A. 稀释平板法测定土壤微生物数量
A、测定土壤样品中的微生物的数量，常用稀释涂布平板法，来统计活菌数目，一般情况下，实验结果与真实结果相比偏小，A错误；
B、样方大小对种群数量有一定的影响，乔木100m 2 、灌木16m 2 、草本1m 2 ，所以样方法测种群密度时取的样方面积不合适，实验结果与真实结果相比不一定偏大，B错误；
C、根据标志重捕法的计算公式：种群中个体数（N）÷标记总数=重捕总数÷重捕中被标志的个体数可知，若部分灰喜鹊身上的标志物脱落，则会导致重捕中被标志的个体数偏小，最终导致实验所得到数值比实际数值大，C正确；
D、由于酵母菌是兼性厌氧型生物，所以计数培养液中酵母菌数量时，待培养液沉淀后再取沉淀物计数，往往实验结果与真实结果相比偏大，D正确．
故选：CD．
B. 土壤微生物分离计数的方法
用培养基的方法来分比较麻烦，而且土壤中90%以上的菌是不可培养的……
如果只是想做到群落水平的话，可以试试Biolog分析、磷脂脂肪酸分析和总DNA分析等方法，这些方法能研究和表征那些现在还不能够被培养的土壤微生物。
C. 微生物计数方法有哪些
测定微生物计数的方法有很多,主要有以下几种：
1.血细胞计数法
将稀释的菌液样品滴在血细胞计数板上,在显微镜下计算4~5个中格的细菌数,并求出每个小格所含细菌的平均数,再以此为依据,估算总菌数.
①此法的缺点是不能区分死菌和活菌.
②对压在小方格界线上的细菌,应当取平均值计数.
③此法可用于测定培养液中酵母菌种群数量的变化
2.稀释涂布平板法
原理：每个活细菌在适宜的培养基和良好的生长条件下可以通过生长形成菌落.培养基表面生长的一个菌落,来源于样品稀释液中的一个活菌.
①这一方法常用来统计样品中活菌的数目
②统计的菌落数往往比活菌的实际数目低,原因是当两个活多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落.因此统计结果一般用菌落数而不是用活菌数来表示.
③土壤、水、牛奶、食品和其他材料中所含细菌、酵母、芽孢与孢子等的数量均可用此法测定.但不适于测定样品中丝状体微生物,例如放线菌或丝状真菌或丝状蓝细菌等的营养体等.
④此法若不培养成菌落,可通过将一定量的菌液均匀地涂布在玻片上的一定面积上,经固定染色后在显微镜下计数,这样又称涂片计数法.染色可用台盼蓝,台盼蓝能使死细胞染成蓝色,可分别计数死细胞和活细胞.
3.滤膜法
滤膜法是当样品中菌数很低时,可将一定体积的湖水、海水或饮用水灯样品通过膜过滤器.然后将滤膜干燥、染色,并经处理使膜透明,再在显微镜下计算膜上（或一定面积上）的细菌数.
此法也可以通过培养观察形成的菌落数来推算样品中的菌数.例如测定饮用水中大肠杆菌的数目：将已知体积的水过滤后,将滤膜放在伊红美蓝培养基上培养.在该培养基上大肠杆菌的菌落呈现黑色,可根据培养基上黑色菌落的数目,计算出水样中大肠杆菌的数目.
此法也是统计样品中活菌的数目.
4.比浊法
原理是在一定范围内,菌是悬液中细胞浓度与混浊度成正比,即与光密度成正比,菌越多,光密度越大.因此可借助与分光光度计,在一定波长下,测定菌悬液的光密度,以光密度表示菌量.实验测量时一定要控制在菌浓度与光密度成正比的线性范围内,否则不准确.
5.显微镜直接计数法
在课本生物选修1生物技术实践P22中“除了上述活菌计数法外,显微镜直接计数也是测定微生物数量的常用方法.”这里说的显微镜直接计数,我认为应该是在稀释涂布的基础上不培养成菌落而通过染色的方法在显微镜下直接计数.再如滤膜法也一样,可以有两种情况.
