快速,但需要设定一致的处理条件,否则偏差很大,由于离心沉淀物中夹杂有一些固体营养物,结果会有一定偏差。
2、称干重法。原理:利用离心或过滤法测定。一般干重为湿重的10-20%。称干重发法较为烦琐,通常获取的微生物产品为菌体时,常采用这种方法,如活性干酵母(activity dry yeast, ADY),一些以微生物菌体为活性物质的饲料和肥料。
3、比浊法。原理:微生物的生长引起培养物混浊度的增高。通过紫外分光光度计测定一定波长下的吸光值,判断微生物的生长状况。该法主要用于发酵工业菌体生长监测。
4、菌丝长度测量法。方法:对于丝状真菌和一些放线菌,可以在培养基上测定一定时间内菌丝生长的长度。
❹ 食品在生产车间空气中微生物的分配比较均匀进行微生物检验时样品的采集比较容易。
满意
食品检验样品的采集
采样(Sampling)从产品中抽取少量的、有一定代表性的样品,供检验分析用,这一过程称为采样。
一、食品检验样品采集的原则
采样前的一些准备工作
– 干冰:制冷剂。也可以用湿冰。
– 盒子或制冷皿:贮藏、运输样品。
– 灭菌容器:从塑料袋到灭菌的加仑漆桶等。
– 取样工具:茶匙、角匙、尖嘴钳、镊子、 量筒和烧杯等。
– 灭菌手套:
– 无菌棉拭子:一般用于拭取仪器设施和工厂环境区域。
– 灭菌全包装袋:装样品用。
? 当样品收集时,样品采集时的条件例如产品的温度、地点等,连同扦样样品号唛头,一并记录入检验员的注释说明中。
? 当采集无菌样品时,一条最重要的规则是:千万别污染样品。这需要样品采集人非常小心地采集所有附加样品,确保不违反这条规则。
2. 食品检样采集的原则
1)所采样品应具有代表性。
2)采样必须符合无菌操作的要求,防止一切外来污染
– 一件用具只能用于一个样品,防止交叉污染。
3)在保存和运送过程中应保证样品中微生物的状态不发生变化
– 采集的非冷冻食品一般在0~5℃冷藏,不能冷藏的食品立即检验。一般在36h内进行检验。
4)采样标签应完整、清楚
– 每件样品的标签须标记清楚,尽可能提供详尽的资料。
二、食品检验样品的采集方法
一)取样方案
一般说来,进出口贸易对食品抽样量有明确规定的,按规定抽样;无具体抽样规定的,可根据检验目的、产品及被抽样品的性质和分析方法确定抽样方案。
目前最为流行的抽样方案为(国际食品微生物学标准委员会)ICMSF的抽样方案和随机抽样方案。
无论采取何种方法抽样,每批货物的抽样数量不得少于5件。对于需要检验沙门氏菌的食品,抽样数量应适当增加,最低不少于8件。
二)样本选择
三)抽样(采样)方法
国际食品微生物标准委员International Commission on Microbiological Specifications for Foods, ICMSF
ICMSF方法是从统计学角度来考虑,对一批产品检查多少个检样才能够有代表性,才能客观地反映该批产品质量的设想采样的
ICMSF提出的采样基本原则,是根据以下考虑来规定不同的采样数:
(1) 各种微生物本身对人的危害程度各有不同;
(2) 食品经不同条件处理后,其危害程度可分为3种情况:危害度降低;危害度未变;危害度增加。
ICMSF是将微生物的危害度、食品的特性及处理条件三者综合在一起进行食品中微生物危害度分类的。这个设想是很科学的,符合实际情况的,对生产厂及消费者来说都是比较合理的。
ICMSF的采样方案:ICMSF方法中包括二级法及三级法2种。二级法只设有n、c及m值,三级法则有n、c、m及M值。
– n:系指一批产品的采样个数。 c:系指该批产品中检样菌数超过限量的检样数。
– m:系指合格菌数限量。 M:系指附加条件后判定为合格的菌数限量 。
在中等或严重危害的情况下使用二级抽样方案,对健康危害低的则建议使用三级抽样方案。
1)二级法:
只设定合格判定标准m值,超过m值的,则为不合格品。通过检查在检样中是否有超过m值的,来判定该批是否合格。
如生食鱼片中细菌总数标准为n=5,c=0,m=100cfu / g。其中m=100cfu / g即为限量标准,n=5即取样5个,c=0即表示在该批5个检样中,若未见有超过m值为100cfu / g的检样,则该批产品为合格品。
cfu:colony forming unit, 菌落形成单位
2)三级法:
设有微生物标准值m及M值,如同二级法,超过m值的检样为该检样不合格。所有检样均小于m值,该批产品为合格;在m值到M值范围内的检样数在c值范围内,即为附加条件合格,否则为不合格;凡有检样超过M值者,则该批产品为不合格。
如澳大利亚冷冻糖制食品的大肠菌群标准为n=5,c=2,m=100,M=1000,其含义是从一批产品中,取5个检样,若所有检样大肠菌群结果均小于m=100,则判定为该批产品合格;若≤2个检样的结果位于m与M值之间(即100~1000之间),则判定为附加条件合格;若有3个及以上检样的结果位于m与M值之间,判定为该批产品不合格;若有任一检样大肠菌群数超过M值(即1000)者,则判定该批产品不合格。
