微生物质控菌株怎么复苏

㈠ 我第一次微生物，刚买回来了菌种，但不知道如何复苏和保存，帮帮忙，谢谢

复苏就是挑一点在培养基上培养。保存一般4度冰箱里

㈡ 菌种如何复壮呢

栽培种如果保存时间太长，是没有办法复壮的。如果菌丝体已经出现老化现象，最好不要再使用。

㈢ 如何对退化的菌种进行复壮

如果一个菌种因遗传变异而呈现退化，我们是无法通过改变环境条件使其恢复原状的。因此，所谓“复壮”，是指从衰退的群体中找出尚未衰退的少数个体，以达到恢复菌种的优良性状的目的；或通过改变某些内（如菌种的生理状况）、外（如营养成分）因素，使因长期在人工条件（尤其是不适的条件）下培养，生活力和生理机能下降的菌种恢复生活力和正常生理机能的一种措施。

菌种复壮最好在菌种的生产性能尚未衰退之前及时进行，并定期对菌种进行复壮处理，以防衰退。主要通过淘汰已衰退的个体和定期重新分离菌种措施来完成。常有以下几种方法：

（1）纯菌种分离

自然界里，食用菌大都与细菌、霉菌、酵母菌等微生物混杂生活在一起，因此，为了获得纯菌种，就必须进行纯菌种的分离培养。所谓纯菌种分离是指采用无菌操作技术，将食用菌的菌种从混杂的微生物群中单独地分离出来。常用的分离方法有孢子分离法、组织分离法、基内菌丝分离法和土中菌丝分离法。

在自然条件下，菌种的复壮，只有靠产生新一代才能实现，经有性繁殖所产生的孢子，是食用菌生活史的起点，具有丰富的遗传特性。要有计划的把无性繁殖和有性繁殖的方法交替使用，最好每年进行一次组织分离，3年进行一次有性繁殖。新分离的菌种，必须经过试验，性能符合要求后，方能用于生产。

（2）更换培养基

在菌种的培养、保藏、继代过程中，每隔一个时期，注意改变培养基成分（改变、调整、增加某种碳源、氮源或矿质元素等），或在原有的培养基中添加酵母膏、麦芽汁、氨基酸类物质和维生素等，或采用麦粒、谷粒、玉米粒等颗粒菌种，以刺激菌丝生长，提高菌种活力。

（3）适当添加维生素

在高温的夏季，培养双孢菇、凤尾菇等食用菌母种时，在琼脂培养基中加入适量维生素E或维生素B₁，可延缓细胞衰老，而且产量还有增加的趋势。

（4）菌丝液培养

从已退化的菌群中分离出仍保持原菌种典型性状的单个菌体细胞，经生长测定后进行扩大培养，以恢复原菌种的优良性状。具体操作是：在无菌条件下，将试管中菌丝体刮下，放入装有100毫升无菌水的三角瓶中，充分振动摇匀，使菌丝分散，然后用注射器吸取10毫升菌丝液，注入装有90毫升无菌水的三角瓶内，充分摇匀后，接入平板培养基上，每个平板接入2～3滴菌丝液，使菌丝液分散在平板上，在适宜温度下培养使菌丝萌发，从中挑选健壮的菌丝接入斜面试管。等到菌丝长满斜面，经试验证明符合原菌种的性状后，即可用于生产。

（5）尖端菌丝切取复壮

菌丝体的生长点位于菌丝的尖端，取菌丝的尖端旺盛生长点，进行分离培养，以得到优良的菌种。

（6）原基复壮分离法

此法适宜木腐菌的菇类，原基分离能保持母本性状。由于原基形成的物质条件更优越化，因而更易筛选到优良菌株。如用灭菌的尖头镊子在无菌条件下镊取金针菇原基，接入斜面培养基中，恒温培养7～10天。选取菌丝浓密、气生菌丝旺盛的斜面种再转管，生长性状稳定的即为复壮后的分离种。

（7）芽孢复壮

吕作舟、蔡衍山（1992）提出，银耳菌种出耳率下降，可加入芽孢进行复壮。具体做法是：将约500毫升含5克葡萄糖和数滴乳酸灭菌营养液（pH5.5左右），分注入30～40支银耳芽孢试管中，将芽孢菌落洗脱，即得芽孢悬液。芽孢悬液应随配随用，每瓶木屑种加 20毫升芽孢悬液，段木栽培的出耳率可明显提高。

（8）种木分离

袋料栽培的木生菌类，要定期接入木材中，待长出子实体后，挑选菇木或耳木进行种木分离，从而达到复壮作用。

㈣ 菌种冷冻后如何复苏

菌株的复苏
1、 从冰箱取出保存管。不要将保存管解冻。如果同时取出几支管，可以用冰袋来防止保存管的解冻。
2、 打开盖子，用无菌的针插入玻璃珠的孔挑出或用镊子取出玻璃珠
3、 取出的玻璃珠，可以投入一专用的液体培养基，或者立即在一专用的固体培养基上滚动。培养基置合适的条件培养
4、 遵循废物处理手册安全地处理该玻璃珠
5、 保存管重新封好，尽快将它置冰箱保存

