如何的制片生物

‘壹’ 生物制片的基本步骤

一 目的：
1.学习并掌握临时装片的制作方法。
2.完成基本实验要求的基础上，依自己的兴趣，制作更多的临时装片

二 背景知识（点击展开）

三 实验内容
制作洋葱表皮细胞临时装片

四 实验用品
滴管、纱布、镊子、吸水纸、载玻片、盖玻片、清水、刀片、染液（碘液）

五 实验材料
洋葱表皮细胞、其他感兴趣的生物材料

六 实验步骤
1．擦拭载玻片、盖玻片（动画）
2．在载玻片的中央滴一滴清水（动画）（图zx-21）
3．在洋葱内表皮用刀片划出一个约1cm2的正方形（在使用刀片时注意安全），用镊子撕取洋葱内表皮（动画）（图zx-22）
4．将内表皮置于载玻片的清水中，并使之铺开（动画）（图zx-23）
5．从一侧开始慢慢盖上盖玻片，不能有气泡产生（动画） （图zx-24）
6．在盖玻片的一侧滴一滴染液（动画）
7．然后用吸水纸从另一侧吸取多余的染液，使洋葱表皮细胞均匀染色（动画）
8．显微镜下观察。（图zx-25）

染色后的洋葱细胞(示细胞核)（图）

显微镜使用的注意事项
1．搬动显微镜时，要一手握镜臂，一手扶镜座，两上臂紧靠胸壁。切勿一手斜提，前后摆动，以防镜头或其他零件跌落。
2．观察标本时，显微镜离实验台边缘应保持一定距离(5cm)，以免显微镜翻倒落地。镜柱与镜臂间的倾斜角度不得超过45度，用完立即还原。
3．使用时要严格按步骤操作，熟悉显微镜各部件性能，掌握粗、细调节钮的转动方向与镜筒升降关系。转动粗调节钮向下时，眼睛必须注视物镜头。
4．观察带有液体的临时标本时要加盖片，不能使用倾斜关节，以免液体污染镜头和显微镜。
5．粗、细调节钮要配合使用，细调节钮不能单方向过度旋转，调节焦距时，要从侧面注视镜筒下降，以免压坏标本和镜头。
6．用单筒显微镜观察标本，应双眼同时睁开，左眼观察物像，右眼用以绘图，左手调节焦距，右手移动标本或绘图。
7．禁止随意拧开或调换目镜、物镜和聚光器等零件。
8．显微镜光学部件有污垢，可用擦镜纸或绸布擦净，切勿用手指、粗纸或手帕去擦，以防损坏镜面。
9．凡有腐蚀性和挥发性的化学试剂和药品，如碘、乙醇溶液、酸类、碱类等都不可与显微镜接触，如不慎污染时，应立即擦干净。不要任意取下目镜，谨防灰尘落入镜筒。
10．使用油镜观察样品后，随即用二甲苯将油镜镜头和载波片擦净，以防其他的物镜玻璃上沾上香柏油。二甲苯有毒，使用后马上洗手。
11．实验完毕，要将玻片取出，用擦镜纸将镜头擦拭干净后移开，不能与通光孔相对。用绸布包好，放回镜箱。切不可把显微镜放在直射光线下曝晒。

