⑴ 环境工程自来水中微生物的检测实验报告
(1)采水样 先将自来水笼头用火焰烧3分钟灭菌,再拧开水笼头使水流5分钟后,以无菌容器接取水样. (2)用无菌吸管取水样1ml,注入两个无菌培养皿中, 并
⑵ 食品微生物学检验 菌落总数测定报告怎么写
食品微生物学检验 菌落总数测定
1 范围
本标准规定了食品中菌落总数(Aerobic plate count)的测定方法。
本标准适用于食品中菌落总数的测定。
2 术语和定义
2.1 菌落总数 aerobic plate count
食品检样经过处理,在一定条件下(如培养基、培养温度和培养时间等)培养后,所得每g(mL)检样中形成的微生物菌落总数。
3 设备和材料
除微生物实验室常规灭菌及培养设备外,其他设备和材料如下:
3.1 恒温培养箱:36 ℃±1 ℃,30 ℃±1 ℃。
3.2 冰箱:2 ℃~5 ℃。
3.3 恒温水浴箱:46 ℃±1 ℃。
3.4 天平:感量为0.1 g。
3.5 均质器。
3.6 振荡器。
3.7 无菌吸管:1 mL(具0.01 mL 刻度)、10 mL(具0.1 mL 刻度)或微量移液器及吸头。
3.8 无菌锥形瓶:容量250 mL、500 mL。
3.9 无菌培养皿:直径90 mm。
3.10 pH 计或pH 比色管或精密pH 试纸。
3.11 放大镜或/和菌落计数器。
4 培养基和试剂
4.1 平板计数琼脂培养基:见附录A 中A.1。
4.2 磷酸盐缓冲液:见附录A 中A.2。
4.3 无菌生理盐水:见附录A 中A.3。
5 检验程序
菌落总数的检验程序见图1。
图
1 菌落总数的检验程序
6 操作步骤
6.1 样品的稀释
6.1.1 固体和半固体样品:称取25 g 样品置盛有225 mL 磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯内,8000 r/min~10000 r/min 均质1 min~2 min,或放入盛有225 mL 稀释液的无菌均质袋中,用拍击式均质器拍打1 min~2 min,制成1:10 的样品匀液。
6.1.2 液体样品:以无菌吸管吸取25 mL 样品置盛有225 mL 磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌锥形瓶(瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠)中,充分混匀,制成1:10 的样品匀液。
6.1.3 用1 mL 无菌吸管或微量移液器吸取1:10 样品匀液1 mL,沿管壁缓慢注于盛有9 mL 稀释液的无菌试管中(注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面),振摇试管或换用1 支无菌吸管反复吹打使其混合均匀,制成1:100 的样品匀液。
6.1.4 按6.1.3 操作程序,制备10 倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次,换用1 次1 mL 无菌吸管或吸头。
6.1.5 根据对样品污染状况的估计,选择2 个~3 个适宜稀释度的样品匀液(液体样品可包括原液),在进行10 倍递增稀释时,吸取1 mL 样品匀液于无菌平皿内,每个稀释度做两个平皿。同时,分别吸取1 mL 空白稀释液加入两个无菌平皿内作空白对照。
6.1.6 及时将15 mL~20 mL 冷却至46 ℃的平板计数琼脂培养基(可放置于46 ℃±1 ℃恒温水浴箱中保温)倾注平皿,并转动平皿使其混合均匀。
6.2 培养
