1. 菌落总数培养皿怎么数,片上面又有好多小点要数吗
很小的也要数,可借助放大镜。按照新GB,计算300以内的平板。
2. 如何数细菌个数
是这样的,如果你是固体接种那很难保证,如果是液体接种的话,从原液体培养管里面混合均匀后接种相同量的液体,细菌数就是一样的。我看你是要计数,所以还要梯度稀释,梯度稀释到一定浓度后,取0.1ml打到培养基表面,用涂布器涂布均匀,倒置于培养箱培养,24小时后取出数数,简单的办法是,拿着油性记号笔,数过的细菌个数都点上颜色,这样就不会重复计数了,有效计数范围是30~300个
3. 微生物平板菌落计数法具体实验步骤
一、目的要求
学习平板菌落计数的基本原理和方法。
二、基本原理
平板菌落计数法是根据微生物在固体培养基上所形成的一个菌落是由一个单细胞繁殖而成的现象进行的,也就是说一个菌落即代表一个单细胞。计数时,先将待测样品作一系列稀释,再取一定量的稀释菌液接种到培养皿中,使其均匀分布于平皿中的培养基内,经培养后,由单个细胞生长繁殖形成菌落,统计菌落数目,即可换算出样品中的含菌数。
这种计数法的优点是能测出样品中的活菌数。此法常用于某些成品检定(如杀虫菌剂),生物制品检定以及食品、水源的污染程度的检定等。但平板菌落计数法的手续较繁,而且测定值常受各种因素的影响。
三、器材
大肠杆菌悬液,牛肉膏蛋白胨培养基, 1ml无菌吸管,无菌平皿,盛有4. 5 ml无菌水的试管,试管架和记号笔等。
四、操作步骤
1.编号:
取无菌平皿 9套,分别用记号笔标明10-4、10-5、10-6各3套。另取6支盛有4.5ml无菌水的试管,排列于试管架上,依次标明10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6。
2.稀释
用1ml无菌吸管精确地吸取0.5ml大肠杆菌悬液放入10-1的试管中,注意吸管尖端不要碰到液面,以免吹出时,管内液体外溢。然后仍用此吸管将管内悬液来回吸吹三次,吸时伸入管底,吹时离开水面,使其混合均匀。另取一支吸管自10-1试管吸0.5ml放入10-2试管中,吸吹三次,……其余依次类推。整个稀释过程如图Ⅷ-3。
3.取样
用3支1ml无菌吸管分别精确地吸取10-4、10-5、10-6的稀释菌液0.2ml,对号放入编好号的无菌培养皿中。
4.倒平板
于上述盛有不同稀释度菌液的培养皿中,倒入溶化后冷却至45℃左右的肉膏蛋白胨琼脂培养基约10—15ml,置水平位置,迅速旋动混匀,待凝固后,倒置于37℃温室中培养。
5.计数
培养24小时后,取出培养皿,算出同一稀释度三个平皿上的菌落平均数,并按下列公式进行计算:
每毫升中总活菌数=同一稀释度三次重复的菌落平均数×稀释倍数×5
一般选择每个平板上长有30—300个菌落的稀释度计算每毫升的菌数最为合适。同一稀释度的三个重复的菌数不能相差很悬殊。由10-4、10-5、10-6三个稀释度计算出的每毫升菌液中总活菌数也不能相差悬殊,如相差较大,表示试验不精确。
平板菌落计数法,所选择倒平板的稀释度是很重要的,一般以三个稀释度中的第二稀释度倒平板所出现的平均菌落数在50个左右为最好。
平板菌蓓计数法的操作除上述的以外,还可用涂布平板的方法进行。二者操作基本相同,所不同的是涂布平板法是先将牛肉膏蛋白胨琼脂培养基溶化后倒平板,待凝固后编号,并于 37℃温室中烘烤30分钟左右,使其干燥,然后用无菌吸管吸取 0.2ml菌液对号接种于不同稀释度编号的培养皿中的培养基上,再用无菌玻璃刮棒将菌液在平板上涂布均匀,平放于实验台上20—30分钟,使菌液渗透入培养基内,然后再倒置于37℃的温室中培养。
五、实验报告
1.结果
将计数结果填入下表。
2.思考题
(1)为什么溶化后的培养基要冷却至45℃左右才能倒平板?
