如何做好食品微生物检测工作

1. 实验室微生物检验需要注意哪些问题

微生物检验无菌操作的注意事项有很多细节，日常的微生物检验过程中要注意无菌操作，除了要在洁净台和操作器皿上的消毒，还需要注意人员卫生和环境的卫生。

【操作技巧】

进行培养时，动作要准确敏捷，但又不必太快，以防空气流动，增加污染机会。不能用手触及已消毒器皿，如已接触，要用火焰烧灼消毒或取备品更换。为拿取方便，工作台面上的用品要有合理的布局，原则上应是右手使用的东西放置在右侧，左手用品在左侧，酒精灯置于中央。工作由始至终要保持一定顺序性，组织或细胞在未做处理之前，勿过早暴露在空气中。同样，培养液在未用前，不要过早开瓶;用过之后如不再重复使用，应立即封闭瓶口直立可增加落菌机会。吸取营养液、PBS、细胞悬液及其它各种用液时，均应分别使用吸管，不能混用，以防扩大污染或导致细胞交叉污染。工作中不能面向操作野讲话或咳嗽，以免唾沫把细菌或支原体带入工作台面发生污染。操作前用酒精擦拭超净台面及双手。手或相对较脏的物品不能经过开放的瓶口上方，瓶口最易污染，加液时如吸管尖碰到瓶口，则应将吸管丢掉。

【培养前准备】

在开始实验前要制定好实验计划和操作程序。有关数据的计算要事先做好。根据实验要求，准备各种所需器材和物品、清点无误后将其放置操作场所(培养室、超净台)内，然后开始消毒。这可以避免开始实验后.囚物品不全往返拿取而增加污染机会。

【火焰消毒】

在无菌环境进行培养或做其它无菌工作时，首先要点燃酒精灯或煤气灯。以后一切操作，如按装吸管帽、打开或封闭瓶口等，都需在火焰近处并经过烧灼进行。但要注意：金属器械不能在为焰中烧的时间过长，以防退火，烧过的金属镊要待冷却后才能挟取组织，以免造成组织损伤。吸取过营养液后的吸管不能再用火焰烧灼，因残留在吸管头中营养液能烧焦形成炭膜，再用时会把有害物带入营养液中。开启、关闭长有细胞的培养瓶时，火焰灭菌时间要短。防止因温度过高烧死细胞。另外胶塞过火焰时也不能时间长，以免烧焦产生有毒气体，危害培养细胞。

【洗手和着装】

原则上和外科手术相同。平时仅做观察不做培养操作时，可穿装细胞培养室内紫外线照射30min的清洁工作服。在利用超净台工作时，因整个前臂要伸入箱内，应着长袖的清洁工作服，并于开始操作前要用75%酒精消毒手。如果实验过程中手触及可能污染的物品和出入培养室都要重新用消毒液洗手。进入原代培养室需彻底洗手还要戴口罩、着消毒衣帽。

【操作台消毒】

体外培养细胞缺乏抗感染能力，所以防止污染是决定培养成功或失败的首要条件。即便使用设备完善的实验室。若实验者粗心大意，技术操作不规范,也会导致污染。因而.为在一切操作中为最大可能的保证无菌.每一项工作都必须做到有条不紊和完全靠。无菌培养室每天都要用0.2%的新洁尔灭拖洗地面—次(拖布要专用).紫外线照射消毒30-50min，超净工作台台面每次实验前要用75%酒精擦洗。然后紫外线淌毒30min。在工作台面消毒时切勿将培养细胞和培养用液同时照射紫外线，消毒时工作台面上用品不要过多或重叠放置.否则会遮挡射线降低消毒效果。—些操作用具如移液器、废液缸、污物盒、试管架等用75%酒精擦洗后置于台内同时紫外线消毒。

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2. 食品微生物检测内容有哪些

三个方面的内容：
第一类是致病菌及其毒素，比如沙门氏菌、副溶血性弧菌、单增李斯特菌、金葡菌肠毒素等，它们主要导致胃肠道疾病，严重的会造成肝、脑、肾等脏器的损害，甚至死亡。；

