生物培养法是什么意思

‘壹’ 微生物的培养方法

1．平板划线分离培养法

对混有多种细菌，采用划线分离和培养，使原来混杂在一起的细菌沿划线在琼脂平板表面分离，得到分散的单个菌落，以获得纯种。平板划线分离法通常有两种方法：

①分区划线分离法：此法常用于含菌量较多的细菌的分离。先用接种环挑取标本涂布于琼脂平板1区（占培养基总面积的¼）并作数条划线，再于2、3、4区依次划线。每划完一个区域，均将接种环烧灼灭菌1次，冷后再划下一区域，每一区域的划线均与上一区域的划线交接1~3次。一个成功分区划线的平板，培养后分别观察1区形成菌苔，2区菌落连成线，3区和4区可分离到单个菌落。

②连续划线分离法：此法常用于含菌量不多的标本或培养物中的细菌分离培养。方法是先将接种物在琼脂平板上1/5处轻轻涂抹，然后再用接种环或拭子在平板表面曲线连续划线接种，直至划满琼脂平板表面。

2.琼脂斜面接种法

主要用于菌落的移种，以获得纯种进行鉴定和保存菌种等。用接种环（针）挑取单个菌落或培养物，从培养基斜面底部向上划一条直线，然后再从底部沿直线向上曲折连续划线，直至斜面近顶端处止。生化鉴定培养基斜面接种，用接种针挑取待鉴定细菌的菌落，从斜面中央垂直刺入底部，抽出后在斜面上由下至上曲折划线接种。

3．穿刺接种法

此法多用于半固体培养基或双糖铁、明胶等具有高层的培养基接种，半固体培养基的穿刺接种可用于观察细菌的动力。接种时用接种针挑取菌落，由培养基中央垂直刺入至距管底0.4cm处，再沿穿刺线退出接种针。双糖铁等有高层及斜面之分的培养基，穿刺高层部分，退出接种针后直接划线接种斜面部分。

4．液体培养基接种法

用于各种液体培养基如肉汤、蛋白胨水、糖发酵管等的接种。用接种环挑取单个菌落，倾斜液体培养管，在液面与管壁交界处研磨接种物（以试管直立后液体淹没接种物为准）。此接种法应避免接种环与液体过多接触，更不应在液体中混匀、搅拌，以免形成气溶胶，造成实验室污染。

5．倾注平板法

本法主要用于饮水、饮料、牛乳等标本中的细菌计数。取纯培养物的稀释或原标本1ml至无菌培养皿内，再将已融化并冷却至45~50℃左右的琼脂培养基15~20ml倾注入该无菌培养皿内，混匀，待凝固后置37℃培养，长出菌落后进行菌落计数，以求出每毫升标本中所含菌数。先数6个方格（每格为1cm2）中菌落数，求出每格的平均菌落数，并算出平皿直径，然后按下列公式计数，求出每毫升标本中的细菌数。

全平板菌落数=每方格的平均菌落数×лr2

每ml标本中的细菌数=全平板菌落数×稀释倍数

6．涂布接种法

本法多用于纸片扩散法药敏试验的细菌接种。将一定量或适量的菌液加到琼脂培养基表面，然后用灭菌的L型玻璃棒或棉拭子于不同的角度反复涂布，使被接种液均匀分布于琼脂表面，然后贴上药敏纸片，或直接培养，本法经培养后细菌形成菌苔。

‘贰’ 什么是纯培养,纯培养方法有哪些

微生物纯培养的方法 一、固体培养基分离
1.稀释倒平板 特点:菌落分离较为均匀,进行微生物计数结果相对准确。但操作相对麻烦,热敏感菌有时易被烫死,而严格好氧菌也可能因被固定在培养基中生长受到影响。
2.涂布平板法 特点:操作相对简单,是较常使用的常规方法。但有时会因涂布不均匀使某些部位的...
3.平板划线法 特点:操作简单,多用于对已有纯培养的确认和再次分离。 应用:这三种方法可用于...
4.稀释摇管法 特点

‘叁’ 细菌培养法的实验原理

是相乘的方法的微生物，让他们在预定的再现培养基控制的实验室条件下。微生物培养是用作分子生物学研究工具的基础和基本诊断方法。

细菌培养物可以在具有一层薄薄的琼脂培养基的培养皿中生长。一旦培养皿中的生长培养基接种了所需的细菌，将培养皿在选定细菌生长的最佳温度（例如，通常在 37 摄氏度或人体温度下，用于人类培养）或动物，或较低的环境文化）。

达到所需的生长水平后，琼脂平板可以倒置存放在冰箱中较长时间，以保留细菌以供将来实验使用。

在将琼脂倒入盘中并使其凝固之前，可以将多种添加剂添加到琼脂中。某些类型的细菌只能在某些添加剂存在的情况下才能生长。这也可以用于创建包含抗生素抗性基因的工程细菌菌株。

