车间取水样做微生物怎么取

㈠ 生产用水的微生物检测标准与采水样的方法是什么

我做过用固体培养基测水样中微生物含量，菌落数要求在30～300个才可以计数。你的培养基中菌落数太少，你检查一下你的取样方法和操作步骤有没有规范，不行就减小稀释倍数试试。而且一般每一个稀释浓度下要做三组平行试验。
计算时，先计算每一稀释浓度下三组平行试验的平均数，把不同浓度下的平均数进行比较，首先选择平均菌落数在30—300之间的，当只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时，则以该平均菌落数乘其稀释倍数即为该水样的细菌总数。

㈡ 纯化水中的微生物检测怎么做 要详细

1检测前的准备
1.1仪器：微生物限度检验仪
微生物限度培养器
1.2培养基：TGYA琼脂培养基、R2A琼脂培养基
上述培养基均须做培养基的促生长试验，TGYA琼脂培养基的促生长试验参见微生物计数操作检查法SOP07-QC-3-017，R2A琼脂培养基促生长试验中选择的菌种是铜绿假单胞菌、大肠埃希菌、金黄色葡萄糖球菌，操作方法同微生物计数操作检查法SOP07-QC-3-017中培养基的促生长试验。
75%的酒精
1.3开启净化工作台，把微生物限度检验仪连接电源。

2检测
2.1薄膜过滤法
使用孔径大小不超过0.45μm的薄膜过滤器。
2.2在净化工作台下，用火焰喷枪对泵头端面和过滤片进行消毒。把微生物限度培养器固定在微生物限度检验仪上，打开微生物限度培养器盖子。
2.3取50ml的纯化水，倒入微生物限度培养器中，打开微生物限度检验仪开关，立即过滤。过滤完成后，取下过滤器，在过滤器膜的另一面中，倾注TGYA琼脂培养基，盖上盖子。
2.4取50ml的纯化水，倒入微生物限度培养器中，打开微生物限度检验仪开关，立即过滤。过滤完成后，取下过滤器，在过滤器膜的另一面中，倾注R2A琼脂培养基，盖上盖子。
2.5每个样品过滤后均做2单个培养，检测完毕，取一微生物限度培养器固定在微生物限度检验仪上，注入100ml的75%酒精过滤，关闭仪器、电源。

3培养
倾注TGYA琼脂培养基的，在30℃-35℃培养48h-72h，并计数。倾注R2A琼脂培养基的，在20℃-25℃培养5d-7d，并计数。
分别计算和报告两种培养基每1ml纯化水中的cfu值。

㈢ 微生物的无菌操作 待测样品是怎么取的,不是操作过程.就是操作之前的那个样品该怎么取.

先前做好生理盐水,分装于225ml广口瓶中,将你要测的那个样品拿过来,镊子与剪刀均用酒精消毒,样品的外包装用酒精棉球擦拭消毒,剪刀剪开包装袋口,分取袋子不同部位的产品25g放入225ml蒸馏水中
我们那个待测样品是直接从车间抽取的的成品,随机取样

㈣ 如何提取水样

夏季取水样应注意的问题
一年中的各季节都会使给水工作人员遇到其特有问题。

夏季出现的问题则是取水样瓶中的非典型大肠菌或异养菌的大量滋生。

非典型大肠菌和异养菌的大量生长导致水的细菌总数超出容许值。其中某些生物可引起某一地区的幼儿、病人及老年人的健康问题。在实验室分析中这些细菌的过量生长，也可抑制或妨碍大肠菌的生长。

然而，在温度较高时，水样采集之后至分析之前非典型大肠菌的大量滋生，并不能如实反应细菌的情况。问题在于在夏季所具备的条件下，取水样方法不得当。

夏季的特殊条件非常适合这些细菌的滋生，以地表水为水源的供水系统尤甚。细菌在夏季温度下迅速生长，这在地表水供水中极为常见。

细菌生长和繁殖需要暖热的温度。热天采集的水样放入绝缘条件很差的箱内，然后送往化验室。在邮车的回程中水样得到相当的热量。这些微生物以每20分钟增长一倍的速度递增。

假设一开始只有一个细菌，一小时后就达到8个，二小时后增加到64个，8小时之后就可达16,777,216个，且该过程仍在继续。如果水样是在下午4:30采集，上午8点送达化验室，路途15.5小时，细菌分裂的次数就会达46次。然而这只是个理论数字，但由此可看出，水样在化验室分析之前，细菌有向天文数字增长的趋势。

