生物实验有哪些干扰因素

❶ 影响检验结果的生物学因素有哪些

1.生理因素的影响。年龄、一些体液成分在不同的年龄段有所不同。性别、青春期之前，男性与女性的血液生化数据几乎无差异。青春期之后，男性血清碱性磷酸酶、氨基转移酶、肌酸激酶、酸性磷酸酶活性高于女性。体型、肥胖者血清胆固醇、甘油三酯、极低密度脂蛋白、尿酸、葡萄糖浓度及乳酸脱氢酶活性升高，男性血清天门冬氨酸氨基转移酶、肌酐、总蛋白及血液血红蛋白浓度随体重增加而升高，女性血清钙随体重增加而升高，男性和女性血清磷均随体重增加而降低。妊娠、随着孕期的延长，孕妇各系统将发生一系列的生理性变化，血清中的生化成分也将发生变化，如甲状腺激素分泌增加，肾小球滤过率增高，甲胎蛋白升高，总蛋白和白蛋白减少。昼夜节律的变化、许多体液成分有昼夜节律的变化，促使其变化的因素有体位、活动、膳食、紧张、日照，以及睡眠状态。有些体液成分的昼夜节律变化很大。运动。运动使呼吸加快，出汗增多，体液分布发生改变，导致血液生化成分发生改变。
2.饮食和药物因素的影响。
饮食的影响、饮食对体液生化成分的影响取决于饮食的成分和进食时间。
药物和毒物的影响、药物对生化结果的影响主要包括两个方面：（1）影响分析方法,即药物本身或其代谢产物干扰化学反应,如维生素C是一种还原剂,可干扰葡萄糖氧化酶法测定血糖。（2）药物可以通过它的生理作用、药理作用及毒理作用改变生化参数,如口服含黄体酮成分的避孕药引起血清胆固醇的升高；利尿药增加血钠和血钾浓度；砷剂易损害肝脏,引起肝功能的异常。

❷ 影响食品微生物检验结果的因素有哪些

食品微生物检验是食品安全监测的重要组成部分，在实际工作中存在许多复杂因素影响食品微生物学的检验，可能给检验结果带来偏差甚至错误。影响食品微生物检验结果的因素主要有以下几个方面：

1．样品的接收和预处理。样品送达实验室时，应检查样品标记是否与样品相符，样品包装状况是否正常。送检的样品，一般需保持在0～4℃的环境中，食品微生物学实验室在收到样品后，必须及时进行检验，以防止病原菌死亡或细菌数量增加。
2．仪器设备。微生物实验室的主要仪器及设备包括：无菌室、显微镜、菌落计数器、高压灭菌器、干热灭菌器、离心机、蒸馏设备、培养箱、厌氧箱、水浴箱、冰箱、超净工作台、酶标仪、洗板机、PCR仪、电泳仪、凝胶成像系统等。要求所有的仪器和设备均应按照生产厂家提供的方法和有关规定正确使用，操作人员应了解仪器工作原理并遵守操作规则。
3．检验培养基和试剂。⑴培养基必须由专业厂家生产，产品质量必须符合有关的质量标准，保存也应符合要求，防止潮解、结块等，使用时尽量缩短开盖时间，放在低温干燥的环境中保存。对于易受潮的品种启用后宜放入干燥器中保存。培养基的配制应严格按照国标规定的方法进行操作并做好原始记录。⑵检验试剂及药品须在分析纯级以上。在利用药品、试剂配制标准溶液、染色液、缓冲液及其他试剂时应注意：按要求选取溶剂，用带塞的试剂瓶盛装，易分解的试剂宜用棕色瓶，挥发性的试剂瓶口应予密封。实验室内保存的试剂应定期进行清点，陈旧或损坏的试剂及时弃去，注意保存试剂的使用有效期以及最佳保存方式。
4．检验人员检验。人员应执行上岗前培训，并主动学习新技术，掌握国家食品卫生微生物学检验方法、标准及相关法律法规。
总之，食品微生物检验一定要把握好从取出样品、称取样品到处理样品、检验样品的全过程无菌操作，检验人员必须按照标准严格、认真的检验。