显微摄影操作的重要注意事项

1.摄影者对显微摄影装置的调整：包括两目镜瞳孔间距的调整和个人屈光不正的校正。前者指将两目镜的距离按个人的瞳孔间距进行调整，拉动目镜或捻转瞳孔间距调节螺旋。校正屈光时应转动目镜筒上的屈光度调节环，使物镜视野中心的“十”字由单线调成双线，达到完全清晰，并且左右眼应分别调整。每个拍摄者都不宜省略这一步。
2.物镜与摄相目镜不同组合的选择：摄影目镜除放大功能外，并不具备空间分辨功能，只有物镜才具有空间分辨力。在一般条件下，对组织切片厚度在20 μm以下者，应尽量选择较高倍物镜，例如欲放大实物50倍时，选择“20×”物镜配以“2.5×”目镜的组合方式，其清晰度比“10×”物镜及“5×”目镜的组合方式要高些。但是也要考虑切片薄厚和观察标本的特异性的问题，例如在厚度为30 μm以上的冰冻切片上，观察蜿蜒走行的神经纤维或血管时，由于较低倍物镜的焦点深度较长，有利于从不同深度、层次或角度，连续观察分析不在同一平面上走行的神经或血管影像。在这种情况下，还可将物镜与目镜不同组合多次拍摄，最终择其效果最佳者。
3.聚光器的调控使用问题：经验较少的摄影者往往缺少对聚光器高度的调节，也不知光源是否偏离视野中心。不少人只进行了物镜与组织切片间的所谓“上聚焦”，而没有进行聚光器与组织切片间的“下聚焦”，这当然也无法获得最佳清晰度的成像底片。 Kohler 照明法操做步骤如下：①将视场光阑缩至最小，使光阑叶片的通孔呈现其八角形影像；②两手分别捻转载片台下的左右定心螺丝，使光阑影像与视场中心圆圈重合，以校正光路；③调节聚光器高度，使八角形光阑影像由模糊变清晰，即“下聚焦”；④散大该光阑至135帧幅边框（指常规135型负片画幅，24 mm×36 mm）影像外周。再次微调聚光器高度，使光阑象最清晰为止。每变换一次放大倍率时，都要重复进行如上调整步骤。
4.提高摄影反差：组织结构对比反差的好坏，当然取决于组织制备技术的质量。这是提高显微摄影质量的重要环节。但是一般情况下，为了弥补切片中对比反差的不足，常可采用如下的补救措施：①按照物镜上的数值孔径值即NA值，相应地进行聚光器孔径光阑的匹配调节。一般质量优良的物镜镜头上，除标有放大倍率外，同时还标有NA值，NA值越大者空间分辨率相对越高。②如果按此法调节NA值转盘后，若由于组织制备欠佳致使影像反差仍然不足时，则可将物镜孔径光阑的NA值再适当缩小，例如10x物镜可调至0.19等。③如经过上述措施影像反差仍不好，则可将视场光阑从135（指常规135照片画幅24 mm×36 mm）边框外缩至边框内，然后在暗室扩放时，再将视场光阑影像除去。当然，上述的后两种措施，只不过是一种稍作修正的补救办法而已。
5.低倍摄影难度大：低倍摄影有其特殊优点，例如在1（物）×2.5（目）放大倍率下，可拍摄大鼠脑切片一侧全貌，对总览特异性标记物的分布有一目了然之效果，但是低倍物镜分辨力低，焦深较长，利用微调螺旋进行精确聚焦有一定难度。为避免视力的个体差异,应采取欠焦、过焦、正焦3步,聚焦不宜反复进行。
6.油浸镜头的使用：100×的物镜多为油浸镜头，然而，使用后常因镜头擦不净而使镜头受损。替代的办法是滴加超纯水或双蒸水，观察效果与香柏油差别不大。由于100×物镜镜头与切片距离极近，极易碰损镜头，必须先以40×物镜聚焦，再转至100×物镜，轻轻转动聚焦微调螺旋至焦点。为避免镜头损伤，新型100×物镜常有弹簧装置，可使镜头微动伸缩而避免其损伤。
7.其它注意事项: ①按照常规,彩色胶卷应加LBD（色温变换）滤片,黑白胶卷应加IF550（绿色）滤片。LBD滤片可使日光型彩卷获得最佳色温补偿，IF550 滤片则可使黑白卷分光感度与人眼者接近。尽管有人认为不一定需要滤光处理，但因为摄影取决于胶片的化学感光度，并不取决于人们眼睛对视野的直观感受，还是加滤光片为好。②曝光时间的选定，也是一个必需注意的问题。已知在光强与曝光时间两个参数之间，有许多不同的组合，均在曝光的“安全”范围内，但所谓的“安全”范围，并不等于最佳条件，所以作者认为限定曝光时间还是十分必要的，其道理在于胶卷化学感光度有一定限制，一个胶卷36个帧幅若随意变动曝光时间，在36张之间差异将很大，而冲洗胶卷是在同一条件下，难免有些帧幅显影不佳。依据作者的经验，曝光时间一般限定在0.5～1 s，底片的影像效果较佳。③要将重点拍摄的结构置于视场中心，因为自动曝光装置测得的曝光时间，是以视场中心区为标准，而偏离中心区越远越不准。有时为了兼顾结构局解关系，而重点结构又不在视场中心时，则可采取点（spot）曝光法。④若需将一张切片上的结构拍为几张,之后拼接时,可在New Vanox 显微摄影仪器上设有一个锁定键（lock），有利于解决这一问题，以使同一结构的几个帧幅曝光时间一致，然后在洗照片时将这组照片同时放入显影液与定影液。

‘贰’ 高中生物 为什么先制片后水解 到底什么叫制片

观察DNA和RNA的分布实验。用口腔上皮细胞或洋葱鳞片叶表皮细胞。先制片的目的是为了让细胞贴附在载玻片上。后解离是为了便于改变细胞膜的通透性，利于染色剂进入细胞，以及便于染色剂着色。
如果先解离，细胞已经被分散开或破坏，则无法使其固定在玻片上。解离完之后还要冲洗，则可能导致细胞被冲走。所以先固定。