幸而发生这样后果的条件总是不完全具备的。饮用水中所含营养成份一般很有限，不可能提供如此众多细菌以营养。此外，这些细菌本身所排出的废物对某些微生物是有毒的，如有充分的时间，细菌就会死掉。即使如此，我们在滤膜上发现无从计数的菌落也是不足为奇的。

细菌的来源

细菌一开始是怎样进入水样中的呢？可能有多种原因。如果水中含有颗粒物质，这就可能使细菌接触不到消毒剂。这正如有一位老微生物学家恰当地描述过那样“假如你仅有一微米高，那么不用很大窨就可隐匿起来。”

给水干管内壁一般繁殖了细菌并逐渐形成粘膜，使不与消毒剂接触。夏季用水量大时，会冲击这层粘膜，连同活着的细菌，一起进入水中。假使有极少量这种物质进入水样，就极可能成为细菌之源。水样在取样的这段时间内被脱氯，因此在正常情况下得以杀菌的氯都已去掉。

在夏天，发现许多地表给水的整个配水管网中难以维持恰当的余氯量。而余氯可使水中保持极低的细菌含量。

夏季施工较多。尽管在新建管线或维修时倍加小心，但细菌仍有进入管网的可能性。再加之微生物可借助颗粒物质掩护起来。 任何一种不正确的取样方法几乎都有增加细菌进入水样的可能性，而且在运送途中还在增加。有许多方面会使我们无法想到经繁衍的细菌数竟比应有的大得多。我们关心这一点是因为大量细菌排出的废物可能抑制大肠菌的生长。假如使用滤膜法，菌落就可能完全长满滤膜，因而水样中可能存在的大肠菌，化验员就检测不到。

大肠菌分析使用的培养基具有化学抑制剂，可减少非大肠菌的生长。然而如水样中细菌数很高，那么抑制剂就会被消耗尽，滤膜上便可看到细菌的大量繁殖，在多试管发酵和测试是否有大肠菌存时，就会观察到浑浊现象。

无漏逢且无进气装置的水龙头

取水样中产生的问题是可以避免的（请见“夏季取水样的建议”）。取样前用肥皂和水洗手，然后选好适当类型的水龙头。所选水龙头应是平滑出口，且确无漏逢与进气装置的。不要用户外洒水栓取样。这些水龙头穿过且常接近地面，易受污染。

假如从厨房水龙头取水样，注意不能有进气装置。取样之前须经彻底清洗。当使用氯溶液或加氯清洗剂时，取样前一定要注意冲净。不提倡用火焰烧水龙头的灭菌法。这种方法，由于热度高，容易损坏新型配件中的尼龙或塑料部件。因此，下次再去取样时，将不受欢迎了。

当取样人员选好自来水龙头并确认已清洗干净之后，打开水门，让水自低速向中速放水，直至入户水管得以冲净。然后水压保持不变取水样。

伊利诺斯环保局对在水样运送途中保持其低温一点并未作出规定。该局曾考虑使用具有某种绝缘保温作用的注塑泡沫聚苯乙烯容器，但由于费用高以及存放这些硬质容器占用空间大带来的问题，此项目未继续进行。

任何缩短保存时间的方法都会减少细菌的生长。如距离化验室很近，可要求将水样驱车送至化验室。如用冰冷却水样，一定注意保管好样瓶，不使融化的冰水从瓶口流入，使用冷冻容器，一定要确保不接触水样瓶，否则会使水样结冰。

夏季取水样方法建议：

为防止热天水样受到细菌污染，应注意：

*冲净入户管线，并邻近消火栓；

*取水样时水压不要变化；

*不要邮递水样，要直接送达；

*将水样放在冰块中；

*取样前用肥皂和水洗手且正确选定取样水龙头。

新的大肠菌采样方法 New Coliform Sampling

新的大肠菌采样方法的规定将自1991年生效。美国环保局对此预告：为符合新方法的计算，大肠菌最大容许污染限(MCL)的不合格数目将会增加约1/3。计算将根据有无大肠菌，而不是根据大肠菌的平均密度。这种作法可能不利于小型给水企业。

按现行条例，每一给水企业每月采集常规水样两遍，一个水样中计数为3个大肠菌，就作为不合格，而新条例规定，要求给水企业取3个或4个平行水样，这要随常规水样多寡而定，如这些水样合格，就认为达标。这些平行水样均应计入合格率中。

