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如何做微生物

发布时间:2022-08-06 22:12:43

1. 如何进行微生物检验分析中的质量控制

一、诊断性抗血清试剂,实验当日至少应做多价血清阴性和阳性质控。定性试验试剂每次检测时应至少包括阳性和阴性质控菌株。不含内质控的直接抗原检测试剂,实验当日应检测阳性和阴性质控。使用的染色剂(革兰染色、特殊染色和荧光染色),至少每周(若检测频率小于每周1此,则实验当日)用已知阳性和阴性(适用时)的质控菌株检测。凝固酶、过氧化氢酶、氧化酶、β-内酰胺酶,实验当日应做阴性和阳性质控,商业头孢菌素试剂的β-内酰胺酶试验可遵循制造商的建议。
二、实验室采用的抗菌药物敏感性试验方法的质控:应以质控标准菌株连续检测20—30天,每一组药物/细菌超出参考范围(抑菌圈直径或MIC)的频率应不超过(≤)1/20或1/30;也可采用替代质控方案,即连续5天,每天对每一组药物/细菌重复测定3次,每次单独制备接种物,15个数据超出参考范围(抑菌圈直径或MIC)的结果应不超过(≤)1个,若失控结果为2-3个,则如前述,再进行5天,每天3次重复试验,30个数据失控结果应不超过(≤)3个。此后,应每周使用标准菌株进行质控。若检测频率小于每周1次,则每个检测日应进行质控。采用自动或者半自动仪器检测MIC值时,应按照制造商的要求进行质控。

三、厌氧菌培养:还需要使用有效的方法检测厌氧培养环境(如以亚甲兰试条、厌氧菌或其它适当方法)。分枝杆菌检测:抗酸染色应在实验当日用适当的阴性和阳性质控验证;荧光染色应每次实验以阴性和阳性质控验证。真菌检测:直接染色(如:抗酸染色,PAS,吉姆萨染色,墨汁染色)检查患者样品时,应在实验当日做阴性和阳性质控(某些染色如吉姆萨染色,玻片本身作为阴性质控。KOH制备的玻片不需要质控)。病毒:连续细胞传代时应定期监测支原体污染(宜监测阴性未传代的质控株,而不是培养支原体);应监测用于细胞生长培养液的动物血清的细胞毒性;应具备相应的细胞株用于病毒培养。

2. 怎样做微生物的镜检

取一滴试液,放载玻片上,盖上盖玻片,放显微镜下看就行了。如果需要计数,就是用血球计数板。这是最简单的了,不过这样恐怕看不出什么啊。光是看形态来判断种类吗?

3. 微生物培养方法有哪些

常用的微生物实验室接种方法有以下几种:

1、液体接种:从固体培养基中将菌洗下,倒入液体培养基中,或者从液体培养物中,用移液管将菌液接至液体培养基中,或从液体培养物中将菌液移至固体培养基中,都可称为液体接种。

2、穿刺接种:在保藏厌氧菌种或研究微生物的动力时常采用此法。做穿刺接种时,用的接种工具是接种针。用的培养基一般是半固体培养基。它的做法是:用接种针蘸取少量的菌种,沿半固体培养基中心向管底作直线穿刺,如某细菌具有鞭毛而能运动,则在穿刺线周围能够生长。

3、活体接种:活体接种是专门用于培养病毒或其它病原微生物的一种方法,因为病毒必须接种于活的生物体内才能生长繁殖。所用的活体可以是整个动物;也可以是某个离体活组织,例如猴肾等;也可以是发育的鸡胚。接种的方式是注射,也可以是拌料喂养。

4、浇混接种:该法是将待接的微生物先放入培养皿中,然后再倒入冷却至45°C左右的固体培养基,迅速轻轻摇匀,这样菌液就达到稀释的目的。待平板凝固之后,置合适温度下培养,就可长出单个的微生物菌落。

5、划线接种:即在固体培养基表面作来回直线形的移动,就可达到接种的作用。常用的接种工具有接种环,接种针等。在斜面接种和平板划线中就常用此法。

6、涂布接种:与浇混接种略有不同,就是先倒好平板,让其凝固,然后再将菌液倒入平板上面,迅速用涂布棒在表面作来回左右的涂布,让菌液均匀分布,就可长出单个的微生物的菌落。

7、三点接种:在研究霉菌形态时常用此法。此法即把少量的微生物接种在平板表面上,成等边三角形的三点,让它各自独立形成菌落后,来观察、研究它们的形态。除三点外,也有一点或多点进行接种的。

