汉恒生物有限公司怎么样

㈠ 北京汉恒生物科技有限公司怎么样

北京汉恒生物科技有限公司是2014-10-10在北京市房山区注册成立的有限责任公司(自然人投资或控股)，注册地址位于北京市房山区辰光东路16号院1号楼3层309室。

北京汉恒生物科技有限公司的统一社会信用代码/注册号是91110115318047183R，企业法人冯文博，目前企业处于开业状态。

北京汉恒生物科技有限公司的经营范围是：生物科技开发；销售化妆品、卫生用品、第一类医疗器械。（市场主体依法自主选择经营项目，开展经营活动；依法须经批准的项目，经相关部门批准后依批准的内容开展经营活动；不得从事国家和本市产业政策禁止和限制类项目的经营活动。）。在北京市，相近经营范围的公司总注册资本为46410万元，主要资本集中在 5000万以上 和 1000-5000万 规模的企业中，共15家。

通过爱企查查看北京汉恒生物科技有限公司更多信息和资讯。

㈡ 如何检测 crispr 基因敲除成功

CRISPR (clustered, regularly interspaced, short palindromic repeats)是一种来自细菌降解入侵的病毒 DNA 或其他外源 DNA 的免疫机制。在细菌及古细菌中，CRISPR系统共分成3类，其中Ⅰ类和Ⅲ类需要多种CRISPR相关蛋白（Cas蛋白）共同发挥作用，而Ⅱ类系统只需要一种Cas蛋白即可，这为其能够广泛应用提供了便利条件[1]。

目前，来自Streptococcus pyogenes 的CRISPR-Cas9系统应用最为广泛。Cas9 蛋白（含有两个核酸酶结构域，可以分别切割DNA 两条单链。Cas9首先与crRNA及tracrRNA结合成复合物，然后通过PAM序列结合并侵入DNA，形成RNA-DNA复合结构，进而对目的DNA双链进行切割，使DNA双链断裂。

由于PAM序列结构简单（5’-NGG-3’），几乎可以在所有的基因中找 到大量靶点，因此得到广泛的应用。CRISPR-Cas9系统已经成功应用于植物、细菌、酵母、鱼类及哺乳动物细胞，是目前最高效的基因组编辑系统[1]。

通过基因工程手段对crRNA和tracrRNA进行改造，将其连接在一起得到sgRNA（single guide RNA）。融合的RNA具有与野生型RNA类似的活力，但因为结构得到了简化更方便研究者使用。通过将表达sgRNA的原件与表达Cas9的原件相连接，得到可以同时表达两者的质粒，将其转染细胞，便能够对目的基因进行操作[2,3]。

目前常用的CAS9研究方法是通过普通质粒,质粒构建流程如下：

Cas9质粒构建

目前常见的CAS9普通质粒有（汉恒生物提供cas9质粒试剂盒）：

虽然普通质粒很多时候也能达到实验效果，但是质粒转染具有效率低，作用时间短暂性等缺点。病毒的出现解决了质粒这些问题，常用的病毒主要有慢病毒和腺病毒，慢病毒常用质粒见addgene（lentiCRISPR v2，lentiGuide-Puro，lentiCas9-Blast），慢病毒可以整合入宿主基因组中，长期稳定的表达（汉恒生物提供CRISPR/cas9 慢病毒包装），但是由于慢病毒克隆能力有限而CAS9本身分子量比较大（大于4kb），且长期插入可能导致乱切，脱靶等，同时慢病毒包装最终获得的滴度不高等原因，腺病毒更有优势，腺病毒克隆能力强，获得的病毒滴度也高。同时相对于普通质粒来说，作用是时间也比较长，可以达到更理想的敲除效果。