另外,微生物计数法发展迅速,多种多样的快速、简易、自动化的仪器和装置等方法可以用来统计微生物的数目.
D. 如何计算土壤微生物的菌数(稀释涂布法）
土壤中微生物种类很多，根据你想要的菌配制所需要的培养基就行了，很简单啊。
E. 通过菌落数计算样品中的微生物数量的方法
菌落总数的计算方法
若只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内，计算两个平板菌落数的平均值，再将平均值乘以相应稀释倍数，作为每g（mL）中菌落总数结果。
若有两个连续稀释度的平板菌落数在适宜计数范围内时，按如下公式计算：
N=∑C/（n1+0.1n2）d
式中：
N —样品中菌落数
ΣC —平板（含适宜范围菌落数的平板）菌落数之和
n1 —第一稀释度（低稀释倍数）平板个数
n2 —第二稀释度（高稀释倍数）平板个数
d —稀释因子（第一稀释度）
示例：
稀释度 1:100（第一稀释度） 1:1000（第二稀释度）
菌落数（CFU） 232，244 33，35
上述数据按8.2.2数字修约后，表示为25000或2.5×104。
若所有稀释度的平板上菌落数均大于300 CFU，则对稀释度最高的平板进行计数，其他平板可记录为多不可计，结果按平均菌落数乘以最高稀释倍数计算。
若所有稀释度的平板菌落数均小于30 CFU，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数计算。
若所有稀释度（包括液体样品原液）平板均无菌落生长，则以小于1 乘以最低稀释倍数计算。
若所有稀释度的平板菌落数均不在30 CFU～300 CFU 之间，其中一部分小于30 CFU 或大于300 CFU 时，则以最接近30 CFU 或300 CFU 的平均菌落数乘以稀释倍数计算。
ps 8.2.2大于或等于100 CFU 时，第3 位数字采用“四舍五入”原则修约后，取前2位数字，后面用0 代替位数；也可用10 的指数形式来表示，按“四舍五入”原则修约后，采用两位有效数字。
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F. 测定微生物的生物量有哪些主要方法
测定微生物的生物量有哪些主要方法
测定的方法主要有四种：
1.直接计数测定：根据微生物种类，有血球计数板和细菌计数板；
2.比浊法：根据菌悬液的浓度在一定范围内与光密度成正比，可以用分光光度计测OD值，用OD值表示样品菌液浓度；
3.核酸计数法：荧光定量PCR技术；
4.活菌计数法：MPN和平板计数法由于测定方法的限制。新鲜土样经氯仿熏蒸后（24h），土壤微生物死亡细胞发生裂解，释放出微生物生物量碳，用一定体积的LK2SO4溶液提取土壤，借用有机碳自动分析仪测定微生物生物量碳含量。根据熏蒸土壤与未熏蒸土壤测定有机碳的差值及转换系数（KEC），从而计算土壤微生物生物量碳。
G. 如何测定土壤中特定细菌的数量
显微镜直接计数法和稀释平板计数法是测定微生物数量的常用方
法。
直接计数法中常用的是显微镜直接计数法，这种方法是先将待
测样品制成悬液，然后取一定量的悬液放在显微镜下进行计数(图1-
3-1)。根据在显微镜下观察到的微生物数目来计算出单位体积内的微
生物总数。直接计数法所需设备简单，可迅速得到结果，而且在计数
的同时能观察到所研究微生物的形态特征，其缺点是难以计数微小的
细菌。这种方法一般适用于纯培养悬浮液中各种单细胞菌体的计数。
间接计数法最常用的是稀释平板计
数法，它是根据微生物的培养特征而设计
的计数方法。这种方法在样品中含菌数较