表3-1 ICMSF按微生物的危害度及食品处理进行情况分类
二)样本选择
样本选择可以分为有针对性选择和随机选择两种。
1、在现场抽样时,可利用随机抽样表进行随机抽样。
2、有针对性选择是根据已掌握的情况,如怀疑某种食物可能是食物中毒的原因食品,或者感观上已初步判定出该食品存在卫生质量问题,而有针对性地选择采集样本。
三)抽样(采样)方法
随机采样,即用一种能使总体的每一部分有同等机会出现在样品中的方法,从大批样品中抽出若干部分。
代表性采样(针对性采样),即使用系统抽样法采样,以使所取的每一部分代表食品的相应部分。
随机抽样表系用计算机随机编制而成,包括1千、1万或10万个数字。其使用方法如下:
a.先将一批产品的各单位产品(如箱、包、盒等)按顺序编号。如将一批600包的产品编为1、2……600。
b.随意在表上点出一个数。查看该数字所在的行和列。如点在第18行、第10列的数字上。
c.根据单位产品编号的最大位数(比如,最大为三位数),查出所在行的连续列数字,则编号与该数相同的那一份单位产品,即为一件应抽取的样品。
d.继续查下一行的相同连续列数字。该数字所代表的单位产品为另一件应抽取的样品。
e.依次按上述方法查下去。当遇到所查数超过最大编号数量,则舍去此数,继续查下一行相同列数,直到完成应抽样品件数为止。
三)抽样(采样)方法
1)、重量法 采取一定重量的食品作为一个样品。采取屠宰后两腿内侧肌或背最长肌100g/只;蛋、蛋制品样品,每份不少于200g。
2)、拭子法 拭子法采样不损害肉的完整性,操作简便。但是检出的活菌总数不高。
3)、灌洗法 对于全净膛光禽最好在洗涤后立即采样。本法比拭子法检出率高。
抽样方法对抽样方案的有效执行和保证样品的有效性代表性至关重要。
抽样必须遵循无菌操作程序,抽样工具如整套不锈钢勺子、镊子、剪刀等应当高压灭菌,防止一切可能的外来污染。容器必需清洁、干燥、防漏、广口、灭菌,大小适合盛放检样。抽样全过程中,应采取必要的措施防止食品中固有微生物的数量和生长能力发生变化。 应注意产品的均质性和来源,确保检样的代表性。
微生物检验时样品的制备 均匀食品:用四分法缩分;肉类、水产类食品:灭菌剪刀剪碎,四分法缩分。
❺ 微生物检验样品的采集原则有哪些
1.早期采集:
采集时间最好是病程早期、急性期或症状典型时,而且必须在使用抗生素或其他抗菌药物之前采集。
2.无菌采集:
采集的标本应无外源性污染。
在采集血液、脑脊液、胸腔积液、关节液等无菌标本时,应注意对局部及周围皮肤的消毒,严格进行无菌操作;
对于与外界相通的腔道,如窦道标本应由窦道底部取活组织检查,而不应从窦道口取标本,以免受皮肤表面正常菌群的污染,造成混淆和误诊;
对于从正常菌群寄生部位(如口腔)采集的标本,应明确检查的目的菌,在进行分离培养时,采用特殊选择性培养基。
采集的标本均应盛于无菌容器内,盛标本的容器须先经高压灭菌、煮沸、干热等物理方法灭菌,或用一次性无菌容器,而不能用消毒剂或酸类处理。
3.根据目的菌的特性用不同的方法采集:
厌氧菌、需氧或兼性厌氧菌,以及L型菌采用的方法不同。
4.采集适量标本:
采集量不应过少,而且要有代表性,同时有些标本还要注意在不同时间采集不同部位标本。
5.安全采集:
采集标本时不仅要防止皮肤和黏膜正常菌群对标本的污染。同时也要注意安全,防止传播和自身感染。
❻ 怎样的取样阀用怎样的微生物取样方法
微生物取样方法
举例一:
一、 空气采样及检验方法
1培养基:普通营养琼脂平板,按GB4789.28中3.7条配制
2采样(空气沉降法)
2.1布点:面积小于30平方米的车间,设一对角线,在线上取3点,即中心一点,两端在距墙1米处各取一点;面积大于30平方米的车间,设东、西、南、北、中5个点,其中东、西、南、北点均距墙1米。
2.2采样高度:与地面垂直高度80-150厘米。
2.3采样方法;用直径为9厘米的普通营养琼脂平板在采样点上暴露20分钟盖上送检培养。 3培养:于37℃培养24小时。
4检测频率:每周
空气质量标准:
生车间、熟车间、成品车间:低于100个
半成品库、成品库:低于10个
二、设备的采样与检验方法
根据生产过程所要求的重点卫生部位,实验室对其进行涂抹采样,进行细菌总数检验。 1采样方法
1.1涂抹法(适用于表面平坦的设备和工器具产品接触面)
取经过灭菌的铝片框(框内面积为50平方厘米)放在需检查的部位上,用无菌棉球蘸上无菌生理盐水擦拭铝片中间方框部分,擦完后立即将棉球投入盛有10毫升无菌生理盐水的试管中,此液每毫升代表5平方厘米。
1.2贴纸法(适用于表面不平坦的设备和工器具接处面)
将无菌规格纸(5×5厘米,纸质要薄而软)用无菌生理盐水泡湿后,于需测部分分别贴上两张
❼ 空气微生物的采样方法有几种
检测空气中微生物含量通常有:浮游菌检测法与沉降菌检测法两种方法.