❸ 有哪些因素可以干扰folin

1．干扰物质
此法是在Folin-酚法的基础上引入双缩脲试剂，因此凡干扰双缩脲反应的基团，如-CO-NH2,-CH2-NH2,-CS-NH2以及在性质上是氨基酸或肽的缓冲剂，如Tris缓冲剂以及蔗糖，硫酸铵，巯基化合物均可干扰Folin-酚反应。此外，所测的蛋白质样品中，若含有酚类及柠檬酸，均对此反应有干扰作用。而浓度较低的尿素（约0.5%左右），胍（0.5%左右），硫酸钠（1%），硝酸钠（1%），三氯乙酸（0.5%），乙醇（5%），乙醚（5%），丙酮（0.5%）对显色无影响，这些物质在所测样品中含量较高时，则需做校正曲线。若所测的样品中含硫酸铵，则需增加碳酸钠—氢氧化钠浓度即可显色测定。若样品酸度较高，也需提高碳酸钠—氢氧化钠浓度1—2倍，这样即可纠正显色后色浅的弊病。
2．控制时间
因Lowry反应的显色随时间不断加深，因此各项操作必须精确控制时间。即第1支试管加入2.0ml碱性硫酸铜试剂后，开始计时，1分钟后，第2支试管加入2.0ml碱性硫酸铜试剂，2分钟后加第3支试管，以此类推。全部试管加完碱性硫酸铜试剂后若已到10分钟，则第1支试管可立即加入0.20ml Folin-酚试剂，1分钟后第2支试管加入0.20ml Folin-酚试剂，2分钟后加第3支试管，以此类推。40℃水浴10min，冷却后，每一分钟测定一管吸光值。

❹ 生物安全实验室的负压不稳定是什么原因

生物安全实验室负压梯度扰动因素，SICOLAB整理了一下，大概这几方面
1、正常运行工况下的扰动
在实验室正常运行期间，经常会出现干扰室内压差稳定的情况，最常见的有4种：
1）工作人员进出开关门，导致静压差波动甚至逆转；
2）配备生命支持系统和化学淋浴的高等级生物安全实验室，室内有工作人员的动态工况下，正压防护服排风到室内，引起静压差波动甚至逆转，另外化学淋浴间在压缩空气吹干的过程向化学淋浴间排风，也可归纳于此；
3）室内设置有对外的局部排风设备（如B2型生物安全柜、负压排风柜、动物隔离器、独立通风笼具等）时，设备启动与停止引起的静压差波动甚至逆转；
4）室内温湿度显着变化引起的压力波动甚至逆转。
2、异常故障引起的扰动
在实验室正常运行期间，偶尔会出现异常故障干扰室内压差稳定，甚至出现压力逆转的情况，常见的有2种：
1）当排风系统出现故障时，导致静压差波动甚至逆转；
2）当送风系统出现故障时，导致静压差波动甚至逆转。
3、通风系统开关机的扰动
为避免实验室通风系统开关机过程中出现正压，要求送、排风系统连锁，即开机时要求先开排风机再开送风机，关机时先关送风机再关排风机。国内高等级生物安全实验室几乎全部是按照此连锁顺序运行的，但在开关机过程中仍有部分实验室出现短时相对压力逆转以及部分实验室绝对负压过大的情况（－300Pa以上）。
3、负压梯度标准要求
高等级生物安全实验室房间压力控制是实验室通风控制的重要部分，是安全运行和污染控制的保证。
3.1负压梯度技术指标要求
GB50346—2011《生物安全实验室建筑技术规范》和GB19489—2008《实验室生物安全通用要求》对气密性高等级生物安全实验室各功能房间之间的静压差均有明确规定。
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❺ 影响动物实验效果的动物实验技术因素有哪些

一、动物选择
选择好适合研究需要的实验动物是获得正确实验结果和实验成功的重要环节。应按照不同实验的要求选择合适的动物。如作肿瘤的研究工作，就必须了解哪种动物是高癌种，哪种是低癌种，各种动物自发性肿瘤的发生率是多少。如A系、C3H系、AKR系、津白Ⅱ等小鼠是高癌品系小鼠，C3H/He系经产雌鼠有80～100%的自发性乳腺癌。AKR系8～9月龄小鼠有80～90%自发性血病。C57BL系、津白Ⅰ等小鼠是低癌品系小鼠。不同动物对同一因素的反应虽然往往是相似的，但也常常会遇到动物出现特殊反应的情况。如5岁以上的雌狗常自发性乳腺肿瘤，如果给雌狗孕激素，就更容易诱发乳腺肿瘤。雌激素还容易引起狗发生贫血，这在其它实验动物是很少见的。怎样选择好实验动物可参看实验动物的选择和应用一讲。

