微生物验证做哪些

‘壹’ 做微生物实验的步骤

1、准备工作，培养基的配制及灭菌（121-126度灭30分钟高压蒸汽式灭菌），玻璃器皿的灭菌（170度灭2小时干热灭菌，也可用湿热灭菌）若量大可加长灭菌时间。

‘贰’ 药品领域的微生物检测及标准

中国药典微生物限度检查法，为《中国药典》附录收载的关于药品微生物检查的法定方法。药品的不同剂型的微生物检测标准不同，具体如下：

1、制剂通则品种

制剂通则、品种项下要求无菌的制剂及标示无菌的制剂应符合无菌检查法规定。

2、口服给药制剂

细菌数每1g不得过l000cfu。每lml不得过100cfu。

霉菌和酵母菌数每lg或lml不得过100cfu。

大肠埃希菌每1g或lml不得检出。

3、耳、鼻及呼吸道吸入给药制剂

细菌数每1g、lml或l0cm²，不得过100cfu。

霉菌和酵母菌数每1g、lml或l0cm²，不得过10cfu。

金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌每1g、lml或l0cm²不得检出。

大肠埃希菌鼻及呼吸道给药的制剂，每1g、lml或l0cm²，不得检出。

4、阴道、尿道给药制剂

细菌数每1g、lml或l0cm²，不得过100cfu。

霉菌数和酵母菌数每1g、lml或l0cm²应小于10cfu。

金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、白色念珠菌每1g、lml或l0cm²，不得检出。

5、直肠给药制剂

细菌数每1g不得过l000cfu。每lml不得过100cfu。

霉菌和酵母菌数每1g或lml不得过100cfu。

金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌每lg或lml不得检出。

6、其他局部给药制剂

细菌数每1g、lml或l0cm²不得过100cfu。

霉菌和酵母菌数每1g、lml或l0cm²不得过100cfu。

金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌每1g、lml或l0cm²不得检出。

7、含动物组织

含动物组织（包括提取物）的口服给药制剂每10g或10ml还不得检出沙门菌。

8、兼用途径制剂

应符合各给药途径的标准。

(2)微生物验证做哪些扩展阅读

微生物限度检查法的注意事项：

1、当建立产品的微生物限度检查法时，应进行控制菌检查方法的验证，以确认所采用的方法适合于该产品的控制菌检查。若产品的组分或原检验条件发生改变可能影响检验结果时，检查方法应重新验证。

2、检查项目应当包括细菌数、霉菌数、酵母菌数及控制菌检查。

3、微生物限度检查应在环境洁净度10000 级下的局部洁净度100 级的单向流空气区域内进行。

4、检验全过程必须严格遵守无菌操作，防止再污染。单向流空气区域、工作台面及环境应定期按《医药工业洁净室（区）悬浮粒子、浮游菌和沉降菌的测试方法》的现行国家标准进行洁净度验证。