8、注射接种:该法是用注射的方法将待接的微生物转接至活的生物体内,如人或其它动物中,常见的疫苗预防接种,就是用注射接种,接入人体,来预防某些疾病。

4. 如何做好微生物组工作

1 / 3 第一点:选择富含益生菌的食物,如自制酸奶、康普茶、泡菜、豆豉等。第二点:低碳水化合物和优质脂肪,每天摄取大量的蔬菜水果和85-110克的蛋白质。第三点:享受红酒、茶叶、美式咖啡和黑巧。多酚的饮食能显着降低氧化应激标志物,从而降低神经性疾病的风险,而且多酚类食物能积极影响肠道微生物多样性的能力。第四点:选择富含益生元的食物,如洋姜、大蒜、洋葱、韭菜、豆薯等。第五点:饮用好水。无论选择哪种净水机,都要定期对其进行维护,随着污染物的积累,过滤器会变得不那么有效。第六点:每季禁食。人体能将脂肪分解成一种叫做酮类的分子,特别是β-羟丁酸(β-HBA)的物质可谓大脑的超级燃料,而且也是肠道有益菌群的一部分。

2 / 3 第一点:选择富含益生菌的食物,如自制酸奶、康普茶、泡菜、豆豉等。第二点:低碳水化合物和优质脂肪,每天摄取大量的蔬菜水果和85-110克的蛋白质。第三点:享受红酒、茶叶、美式咖啡和黑巧。多酚的饮食能显着降低氧化应激标志物,从而降低神经性疾病的风险,而且多酚类食物能积极影响肠道微生物多样性的能力。第四点:选择富含益生元的食物,如洋姜、大蒜、洋葱、韭菜、豆薯等。第五点:饮用好水。无论选择哪种净水机,都要定期对其进行维护,随着污染物的积累,过滤器会变得不那么有效。第六点:每季禁食。人体能将脂肪分解成一种叫做酮类的分子,特别是β-羟丁酸(β-HBA)的物质可谓大脑的超级燃料,而且也是肠道有益菌群的一部分。

3 / 3 第一点:选择富含益生菌的食物,如自制酸奶、康普茶、泡菜、豆豉等。第二点:低碳水化合物和优质脂肪,每天摄取大量的蔬菜水果和85-110克的蛋白质。第三点:享受红酒、茶叶、美式咖啡和黑巧。多酚的饮食能显着降低氧化应激标志物,从而降低神经性疾病的风险,而且多酚类食物能积极影响肠道微生物多样性的能力。第四点:选择富含益生元的食物,如洋姜、大蒜、洋葱、韭菜、豆薯等。第五点:饮用好水。无论选择哪种净水机,都要定期对其进行维护,随着污染物的积累,过滤器会变得不那么有效。第六点:每季禁食。人体能将脂肪分解成一种叫做酮类的分子,特别是β-羟丁酸(β-HBA)的物质可谓大脑的超级燃料,而且也是肠道有益菌群的一部分。

5. 如何进行微生物的培养

微生物培养法是在人为条件下繁殖微生物的方法。根据微生物的种类以及对养料、温度、氧气、水分、酸碱度等环境条件的要求不同,并联系生产和实验上的具体要求,可有不同的培养方法。可分好气培养法和厌气培养法两类。中海生物技术的培养基一是好气微生物培养法,常用:
①摇床培养法,即将微生物接种于盛有液体培养基的三角瓶后,放在恒温培养室中的摇床上作有节奏的振荡,使空气不断进入培养液中,促其良好生长;
②浅盘培养法,又称表面培养法,在盘内放一浅层培养基,使微生物能够充分接触空气,而有利于生长繁殖,但此法所需空间大,并且容易污染杂菌;
③深层培养法,适用于好气微生物的大规模发酵培养,在大容积的液体培养基中,通入无菌空气,并不断搅拌,可使微生物充分接触空气,迅速繁殖并积累代谢产物。二是厌气微生物培养法,实验室常用化学还原剂或抽气机吸除培养基中的分子氧,也有用静止状态的深层培养法。在生产中常用密封式发酵罐或不通风的固体发酵法。

6. 土壤微生物的检测怎么做,哪里可以做

土壤微生物是土壤中一切肉眼看不见或看不清楚的微小生物的总称,严格意义上应包括细菌、古菌、真菌、病毒、原生动物和显微藻类。其个体微小,一般以微米或毫微米来计算,通常1克土壤中有几亿到几百亿个,其种类和数量随成土环境及其土层深度的不同而变化。它们在土壤中进行氧化、硝化、氨化、固氮、硫化等过程,促进土壤有机物的分解和养分的转化;那土壤内的微生物如何测定呢,下面喆图小编带大家来了解一下。

一、培养方法

(1)稀释平板涂抹法

具体操作如下:

①准确称取 10g(精确到 0.001)采集的鲜土,倒入装有 90 ml 无菌水的 500 ml 的三角瓶中,置于往返震荡机上(120r/min,常温),震荡 20 min,使土壤充分分散成为土壤悬液。

②将上面的土壤悬液用无菌移液管吸取 5 ml 到 45 ml 稀释液中,即为 10-2稀释度,依次按 10倍法稀释,制成 10-1~-~10-6稀释度。注意:每次吸取悬液时,在稀释液中反复吸入和吹出 3-~5 次,减少因管壁吸附而造成的误差,并使悬液进一步分散,每个稀释度需要更换无菌吸管吸取悬液。)