‘叁’ 光学和电子显微镜样品制备的制片法

显微制片法一般包括切片法、整体封片法、涂片法和压片法4类。①切片法。光学显微镜的切片厚度在2～25微米之间，一般动植物材料的切片以厚10微米左右为合适。切片法根据包埋剂的不同而有所不同。常用的是石蜡切片法、棉胶切片法、冰冻切片法、乙二醇甲基丙烯酸脂法(简称GMA法)。石蜡切片法包括固定、包埋、切片、染色、脱水和封固等步骤。关键是把生物材料用石蜡包埋，以石蜡为支持物，把浸在蜡块中的生物材料切成理想的薄片。操作过程为：固定→水洗→从低浓度逐级到高浓度酒精脱水→二甲苯透明→浸蜡→包埋→切片→贴片→二甲苯脱蜡→逐级从高浓度到低浓度酒精处理，最后过渡到水→染色→逐级从低浓度到高浓度酒精脱水→二甲苯透明→树脂胶封固。其中的基本步骤在各种制片技术中都是相同的。②整体封片法。用于单细胞、微小生物体或分散的器官的整装制片方法。此法也需要经过固定、染色、脱水、透明和封固各个步骤。草履虫和昆虫口器制片即用此法。③涂片法。把易于分散的生物标本涂布在载玻片上的制片方法。血液涂片便是一例。④压片法。将天然的、易于分散的组织或经过处理后易于分散的组织，如动物的精母细胞、根尖细胞等放在载玻片上、再加盖玻片，用力压碎组织，使细胞或细胞内的结构铺展成一层的制片方法。压片法常用于观察染色体，通常用醋酸洋红、地衣红和石炭酸复红染色。

‘肆’ 生物制片方法有哪些主要包括哪些步骤

生物制片的方法主要包括动物或者是植物细胞的制片，有永久装片也有一些切片图片还有其他的一些装片。不同的装片方法是不一样的。

‘伍’ 生物制作临时装片的过程

一擦二滴三取四浸五盖六染七吸．
1：擦净载玻片和盖玻片
2：滴一滴清水于洁净的载玻片上
3：取材
4：将材料放入载玻片的液滴中展平
5：盖上盖玻片，注意轻放，防止产生气泡
6：将染液滴于盖玻片的一侧
7：用吸水纸从另一侧吸染液，让染液通过材料，给材料着色

‘陆’ 如何简单制作生物显微镜切片

如何简单制作生物显微镜切片
1、我们准备一片干净的载玻片，然后在上面滴一滴蒸馏水，最佳的位置是在载玻片的右边三分之一出，为什么呢主要是左边方便贴标签

2、把制作好的切片或者需要观察的培养液滴进蒸馏水中

3、拿着盖玻片使用约四十五度的角慢慢放下，让盖玻片盖住标本不要有气泡，被挤出来的多余的水用吸纸给吸干这样就算可以完成了

‘柒’ 生物显微镜玻片怎么做

方法：

涂片：将材料均匀地涂布在载玻片上。

装片：将生物材料置于载玻片和盖片之间，施加一定压力，将组织细胞压散。

切片：从生物体上切取的薄片制成玻片标本。

当用显微镜观察细胞时，应用薄薄的易碎透明小片，这个小片就是玻片。

‘捌’ 生物切片怎么做

①用纱布将玻片擦拭干净；
②在洁净的载玻片上滴一滴清水（动物细胞用0.9％的生理盐水），水量不宜过多，也不能太少； ③从生物体上取材，放在水滴中；
④对撕取的薄膜要展平，挑取的材料要涂抹几下，避免细胞重叠，看不清细胞机构；
⑤用镊子夹起盖玻片，使它的一侧先接触载玻片上的水滴（为防止产生气泡），然后缓缓地盖在要观察的材料上；
⑥在盖玻片的一侧滴加染液；
⑦在与滴染液相对的一侧用吸水纸吸取多余的染液。
（纯手工码字，希望满意）

‘玖’ 几种生物制片方法各适宜观察什么生物样品

装片：可观察从生物体上取下来的细胞（如口腔上皮细胞、洋葱鳞片叶内表皮细胞）或个体微小的生物如衣藻、水绵、水螅、青霉结构
切片：用于观察用特制刀具把生物体的组织或矿物切成的薄片,如叶片切片（观察叶片结构气孔等结构）
切片：用于观察悬液状态的生物材料,如人的血液血细胞的观察

‘拾’ 请你写出采集微生物的制片过程

1.采集合适的样本于无菌容器中;
2.准备无菌试管,在其中加入无菌肉汤.
3.将样本接种于上述试管中,35℃培养18h~24h,取肉汤涂片或接种于合适的培养基上即可.