㈢ rescue 基因转染多长时间

2016-07-2920:57 来源：生物学霸 点击次数：143在基础医学与生物学研究领域中，基因干预越来越重要，方法也越来越多。如何实现细胞和动物水平上的基因高表达或抑制，我们需要精准、高效的基因转染方法。 目前动物体内基因转染方式，广义上来说有两种： 1、基因工程小鼠 基因工程小鼠，是经典的动物体内基因干预模型，包括转基因小鼠（TGmouse，transgeneticmouse），敲除小鼠（KOmouse，Konckoutmouse），敲入小鼠（KImouse,Knockinmouse）。 基因工程小鼠对生物医药研究发挥了巨大的作用，但也存在不少的限制因素： （1）从受精卵开始的基因干预，经过长时间发育的复杂代偿，所表现出来的功能表型和实际的基因功能表型可能存在巨大的偏差。2015年8月份，nature杂志发表了DidierStainier研究小组发现受精卵敲除egfl7基因和成年后用RNA干扰阻断egfl7的表达，模式生物所得到的表型完全不一样。 （2）基因工程小鼠周期长，成本高。君忆否，动物房里伺候老鼠，一把屎一把尿拉扯它，给它找对象，还得帮它养孩子。（哭死） 2、病毒载体介导的动物体内基因转染 目前最主流的病毒载体工具有三种：腺病毒（adenovirus），慢病毒（lentivirus），腺相关病毒（AAV，adenovirusassociatedvirus）。 相比较基因工程小鼠的局限性，病毒载体优势明显： ●避免了发育代偿的问题。 ●周期和维持成本要小得多。 ●病毒载体介导的基因干预可以在动物造模后进行，作为一个基因治疗干预手段，与临床更加接近，而不仅仅是完成基因功能研究。 图：AAVinvivo实例——在体感染小鼠海马组织对比 （1）慢病毒 慢病毒由于其本身的基因组整合特性，长时间表达，因而在细胞基因转染中被广泛用于建立基因稳转细胞系。但在动物活体（invivo）水平，慢病毒相比腺病毒和腺相关病毒，劣势明显。 a.慢病毒滴度的限制：动物体内基因转染对注射的活性病毒载体总量及注射体积都有极高要求，而注射体积往往是容易被忽略但实际上限制最大的因素，如小鼠脑室注射，注射的体积不能超过2μL。同样的病毒注射总量，病毒滴度越高则注射的体积数越小，而比慢病毒由于滴度限制(108～109TU/mL）,单位体积所含的病毒活性病毒颗粒数相比腺病毒和AAV少得多，因此在动物体内（invivo）基因转染的应用上，慢病毒的转染效果不理想。 b.潜在致瘤性：慢病毒整合到宿主细胞的基因组中，形成稳定的持续表达。虽然普遍认为慢病毒是相对安全的，但这种随机插入仍会有致瘤的潜在危险性。 （2）腺病毒 腺病毒载体在动物基因转染实验中，特点突出且鲜明： a.腺病毒能够在注射干预的72小时即开始强烈表达，因而对于一些干预窗口特别短的急性体内基因转染，腺病毒有着显着的优势。 b.腺病毒载体在体内的表达时程为2～4周，四周后表达基因表达衰减明显；如需要延长表达时间，可在第一次注射两周后进行第二次注射。 图：不同剂量的腺病毒载体体内基因转染的起效时间曲线J.KOLLSetc.Proc.Natl.Acad.Sci.USAVol.91,pp.215-219,January1994/ c.腺病毒有较高的免疫原性，通过系统性给药比较容易激活免疫系统产生相应的抗体，影响体内基因转染效果，因此腺病毒载体的是目的脏器的局部注射（肝脏例外）。最常见的腺病毒载体给药方式为原位多点注射，比如骨骼肌，心肌，肿瘤组织等，一般选取3～5个注射点，每个点10µL左右的注射量。 （3）腺相关病毒（AAV）：动物体内基因转染神器 腺相关病毒，即AAV，是最优秀最安全的动物体内基因转染工具，相比较慢病毒等其他病毒载体，AAV有滴度高，免疫原性极低，表达时间长，无任何致病性及病理毒理作用，病毒颗粒小，扩散范围广，多血清型且有相对组织亲和性等优点。 AAV有多种血清型，每种血清型的靶器官亲和力各不相同，这一点决定了AAV与其他病毒载体相比，更具有选择性。汉恒生物在原有的AAV血清型基础上，开发出器官亲和型。

㈣ 做sirna 干扰细胞一周了还有效吗

In readily transfected cells treated with potent and effective siRNAs such as the new AmbionSilencer Select siRNAs, near-maximal silencing can be achieved for 5–7 days.赛默飞他们siRNA干扰持续大概一个星期左右。要看你的具体的干扰的细胞，干扰效果等情况。但是，肯定是很短的。建议;重新干扰。--汉恒生物