③根据各类微生物在土壤中的数量多少选择适当稀释度的悬液接种。本实验选择细菌的稀释度为 10-~10-5,放线菌为 10~-10-4,真菌为 10-1~-10-3。 -3-2

④土壤悬液的接种方法:在无菌培养皿中倒入 15~20 ml 选择性培养基,待凝固后,用 0.2 ml无菌移液枪吸取0.2 ml各稀释度的土壤悬液,然后立即用涂抹棒将悬液均匀的涂抹于培养基表面。用同一支吸管接种时,从高稀释度开始,依次接种到低稀释度。

⑤接种了土壤悬液的培养皿,平放在超净工作台 20~30 min,使得菌液渗透入培养基内,然后倒置于 28~-30°C 生化培养箱中培养一定时间:细菌 1~-3 天,放线菌 10-~14 天,真菌 3~-7 天。

⑥培养结束后,取出培养皿计数。

(2)稀释培养法

一系列稀释度的制作与稀释平板法相同。根据各类微生物在土壤中数量的多少选择适当的稀释度,分别接种 1 ml 稀释液与制作好的液体培养基中,根据需要做 3~4 次重复,适温培养。2 三大类土壤微生物培养基的分离三大类土壤微生物的分离采用稀释平板涂抹法,每个菌种要求做 3 个稀释度,每个稀释度做3-4次重复,选取细菌和放线菌的菌落在20~-200之间的培养皿、真菌的菌落在 10-~100 的培养皿计数,并计算三次重复的平均值。每克干土中微生物数量计算式:

每克干土中菌落数=(菌落平均数×稀释倍数×100%)/(湿土质量×干土)

1, 细菌:牛肉膏蛋白胨培养基:牛肉膏 3g、蛋白胨 5g、琼脂 18g、蒸馏水 1000 ml、pH 值 7.0-~7.2 。

2, 放线菌:改良高氏 1 号培养基:KNO3 1g,FeSO4·7H2O 0.01g,K2HPO4 0.5g,淀粉 20g,MgSO4·7H2O 0.5g、NaCl 0.5g、琼脂 18g、3%重铬酸钾溶液 3.3ml、蒸馏水 1000ml、pH 值 7.2~-7.4

3,真菌:马丁氏培养基(虎红琼脂):蛋白胨 5g、KH2PO4 1g、MgSO4 0.5g、葡萄糖 10g、琼脂 18.5g、孟加拉红 0.033g、氯霉素 0.1g、蒸馏水 1000ml。

所有培养基需在湿热灭菌锅中121°C灭菌 20-~30min

以上土壤微生物测定方案仅供参考,可以查询专业公司进行检测。

7. 微生物怎么做

采用滤膜法进行微生物检测是一种国际公认的微生物标准检验方法,其得到AOAC、美国、欧洲和日本等国家的药典、FDA和EPA等组织的承认,广泛应用于环境监测、食品及饮料工业、化妆品、制药工业品质控制和电子工业等领域。赛多利斯公司的滤膜法微生物检测产品成功地应用于滤膜法已有20多年的历史,实用而且方便实用,它简化了微生物检测程序。
滤膜法微生物检测:
将适当孔径的滤膜放入滤器,过滤样品,由于滤膜的作用而将微生物保留在膜的表面上。样品中微生物生长抑制剂可在过滤后用无菌水冲洗滤器而除去。然后,将滤膜放在培养基上培养,营养物和代谢物通过滤膜的微孔进行交换,在滤膜表面上培养出的菌落可以计数,并和样品量相关。
滤膜法的优点:
- 与直接法比较,可以检测大量的样品
- 浓缩效应使微生物检测的准确度提高
- 带有菌落的滤膜,可作为检测的永久记录存档
- 可见的菌落和样品量直接对应,得出定量结果

操作具体一点就是:薄膜过滤法检测,一个样过滤一份,就是200ml的纯化水通过滤膜,将该滤膜浸泡在灭菌好的l生理盐水中,再接种到平皿中,制成10级、100级、1000级稀释倍数的细菌、霉菌和酵母菌稀释培养皿,即可

8. 怎样做好微生物检验的工作

怎样做好微生物检验质量控制
生物学检验室内质量控制包括:①对细菌检验人员的要求;②操作手册;③仪器设备的功能监测;④培养基的质量控制;⑤试剂、染色液及抗血清的质量控制;⑥标本检验的质量控制;⑦标准菌株的来源和保存及室内质量的全面控制七个方面。
质量控制:满足质量要求的操作技术和活动。
质量保证:为了满足实验室质量要求
,制定相应的计划,实施证明(记录)所进行的一系列的系统活动。
外部质量控制:通过互相校准和/或检验对实验室的操作和结果所进行的控制。
内部质量控制:实验室内部采取的以对比分析、跟踪以及相关方法,对实验室工作的连续性控制计划。

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