㈤ 如何对微生物菌种进行活化能否更具体一些

有同学已经说的很专业了，我就给你说些简单实用的。不知道你出于何种目的要进行活化。如果你是用冻存管保存的菌株进行活化，取出2颗小珠放在适宜的固体培养基上，合上盖让小珠在平皿上滚动，适宜条件培养就可以了。长出一个菌落，你再繁殖就可以了。如果你是冻干粉的菌种，准备适宜的液体培养基，少少一点点粉末接种就可以了，根据此菌种一般液体培养所需时间，大概在36-48h，你还可以在观察到液体浑浊、试管底部有沉淀时（沉淀者也可能为原本死亡的细菌），取100微升液体涂抹在固体培养基上。
一般的话，复苏的菌种需要重复几次复壮。

㈥ 标准菌株怎样保存最适合的温度是多少

可使用冻干保藏、利用多孔小珠(磁珠)在-70℃保藏或使用液氮保藏等方法。菌株不同保藏方法也不尽相同，应根据文献资料选择最佳保藏方法。

对于从标准菌种冷藏中心或经ISO9000 质量管理体系认证或其它有效的认证的商业机构获得原包装的质控菌株，复苏和使用应按照制造商提供的使用说明进行。

(6)微生物质控菌株怎么复苏扩展阅读：

标准菌株使用注意事项：

1、选择合适的培养基：勿使用选择性培养基。一般使用非选择性的增菌培养基，因为微生物在选择性培养基中生长某些生物特性可能丢失，保藏的菌种的生物特性可能与标准菌株特性不同。

2、菌液的浓度：菌液的浓度一般越大，菌种保存时间越长。保藏时细菌常使用菌液，霉菌常用无菌水或生理盐水制备成的孢子悬液。

3、甘油浓度：甘油终浓度一般为10%~20%。由于甘油原液太粘稠，需要配制合适的甘油-水溶液。

4、对菌种进行保藏时注意慢冻快化，冷冻时降温速率保持1℃/min,复苏时用37℃水浴融化，能够保证菌种大的成活率。当冷冻菌种融化后，应避免再次冷冻，否则菌体的生存率会大幅度降低。

㈦ 用甘油冻存的细菌如何进行复苏

复苏：

1、无菌操作台灭菌30min后，75%酒精棉球消毒包括手在内的所有物品。

2、用灭菌接种环扣取试管中的冷冻菌块放入3mlLB液体培养基中，37℃150rpm过夜培养。

3、将过夜菌液重新按照步骤2活化一次。

4、活化2次后的菌液即可用于实验。

目的

微生物在使用和传代过程中容易发生污染、变异甚至死亡，因而常常造成菌种的衰退，并有可能使优良菌种丢失。菌种保藏的重要意义就在于尽可能保持其原有性状和活力的稳定，确保菌种不死亡、不变异、不被污染，保持菌株优良性状不退化，保持优良菌株存活，以达到便于研究、交换和使用等诸方面的需要。

㈧ 怎样复活安培管里休眠的菌种干粉，具体操作，请知道的朋友帮忙啊！

一、安瓿瓶装微生物菌种开封
1-1、用浸过70％酒精的脱脂棉擦净安瓿瓶。
1-2、用火焰将安瓿瓶口加热灭菌。 1-3、用镊子将铝封口撕开。
二、菌株恢复培养
2-1、用无菌吸管，吸取0.3-0.4ml适宜的液体培养基，滴入安瓿管内，轻轻振 荡，使冻干菌体溶解呈悬浮状。
2-2、取约0.2ml菌体悬浮液，移植于指定的琼脂斜面培养基上，剩余的菌液，注入指定的液体培养基内（3-4ml），然后在建议的温度下培养。
三、注意事项
3-1、菌种活化前，请将安瓿瓶保存在5-10℃的环境下。
3-2、厌氧菌的培养，如无特别说明，自开封至接种完成，均需以无氧气体充 填，以保持厌氧状态。
3-3、某些菌种经过冷冻干燥保存后，延迟期较长，需连续两次继代培养才能 正常生长。
四、制作ｅｍ菌液

4-1、菌种活化:用ｅｍ菌种10克、红糖0.1公斤（红糖先用热水溶化），加入1公斤的水。注：（先把水加热到100°c后加入红塘或白糖，而后继续加热5分钟。冷却到40°c时加入ｅｍ菌种），密闭发酵(35°c-40°c温度)下活化3天，打开容器口闻到有酸甜味即活化成功。可以作为液体菌种使用。
4-2、制作原液：将活化好的液体菌种加入二级发酵罐。菌种——二级发酵罐(密闭) (加水比例:按1:10的比例加入) 二级发酵液:（10%的无菌糖水！ 0.1%琼脂粉！温度35-40度！发酵5-7天！）成品发酵液标准（气味：酸甜！ ph值：4.0-5.0！ 活菌含量：100亿/ml ！）

㈨ 细菌复苏操作

先剃度升温，我想培养基用普通的牛肉糕蛋白冻就可以了吧，液体培养一天左右，再划线挑选个好的菌落，再扩大培养使用。菌种不同不知道能不能跟我以前做的一样，以前好像是用的杆菌。