二、实验季节
生物体的许多功能随着季节产生规律性的变动。目前已有大量资料表明，动物对化学物作用的反应也受到季节的影响。例如在春、夏、秋、冬分别给10只大鼠注入一定量的巴比妥纳，发现入睡时间以春季最短。秋季最长，而睡眠时间则相反，春季最长，秋季最短（见表11-19）。

表11-19大鼠对巴比妥纳反应的季节变动

季节 入睡时间（分） 睡眠时间（分）
春 56.1±11.0 470±34.0
夏 93.5±11.3 242±14.3
秋 120.0±19.0 190±18.7
冬 66.5±8.2 360±33.0
不同实验季节，动物的机体反应性有一定改变。如不同季节对辐射效应有影响。家兔的放射敏感性在春夏两季升高，秋冬两季降低。在狗的实验中，在春、夏两季照射后的死亡率比秋、冬为高。小鼠的放射敏感性，在冬季和补夏显着升高，而初夏和夏季则降低。大鼠的放射敏感性则没有明显的季节性波动。因此，这种季节的波动在进行跨季度的慢性实验时必须注意的。

三、昼夜过程
机体的有些功能还有昼夜规律性变动。例如有人给小鼠皮下重复注入40%的四氯化碳溶液0.2ml后，在同一天不同的时间将动物处死，观察肝细胞的有丝分裂动态，以了解肝细胞变性的修复情况。结果列于表11-20。资料表明，小鼠肝细胞有丝裂的昼夜变动十分明显。

表11-20小鼠肝细胞有丝分裂系数（‰）的昼夜变动

分组 昼夜的钟点
0 2 4 6 7 8 9 10
实验组 2.4±1.2 2.6±1.2 1.02±0.17 4.11±0.27 0.26±0.06 1.36±0.25 0.66±0.25 0.57±0.08
对照组 2.8±1.86 2.6±0.16 0.2±0 6.3±1.48 0.46±0.07 0.26±0.07 0.97±0.05 0.66±0.04
动物对照射的敏感性在昼夜间有不同的变化，这种变化见于不同性别、种系和年龄的小鼠和大鼠。白天放射敏感性降低（死亡较少，LD50/30较高，体重下降较少，肝脏损伤较轻）夜间升高。同时，在小鼠和大鼠实验中，除了夜间（21～24点）的高峰外，还发现白天（小鼠9～12点，大鼠15点）损伤加重情况。下午和后半夜射敏感性最低。大鼠与小鼠不同，其放射敏感性虽有昼夜间的明显波动，但不很剧烈。经实验证明实验动物的体温、血糖、基础代谢率、内分泌激素的分泌均发生昼夜节律性变化。因此这类实验的观察必须设有相应的对照，并注意实验中某种处理的时间顺序结果的影响。为了得到可比性的实验结果，所有实验组动物应在同一时间内进行照射或其它实验处理。

四、麻醉浓度
动物实验中往往需要将动物麻醉后才能进行各种手术和实验。要求麻醉浓度要适度，而且在整个实验过程中要保持始终恒定。因此不能不分别实验要求和动物品种（或品系）而用同一种麻醉剂，也不能乱用麻醉剂。因为不同的麻醉剂有不同的药理作用和副作用，应根据实验要求与动物种类而加以选择，使用合适。麻醉浓度的控制是顺利完成实验获得正确实验结果的保证。如果麻醉过深，动物处于浓度抑制，甚至濒死状态，动物各种正常反应受到抑制，那是不会做出可靠的实验结果的。麻醉过浅，在动物身上进行手术或实验，将会引起强烈的疼痛刺激，使动物全身，特别是呼吸，循环功能发生改变，消化功能也会发生改变，如疼痛刺激会反射性的长时间中止胰腺的分泌。所以麻醉浓度必须合适。由此也不难理解在整个实验中保持麻醉浓度的始终一致是如何必要了，因为麻醉浓度的变动，会使实验结果产生前后不一致的变化，给实验结果带来了难以分析的误差。

五、手术技巧
动物实验中除了要注意选择合适的实验动物，用的试剂要纯粹，仪器要灵敏，方法要准确外，还必须注意手术技巧，即操作技术的熟练。手术熟练可以减少对动物的刺激，动物受的创伤、