第二类是产毒真菌和真菌毒素，包括黄曲霉毒素、伏马菌素、展青霉素等，它们或造成人的急性中毒事件，或因长期摄入，造成消化道癌症和某些地方病。

第三类是病毒和寄生虫。

3. 食品污染物检测主要测什么选什么项目有要求吗

食‎品在‎从生产、加工、包装、‎贮存‎、运输、‎销售直至‎食用等过程中产生的或‎由环境污染带入的、非‎有意‎加入‎的化学性‎危害物质。食品污染物检测包含‎有重金属、苯并芘‎等相关污‎染物指‎标，具体检测项目需‎要以‎检测目的‎及国标等‎标准为指导。如果有相‎关检测需求，可以‎考虑‎下浙‎江华才，‎在我‎们省的食品各指标检测中算‎是很‎有名‎的了，流‎程正规，资质‎齐全，出报告速度也快，长期合作下来感觉挺好的。谢谢您能一如既往的采纳我的回答

4. 如何做好微生物组工作

1 / 3 第一点：选择富含益生菌的食物，如自制酸奶、康普茶、泡菜、豆豉等。第二点：低碳水化合物和优质脂肪，每天摄取大量的蔬菜水果和85-110克的蛋白质。第三点：享受红酒、茶叶、美式咖啡和黑巧。多酚的饮食能显着降低氧化应激标志物，从而降低神经性疾病的风险，而且多酚类食物能积极影响肠道微生物多样性的能力。第四点：选择富含益生元的食物，如洋姜、大蒜、洋葱、韭菜、豆薯等。第五点：饮用好水。无论选择哪种净水机，都要定期对其进行维护，随着污染物的积累，过滤器会变得不那么有效。第六点：每季禁食。人体能将脂肪分解成一种叫做酮类的分子，特别是β-羟丁酸（β-HBA）的物质可谓大脑的超级燃料，而且也是肠道有益菌群的一部分。

2 / 3 第一点：选择富含益生菌的食物，如自制酸奶、康普茶、泡菜、豆豉等。第二点：低碳水化合物和优质脂肪，每天摄取大量的蔬菜水果和85-110克的蛋白质。第三点：享受红酒、茶叶、美式咖啡和黑巧。多酚的饮食能显着降低氧化应激标志物，从而降低神经性疾病的风险，而且多酚类食物能积极影响肠道微生物多样性的能力。第四点：选择富含益生元的食物，如洋姜、大蒜、洋葱、韭菜、豆薯等。第五点：饮用好水。无论选择哪种净水机，都要定期对其进行维护，随着污染物的积累，过滤器会变得不那么有效。第六点：每季禁食。人体能将脂肪分解成一种叫做酮类的分子，特别是β-羟丁酸（β-HBA）的物质可谓大脑的超级燃料，而且也是肠道有益菌群的一部分。

3 / 3 第一点：选择富含益生菌的食物，如自制酸奶、康普茶、泡菜、豆豉等。第二点：低碳水化合物和优质脂肪，每天摄取大量的蔬菜水果和85-110克的蛋白质。第三点：享受红酒、茶叶、美式咖啡和黑巧。多酚的饮食能显着降低氧化应激标志物，从而降低神经性疾病的风险，而且多酚类食物能积极影响肠道微生物多样性的能力。第四点：选择富含益生元的食物，如洋姜、大蒜、洋葱、韭菜、豆薯等。第五点：饮用好水。无论选择哪种净水机，都要定期对其进行维护，随着污染物的积累，过滤器会变得不那么有效。第六点：每季禁食。人体能将脂肪分解成一种叫做酮类的分子，特别是β-羟丁酸（β-HBA）的物质可谓大脑的超级燃料，而且也是肠道有益菌群的一部分。

5. 食品微生物检验前需要什么准备

微生物检验前，最重要是灭菌,包括：培养基、稀释管、培养皿和吸管（一次性就放在无菌室就好），当然无菌室紫外灭菌30-60min也是必须的，再在缓冲间灭一件白大褂
其他像接种针、酒精棉球等也要事先准备好

6. 关于食品中微生物的检测

我国卫生部颁布的食品微生物指标有菌落总数、大肠菌群和致病菌三项。

你已经做过菌落总数，那就只需下面两个了。都是很普通的仪器，但是试剂的话比较多，需要特别购买，不过也是很普通的试剂，在一般的试剂商店能买到。

其实你可以外送检测，不会很贵。如果自己做，就比较烦了。

一、食品中大肠菌群的测定

1、实验材料：温箱、水浴锅、天平、显微镜、均质器或乳钵、温度计、平皿、试管、发酵管、吸管、载玻片、接种针、乳糖—胆盐发酵管、乳糖发酵管、蛋白胨水、靛基质试剂、麦康凯、伊红美蓝琼脂（EMB）、远腾氏琼脂、革兰氏染色液