分别按:《GB/T16293-1996医药工业洁净室(区)浮游菌的测试方法》、《GB/T16294-1996医药工业洁净室(区)沉降菌的测试方法》操作.一般在洁净室综合性能验收时,30万级时才测沉降菌,不测浮游菌,其它的则采用浮游菌检测法.
按照上述两个检测规程均可采作普通肉汤琼脂培养基.
❽ 在食品微生物检验中,对样品的采集方案有哪些要求
食品卫生微生物检验样品的采集和处理
一、范围
适用于各类食品样品的采样。
二、采样用品
灭菌探子、铲子、匙、采样器、试管、吸管、广口瓶、剪子、开罐器等。
三、样品的采集
在食品检验中,所采集的样品必须有代表性。食品中因其加工批号、原料情况(来源、种类、地区、季节等)、加工方法、运输、保藏条件、销售中的各个环节(例如有无防蝇、防污染、防蟑螂及防鼠等设备)及销售人员的责任心和卫生认识水平等均可影响食品卫生质量,因此必须考虑周密。
1、采样数量
每批样品要在容器的不同部位采取,一般定型包装食品采取一袋/瓶(不少于250g)及散装食品采取250g.
2、采样方法
(1)
采样必须在无菌操作下进行。
(2)
根据样品种类,袋装、瓶装和罐装食品,应采完整的未开封的样品。如果样品很大,则需要无菌采样器
取样;固体粉末样品,应边取边混合;液体样品通过振摇混匀;冷冻食品应保持冷冻状态(可放在冰内、冰箱的冷盒内或低温冰箱内保存),非冷冻食品需在1℃~5℃中保存。
3、
采样标签
采样前或后应贴上标签,每件样品必须标记清楚(如品名、来源、数量、采样地点、采样人及采样时间等)。
四、送检
样品送到微生物检验室应越快越好。如果路途遥远,可将不需冷冻样品保持在1℃~5℃环境中(如冰壶)。如需保持冷冻状态,则需保存在泡沫塑料隔热箱内(箱内有干冰可维持在0℃以下)。送检时,必须认真填写申请单,以供检验人员参考。
五、检验
微生物检验室接到送检申请单,应立即登记,填写实验序号,并按检验要求,立即将样品放在冰箱或冰盒中,积极准备条件进行检验。
各食品微生物检验室必须备有专用冰箱存放样品。一般阳性样品,发出报告后3d(特殊情况
适当延长),方能处理样品。进口食品的阳性样品,需保存6个月,方能处理。阴性样品可及时处理。
检验完后,检验人员应及时填写原始记录,签名后,送质控办出具检验报告。
❾ 测定微生物的生物量有哪些主要方法
测定微生物的生物量有哪些主要方法
测定的方法主要有四种:
1.直接计数测定:根据微生物种类,有血球计数板和细菌计数板;
2.比浊法:根据菌悬液的浓度在一定范围内与光密度成正比,可以用分光光度计测OD值,用OD值表示样品菌液浓度;
3.核酸计数法:荧光定量PCR技术;
4.活菌计数法:MPN和平板计数法由于测定方法的限制。新鲜土样经氯仿熏蒸后(24h),土壤微生物死亡细胞发生裂解,释放出微生物生物量碳,用一定体积的LK2SO4溶液提取土壤,借用有机碳自动分析仪测定微生物生物量碳含量。根据熏蒸土壤与未熏蒸土壤测定有机碳的差值及转换系数(KEC),从而计算土壤微生物生物量碳。
❿ 空气微生物采样研究的方法~
空气浮游微生物采样器是根据颗粒撞击原理和等速采样理论设计。被采样的带有微生物的空气在抽气泵作用下,高速喷射并撞击到装有培养基的培养皿上,经培养后形成菌落予以计数。
对固体撞击式采样法与平板沉降法进行初步实验。结果表明,使用固体撞击式采样法测定空气微生物的含量总数与平板沉降法采获的总数结果差异有显着性,平板沉降法只能收集到较大颗粒的微生物,不能作精确的定量计数,它可作为一般卫生学的检验手段。固体撞击式采样法对悬浮于空气中小颗粒微生物捕获率高于沉降法,并能较准确地表达出空气中细菌的实际含量,是一种较理想的的采样方法。