❻ 每种蛋白质浓度测定方法的干扰因素都有哪些

每种蛋白质浓度测定方法的干扰因素：干扰因素有硫酸铵、Tris缓冲液和某些氨基酸等。

在使用双缩脲试剂时候，必须注意，必须是先加0.1 g/mL氢氧化钠溶液，再加0.01 g/mL硫酸铜的水溶液。若先加入硫酸铜溶液，再加入氢氧化钠溶液，则无法充分制造碱性环境，此时硫酸铜会与氢氧化钠发生复分解反应，生成蓝色氢氧化铜沉淀，导致现象不清，无法较好地达到实验目的。

注意事项

不合宜人群：有明显出血倾向的人群。检查前禁忌：检查前一天不吃过于油腻、高蛋白食物，避免大量饮酒。血液中的酒精成分会直接影响检验结果。体检前一天的晚八时以后，应禁食。

检查时要求：抽血时应放松心情，避免因恐惧造成血管的收缩、增加采血的困难。测定中，蛋白-染料复合物会有少部分吸附于比色杯壁上，实验证明此复合物的吸附量是可以忽略的。测定完后可用乙醇将蓝色的比色杯洗干净。

以上内容参考：网络-蛋白质浓度测定

❼ 细菌内毒素检查在哪些情况下进行干扰试验

您好，
通过鲎实验法检供试品内毒素含量，受到多种因素的影响，如供试品的ph值、温度、离子强度、浓度，蛋白质和可发生鲎试剂反应的非内毒素杂质等都会对内毒素的检测产生干扰。在进行鲎试验法检测其内毒素时，需先进行干扰试验。
当进行新药的内毒素检查试验前，
或无内毒素检查项的品种建立内毒素检查
法时，须进行干扰试验。
当鲎试剂、供试品的配方、生产工艺改变或试验环境中发生了任何有可能影响试验结果的变化时，须重新进行干扰试验。
当
es
在
0.5λ～2λ（包括
0.5λ和
2λ）及
et
在
0.5es～2es（包括
0.5es和
2es）时，认为供试品在该浓度下无干扰作用。若供试品溶液在小于
mvd
的稀释倍数下对试验有干扰，应将供试品溶液进行不超过
mvd
的进一步稀释，再重复干扰试验。
如果一个新药开展内毒素检查时，未进行干扰试验，可能会造成假阴性或假阳性结果。

❽ Folin－酚测定蛋白含量实验中的干扰因素有哪些

该方法可受这些物质如：硫酸铵；Tris缓冲液；甘氨酸；各种硫醇干扰,另外该方法有耗费时间长；操作要严格计时；颜色深浅随不同蛋白质变化等缺点.