对于每月采集的水样不足40个的给水企业，就允各许有一个大肠菌阳性水样。如是采集40个或40个以上的水样，就允许有5%的不合格率。超过5%的数就算超标，不允许用四舍五入计算。

非典型大肠菌生长将会受到密切注视。伊利诺斯州环保局需对水样出现菌落聚集或“数不可计”的非大肠菌菌数的生长进行校核。这种校核还将包括在多管发酵试验及有无大肠菌试验。对其中出现的浑浊的培养物作分析。这些水样将自行作废，必须重新更换，这样就不会出现属监测方法不合格的水样。如给水企业未重新取样，它就会自动收到一次监测不合格记载。

按照新条例，要求化验室仅报告出水样所监测的大肠菌是属阴性或是阳性。如化验室使用的是计数法，在计算是否合格时，应将全部大肠菌水样作为1或100来计算阳性比率。在计算是否合格时，应包括全部重取水样在内。

重取水样应立即采集这一点应特别强调。对污染和作废的水样，应在收到通知的24小时内重新采集。假使做不到，就需向州请求自动放弃。自动放弃时应说明采集重复水样的商定日期。假使不能满足这点，就作为一次监测不合格。假使使用的不是局属的化验室，也应按上述方法执行。

何玲译 姚芳宇 吴玲玲校 译自《Water Engieering》
转自若若的网易空间

㈤ 水样中纯种微生物的分离过程以及试验所用培养基，营养液等

你这个问题太笼统了。
水样中的微生物包括真菌，细菌。不同的目标微生物有不同的培养方法，培养基和培养液也是要根据你目标微生物的不同进行选择。
下面列出纯种细菌筛选的一般步骤。
1.首先确定所要培养的目标微生物。
2.根据目标微生物，确定培养基。你可以参考相关文献。
3.接种，富集。将水样接种到相应的培养基中进行富集培养，富集培养需要的次数据富集所得菌而定。一般需富集至10的8次方个每毫升。
4.划平板。
5.挑取单菌落，进行纯培养。
重复4.5部即可。

㈥ 制药用水（注射用水）微生物限度如何检查在操作过程中，如何做阴性希望能够有详细的操作过程，谢谢大家

开启开启洁净工作台的紫外灯30分钟以上，将培养基融化，置于50℃水浴中，备用；
关闭洁净工作台的紫外灯，打开风机，点燃酒精灯，用酒精棉球擦手消毒，方可进行下面操作；
细菌计数：取注射水水样1ml，加99ml洗液冲洗；纯化水取水样100 ml，并做阴性对照，经直径为50 mm、孔径0.45μm 的薄膜过滤器过滤，小心取出滤膜，菌面向上贴于营养琼脂培养基平板上，将培养皿倒置于培养箱中，于30～35℃培养72 h，菌落计数，
霉菌及酵母菌计数：取注射水水样1ml，加99ml洗液冲洗；纯化水取水样100 ml，均做平行，并做阴性对照，经直径为50 mm、孔径0.45μm 的薄膜过滤器过滤，小心取出滤膜，菌面向上贴于玫瑰红钠培养基平板上，将培养皿倒置于培养箱中，于23～28℃培养5天（可延长到7天），菌落计数；
大肠菌群的检查：取含培养基10 ml的乳糖胆盐发酵管若干支，分别加入供试水样1 ml。另取乳糖胆盐发酵培养基管1支加1ml洗液为阴性对照组，于36±1℃培养18～24 h。阴性对照应无菌生长。供试品乳糖胆盐发酵管若无菌生长，或有菌生长但不产酸产气或产酸不产气，判该管未检出大肠菌群。

㈦ 微生物 水 采样

可以用深水采样器http://www.patent-cn.com/G01N/CN2410633.shtml

还有一种是带泵的野外专用取样器http://www.goepe.com/apollo/prodetail-jessecheung-498467.html

至于保存可以用水样检测拭子，冷藏可保存12个月，室温可保存4周http://www.szfitly.com/shopdetail/proct/20100621-9131995.html

㈧ 实验室该如何无菌采样

液体样品

液体样品比较容易获得，液态食品一般盛放在大罐中，取样时可连续或间歇搅拌。对于较小的容器，可在取样前将液体上下颠倒，使其完全混匀。取得的样品应放在已灭菌的容器中送往实验室，实验室在取样检测之前应当把液体再彻底混匀一次。