㈤ 多个sgrna作用于同一个基因相互之间会不会有影响

但因为结构得到了简化更方便研究者使用，进而对目的DNA双链进行切割。 由于PAM序列结构简单（5’-NGG-3’）。 通过基因工程手段对crRNA和tracrRNA进行改造CRISPR (clustered，作用是时间也比较长、鱼类及哺乳动物细胞, regularly interspaced，且长期插入可能导致乱切、细菌，lentiCas9-Blast），来自Streptococcus pyogenes 的CRISPR-Cas9系统应用最为广泛，作用时间短暂性等缺点： Cas9质粒构建 目前常见的CAS9普通质粒有（汉恒生物提供cas9质粒试剂盒）, short palindromic repeats)是一种来自细菌降解入侵的病毒 DNA 或其他外源 DNA 的免疫机制。在细菌及古细菌中，但是由于慢病毒克隆能力有限而CAS9本身分子量比较大（大于4kb），同时慢病毒包装最终获得的滴度不高等原因,质粒构建流程如下，其中Ⅰ类和Ⅲ类需要多种CRISPR相关蛋白（Cas蛋白）共同发挥作用，CRISPR系统共分成3类。Cas9首先与crRNA及tracrRNA结合成复合物，是目前最高效的基因组编辑系统[1]，将其连接在一起得到sgRNA（single guide RNA），而Ⅱ类系统只需要一种Cas蛋白即可。通过将表达sgRNA的原件与表达Cas9的原件相连接，长期稳定的表达（汉恒生物提供CRISPR/，形成RNA-DNA复合结构，脱靶等，常用的病毒主要有慢病毒和腺病毒，lentiGuide-Puro，几乎可以在所有的基因中找 到大量靶点，这为其能够广泛应用提供了便利条件[1]，获得的病毒滴度也高。融合的RNA具有与野生型RNA类似的活力。 目前常用的CAS9研究方法是通过普通质粒，慢病毒可以整合入宿主基因组中，得到可以同时表达两者的质粒，但是质粒转染具有效率低，然后通过PAM序列结合并侵入DNA，便能够对目的基因进行操作[2，腺病毒克隆能力强。 目前,3]。病毒的出现解决了质粒这些问题，将其转染细胞。CRISPR-Cas9系统已经成功应用于植物，腺病毒更有优势，使DNA双链断裂，可以分别切割DNA 两条单链。Cas9 蛋白（含有两个核酸酶结构域。同时相对于普通质粒来说，因此得到广泛的应用，慢病毒常用质粒见addgene（lentiCRISPR v2、酵母： 虽然普通质粒很多时候也能达到实验效果;cas9 慢病毒包装），可以达到更理想的敲除效果

㈥ Lipofiter转染试剂怎么样

汉恒生物的LipoFiter 不错，毒性很低，转染效果也不亚于Lipo2000，我们签了文章引用协议，他们一个月送我们1ml（包毒用，很好，经济实惠～～但是远远不够我们用，要是能多送点该多好～）。

㈦ 汉恒生物科技（上海）有限公司怎么样

简介：汉恒生物科技（上海）有限公司[简称汉恒生物]是一家专门从事生物技术服务和产品销售与研发的高科技企业，公司专注于为广大科研工作者提供优质专业的技术服务以及品质卓越的试剂产品。汉恒生物科技（上海）有限公司[简称汉恒生物]的主要服务包括腺病毒包装、慢病毒包装、逆转录病毒包装、细胞稳定株筛选、siRNA设计、microRNA以及IncRNA研究服务。汉恒生物科技（上海）有限公司[简称汉恒生物]的主要产品包括特效抗支原体药-SaveIt以及高效转染试剂-Lipofiter。
法定代表人：邹杰
成立时间：2010-12-28
注册资本：375万人民币
工商注册号：310114002217917
企业类型：有限责任公司（自然人投资或控股）
公司地址：上海市嘉定区菊园新区昌徐路88号2幢1391室

㈧ 都有哪些关于遗传的谚语

1、一猪生九崽，连母十个样。——《民间俗语》

解释：母猪生下的都是小猪，不是其他的动物，则说明的是生物的遗传现象，而每个幼崽都不一样说明生物是回变异的，并不是一成不变。

2、龙生龙，凤生凤，老鼠生的儿子会打洞。——《民间俗语》

解释：龙生孩子是龙种，凤生孩子是凤种，老鼠生孩子是老鼠种。

3、桂实生桂，桐实生桐。——《民间俗语》

解释：桂树种子会长出桂树，桐树种子会长出桐树，形容亲子代之间的相似。

4、种瓜得瓜，种豆得豆。——《民间俗语》

解释：意思是种什么，收什么。瓜特性的遗传物质通过精子和卵细胞传递给孩子瓜，孩子瓜受这些遗传物质的控制，长大了就是跟爸爸妈妈一样的瓜 不可能是黄豆。

5、狗改不了吃屎。——《民间俗语》

解释：简单的说就是狗子抵御不了屎，对它的诱惑，因为在狗的眼里屎就是一盘美食。

㈨ 慢病毒包装试剂盒包出病毒的滴度一般是多少

不知道别的公司是什么样的，汉恒生物的滴度是这样的。还可以免费申请试用装

过表达慢病毒

＞10^8 PFU/ml

干扰慢病毒

＞10^8 PFU/ml