❾ 双缩脲法测血清蛋白质含量实验的干扰因素

干扰因素是尿素，双缩脲识别蛋白质的方法是检测肽键，而血清中含有尿素，尿素的结构和肽键很相似，尿素遇双缩脲也会产生紫色反应。因此干扰因素是尿素。

❿ 影响ELISA结果的若干内源性干扰因素有哪些

内源性干扰因素一般包括类风湿因子、补体、高浓度的非特异免疫球蛋白 、异嗜性抗体、某些自身抗体、因使用鼠抗体治疗或诊断诱导的抗鼠Ig抗体、交叉反应物质等。在日常的临床血清(浆)标本中，有相当比例不同程度的含有上述各种干扰物质，从而导致测定结果的假阳性。
1.类风湿因子(rheumatoid factors,RF)在类风湿患者、其他疾病以及正常人血清中,常含有较高或不同浓度的RF，RF一般为TgM型，亦有IgG和IgA型，RF具有与变性IgG产生非特异结合的特点，因为在ELISA测定中，其可与固相上包被的特异抗体IgG以及随后加入的酶标的特异抗体IgG结合，从而出现假阳性结果。尤其是在捕获法IgM型特异抗体的测定中表现最为明显，因为此时固相包被的抗体为抗人弘链抗体，IgM型RF的存在可使其大量结合于固相。为避免RF对ELISA测定的干扰，通常可以采取下述措施：
(1)稀释标本：这在判断急性病原体感染的特异IgM抗体如抗HAVIgM，抗HBclgM， TORCH的IgM抗体检验等尤为有用。因为急性感染时，血循环中特异的IgM抗体滴度通常很高，而RF滴度通常相对要低得多。因此，在测定前对标本进行稀释，特异的IgM因高滴度存在仍可检出，而非特异的RF则会因为稀释变成非常低的滴度，从而对测定几乎不产生干扰。现在，有些特异IgM检测ELISA试剂 盒不要求稀释标本，直接检测，这样虽然方便了实验室技术人员的操作，但容易出现假阳性结果，并且由于某些慢性感染，如HBV的感染，血循环中抗HBelgM可持续以一定的滴度存在，标本不做稀释即进行检测，即可出现阳性结果，从而失去抗HBclgM用于HBV急性感染的诊断价值。因此，在临床实验室，一定要使用要求对标本做1:1000稀释的试剂盒进行检验，从而保证相应检测项目结果的可靠性及临床应用价值。
(2)改变酶标抗体：由于RF结合的是IgG的Fc片段，如果将待酶标的抗体的F，片段酶切夫除，仅留下具有特异结合功能的F(ab’)2部分标记酶，则在测定中即可避免RF的干扰。
(3)标本中RF用变性IgG预先封闭：将经热变性(63℃，10min)的动物如兔、羊等的IgG加入到标本稀释液中，或是将该变性IgG连接至一颗粒固相如聚苯乙烯微球或微孔，然后加入临床血清标本，反应后，再吸出标本进行检测。此外，在测定特异IgM时，也可使用抗人IgG去除临床标本中RF和IgG。
(4)测定抗原 时，可在标本中加入可使RF降解的还原剂：如2—巯基乙醇。2—巯基乙醇等还原剂可使抗体内的巯基裂解，因而可以去除RF的干扰，但只适用于抗原测定。
(5)包被或酶标二抗使用特异的鸡抗体IgY：RF不与鸡IgY反应，如果包被和酶标二抗均为鸡IgY抗体，则不受标本中RF的干扰。
2.补体在固相酶免疫测定中，来自哺乳动物的固相特异抗体和酶标二抗均有激活人补体系统的功能。一方面，固相抗体和酶标二抗可因为其在固相吸附及结合过程中，抗体分子发生变构，从而其F, 段的补体C1，结合位点被暴露出来，这样C1，就成为一个中介物将二者交联起来，从而出现假阳性结果。另一方面，固相抗体也会因为活化补体的结合，封闭抗体的抗原表位结合能力，而引起假阳性结果或使定量测定结果偏低。由补体引起的干扰可通过下述方法避免：
(1)对临床血清标本加热灭活补体：采用56~C30min加热可使标本中的补体C1。灭活。
(2)包被或酶标二抗使用特异的鸡抗体：鸡抗体不激活人的补体系统，因此，使用特异的鸡抗体，不会出现因补体激活而存在的假阳性和假阴性干扰。
3.异嗜性抗体(heterophilieantibodies)人类血清中含有抗啮齿类动物(如鼠、马、羊等)的免疫球蛋白(lg)的抗体，即天然的异嗜性抗体。有研究表明，天然的异嗜性抗体(lgG)可分为两类，一类(85%的假阳性由其引起)可结合于山羊、小鼠、大鼠、马和牛IgG的Fab区域，但不与兔IgG的Fab区结合。另一类(15%的假阳性由其引起)可结合于小鼠、马、牛和兔IgG的Fc区表位，但不与山羊和大鼠IgG的Pc区表位结合。异嗜性抗体可通过交联固相和酶标的单抗或多抗而出现假阳性反应。由异嗜性抗体引起的干扰可通过下述方法避免：
(1)使用特异的兔F(ab’)2。片段作为固相或测定酶标抗体。
(2)在标本或标本稀释液中加入过量的动物Ig，封闭可能存在的异嗜性抗体。但加入量不足或亚类不同时无效。
(3)使用靶特异的非Ig亲和蛋白(affibody)替代固相或酶标抗体之一。采用噬菌展示来自单个金黄色葡萄球A蛋白(SPA)联合文库的人IgA结合亲和蛋白，用于IgA的测定，不受异嗜性抗体的影响。
4.因使用鼠抗体治疗或诊断诱导的抗鼠Ig抗体在临床上，有尝试使用鼠源性单克隆抗体进行靶向治疗，及使用放射性核索标记鼠源性单克隆抗体进行影像诊断等，均有可能