2、实验方法与步骤

2.1采样及稀释

(1)以无菌操作将检样25g（或25ml）放于含有225ml灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内（瓶内预置适当数量的玻璃珠）或灭菌乳钵内，经充分振摇或研磨做成1：10的均匀稀释液。固体检样最好用无菌均质器，以800r/min～1000r/min的速度处理1min，做成1：10的稀释液。

(2)用1ml灭菌吸管吸取1：10稀释液1ml，注入含有9ml灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内，振摇混匀，做成1：100的稀释液，换用1支1ml灭菌吸管，按上述操作依次作10倍递增稀释液

(3)根据食品卫生要求或对检验样品污染情况估计，选择三个稀释度，每个稀释度接种3管。也可直接用样品接种。

2.2乳糖初发酵试验

即通常所说的假定试验。其目的在于检查样品中有无发酵乳糖产生气体的细菌将待检样品接种于乳糖胆盐发酵管内，接种量在1ml以上者，用双料乳糖胆盐发酵管；1ml及1ml以下者，用单料乳糖发酵管。每一个稀释度接种3管，置（36±1）℃温箱内，培养（24±2）h，如所有乳糖胆盐发酵管都不产气，则可报告为大肠菌群阴性，如有产生者，则按下列程续进行。

2.3分离培养：将产气的发酵管分别转种在伊红美蓝琼脂板或麦康凯琼脂平板上，置（36±1）℃温箱内，培养18h～24h，然后取出，观察菌落形态并作革兰氏染色镜检和复发酵试验。

2.4乳糖复发酵试验：即通常所说的证实试验，其目的在于证明从乳糖初酵管试验呈阳性反应的试管内分离到的革兰氏阴性无芽胞杆菌，确能发酵乳糖产生气体。在上述的选择性培养基上，挑取可疑大肠菌群1～2个进行革兰氏染色，同时接种乳糖发酵管，置（36±1）℃的温箱内培养（24±2）h，观察产气情况。凡乳糖发酵管产气，革兰氏染色为阴性无芽胞杆菌，即报告为大肠杆菌阳性；凡乳糖发酵管不产气或革兰氏染色为阳性，则报告为大肠杆菌为阴性。

3报告：根据证实为大肠菌群阳性的管数，查MPN检索表，报告每100ml（g）食品中大肠菌群的最可能数。

二、食品中病原菌的检验：主要有沙门氏菌属、志贺氏菌属、霍乱弧菌属、霉菌真菌等等。国内主要是指沙门氏和志贺氏，试剂主要为SS琼脂。将样品（增菌后）稀释涂布在SS琼脂上面，然后看长出的菌落，找一些图片做对照，一致的话说明有致病菌，没有的话就说明PASS。一般沙门氏或志贺氏菌落是无色透明或粉红色菌落，表面光滑，产硫化氢的菌落中心有黑点。

7. 如何提升食品微生物检测质量

目前，随着食品检验事业的飞速发展，各级食品实验室也得到了很大的改观，人员素质提高，实验室设备更新换代，提高了检验结果的准确性和精密性，满足了食品检验的需要，食品实验室成为食品检验监督不可缺少的依赖。各实验室为了提高本实验室的检验质量，竞相开展了质量控制工作，也确实收到了良好的效果，但在质量控制工作的实施过程中，并非尽如人意，还存在着许多问题。 一是仪器设备的性能与运行状态。进行期间核查，重点是对那些不太稳定、使用频率高、使用条件恶劣、容易产生漂移、因出现过载可能造成损坏的、能力验证结果有问题、对检测数据有疑问、单纯校准不能保证在有效期内正确可靠的仪器设备、计量参考物质或标准物质，核查其可信度和可靠性。方法：（1）用参考标准进行核查；（2）参加能力验证或其他实验室之间的比对；（3）使用有证标准物质；（4）相同仪器比对；（5）同一样品不同仪器检测结果的比对；（6）对保留样品的再检测；（7）协议标准和方法。

8. 怎样学好食品微生物检测技术

1.要细仔。微生物检测过程就是要避免过程污染样品，所以要充分考虑到过程中可能对样品污染的因素。
2.标准与实践相结合。有些标准看起来很负责，但经过实践，综合处理一下，过程还是很简单的，不要死死的读标准，不去做。
3.多练习。微生物很多技巧要非常熟练，向划线分离、接种生化管、血清凝固实验要不断的尝试练习，才能做的好。