当将所选抗生素添加到琼脂中时，只有允许赋予耐药性的基因插入物的细菌细胞能够生长。这允许研究人员仅选择成功转化的菌落。

培养条件

培养时应根据细菌种类和目的等选择培养方法、培养基，制定培养条件（温度、pH值、时间，对氧的需求与否等）。一般操作步骤为先将标本接种于固体培养基上，做分离培养。再进一步对所得单个菌落进行形态、生化及血清学反应鉴定。

培养基常用牛肉汤、蛋白胨、氯化钠、葡萄糖、血液等和某些细菌所需的特殊物质配制成液体、半固体、固体等。

一般细菌可在有氧条件下，37℃中放18～24小时生长。厌氧菌则需在无氧环境中放2～3天后生长。个别细菌如结核菌要培养1个月之久。

‘肆’ 微生物的培养方法是什么

1905年，德国微生物学家科赫因对结核杆菌和结核菌素的研究取得重大成就而荣获诺贝尔奖金。他发明固体培养基，用它分离培养细菌，创造细菌的纯粹培养法。他又改进细菌染色法，为研究细菌的形态和结构创造有利条件。荷兰科学家E．C．翰逊教授研究使啤酒发酵的酵母，创造单细胞的纯粹培养法。以后，又有人采用纯粹培养法选择适当酵母，用于啤酒的工业生产，为纯粹培养法在工业发酵上的应用开辟了道路。翰逊的学生哈斯发现，当时用的由明胶制成的固体培养基很容易发生液化现象，使用时有困难。哈斯的妻子建议用琼脂代替明胶，获得了较好的效果。这种琼脂培养基被后人采用，一直沿用到今天。后来又有人创造一种培养皿，可供微生物平板分离用。从此以后，分离出的微生物日益增多，新的微生物不断被发现。这样，可供工业用的微生物也日益充实起来，一支微生物生力军异军突起。

‘伍’ 微生物生态研究中培养方法与非培养方法的区别

目前不是所有的微生物都能够进行纯培养，一些共生微生物必须与寄主一起才能生长繁殖。对于能够进行纯培养的微生物，通过纯培养的方法很容易获得其在原始生境中的数量，通过涂布平板的方法就能获得样品中群落结构信息；但不能纯培养的微生物，就不能用传统的培养方法进行研究，为了获得样地中微生物多样性和群落结构，一般使用分子生物学的方法进行研究，使用较多的技术如DGGE、T-RFLP等。

‘陆’ 微生物培养的方法有哪些

微生物培养法是在人为条件下繁殖微生物的方法。根据微生物的种类以及对养料、温度、氧气、水分、酸碱度等环境条件的要求不同，并联系生产和实验上的具体要求，可有不同的培养方法。可分好气培养法和厌气培养法两类。中海生物技术的培养基一是好气微生物培养法，常用：
①摇床培养法，即将微生物接种于盛有液体培养基的三角瓶后，放在恒温培养室中的摇床上作有节奏的振荡，使空气不断进入培养液中，促其良好生长;
②浅盘培养法，又称表面培养法，在盘内放一浅层培养基，使微生物能够充分接触空气，而有利于生长繁殖，但此法所需空间大，并且容易污染杂菌;
③深层培养法，适用于好气微生物的大规模发酵培养，在大容积的液体培养基中，通入无菌空气，并不断搅拌，可使微生物充分接触空气，迅速繁殖并积累代谢产物。二是厌气微生物培养法，实验室常用化学还原剂或抽气机吸除培养基中的分子氧，也有用静止状态的深层培养法。在生产中常用密封式发酵罐或不通风的固体发酵法。

‘柒’ 微生物培养方法

微生物培养法是在人为条件下繁殖微生物的方法。根据微生物的种类以及对养料、温度、氧气、水分、酸碱度等环境条件的要求不同，并联系生产和实验上的具体要求，可有不同的培养方法。可分好气培养法和厌气培养法两类。中海生物技术的培养基一是好气微生物培养法，常用：①摇床培养法，即将微生物接种于盛有液体培养基的三角瓶后，放在恒温培养室中的摇床上作有节奏的振荡，使空气不断进入培养液中，促其良好生长;②浅盘培养法，又称表面培养法，在盘内放一浅层培养基，使微生物能够充分接触空气，而有利于生长繁殖，但此法所需空间大，并且容易污染杂菌;③深层培养法，适用于好气微生物的大规模发酵培养，在大容积的液体培养基中，通入无菌空气，并不断搅拌，可使微生物充分接触空气，迅速繁殖并积累代谢产物。二是厌气微生物培养法，实验室常用化学还原剂或抽气机吸除培养基中的分子氧，也有用静止状态的深层培养法。在生产中常用密封式发酵罐或不通风的固体发酵法。