5、除另有规定外，本检查法中细菌及控制菌培养温度为30℃～35℃；霉菌、酵母菌培养温度为23℃～28℃。

6、检验结果以1g、1ml、10g、10ml、10c㎡ 为单位报告，特殊品种可以最小包装单位报告。

‘叁’ 如何验证环境有大量微生物并写出具体方法步骤

空气中微生物的检测
（一)实验目的 (1)了解空气中微生物的分布状况。 (2)比较普通实验室和无菌室空气中存在的微生物的数量和种类。 (3)验证无菌操作法在微生物学实验中的重要性。
（二）实验原理 在我们周围的环境中存在着种类繁多、数量庞大的微生物。空气中也不例外。虽然空气不是微生物栖息的良好环境。但由于气流、灰尘和水沫的流动，人和动物的活动等原因，仍有相当数量的微生物存在。当空气中个体微小的微生物落到适合于它们生长繁殖的固体培养基的表面时，在适温下培养一段时间后，每一个分散的菌体或孢子就会形成一个个肉眼可见的细胞群体即菌落。观察大小、形态各异的菌落，就可大致鉴别空气个存在的微生物的种类。本实验通过检测普通实验室和消毒后的无菌室空气中存在的微生物，从而判断无菌室的消毒效果，了解空气中常见的微生物类群。
（三)实验器材 (1)培养基： 1)牛肉膏蛋白胨培养基。 2)马铃薯蔗糖培养基。 (2)器材：无菌平皿若干套，酒精灯，培养箱等。
(四〕实验方法 (1)倒平板：按常法配置上述培养基，分装于三角瓶中，高压灭菌备用。临用前将培养基熔化，冷却至50℃左右，倒平板若干个备用。 (2)检测：先将无菌室的紫外灯打开，照射15min后关闭。打开上述冷凝了的无菌平板的皿盖，让其在无菌室空间和无人走动的普通实验室空间分别暴露Ih后，盖上皿盖。要求每种培养基的平板在每个空间设3个重复。 (3)培养：将细菌培养基平板和真菌培养基平板分别置37℃和28℃的培养箱中倒置培养，1—2d后开始连续观察，注意不同类别的菌落出现的顺序及菌落的大小、形状、颜色、干湿等的变化。

如果是其他环境中的菌株,比如 土壤 植被 动物毛发 生活器具,可以取少量以上样品 在无菌水中振荡半小时,然后取其上清液涂布于无菌平板表面.

‘肆’ 微生物的方法确认怎么做

这在不同样本中的确定方法是不同的，在实际工作中各种情况还是很复杂的，也需要比较多的经验来进行判断，并不是一句两句就能说清楚的。
简单说一下:
首先假设在样本中检测到明确为致病微生物的细菌，那么就可以说明这些细菌，很可能是导致疾病的微生物，比如沙门氏菌志贺氏菌，金黄色葡萄球菌等。
在无菌体液中，比如血液，骨髓，脑脊液等检测出来细菌那么也可以明确这些细菌是导致疾病的微生物。
在含有正常菌群的体表或者体腔管道内，贱厨拉菲正常菌群，并且数量比较多的细菌，那么这种细菌可能也是致病微生物。

‘伍’ 微生物定量方法怎么做方法验证

目前注册申请提供微物限度检查验证内容于简略设计够严谨程够规范或者未进行验证等虽进行验证验证重点突能反映试验完整性行性 实际微物限度检查主要考察待测物受微物污染程度检查内容包括细菌数、霉菌数、酵母菌数及控制菌检查验证应针细菌、霉菌、酵母菌计数控制菌检查进行验证 面别介绍细菌、霉菌、酵母菌计数验证控制菌检查验证内容

‘陆’ 纯化水的微生物验证大家是怎么做的

首先：只做菌落总数和总大肠菌群两项。
其次：当总大肠菌群产酸产气时，根据需要做耐热大肠菌群，和大肠埃希氏菌检测。
在做大肠检测时，有多管发酵法、滤膜法、酶底物法三种方法，可根据实验室实际情况选择具体方法。
标准参照“GB/T 5750.12-2006 生活饮用水标准检验方法 微生物指标”
需要请留邮箱

‘柒’ 想检测微生物指标有什么要求，都有哪些检测项目费用多少

做微生物指标的检测，要求是无菌的环境，和无菌的操作技术。微生物检测项目最常见的就是活菌总数计数，另外就是可以做单一菌种的培养和鉴定。还有卫生指标要求的霉菌总数。有害微生物如沙门氏菌、大肠杆菌计数等。单项的微生物如活菌总数的检测费用在500~600左右。如果做菌种鉴定，预估在1500的样子，不同的检测机构，费用有较大差别。

