❶ 生物选修一稀释涂布平板法的步骤是怎么样的啊。。 为什么还要把每个浓度梯度的都涂布到平板上 而且
因为一般细菌浓度比较高,但是我们又很难把控这个浓度,所以就每个梯度都稀释出来,然后去涂板子,这样就可以保证有一个板子上的细菌长的菌落数目比较合适,同时再看下该浓度上下一个梯度是不是差不多是十倍关系,如果不是就说明你稀释的不够好,测量数据不够准确~
❷ 跪求 土壤微生物的测定:涂布平板法 测定细菌、真菌和放线菌的实验步骤(详细)
1. 土壤样品采集
采集一般定点于耕作层0--20cm,先除去表土1--
2cm,以无菌铲采土充分混匀后用无菌塑料袋分装。
2. 培养基的制备与平板制作
牛肉膏蛋白胨、高氏1号和马铃薯蔗糖琼脂固体培
养基培养基的溶解与平板制作
3、平板的制作
每组准备三套无菌培养皿,在皿底注明稀释液浓度。
融化锥形瓶中的培养基,放在45-50℃ 恒温水浴锅中备用
倒入45-50℃融化的培养基约1/4-1/3培养皿高度。培养皿平放在桌上顺时针、逆时针轻轻转动,混匀皿中物质。培养基冷凝后即成平板。
4、制备稀释液(无菌操作)
(1)制备土壤悬液:
称取土样10g,迅速倒入90mL无菌水三角瓶中,振荡5~10min,使土样充分打散,即成为10-1的土壤悬液。
(2)稀释:
用1mL无菌移液器吸取10-1的土壤悬液1.0mL,放入9.0mL无菌水中即为10-2稀释液,如此重复,可依次制成10-2~10-8的稀释液。注意:操作时每一个稀释度换用一个移液管,以减少稀释中的误差。
5.培养
将接种好的细菌、放线菌、霉菌平板倒置,即皿盖朝下放置,于28~30℃中恒温培养,细菌
培养1~2d,放线菌培养5~7d,霉菌培养3~5d。观察生长的菌落并计数。
❸ 微生物平板涂布注意事项
微生物平板涂布注意事项:
1、样品要准确称取待测样品l0g,放入装有90ml无菌水并放有小玻璃珠的250ml三角瓶中,用手或置摇床上振荡20min,使微生物细胞分散,静置20-30s,即成10-1稀释液。
2、用稀释平板计数时,待测菌稀释度的选择应根据样品确定。样品中所含待测菌的数量多时,稀释度应高,反之则低。
3、涂抹平板计数法与混合法基本相同,所不同的是先将培养基熔化后趁热倒入无菌平板中,待凝固后编号,然后用无菌吸管吸取0.1ml菌液对号接种在不同稀释度编号的琼脂平板上。
(3)生物涂板怎么涂扩展阅读:
涂布平板法的特征:
稀释平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落,即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法,即一个菌落代表一个单细胞。计数时,首先将待测样品制成均匀的系列稀释液,尽量使样品中的微生物细胞分散开,使成单个细胞存在。
再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中,使其均匀分布于平板中的培养基内。经培养后,由单个细胞生长繁殖形成菌落,统计菌落数目,即可计算出样品中的含菌数。
此法所计算的菌数是培养基上长出来的菌落数,故又称活菌计数。一般用于某些成品检定(如杀虫菌剂等)、生物制品检验、土壤含菌量测定及食品、水源的污染程度的检验。
参考资料来源:网络—涂布平板法
❹ 微生物涂抹怎么做
工作人员手部微生物检测,涂抹法
不能将棉球放到培养基里面培养,这样根本没办法计数。将棉签放入10ml灭菌生理盐水中,混匀,取1 ml到平板中,再到平板(45℃的培养基约15ml)。37℃培养48h,计数。
假如手很脏,细菌很多,则将棉签放入含10ml灭菌生理盐水的采样管后,取1ml到9ml无菌生理盐水中(相当于10倍稀释),再取1ml该稀释液到灭过菌的平板中,再倒入培养基。
❺ 稀释涂布平板法是什么
该法是将已熔化并冷却至约50℃(减少冷凝水)的琼脂培养基,先倒入无菌培养皿中,制成无菌平板。待充分冷却凝固后,将一定量(约0.1 ml)的某一稀释度的样品悬液滴加在平板表面,再用三角形无菌玻璃涂棒涂布,使菌液均匀分散在整个平板表面,倒置温箱培养后挑取单个菌落。