9. 工厂微生物检验员具体工作内容有哪些应该具备哪些技术

如果是药厂的话，一般是做一些日常的常规实验还有一些控制菌的检验。像是细菌、霉菌酵母菌的计数，有时还要对阳性菌株进行传代。这些都可以在现行的中国药典附录中找到。每天都要做好计划，准备培养基、玻璃器皿的灭菌工作，实验前后对微生物室进行消毒杀菌和日常管理。检测样品当中的菌落总是是否超标，是否有不得检出的控制菌（如大肠埃希菌或沙门菌等）。网上现在应该能找到药典下载，具体的内容附录里有，像“无菌检查法”、“微生物限度检查法”。实际操作的话，如果你在学校有上过实验课的话，操作也就那些，没什么难度的。我也只是做了一年多的微生物，其实药厂不会只招微生物的检验人员，还是要兼顾一些理化的。去看看药典吧，会有帮助的。

10. 食品微生物检测的程序

（1）采集样品
采样前要了解所采样品的来源、加工、储藏、包装、运输等情况，采样时必须做到：使用的器械和容器需经灭菌，严格进行无菌操作；不得加防腐剂；液体样品应搅拌均匀后才去采样，固体样品应在不同部位采取以使样品具代表性；取样后及时送检。
国际食品微生物标准委员会(ICMSF)制定的食品微生物学分析采样方法，目前已在国内外被逐步推广采用。ICMSF根据以下原则来规定不同的采样数：①各种微生物本身对人的危害程度各有不同；②食品经不同条件处理后，其危害程度可分为3种情况：危害度降低；危害度未变；危害度增加。依据ICMSF采样方法规定，其中：n：指一批产品采样个数；c：指该批产品中检样菌数超过限量的检样数；m：指合格菌数限量；M：指附加条件后判定为合格的菌数限量。
（2）样品送检
采集好的样品应及时送到食品微生物检验室，一般不应超过3h，如果路程较远，可将不需冷冻的样品保持在1～5℃的环境中，勿使冻结，以免细菌遭受破坏。
样品送检时，必须认真填写申请单，以供检验人员参考。
检验人员接到送检单后，应立即登记，填写序号，并按检验要求，立即将样品放在冰箱或冰盒中，并积极准备条件进行检验。
（3）样品处理
样品处理应在无菌室内进行，若是冷冻样品必须事先在原容器中解冻，解冻温度为2～5℃不超过18h或45℃不超过15min。
a.固体样品
用无菌刀、剪或镊子称取不同部位的样品，剪碎放入灭菌容器内，加一定量的水混匀，制成1: 10混悬液，进行检验。在处理蛋制品时，加入约30个玻璃球，以便震荡均匀。生肉及内脏，先进行表面消毒，再剪去表面样品，采集深层样品。
b.液体样品
原包装样品用点燃的酒精棉球消毒瓶口，再用经石炭酸或来苏儿消毒液消过毒的纱布将瓶口盖住，用经火焰消毒的开关器开启。摇匀后用无菌吸管吸取；含有二氧化碳的液体食品，按上述方法开启瓶盖后，将样品倒入无菌磨口瓶中，盖上消毒纱布，将盖开一小缝，轻轻摇动，使气体逸出后进行检验；将冷冻食品放入无菌容器内，融化后检验。
c.罐头
罐头进行密闭试验、膨胀试验和检验。将被检验罐头置于85℃以上的水浴中，使罐头沉入水面以下5 cm，观察5 min，如有小气泡连续上升，表面漏气；另外将罐头放在(37±2)℃环境下7d，如是水果、蔬菜罐头，放在20～25℃环境下7d，观察其盖和底有无膨胀现象。检验时，先用酒精棉球擦去罐上油污，然后用点燃的酒精棉球消毒开口的一端，用来苏儿消毒纱布盖上，再用灭菌的开罐器打开罐头，除去表层，用灭菌匙或吸管取出中间部分的样品进行检验。
（4）检验
每种指标都有一种或几种检验方法，可根据不同的食品、不同目的来选择恰当的检验方法。通常所用的常规检验方法为现行国家标准，或国际标准，（如FAO标准、WHO标准等），或食品进口国的标准（如美国FDA标准、日本厚生省标准、欧共体标准等）。
食品卫生微生物检验室接到检验申请单，应立即登记，填写试验序号，并按检验要求立即将样品放在冰箱或冰盒中，积极准备条件进行检验。
一般阳性样品发出后3d（特殊情况可适当延长）方能处理样品；进口食品的阳性样品，需保存6个月方能处理。阴性样品可及时处理。
（5）结果报告
样品检验完毕后，检验人员应及时填写报告单，签名后送主管人核实签字，加盖单位印章，以示生效，并立即交给食品卫生监督人员处理。