‘壹’ 结晶紫指示剂配方
根据药典,用冰乙酸配
‘贰’ 结晶紫溶液如何配制如题,本人要配制结晶紫溶液
药典上边说的磷酸盐缓冲液pH7.0的配制方法为取磷酸二氢钾0.68g,加入0.1mol/L氢氧化钠溶液29.1ml,用水稀释成100ml即得0.1mol/L氢氧化钠溶液4.000g氢氧化钠加水配制到1000ml容量瓶
‘叁’ 结晶紫染色法测生物膜需要什么浓度的pbs缓冲液
结晶紫染色法测定生物膜的详细步骤
1.在96孔细胞培养板各孔中加0.1ml含5×104~10×4 WEHI-164细胞的培养液(含10%小牛血清的RPMI-1640培养液),37℃ 5% CO2的二氧化碳培养箱中培养2~3小时,让细胞帖壁。
2.用RPMI-1640培养液10倍递次稀释TNF标准品,根据需要3~5倍递次稀释待检样品,每孔加0.1ml稀释的标准品或待检样品,每个稀释度3个重复孔。对照孔6个,3个阳性对照孔各加0.1ml含4μg TNF的RPMI-1640培养液,3个阴性对照孔各加100μl RPMI-1640培养液。继续培养18~24小时。
3.甩去培养液,用PBS小心洗涤一次,每孔加0.1ml 10%甲醇溶液固定细胞30秒钟。
4.吸去甲醇溶液,每孔加0.1ml结晶紫染液,室温中放置20分钟。
5.轻轻甩去染色液,用蒸馏水洗涤各孔,将培养板倒置于吸水纸上吸干水分。自然干燥或37℃烘干。此板可以在室温中长期保存。
6.测定前,每孔加0.1ml 33%醋酸脱色,充分振荡后在570nm处测定光吸收度。用光吸收度(OD)值对样品稀释度作图,比较标准品曲线和待检样品曲线即可得到待测样品中的细胞因子活性
‘肆’ 谁能告诉我结晶紫染色法测定生物膜的详细步骤
1.在96孔细胞培养板各孔中加0.1ml含5×104~10×4 WEHI-164细胞的培养液(含10%小牛血清的RPMI-1640培养液),37℃ 5% CO2的二氧化碳培养箱中培养2~3小时,让细胞帖壁。
2.用RPMI-1640培养液10倍递次稀释TNF标准品,根据需要3~5倍递次稀释待检样品,每孔加0.1ml稀释的标准品或待检样品,每个稀释度3个重复孔。对照孔6个,3个阳性对照孔各加0.1ml含4μg TNF的RPMI-1640培养液,3个阴性对照孔各加100μl RPMI-1640培养液。继续培养18~24小时。
3.甩去培养液,用PBS小心洗涤一次,每孔加0.1ml 10%甲醇溶液固定细胞30秒钟。
4.吸去甲醇溶液,每孔加0.1ml结晶紫染液,室温中放置20分钟。
5.轻轻甩去染色液,用蒸馏水洗涤各孔,将培养板倒置于吸水纸上吸干水分。自然干燥或37℃烘干。此板可以在室温中长期保存。
6.测定前,每孔加0.1ml 33%醋酸脱色,充分振荡后在570nm处测定光吸收度。用光吸收度(OD)值对样品稀释度作图,比较标准品曲线和待检样品曲线即可得到待测样品中的细胞因子活性
‘伍’ 革兰氏染色中需要的各种染色液(结晶紫染色液、碘液、番红复染液)是怎样配制的
革兰氏(Gram)染色液
1.草酸铵结晶紫染液
A液:结晶紫(crystal violet) 1g
95%酒精 20ml
B液:草酸铵(ammonium oxalate) 0.8g
蒸馏水 80ml
混合A、B二液,静置48小时后使用。
2.卢戈氏(Lugol)碘液
碘片 1.0g
碘化钾 2.0g
蒸馏水 300ml
先将碘化钾溶解在少量水中,再将碘片溶解在碘化钾溶液中,待碘全溶后,加足水分即成。
3.95%的酒精溶液。
4.沙黄复染液
沙黄 0.25g
95%的酒精 10ml
蒸馏水 90ml
将沙黄溶于乙醇中,再用蒸馏水稀释。
‘陆’ transwell做细胞迁移用的结晶紫怎么配置的哇怎么染色
① 用棉签擦去基质胶和上室内的细胞 ② 染色:采用0.1%结晶紫染色。 这种方法有如下优势:(1). 不需要固定细胞,直接染色即可。(2). 配制简单方便。(3). 染色后可以用33%醋酸脱色,将结晶紫完全洗脱下来,洗脱液可在酶标仪上570nm 测其OD值,间接...