6.2.1 待琼脂凝固后,将平板翻转,36 ℃±1 ℃培养48 h±2 h。水产品30 ℃±1 ℃培养72 h±3 h。
6.2.2 如果样品中可能含有在琼脂培养基表面弥漫生长的菌落时,可在凝固后的琼脂表面覆盖一薄层琼脂培养基(约4 mL),凝固后翻转平板,按6.2.1 条件进行培养。
6.3 菌落计数
可用肉眼观察,必要时用放大镜或菌落计数器,记录稀释倍数和相应的菌落数量。菌落计数以菌落形成单位(colony-forming units,CFU)表示。
6.3.1 选取菌落数在30 CFU~300 CFU 之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数。低于30 CFU 的平板记录具体菌落数,大于300 CFU 的可记录为多不可计。每个稀释度的菌落数应采用两个平板的平均数。
6.3.2 其中一个平板有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数;若片状菌落不到平板的一半,而其余一半中菌落分布又很均匀,即可计算半个平板后乘以2,代表一个平板菌落数。
6.3.3 当平板上出现菌落间无明显界线的链状生长时,则将每条单链作为一个菌
⑶ 微生物菌体浓度的测定方法有哪些
微生物菌体浓度的测定方法:
活菌计数法
此法能准确地判断菌液浓度,但有明显的滞后性,无法在第一时间内2确定其实际浓度,待结果出来后,再开始检测,菌的活性将有所下降,给实验室操作带来诸多不便;
比浊法
此法能快速地判断菌液浓度,但为粗略的估计值,受限于各人肉眼的观察,误差较大,准确性不高。
微生物菌体浓度的测定(纤维制品的抗菌性试验方法为例)
一、菌种:
大肠杆菌(EscherichiacoliATCC8099)
二、试剂与仪器
蛋白胨
牛肉膏
氯化钠
Cary100紫外——可见光分光光度计
三、培养基
营养细菌培养基NB。
蛋白胨5g,牛肉膏粉3g,蒸馏水1000mL,pH6.8±0.2。
营养琼脂培养基NA。
蛋白胨5g,牛肉膏粉3g,琼脂粉15g,蒸馏水1000mL,pH6.8±0.2。
1、对数生长期菌液的制备
取在规定保存代数之内的供试菌种,在火焰旁,挑取一铂金环,在营养琼脂培养基上划线,于37℃±1℃培养24h后,在平板上挑取饱满的单菌落,置于20mL营养细菌培养基中,振荡(110r/min,振幅3cm)培养24h。
2、稳定期菌液的制备
取培养好的对数生长期菌液0.4mL,于20mL营养细菌培养基中,再振荡培养4h,即为稳定期菌液。
四、吸光度(ABS值)的测定
取培养好的稳定期菌液,按不同的设定稀释倍数(5、10、20、40倍),依次进行稀释,(稀释液为1/20NB),在660nm标准波长下,测得一组不同菌液浓度的吸光度。(用空白1/20NB进行测试前调零)。
五、活菌计数
在无菌室内火焰旁进行操作。分别依次测定四个不同稀释倍数的菌落数。每个稀释倍数依次制定几个浓度梯度,用灭菌吸管各吸取1mL注入平皿。注入约15mL,45~50℃的营养琼脂培养基,随即转动平皿,使样品与培养基充分混合均匀,待培养基凝固后,翻转平皿,置37℃±1℃培养箱内培养24h后,进行菌落计数。用肉眼观察,点出菌落数,记下各平皿的菌落数后,
求出同一稀释度各平皿生长的平均菌落数。
六、标准曲线的制作
运用生物统计ORG数据分析软件,以吸光度ABS值为横坐标,稳定期的菌液浓度为纵坐标绘制标准曲线。
⑷ 微生物实验报告的总结怎么写
写清楚你的实验名称、实验目的、所用到的仪器试剂、实验步骤、实验结果和对整个实验的分析。
⑸ 酵母rna的提取及组分鉴定实验报告怎么写