计数时,首先将待测样品制成均匀的系列稀释液,尽量使样品中的微生物细胞分散开,使成单个细胞存在(否则一个菌落就不只是代表一个细胞),再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中,使其均匀分布于平板中的培养基内。
微生物平板涂布法有以下注意事项:
1、整个过程需要保证在无菌条件下进行。试管、枪头等仪器设备都需要提前经过灭菌环节才可以使用。
2、接种环使用前应当在酒精灯上灼烧至红热,以保证灼烧充分。
3、蘸取少量菌液,先在培养皿上划第一条,注意不要转动接种环。
4、在稀释过程中要充分混匀,吸取100ul到平板上,然后用烧好的涂布棒均匀涂抹开,各个方向都可以涂布,涂布完灼烧。
❻ 高中生物……什么是涂布平板法具体操作
一种常用接种细菌的方法。字面意思就是把细菌涂抹在平板培养基上。
具体操作:1.吸取含细菌的原液进行梯度稀释处理;
2.取对应数量的无菌牛肉膏蛋白胨培养基(常用);
3.用吸管或移液枪按照由低浓度向高浓度的顺序分别吸取菌液滴在培养基表面,然后用平板抹匀(∟形的玻璃棒)
4.倒转平板,培养。
(注意每一步的无菌操作。大概就是这么个流程,细致的要具体实验具体弄。)
❼ 涂布平板法的实验方法
1.样品稀释液的制备 准确称取待测样品l0g,放入装有90ml无菌水并放有小玻璃珠的250ml三角瓶中,用手或置摇床上振荡20min,使微生物细胞分散,静置20-30s,即成10-1稀释液;再用1ml无菌吸管,吸取10-1稀释液lml,移入装有9ml无菌水的试管中,吹吸3次,让菌液混合均匀,即成10-2稀释液;再换一支无菌吸管吸取10-2稀释液1ml,移入装有9ml无菌水的试管中,也吹吸三次,即成l0-3稀释液;以此类推,连续稀释,制成10-4、10-5、10-6、10-7、10-8、10-9等一系列稀释菌液。
用稀释平板计数时,待测菌稀释度的选择应根据样品确定。样品中所含待测菌的数量多时,稀释度应高,反之则低。通常测定细菌菌剂含菌数时,采用10-7、10-8、10-9稀释度,测定土壤细菌数量时,采用10-4、10-5、10-6稀释度,测定放线菌数量时,采用l0-3、10-4、10-5稀释度,测定真菌数量时,采用10-2、10-3、10-4稀释度。
2.平板接种培养 平板接种培养有混合平板培养法和涂抹平板培养法两种方法。
(1)混合平板培养法 将无菌平板编上10-7、10-8、10-9号码,每一号码设置三个重复,用无菌吸管按无菌操作要求吸取10-9稀释液各1ml放入编号10-9的3个平板中,同法吸取10-8稀释液各lml放入编号10-8的3个平板中,再吸取10-7稀释液各lml放入编号10-7的3个平板中(由低浓度向高浓度时,吸管可不必更换)。然后在9个平板中分别倒入已融化并冷却至45—50℃的细菌培养基,轻轻转动平板,使菌液与培养基混合均匀,冷疑后倒置,适温培养。至长出菌落后即可计数。
(2)涂抹平板计数法 涂抹平板计数法与混合法基本相同,所不同的是先将培养基熔化后趁热倒入无菌平板中,待凝固后编号,然后用无菌吸管吸取0.1ml菌液对号接种在不同稀释度编号的琼脂平板上(每个编号设三个重复)。再用无菌刮铲将菌液在平板上涂抹均匀,每个稀释度用一个灭菌刮铲,更换稀释度时需将刮铲灼烧灭菌。在由低浓度向高浓度涂抹时,也可以不更换刮铲。将涂抹好的平板平放于桌上20—30min,使菌液渗透入培养基内,然后将平板倒转,保温培养,至长出菌落后即可计数。
❽ 稀释涂布平板法
平板法分离培养的原理就是,平板上的一个单菌落都是由初始的一个微生物繁殖产生的,也就是说,一个单菌落里的所有微生物都是相同的。这样,在划线或稀释涂平板后挑取单菌落,那么就获得了一个纯的微生物群体。
明白否?
划线通过一系列交替或者连续的划线,将接种针上的菌再培养基上划开,这样可以保证有单独的菌来生长出一个单菌落。
单菌落你都不会挑么?板上长出单菌落后挑取到培养液中培养,获得的就是纯的一个系的微生物了。
还不明白?