‘捌’ 大家微生物限度检测都用什么做的

大家微生物限度检测都用什么做的
药品微生物限度检查是控制药品质量的一个重要检查项目。中国药典2005年版规定，不同的药品微生物限度检查中的细菌数、霉菌及酵母菌数测定、各控制菌的检查，必须按照经过验证的方法进行。一些中西药制剂由于药品本身的理化性质及抑菌活性，干扰药品污染的微生物计数测定和控制菌的检出，带来检查结果的不准确性。如在细菌数测定中，低稀释级的平均平板菌落数低于高稀释级，呈现细菌的不正常分布，即药品显现出干扰或抑菌作用；反映在控制菌检查中，阳性对照试验呈阴性反应，其检验结果不能反映药品被微生物污染的真实状况，得出不准确的结果或假阴性结果。由于2005年版以前的中国药典，没有要求对微生物限度检查中的各项目进行方法学验证，以至于这类方法学问题越来越多，影响微生物限度检查结果的准确性。2002年10月～2003年4月我所参加中检所组织药品微生物限度检查方法验证试验协作课题。选择了4种审核检验的中西药制剂品种，其原药品标准没有进行微生物限度检查方法验证考察，也未见相关文献报道。为对微生物限度检查方法进行考察，选用4种代表菌做了微生物计数的菌回收率试验。根据各品种的要求对控制菌做检出率测定的研究。得出的结果说明这些药品微生物限度检查方法存在的问题，并为该课题提供了试验数据。

‘玖’ 微生物计数方法验证需要怎么准备

微生物限度检查方法学验证

1、供试品：XXXXX胶囊（批号：XXXXXX）

2、菌种：

菌落计数用菌种：

(1) 枯草芽孢杆菌[CMCC（B）63501]

(2) 金黄色葡萄球菌[CMCC（B）26003]

(3) 大肠埃希菌[CMCC（B）4]

(4) 白色念珠菌[CMCC (F) 98001]

控制菌检查用菌种：

(1) 大肠埃希菌[CMCC（B）4]

(2) 金黄色葡萄球菌[CMCC（B）26003]

3、培养基：营养肉汤培养基、改良马丁培养基、营养琼脂培养基、玫瑰红钠琼脂培养基、胆盐乳糖培养基、4-甲基伞形酮葡糖苷培养基（MUG）。

4、预试验 按照中国药典2005年版微生物限度检查法中常规法及培养基稀释法检验，金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的回收率均小于70%，本品有抑菌作用。

5、细菌、霉菌及酵母菌计数

按照中国药典2005年版微生物限度检查法进行细菌、霉菌及酵母菌计数的方法学验证试验及菌落计数。

5.1菌液制备：

(1) 接种金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌的新鲜培养物至10ml营养肉汤中，35～37℃培养18～24小时，取此培养液1ml加0.9％无菌氯化钠溶液9ml，采用10倍递增稀释法，稀释至10-5～10-7，使菌数约为50～100cfu/ml。

(2) 接种白色念珠菌的新鲜培养物至10ml改良马丁培养基中，23～28℃培养24～48小时，取此培养液1ml加0.9％无菌氯化钠溶液9ml，采用10倍递增稀释法，稀释至10-5～10-7，使菌数约为50～100cfu/ml。

5.2 供试液的制备 取供试品10g，pH7.0无菌氯化钠-蛋白胨缓冲液至100ml，振摇，使呈1：10的供试品储备液。取1：10的供试品储备液 10ml

‘拾’ 工厂微生物检验员具体工作内容有哪些应该具备哪些技术

如果是药厂的话，一般是做一些日常的常规实验还有一些控制菌的检验。像是细菌、霉菌酵母菌的计数，有时还要对阳性菌株进行传代。这些都可以在现行的中国药典附录中找到。每天都要做好计划，准备培养基、玻璃器皿的灭菌工作，实验前后对微生物室进行消毒杀菌和日常管理。检测样品当中的菌落总是是否超标，是否有不得检出的控制菌（如大肠埃希菌或沙门菌等）。网上现在应该能找到药典下载，具体的内容附录里有，像“无菌检查法”、“微生物限度检查法”。实际操作的话，如果你在学校有上过实验课的话，操作也就那些，没什么难度的。我也只是做了一年多的微生物，其实药厂不会只招微生物的检验人员，还是要兼顾一些理化的。去看看药典吧，会有帮助的。