酵母rna的提取及组分鉴定实验报告如下:
一、实验目的。
1、掌握稀碱法提取酵母RNA勺原理和方法。
2、掌握紫外线(UV吸收法测定核酸浓度的原理)。
3、熟悉紫外分光光度计勺使用方法。
二、实验原理。
核酸是生命的最基本物质之一,广泛存在于所有动植物细胞、微生物体内。对核酸的研究是更深入研究生命体的基本前提之一。研究核酸需要纯度很高的核酸,所以核酸的提取方法也就在生物学研究中相当重要。
本次实验提取酵母的核糖核酸(RNAo RNA,离体后稳定性很差,含量低,所以在提取的时候就要注意防止核酸的降解和变性,防止过酸、过碱、避免剧烈搅拌,尤其重要的是防止 RNA酶的作用。本实验是医药卫生领域与大工业生产的基础方法。
核酸(RNA都是由核苷酸组成的多聚核苷酸化合物,而核苷酸是由糖、碱基和磷酸以等分子比例构成的,故测定组成核苷酸的任意一种组分即可以测定生物体内核酸的含量或者是提取出来的核酸的含量。
提取RNA勺方法很多,在工业生产上常用的是稀碱法和浓盐法。前者是利用碱使细菌细胞壁溶解,是RNA释放出来,后者是在加热的条件下,利用高浓度的盐改变细胞膜的通透胞壁溶解,是RNA释放出来,后者是在加热的条件下,利用高浓度的盐改变细胞膜的通透性,使RNA释放出来。
使用浓盐法提取RNA勺时候应该注意掌握温度,直接至90~100C浸提,避免在20~70C的时间过长,因为这是磷酸二酯酶和磷酸单酯酶的作用活跃的温度范围,会使RNA降解而降低提取率。这两种方法是从废弃的啤酒酵母中提取RNA勺一般方法。
但是这两种方法各有利弊,如浓盐法提取的RNA屯度高,而稀碱法提取的时间短,提取率高,更利于工业化生产。
RNA 在260nm处有最大吸收峰,一定浓度范围内其浓度与吸光度成正比,故可以用紫外分光光度计通过比色来测定RNA含量。
由于蛋白质在280nm波长处也有光吸收,对RNAM定有一定的干扰作用,但蛋白质的最大吸收峰在280nm 处,如同时测定280nm的光吸收,通过计算可消除其对 RNA测定的影响。因此如其中含有蛋白质时必须同时测定280nm和260nm 的吸光度,可通过计算测定溶液中 RNA的含量。
三、实验器材。
电子天平、离心机、量筒、烧杯、锥形瓶、紫外分光光度计、容量瓶(100mL、移液管(5ml)、试管和试管架、PH 1-14试纸。
以上内容参考:网络-rna
⑹ 六年级科学实验:研究一滴水中的微生物科学实验报告
实验目的:1、认识微生物是一类个体微小、大多是单细胞的生物。 2、能借助显微镜认真细致观察并描述水滴里的微生物。
实验器材:
显微镜、载玻片、滴管、水样 。
实验步骤:
1、听老师讲解显微镜使用方法。 2、学生分组观察。
3、汇报交流:你观察到什么?是什么样子的?
实验结论: 在一滴水中,生活着许许多多个体微小、结构简单、大多是一个细胞构成的生物,这些非常小,用肉眼根本看不到,只有借助显微镜才能看到生物,叫微生物。
⑺ 常见微生物实验步骤怎么写
1、药敏试验:主要是通过测定抑菌圈的范围来确定药物的疗效。
2、血凝实验:通过测定病毒与红细胞反应的浓度测定其抗体效价。
3、PCR:细菌主要通过16srRNA确定其细菌的种类。
4、中和实验:主要测定病毒的稀释浓度。
5、革兰氏染色:确定是革兰氏阳性还是阴性
6、瑞氏染色:主要是对细菌染色。
⑻ 实验报告怎么写啊
一般情况下化学实验报告是根据实验步骤和顺序从七方面展开来写的:
1.实验目的:即本次实验所要达到的目标或目的是什么。使实验在明确的目的下进行,可避免学生无目的的忙碌,所以教师课前检查实验预习是很必要的。
2.实验日期和实验者:在实验名称下面注明实验时间和实验者名字。这是很重要的实验资料,便于将来查找时进行核对。