‘柒’ 请问 结晶紫溶液如何配制
结晶紫 中文别名:甲基紫
根据国标GC/T 604-2002中表8常 (用 指 示 剂 待 检 溶 液 的 制 备 方 法)中说明: 甲基紫指示剂,称取0.25 g甲基紫,溶于100 mL水中配制而成。在其它资料上也有配制成0.1%水溶液的,用0.1g溶于10ml水中。因为它的颜色太明显,所以使用时,用量也非常少,一般一滴到两滴就足够了。
根据化学数据速查手册介绍,甲基紫共有三次变色:
变色次数 PH范围 酸色 碱色
甲基紫(第一次变色) 0.13~0.5 黄 绿
甲基紫(第二次变色) 1.0~1.5 绿 蓝
甲基紫(第三次变色) 2.0~3.0 蓝 紫
‘捌’ 0.1%结晶紫如何配制
称取0.1g结晶紫加100ml冰乙酸溶解完全,摇匀即得。
‘玖’ 染细菌生物膜的0.5%结晶紫溶液怎么配置
1.在96孔细胞培养板各孔中加0.1ml含5×104~10×4 WEHI-164细胞的培养液(含10%小牛血清的RPMI-1640培养液),37℃ 5% CO2的二氧化碳培养箱中培养2~3小时,让细胞帖壁。
2.用RPMI-1640培养液10倍递次稀释TNF标准品,根据需要3~5倍递次稀释待检样品,每孔加0.1ml稀释的标准品或待检样品,每个稀释度3个重复孔。对照孔6个,3个阳性对照孔各加0.1ml含4μg TNF的RPMI-1640培养液,3个阴性对照孔各加100μl RPMI-1640培养液。继续培养18~24小时。
3.甩去培养液,用PBS小心洗涤一次,每孔加0.1ml 10%甲醇溶液固定细胞30秒钟。
4.吸去甲醇溶液,每孔加0.1ml结晶紫染液,室温中放置20分钟。
5.轻轻甩去染色液,用蒸馏水洗涤各孔,将培养板倒置于吸水纸上吸干水分。自然干燥或37℃烘干。此板可以在室温中长期保存。
6.测定前,每孔加0.1ml 33%醋酸脱色,充分振荡后在570nm处测定光吸收度。用光吸收度(OD)值对样品稀释度作图,比较标准品曲线和待检样品曲线即可得到待测样品中的细胞因子活性
‘拾’ 细胞侵袭实验,用结晶紫染色方法如何做
① 用棉签擦去基质胶和上室内的细胞② 染色:采用0.1%结晶紫染色。这种方法有如下优势:(1). 不需要固定细胞,直接染色即可。(2). 配制简单方便。(3). 染色后可以用33%醋酸脱色,将结晶紫完全洗脱下来,洗脱液可在酶标仪上570nm 测其OD值,间接反映细胞数。结晶紫一染就出来了,我做的时候没做固定,用的结晶紫浓度较高0.5%,摇了5分多钟的板子,镜下就直接可以看到染上色的细胞了。感谢您的采纳啦