少的情形下，也可以完成计数。
应用稀释平板计数法计数时，需要
将待测样品配制成均匀的系列稀释液，尽
量使样品中的微生物细胞分散开。再取一
定稀释度、一定量的稀释液接种到平板
中，使其均匀分布于平板中的培养基内；
或是将一定量的稀释液，与溶化后冷却至
45℃左右的琼脂培养基混合，倾入无菌培
养皿中，摇匀、静置待凝。经过培养后，
就由单个微生物生长繁殖形成菌落，这样
的一个菌落就代表着一个微生物个体。统
计培养基中出现的菌落数，即可推算出检
测样品中的活菌数。
FOR EXAMPLE:]
土壤中好气性细菌的计数
土壤中生活的微生物种类和数量是极其丰富的，这些数量众多的
微生物对提高土壤肥力有重要作用。因此，测定土壤中的含菌量可以
作为判定土壤肥力的一个重要指标。
材料器具
土壤样品；牛肉膏蛋白胨琼脂培养基(附录二)、无菌水；培养皿、
移液管、天平、锥形瓶、试管、酒精灯、恒温培养箱、摇床等。
活动程序
1.制备土壤稀释液
取土壤表层5～10 cm 处的土样。准确称取1 g 土样，放入盛有
99 mL 无菌水的锥形瓶(250 mL，放有小玻璃珠)中，用手或摇床振荡
20 min，即制成102 倍的稀释液。
用1 mL无菌移液管，吸取10 2倍稀释液0.5 mL，移入装有4.5 mL
无菌水的试管中，配制成103 倍稀释液。
用同样的方法可制成稀释倍数为104、105、106 的系列稀释菌液
(图1-3-2)。
图
移液时，要将移液管插入液面，吹吸3 次，每次吸上的液面要高
于前一次，让菌液混合均匀并减少稀释中的误差。每配一个稀释度要
换用一支移液管。
2.取样及倒平板
将无菌培养皿编号，依次为104、105、106，每一号码设置三个
重复。
用无菌移液管三支，分别吸取稀释倍数为104、105、106的土壤稀释
液各0.2 mL，注入到相应编号的培养皿中(每个稀释倍数各三个培养皿)。
将已灭菌牛肉膏蛋白胨琼脂培养基溶化，待冷却至45～50 ℃左
右，倾入到无菌培养皿中，每皿约15 mL，轻轻转动培养皿，使土壤
稀释液与培养基混合均匀。
3.培养
将上述接种好的平板培养基冷却后，倒置放入28～30 ℃的恒温
培养箱中培养24～36 h，直至长出菌落为止。
4. 观察记录
将实验中得到的菌落数填入表1-3-1。
结果分析
1.选取具有合适菌落数的稀释倍数并计数。
在计算结果时，从接种的3 个稀释度中选择一个合适稀释倍数，
统计出菌落数(图1-3-3)。选择的原则是：
过
(1) 细菌、放线菌、酵母菌以每个培养皿内有30～300 个菌落为
宜。霉菌以每个培养皿内有10～100 个菌落为宜。
(2) 同一稀释倍数各个重复的菌落数相差不太悬殊。
2.将统计出的菌落数按下列公式计算，得出每克样品菌数。
每克土壤样品菌数= 某稀释倍数的菌落平均数×稀释倍数
H. 1g土壤中微生物数量计算公式
1g土壤中微生物数量计算公式如下：
从最后的稀释液中取0.1mL涂布，形成了若干菌落，则1mL稀释液中有菌个数为：某稀释液中的菌落数×10，再乘以稀释倍数即为盛有90mL无菌水的锥形瓶中1mL的菌数，而锥形瓶中的100mL总共含有的菌体数为：某稀释液中的菌落数×10×稀释倍数×100，而这些菌来源于10土样，故1g土壤样品中含有的菌体数=某稀释液中的菌落数×10×稀释倍数×100÷10。
I. 土壤微生物数量用什么单位表示//
用 个/克
将已知质量的土壤用蒸馏水制成悬液，按梯度稀释，然后将稀释倍数较高的土壤悬液涂布到平板上进行培养，菌落长好后数菌落的个数，根据稀释倍数即可估算出微生物的数量（个/克）