3.实验仪器和药品:写出主要的仪器和药品,应分类罗列,不能遗漏。此项书写可以促使学生去思考仪器的用法和用途,药品的作用及其所能发生的具体的化学反应,从而有助于理解实验的原理和特点。需要注意的是实验报告中应该有为完成实验所用试剂的浓度和仪器的规格。因为,所用试剂的浓度不同往往会得到不同的实验结果,对于仪器的规格,学生也应了解,不能仅仅停留在“大试管”“小烧杯”的阶段。
4.实验步骤:根据具体的实验目的和原理来设计实验,写出主要的操作步骤,这是报告中比较重要的部分。此项可以使学生了解实验的全过程,明确每一步的目的,理解实验的设计原理,掌握实验的核心部分,养成科学的思维方法。在此项中还应写出实验的注意事项,以保证实验的顺利进行。
5.实验记录:正确如实的记录实验现象或数据,为表述准确应使用专业术语,尽量避免口语的出现。这是报告的主体部分,在记录中,应要求学生即使得到的结果不理想,也不能修改,可以通过分析和讨论找出原因和解决的办法,养成实事求是和严谨的科学态度。
6.实验结论和解释:对于所进行的操作和得到的相关现象运用已知的化学知识去分析和解释,得出结论,这是实验联系理论的关键所在,有助于学生将感性认识上升到理性认识,进一步理解和掌握已知的理论知识。
7.评价和讨论:以上各项是学生接收,认识和理解知识的过程;而此项则是回顾、反思、总结和拓展知识的过程,是实验的升华,应给予足够的重视。在此项目中,学生可以在教师的引导下自由的发挥,比如“你对本次实验的结果是否满意?为什么?如果不满意,你认为是什么原因造成的?如何改进?”或者“为达到实验目的,实验的设计可以如何改进?这样改进的优点是什么?”或者“你认为本实验的关键是什么?”等问题。这些都是学生感兴趣的地方,既能反映他们掌握知识的情况,又能培养他们分析和解决问题的能力,更重要的是培养他们敢于思考,敢于创新的勇气和能力。因此从培养学生思维能力的角度来说,此项内容的书写应是实验报告的重点和难点
⑼ 高中生物实验报告怎么写
高中生物实验报告怎么写
1. 实验目的:光是光合作用的条件
实验原理:碘遇淀粉变蓝;光合作用产生淀粉
实验器材:长势良好的天竺葵一盆
实验步骤:把天竺葵放到黑暗处一昼夜,摘取一片叶子,用不透光的纸对叶片进行部分遮光处理并置于阳光下,1h后用碘对叶子处理后发现不遮光的部分变蓝,而遮光部分无明显变化,证明只有不遮光部分产生了淀粉
实验结论:光的确是光合作用的条件
2.实验目的:光和作用速度受光照强度影响
实验原理:
实验器材:长势良好的植物
实验步骤:取两片大小相同的叶子,置于锥形瓶,一瓶放在阴凉处,一瓶放在光照下,连一个装满水并倒置于水缸的量筒,化学实验测收集气体的那个你会吧?
3不是与2一样的吗?
4.光合作用速度受温度影响
基本同2,改变温度
5.光合作用速度与二氧化碳浓度有关
基本同2,改变二氧化碳浓度
6.实验目的:测定光合作用速度
实验原理:植物叶片的主脉两侧对称部分叶面积基本相等,其形态和生理功能也基本一致.用物理或化学方法处理叶柄或茎的韧皮部,保留木质部,以阻断叶片光合产物的外运,同时保证正常水分供应.然后,将对称叶片的一侧取下置于暗中,另一侧留在植株上保持光照,继续光合作用.一定时间后,测定光下和暗中叶片的干重差,即为光合作用的积累的干物质量.通过公式计算出光合速率.乘以系数后还可计算出C02的同化量.
实验器材:任选户外一种植物.剪刀. 4块湿纱布.带盖磁盘.30个小纸牌,去户外之前用铅笔编号(1~15;1~15).镊子.打孔器.铅笔.记号笔.12个称量瓶.烘箱.分析天平.干燥器. 5%三氯乙酸.