(2)要使平板菌落计数准确,需要掌握哪几个关键?为什么?
(3)同一种菌液用血球计数板和平板菌落计数法同时计数,所得结果是否一样?为什么?
(4)试比较平板菌落计数法和显微镜下直接计数法的优缺点。
4. 菌落总数计数时培养皿侧壁上有好多菌落怎么计数
固体培养基表面及内部的可见菌落(包括小点)均要计数,计数时可用笔在培养皿背面划线,分若干块计数
细菌菌落总数(CFU)的测定
一)平板菌落数的选择
1、进行平皿菌落计数时,记下同一浓度的3个平板(或2个)的菌落总数,计算平均值,再乘以稀释倍数即为1ml水样中的细菌总数。
2、计数时应选择菌落数在30~300/皿之间的稀释倍数进行计数,若同—个稀释度中一个平皿有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应以无片状菌落生长的平皿计数该稀释度的平均菌落数。若片状菌落少于平皿的一半时,而另—半中菌落分布又均匀,则可将其菌落数的2倍作为全皿的数目。在记下各平皿菌落数后,应算出同一稀释度的平均菌数,供下—步计算时用。
(二) 稀释度的选择
l、首先选择平均菌落数在30~300者进行计算,当只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时,即可用它作为平均值乘其稀释倍数。
2、若有两个稀释度的平均菌落数都在30~300之间,则应按两者的比值来决定。若其比值小于2,应报告两者的平均数;若大于2则报告其中较小的菌落数。
3、如果所有稀释度的平均菌落数均大于300,则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。
4、若所有稀释度的平均菌落数均小于30,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。
5、如果全部稀释度的平均菌落数均不在30~300之间,则以最接近300或30的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。
6、菌落计数的报告,菌落在100以内时按实有数报告;大于100时,采用二位有效数字;在二位有效数字后面的数值,以四舍五入方法计算。为了缩短数字后面的零数,也可用10的指数来表示,在所需报告的菌落数多至无法计算时,应注明水样的稀释倍数。
5. 菌落总数培养皿怎么数,片上面又有好多小点要数吗
固体培养基表面及内部的可见菌落(包括小点)均要计数,计数时可用笔在培养皿背面划线,分若干块计数
细菌菌落总数(CFU)的测定
一)平板菌落数的选择
1、进行平皿菌落计数时,记下同一浓度的3个平板(或2个)的菌落总数,计算平均值,再乘以稀释倍数即为1ml水样中的细菌总数。
2、计数时应选择菌落数在30~300/皿之间的稀释倍数进行计数,若同—个稀释度中一个平皿有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应以无片状菌落生长的平皿计数该稀释度的平均菌落数。若片状菌落少于平皿的一半时,而另—半中菌落分布又均匀,则可将其菌落数的2倍作为全皿的数目。在记下各平皿菌落数后,应算出同一稀释度的平均菌数,供下—步计算时用。
(二)
稀释度的选择
l、首先选择平均菌落数在30~300者进行计算,当只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时,即可用它作为平均值乘其稀释倍数。
2、若有两个稀释度的平均菌落数都在30~300之间,则应按两者的比值来决定。若其比值小于2,应报告两者的平均数;若大于2则报告其中较小的菌落数。
3、如果所有稀释度的平均菌落数均大于300,则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。
4、若所有稀释度的平均菌落数均小于30,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。
5、如果全部稀释度的平均菌落数均不在30~300之间,则以最接近300或30的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。
6、菌落计数的报告,菌落在100以内时按实有数报告;大于100时,采用二位有效数字;在二位有效数字后面的数值,以四舍五入方法计算。为了缩短数字后面的零数,也可用10的指数来表示,在所需报告的菌落数多至无法计算时,应注明水样的稀释倍数。
6. 微生物学怎么数菌落数
网络来的~
做样品前首先要根据食品的好坏程度来确定要做的稀释度,不太确定时最好多做几个稀释度。如果细菌长弥漫成片的话就没有任何价值。数菌落时,如菌落不太多时,可以用平均分配的方法,把平皿分四等分或六等分,数相对应的细菌数乘以2或3;菌落过多时可以分别在不同的区域选4个1平方厘米的小方块,数四个小方块的菌落数然后除以4再乘以64就得出菌落数了。