Ⅰ 影响微生物低温致死的因素有哪些
影响微生物低温致死的因素有以下几点。
(l)温度。储藏温度在冰点成冰点以上时，部分能适应低温的微生物会逐渐生长繁殖。由于各种微生物生物学特性的差异，温度对于各种微生物生长的影响程度是不同的。冻结温度对微生物的杀伤性很大，尤其是-5~-2℃的温度范围对微生物的杀伤
性最大。但是当温度下降到-25~20℃时，微生物的死亡速率反而缓慢得多，因为在此温度范围，微生物细胞内的生化反应几乎完全停止。
(2)冷却速度。在冻结温度以上时，冷却速度越快，微生物的死亡速率也越大。这是因为在冷却过程中，微生物细胞内新陈代谢所需要的各种生化反应的协调一致性被迅速破坏。食品冻结以后的情况恰恰相反，缓冻会导致大量的微生物死亡，而速冻则相反。因为缓冻时形成了量少粒大的冰晶体，不仅对微生物细胞产生机械破坏作用，还能促进蛋白质变性。
(3)结合水分和过冷状态。细菌和霉菌的芽抱中的水分含量较低，其中结合水分的含量较高，在冷却时较易进入过冷状态，而不形成冰晶体，这就有利于保持细胞内胶质体的稳定性，菌体不易死亡。
(4)介质。高水分和低pH值的介质会加速微生物的死亡，而食品中所含的糖、盐、蛋白质、脂肪等物质对微生物有一定的保护作用。
Ⅱ 接种环(针)接种前后灼烧的目的是什么为什么在接种前一定要将其冷却如何判断
接种前灼烧的目的是为了彻底的杀灭环上得细菌、芽孢等,可能引起污染的一切生物体.
接种的时候一定要冷却,因为不冷却的话,你接的目标菌可能就直接杀死了（被热的环烫死）,如何判断已经冷却了：一般是用接种环在玻璃平皿的上盖内侧接触一会(大约5s好了),然后用接种环接触培养基,培养基没有被烫坏、没有冷热物接触是发出的糍糍声,就ok了,可以接菌了.
Ⅲ 低温抑制微生物生长繁殖的主要原因
低温可以降低生物体内各种化学反应的活性,还有各种酶的活性,然后体内的生化反应不能按照正常规律进行,所以它们不能进行很多生命活动,包括繁殖。
Ⅳ 平板菌落计数法中,为什么熔化后的培养基再冷却至45摄氏度左右才能倒平板
可能原因有三点：1、融化后的培养基温度较高，不经冷却就倒入冷的平板中，则会产生水汽和水滴附着表面壁上，甚至融液的溅出，影响涂布效果。2、培养基温度过高，在倾倒培养液时烫手，同样影响实验的顺利操作。3、培养基的各种成分需要降低温度来稳定，避免导入平板的培养基成分分布不均匀。
Ⅳ 为什么48度到50度的融化琼脂培养基倾倒至培养皿中不会杀死菌液中的大多数的微生物
微生物生长温度有三个区段，最低生长温度、最高生长温度和最适生长温度。在最低生长温度时微生物的代谢非常缓慢，生长受抑制，因而常用低温来保藏菌种；在最适温度下微生物代谢活跃，适宜微生物生长；在最高生长温度下微生物易衰老，当温度超过一定界限时，就会对微生物起到杀灭作用。也就是我们所知道的高温杀菌的作用。
Ⅵ 微生物对温度的要求不同的原理是什么
不同微生物的酶活性、物质运输、物质溶解对温度的需求不同。
Ⅶ 为什么营养琼脂在使用时要保持在46度
琼脂一般到40度左右开始凝固，但是温度太高的话，又容易将微生物烫死，所以使用温度保持在46度左右比较好。
Ⅷ 微生物的培养方法
1．平板划线分离培养法
对混有多种细菌，采用划线分离和培养，使原来混杂在一起的细菌沿划线在琼脂平板表面分离，得到分散的单个菌落，以获得纯种。平板划线分离法通常有两种方法：
①分区划线分离法：此法常用于含菌量较多的细菌的分离。先用接种环挑取标本涂布于琼脂平板1区（占培养基总面积的¼）并作数条划线，再于2、3、4区依次划线。每划完一个区域，均将接种环烧灼灭菌1次，冷后再划下一区域，每一区域的划线均与上一区域的划线交接1~3次。一个成功分区划线的平板，培养后分别观察1区形成菌苔，2区菌落连成线，3区和4区可分离到单个菌落。
②连续划线分离法：此法常用于含菌量不多的标本或培养物中的细菌分离培养。方法是先将接种物在琼脂平板上1/5处轻轻涂抹，然后再用接种环或拭子在平板表面曲线连续划线接种，直至划满琼脂平板表面。
2.琼脂斜面接种法
主要用于菌落的移种，以获得纯种进行鉴定和保存菌种等。用接种环（针）挑取单个菌落或培养物，从培养基斜面底部向上划一条直线，然后再从底部沿直线向上曲折连续划线，直至斜面近顶端处止。生化鉴定培养基斜面接种，用接种针挑取待鉴定细菌的菌落，从斜面中央垂直刺入底部，抽出后在斜面上由下至上曲折划线接种。
3．穿刺接种法
此法多用于半固体培养基或双糖铁、明胶等具有高层的培养基接种，半固体培养基的穿刺接种可用于观察细菌的动力。接种时用接种针挑取菌落，由培养基中央垂直刺入至距管底0.4cm处，再沿穿刺线退出接种针。双糖铁等有高层及斜面之分的培养基，穿刺高层部分，退出接种针后直接划线接种斜面部分。
4．液体培养基接种法
用于各种液体培养基如肉汤、蛋白胨水、糖发酵管等的接种。用接种环挑取单个菌落，倾斜液体培养管，在液面与管壁交界处研磨接种物（以试管直立后液体淹没接种物为准）。此接种法应避免接种环与液体过多接触，更不应在液体中混匀、搅拌，以免形成气溶胶，造成实验室污染。
5．倾注平板法
本法主要用于饮水、饮料、牛乳等标本中的细菌计数。取纯培养物的稀释或原标本1ml至无菌培养皿内，再将已融化并冷却至45~50℃左右的琼脂培养基15~20ml倾注入该无菌培养皿内，混匀，待凝固后置37℃培养，长出菌落后进行菌落计数，以求出每毫升标本中所含菌数。先数6个方格（每格为1cm2）中菌落数，求出每格的平均菌落数，并算出平皿直径，然后按下列公式计数，求出每毫升标本中的细菌数。
全平板菌落数=每方格的平均菌落数×лr2
每ml标本中的细菌数=全平板菌落数×稀释倍数
6．涂布接种法
本法多用于纸片扩散法药敏试验的细菌接种。将一定量或适量的菌液加到琼脂培养基表面，然后用灭菌的L型玻璃棒或棉拭子于不同的角度反复涂布，使被接种液均匀分布于琼脂表面，然后贴上药敏纸片，或直接培养，本法经培养后细菌形成菌苔。