固体样品

固态样品常用的取样工具有解剖刀、勺子、软木钻、锯、钳子等，使用前均须灭菌。如奶粉等已经混匀的食品，其成分质量均匀稳定，可以抽取少量样品检测;散装样品要从多个点取样，且每个点都要单独处理，在检测前要彻底混匀;肉类、鱼类或类似食品既要在表皮取样，又要在深层取样，深层取样时要小心不要被表面污染。

水样

取水样时，最好选用带有防尘磨口瓶塞的广口瓶。

如果样品时从水龙头上取得，龙头嘴的里外都应擦干净。打开水龙头让水流几分钟，关上水龙头并用酒精灯灼烧，再次打开水龙头让水流1-2min后再接样并装满取样瓶。如果检测的目的是用于追踪微生物的污染源建议还应在水龙头灭菌前取样会在龙头的里外用棉拭子涂抹取样，以检测水龙头自身污染的可能性。

从水库、河流、井水等取水样时，用无菌的器械或工具拿取瓶子和打开瓶塞，在流动水中取样品是瓶嘴应直接对着水流。

带包装食品

直接食用的小包装食品尽可能取原包装，直到检测前不要开封防止污染；桶装或容器包装的液体或固体食品应用无菌取样器由几个不同部位采取，一起放入灭菌容器内；冷冻食品抽样之后送达实验室前，要始终保持样品处于冷冻状态。若样品一旦融化，不可使其再冷冻，保持冷却即可。

无菌抽样的规范性是保证样品检测准确性的前提，因此我们在取样时应规范操作，确保从源头杜绝污染。

㈨ 微生物的采样方法（详细点！）

常用的空气微生物采样方法有四种：沉降法、固体撞击法、液体撞击法、滤过法。

最常用的是平板沉降法，其采集步骤是：在采样前先用紫外线对所要采样的房间照30分钟，使室内处于相对清洁、静止状态，然后将及时领取的新鲜营养琼脂平板，置室内四角及中央各一个，将平板盖打开扣于无菌巾上，暴露20分钟，加盖及时送检，以防污染。

1.2 采样方法
在0.33hm2左右的采样区域内，按15m×15m的面积划分为12个样方。1998年6月在每个样方中分别确定生长水平中等的Ⅰ度(1年生)、Ⅱ度（3年生）、Ⅲ度（5年生）竹各3株，分别在毛竹基部挖开，顺竹蔸取连在根上粒径小于1cm土壤作为根区土壤，并分别将Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ度各3株竹的根区土样混合成一个样品，作为该样方Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ度竹的根区土样。同时在每个样方的竹林中多点采集和根区土深度一致的林间土样1个，采集时尽量避开竹鞭，各点均离竹鞭5厘米以上。
1.3 分析方法
土样带回室内后分成两份，1份鲜样分析土壤微生物三大类；另1份风干、去杂、过筛后测定土壤各类酶活性。土壤微生物计数采用平板法[12]，细菌采用牛肉蛋白胨培养基；真菌采用马丁氏琼脂培养基；放线菌采用高泽1号琼脂培养基。土壤过氧化氢酶采用容量法；蔗糖酶采用二硝基水杨酸比色法；脲酶采用苯酚——次氯酸比色法；蛋白酶采用茚三酮比色法；磷酸酶采用磷酸苯二钠比色法。〔13〕

㈩ 纯化水微生物限度检查操作

纯化水微生物限度操作规程
文件编号
总
页
数
共
3
页
制订部门
实施日期
起
草
人
审
核
人
批
准
人
起草日期
审核日期
批准日期
1.
目的
本规程旨在为微生物限度检查提供一个标准化方法。
2.
适用范围
微生物限度实验室
3.
责任者
QC
主管生测员
4.
安全注意事项
严格无菌操作，防止微生物污染。
5.
规程
5.1
取样
a
．在车间、实验室所有用水点按序取样，标明日期和取样点位置，一个监测
点取水
3
次，一次
250mL
，送检验室按中国药典
2010
年版二部标准进行全检。
b
．
取样前将直接接触样品的容器用
75%
酒精棉球进行擦拭，
采用灭菌后瓶收
集样品。
c
．取样时，取样人洗手并消毒，取样前用纯化水淋洗检验用取样瓶和瓶塞
3
次。灭菌瓶至少取
200mL
用于微生物检验用水，微生物检验应在取样后的
1
小
时内进行，或将样品冷藏并在
4
小时内进行检验。
5.2
微生物限度检查
纯化水检验标准微生物限度检查采用平皿法和薄膜过滤法。
5.3
微生物培养
（
1
）
除另有规定，
本检查法中细菌培养温度为
30-35
℃，霉菌、酵母菌培养温
度为