为什么要进行微生物培养

A. 微生物培养需要什么条件为什么

微生物的生长和繁殖需要条件有：

1、适宜的营养条件(充足的碳源、氮源)。

2、适宜的氧含量(好氧的要震荡培养，厌氧的要厌氧培养，兼性的可以静止培养)。

3、合适的pH值(一般指培养基的pH值)。

4、合适的环境温度(细菌37度，真菌28度)。

5、合适的接种量(一般接种量是1%)。

6、只用专业的中海生物微生物培养基

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微生物的主要特征

1、体小面大

一个体积恒定的物体，被切割的越小，其相对表面积越大。微生物体积很小，如一个典型的球菌，其体积约1mm，可是其表面积却很大。这个特征也是赋予微生物其他如代谢快等特性的基础。

2、吸多转快

微生物通常具有极其高效的生物化学转化能力。据研究，乳糖菌在1个小时之内能够分解其自身重量1000-10000倍的乳糖，产朊假丝酵母菌的蛋白合成能力是大豆蛋白合成能力的100倍。

3、生长繁殖快

相比于大型动物，微生物具有极高的生长繁殖速度。大肠杆菌能够在12.5-20分钟内繁殖1次。不妨计算一下，1个大肠杆菌假设20分钟分裂1次，1小时3次，1昼夜24小时分裂24×3=72次，大概可产生4722366500万亿个（2的72次方），这是非常巨大的数字。

但事实上，由于各种条件的限制，如营养缺失、竞争加剧、生存环境恶化等原因，微生物无法完全达到这种指数级增长。 已知大多数微生物生长的最佳pH范围为7.0 (6.6~7.5)附近，部分则低于4.0。

微生物的这一特性使其在工业上有广泛的应用，如发酵、单细胞蛋白等。微生物是人类不可或缺的好朋友。

B. 3 微生物发酵生产的工厂，为什么都要进行菌种的扩大培养，一般如何进行菌种的扩大培养

在微生物发酵生产时，为保证足够的接种量，常采用菌种的扩大培养。
用以生产的菌株第一步要在实验室环境下培养达700ml以上菌种时，接入一级种子罐种培养1-2天后，输入二级种子罐培养1-2天，再输入发酵罐中培养7天左右。
发酵时出现产量不稳定由多种因素引起，种子质量，接种量，原材料的质量，在发酵过程中糖、氮的补充，发酵控制条件不成熟等。
原材料的影响不大，除非是卖到发霉变质的，或者是质量严重不合格的原材料。
本人认为重要可能是发酵过程中糖氮的补充，掌握不成熟。易引起发酵产量不稳定。

C. 为什么需要进行微生物培养基的优化

培养基优化，是指面对特定的微生物，通过实验手段配比和筛选找到一种最适合其生长及发酵的培养基，在原来的基础上提高发酵产物的产量，以期达到生产最大发酵产物的目的。发酵培养基的优化在微生物产业化生产中举足轻重，是从实验室到工业生产的必要环节。能否设计出一个好的发酵培养基，是一个发酵产品工业化成功中非常重要的一步。

D. 为什么要进行细菌的分离培养进行分离培养应注意哪些事项何谓纯培养

1.因为你可能需要改种细菌进行研究或者为了获得它的某种分泌物而进行培养。2.要严格消毒，避免杂菌污染，另外也要控制好温度。3.纯培养就是培养出来由一个菌体繁殖形成的菌落，因为是同一种菌繁殖而来所以种类单一成为纯培养。

