A. 什么是生物素标签
应该是在基因工程中所用到的类似于抗生素类的基因标记标签
B. 生物素标记的DNA探针用什么方法检测
生物素标记的DNA探针用什么方法检测
以病原微生物DNA或RNA的特异性片段为模板,人工合成的带有放射性或生物素标记的单链DNA片段,可用来快速检测病原体.
怎么检测：
将一段已知序列的多聚核苷酸用同位素、生物素或荧光染料等标记后制成的探针.可与固定在硝酸纤维素膜的DNA或RNA进行互补结合,经放射自显影或其他检测手段就可以判定膜上是否有同源的核酸分子存在.
以细菌为例,目前分子杂交技术用于细菌的分类和菌种鉴定比之G+C百分比值要准确的多,是细菌分类学的一个发展方向.加之分子杂交技术的高敏感性,分子杂交在临床微生物诊断上具有广阔的前景.细菌的基因组大小约5×106bp,约含3000个基因.（各种细菌之间绝大部分DNA是相同的,要获得某细菌特异的核酸探针,通常要采取建立细菌基因组DNA文库的办法,即将细菌DNA切成小片段后分别克隆得到包含基因组的全信息的克隆库.然后用多种其它菌种的DNA作探针来筛选,产生杂交信号的克隆被剔除,最后剩下的不与任何其它细菌杂交的克隆则可能含有该细菌特异性DNA片段.将此重组质粒标记后作探针进一步鉴定,亦可经DNA序列分析鉴定其基因来源和功能.）括号里比较重要!
C. 生物素标记是什么
生物素是个蛋白，标记就是把这个蛋白标记到别的上面便于检测
D. 荧光二抗标记用HRP、AP、FITC、生物素法各发什么颜色荧光
这四个不是一码事，HRP和AP是酶，二抗上挂了酶，要给相应的底物才能显色，显色方式可以通过发荧光也可以不发荧光（例如给予ECL底物，其中的H2O2和鲁米诺在HRP的作用下，能在黑暗中发出荧光；也可以给予双氧水和DAB，反应产生棕色不溶于水的物质）；FITC为异硫氰酸荧光素，本身就是黄绿色荧光，二抗结合后可直接在荧光显微镜下观察；生物素一般也是挂在二抗上的，利用卵白素分别连接生物素标记的第二抗体和生物标记的酶，由酶催化底物，生成终产物，这个终产物也是不溶于水的。
E. 生物素标记在dna5'和3'的区别
相同点：不能发动新链的合成，只催化已有链的延长。都有5'端到3'端聚合的作用，3'端到5'端外切得作用。不同点：DNA聚合酶I还有5'端到3'端外切的作用。而DNA聚合酶III没有此功能。DNA聚合酶I的主要作用是切去冈崎片段5'端得引物。DNA聚合酶III是DNA复制的主要酶。
F. 如何用生物素标记抗体
缓冲溶液的作用主要就是pH稳定性和离子强度的适合，还有避免缓冲溶液中的成分与样品分子发生共价链接，主要就是考虑这些。
链接很容易，就用EDC或者CMC等碳二亚胺，是最容易在羧基和氨基之间催化形成酰胺键，反应条件就是0到4度，过夜，用磁力搅拌子温和搅拌，pH<7反应快，不过pH=7或稍微pH>7也关系不大。EDC或者CMC等碳二亚胺催化活性极高，而且一般的蛋白质的分子表面总有Lys,Arg,Asn,Gln，所以游离在分子表面的羧基和氨基总是不少的，参与反应的两种蛋白质用大致10：1的比例混合（哪种蛋白质便宜，哪种蛋白质的物质的量就大些，但是这不是全部原因），反应样品浓度就按照平时使用时的浓度或略微更低浓度（别用储存液的浓度）即可。很容易反应，而且EDC或者CMC等碳二亚胺是零臂连接试剂，用于空间位阻，形成多分子交联可能较小，即使形成了也很容易用分子筛层析按照分子量区分开。
参与反应的两种蛋白质用大致10：1的比例混合（哪种蛋白质便宜，哪种蛋白质的物质的量就大些，但是这不是全部原因），为了避免两种蛋白质之间发生交联成为串联，因为一种蛋白质形成串联的可能性低一些；即使要形成串联的蛋白质串珠，最好也不要是价格高的那种；另外，EDC或者CMC等碳二亚胺催化活性极高，室温下即会催化，所以要在0到4度，过夜，用磁力搅拌子温和搅拌，一方面避免碳二亚胺催化活性太高形成串联的蛋白质串珠，另一方面，保护蛋白质不变性；反应样品浓度就按照平时使用时的浓度或略微更低浓度（别用储存液的浓度）即可，为什么？因为浓度高了更易形成串联的蛋白质串珠结构，浓度低了，没有反应成功，通过分子筛层析还可以分离出来接着连接，如果形成了酰胺键再要专一性切开就没有那么容易了。
G. 怎样用生物素标记dna
先用限制性内切酶在DNA上切出两个粘性末端，然后在DNA连接酶的配合下用与这个粘性末端相配的有标志性的（可以是放射性和荧光性等同位素一般属于放射性）DNA片段标记出来，简单地说就是这样～
H. 易毕恩公司的5hmC高通量检测到底是什么样的技术优势在哪里
5hmC高通量检测是基于化学标记法的5-羟甲基胞嘧啶（5hmC）检测技术，也叫高通量DNA羟甲基化检测。高通量DNA羟甲基化检测即通过高通量测序的方式检验DNA中羟甲基胞嘧啶在基因组范围上的分布，进而了解基因的去甲基化表观调控信息。它的临床端产品目前适用于肝硬化多发结节肝癌筛查、肝癌高危人群辅助诊断、小肝癌辅助诊断以及AFP阴性患者术后的疗效监控。与其他市场上的癌症早筛技术相比，5hmC高通量检测主要有以下几个优势：1) 能够更加精准判断病情。基因突变并不能直接表明患者当下有没有得疾病，而表观遗传编码则能直接反映疾病的实时情况，且具有高准确性。2) 检出率高。易毕恩具有芝加哥大学富集羟甲基化片段的全球独占专利技术，能特异性地挑出血液中带羟甲基化修饰的基因片段。只用少量血液，就能达到很好的检测效果。3) 覆盖广。通过血液游离DNA的测序可以覆盖20000个基因的羟甲基化分布，无创广谱监控基因活性。