E. 人工培养微生物的意义

稀释培养法和高通量培养法 d.pp3D 9/
在地球环境中，海洋环境中迄今可培养微生物的比例最低，仅为0.001% ～ 0.1%，这是由于海洋环境中主要是寡营养微生物，它们在人工培养时往往受到少数优势生长的微生物的竞争作用而不能生长。为了克服该缺陷，1993 年Button从概率论的角度提出一个崭新的方法，即稀释培养法（Dilution culture）。该方法认为，当把海水中微生物群体稀释至痕量时，在海水中主要存在的寡营养微生物可以不受少数几种优势微生物的竞争作用的干扰，因而主体寡营养微生物被培养的可能性会大大提高。随后，Schut等的实际操作验证了该理论的正确性。 ';/84j-3F
2002 年Connon在稀释培养法的基础上提出高通量培养法（High-throughput culturing，HTC）。将样品稀释至痕量后，采用小体积48 孔细胞培养板分离培养微生物。该方法不仅有效提高微生物的可培养性，还可在短期内监测大量的培养物，大大提高工作效率。Cho等利用该方法从太平洋近海和远洋海水中也分离出多种新菌。Rappé 和Connon结合荧光原位杂交技术（FISH），对高通量培养法进行了改进，根据从培养板各孔中针对性地检测SAR11 进化分支的海洋细菌的存在，在较短时间内对目标微生物进行了大量的培养。但是，稀释培养法和高通量培养法成功的原因恰恰又是制约其进一步发展的障碍。在样品稀释、微生物间的不利作用被削弱的同时，有利作用也被削弱。例如，当微生物被极度稀释、初始接种量很小时，一些微生物分泌的代谢产物也被稀释，其他关联微生物细胞由于缺乏这些必须的代谢产物，生长就会受到抑制；另外，缺少种间的共生关系和群体效应，很多微生物仍然不可培养。 O3!d(dY=_
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3.2 扩散盒培养法 GOW"o"S
Kaeberlein〔2〕等在分离培养潮间带底泥中的微生物时使用一种新颖的自制培养仪器，为其起名为扩散盒（Diffusiongrowth chamber）。扩散盒由一个环状的不锈钢垫圈和两侧胶连的0.1μm 滤膜组成，滤膜只能允许培养环境中的化学物质通过而不能让细胞通过。将底泥样品置于扩散盒内的半固体培养基中，扩散盒置于鱼缸底部的天然海洋底泥上，往鱼缸内加入天然海水并保证扩散盒内存有一定空气供微生物生长。培养时，使天然海水循环流动，并不断注入新鲜的海水。培养1 周后培养基上产生大量的微型菌落，数目高达接种微生物的40%。这种培养方法能较大程度地模拟微生物所处的自然环境，由于化学物质可以自由穿过薄膜，可保证微生物群落间作用的存在，提高微生物可培养性。扩散盒法的主要不足是操作比较繁琐。 b%nkIPA
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3.3 细胞包囊法 hNO )~rt
Zengler 等将海水和土壤样品中的微生物先进行类似稀释培养法的稀释过程，然后乳化，部分微生物形成了仅含单个细胞的胶状微滴。然后将胶状微滴装入层析柱内，使培养液连续通过层析柱进行流态培养。层析柱进口端用0.1μm 滤膜封住，防止细菌的进入而污染层析柱；出口端用8μm 滤膜封住，允许培养产生的细胞随培养液流出。该方法的特点是让微生物在开放式培养液中生长，使培养环境接近于微生物的自然生长环境，能够很好地提高微生物可培养性，但成本较高，不利于普及使用。 & zgPN8u
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3.4 序列引导分离技术 _:5=| 2-E
序列引导分离技术（Sequence-guiding isolation）是根据微生物基因组中特定基因的特异性序列，设计引物或杂交探针，以培养物中目标序列存在和变化情况为标准，来指导对微生物最优培养条件的选择，培养出新的微生物。Stevenson在细菌培养过程中采用了多种培养条件的组合，导致培养方案繁多复杂。为了减少分离细菌的工作量、节省时间，用PCR 作为监测手段来确定目标细菌是否得到培养。当细菌在固体培养基上长出菌落后，用缓冲液冲洗培养基表面，提取冲洗液中细菌的DNA，根据目标细菌的16S rDNA扩增情况判断目标细菌的存在与否。继续用PCR方法监测目标细菌直至分离得到纯菌株。Béjà 等通过对尚未培养的海洋变形细菌的BAC 基因文库进行研究，发现该类菌具有编码视紫红质的基因片段。视紫红质是光营养过程中不可或缺的化学物质。据此设想增加光照可提高该菌的可培养性，而进一步的实验结果验证了该假设的正确性。此外，Breznak指出，分子原位杂交技术可以对推断目标微生物的代谢方式和营养需求提供帮助，极大地节省工作时间，操作也很简便，仅需要一种特异性的探针，显示了在微生物培养时引入分子生物学技术作为引导的优势和力量。

F. 生物实验为什么要做培养细菌，其目的是什么

需要用细菌做实验，了解细菌的结构和生活繁殖的一系列和对人体的
致病性
，可以发明改造相应的治病药物来针对它的这些活动。

G. 为什么选择培养能够浓缩所需的微生物

所谓的选择培养是利用培养基或培养条件针对性地促进或抑制某类微生物的生长，从而使目标微生物数目增加的一种培养方法。

1、选择性的促进某种微生物的生长，从而抑制其他微生物。为了从土壤中分离可分解角蛋白的细菌，我们将培养基的以家禽羽毛粉作为唯一的碳源和氮源，培养48小时后，可分解角蛋白的细菌增殖，成为主要菌群，而没有这一能力的细菌就消失了。

2、选择性地抑制。为了分离真菌，我们可向培养基加入链霉素，以抑制细菌的生长，从而使真菌的数目大大增加，细菌数目减少。

H. 为什么要做细菌培养，药敏实验

引起每个人感染的细菌可能有所不同，而不同的细菌对不同的抗菌药物敏感性，即便是不同人体感染的是同一种细菌，其对抗菌药物的敏感性也会不同，因此，临床上为提高使用抗菌药物的针对性，尽快控制细菌感染，一般均应采集病人标本进行细菌培养和药敏试验。

I. 为什么要培养微生物，直接看不到吗

显微镜不能看到太多差别。培养成菌落，可以看到菌落形态的差别，颜色的差别，如果是真菌，还可以看到的孢子穗（囊）的形态和颜色变化。用不同的培养基，可以分辨是否产气，对氧气的需求反应，对某些物质的分解能力，比如产淀粉酶的会分解淀粉，产蛋白酶的会分解明胶，培养一段时间后，培养基是变酸还是变碱等等。这些信息单靠显微镜是不能够获得的。