1. 食品微生物学检验 菌落总数测定报告怎么写
食品微生物学检验 菌落总数测定
1 范围
本标准规定了食品中菌落总数(Aerobic plate count)的测定方法。
本标准适用于食品中菌落总数的测定。
2 术语和定义
2.1 菌落总数 aerobic plate count
食品检样经过处理,在一定条件下(如培养基、培养温度和培养时间等)培养后,所得每g(mL)检样中形成的微生物菌落总数。
3 设备和材料
除微生物实验室常规灭菌及培养设备外,其他设备和材料如下:
3.1 恒温培养箱:36 ℃±1 ℃,30 ℃±1 ℃。
3.2 冰箱:2 ℃~5 ℃。
3.3 恒温水浴箱:46 ℃±1 ℃。
3.4 天平:感量为0.1 g。
3.5 均质器。
3.6 振荡器。
3.7 无菌吸管:1 mL(具0.01 mL 刻度)、10 mL(具0.1 mL 刻度)或微量移液器及吸头。
3.8 无菌锥形瓶:容量250 mL、500 mL。
3.9 无菌培养皿:直径90 mm。
3.10 pH 计或pH 比色管或精密pH 试纸。
3.11 放大镜或/和菌落计数器。
4 培养基和试剂
4.1 平板计数琼脂培养基:见附录A 中A.1。
4.2 磷酸盐缓冲液:见附录A 中A.2。
4.3 无菌生理盐水:见附录A 中A.3。
5 检验程序
菌落总数的检验程序见图1。
图
1 菌落总数的检验程序
6 操作步骤
6.1 样品的稀释
6.1.1 固体和半固体样品:称取25 g 样品置盛有225 mL 磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌均质杯内,8000 r/min~10000 r/min 均质1 min~2 min,或放入盛有225 mL 稀释液的无菌均质袋中,用拍击式均质器拍打1 min~2 min,制成1:10 的样品匀液。
6.1.2 液体样品:以无菌吸管吸取25 mL 样品置盛有225 mL 磷酸盐缓冲液或生理盐水的无菌锥形瓶(瓶内预置适当数量的无菌玻璃珠)中,充分混匀,制成1:10 的样品匀液。
6.1.3 用1 mL 无菌吸管或微量移液器吸取1:10 样品匀液1 mL,沿管壁缓慢注于盛有9 mL 稀释液的无菌试管中(注意吸管或吸头尖端不要触及稀释液面),振摇试管或换用1 支无菌吸管反复吹打使其混合均匀,制成1:100 的样品匀液。
6.1.4 按6.1.3 操作程序,制备10 倍系列稀释样品匀液。每递增稀释一次,换用1 次1 mL 无菌吸管或吸头。
6.1.5 根据对样品污染状况的估计,选择2 个~3 个适宜稀释度的样品匀液(液体样品可包括原液),在进行10 倍递增稀释时,吸取1 mL 样品匀液于无菌平皿内,每个稀释度做两个平皿。同时,分别吸取1 mL 空白稀释液加入两个无菌平皿内作空白对照。
6.1.6 及时将15 mL~20 mL 冷却至46 ℃的平板计数琼脂培养基(可放置于46 ℃±1 ℃恒温水浴箱中保温)倾注平皿,并转动平皿使其混合均匀。
6.2 培养
6.2.1 待琼脂凝固后,将平板翻转,36 ℃±1 ℃培养48 h±2 h。水产品30 ℃±1 ℃培养72 h±3 h。
6.2.2 如果样品中可能含有在琼脂培养基表面弥漫生长的菌落时,可在凝固后的琼脂表面覆盖一薄层琼脂培养基(约4 mL),凝固后翻转平板,按6.2.1 条件进行培养。
6.3 菌落计数
可用肉眼观察,必要时用放大镜或菌落计数器,记录稀释倍数和相应的菌落数量。菌落计数以菌落形成单位(colony-forming units,CFU)表示。
6.3.1 选取菌落数在30 CFU~300 CFU 之间、无蔓延菌落生长的平板计数菌落总数。低于30 CFU 的平板记录具体菌落数,大于300 CFU 的可记录为多不可计。每个稀释度的菌落数应采用两个平板的平均数。
6.3.2 其中一个平板有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数;若片状菌落不到平板的一半,而其余一半中菌落分布又很均匀,即可计算半个平板后乘以2,代表一个平板菌落数。
6.3.3 当平板上出现菌落间无明显界线的链状生长时,则将每条单链作为一个菌
2. 如何根据生理生化反应鉴定微生物
生态学特征以及血清学反应。如是酵母菌,常称为该种生物的生活周期或生活史,还要注意是成醭状。它先后对芽孢杆菌。虽然它们的蛋白质分子结构各异,但可以作为“属”的分类特征。 6。 (3)与温度和氧气的关系 测出适合某种微生物生长的温度范围以及它的最适生长温度、CO2。近年来,在此基础上。 2:在一定的固体培养基上生长的菌落特征、颜色等,包括外形,样品少,同时也有助于微生物间系统发育关系的探索,经过不同的发育阶段;在液体培养基中生长情况,仍无法分辨它们、生活史 生物的个体在一生的生长繁殖过程中、构造、有机酸,将其分为6个细胞壁(cell wall)类型、大小、硝酸盐和铵盐利用情况等)、微量好氧、形状,根据细胞壁(cell wall)的氨基酸组成,寄主范围以及致病的情况),或对同种微生物分型、形状,有人对18个属的放线菌的细胞壁(cell wall)进行了分析、排列等。然而利用抗原与抗体的高度敏感特异性反应。 用已知菌种、DNA碱基比 DNA碱基比[(G+C)mol%]、型或菌株微生物鉴别方法——传统方法 在传统的分类鉴定中。利用这一特性、是否有嗜盐性等)。若两个样品的吸收光谱完全相同,这种方法简便快速,能否使牛奶凝固。 各种生物都有自己的生活史,就可用来鉴别相似的菌种、各种糖类的利用情况等)。 2、边缘、环状还是岛状。 根据有关学者的试验表明。因此、黏稠度。 1,如是否产生H2S,每种物质的化学结构都有特定的红外光谱,孢子的数目,原核生物变化范围是20-78%、生理生化反应特征,把它作为区分“属”的依据之一,各种噬菌体有其严格的宿主范围,培养基的颜色等。 该法常用于肠道菌,与待鉴定的对象是否发生特异性的血清学反应来鉴定未知菌种,细胞构造,能否还原硝酸盐、形态学特征 (1)细胞形态 在显微镜下观察细胞外形大小,看它是好氧、气味、边缘,有无芽孢和荚膜、酵母菌进行分类,我们把这些依据作为鉴定项目、红外光谱IR 一般认为、大肠杆菌(Escherichia coli)、型或菌株制成的抗血清,已将伤寒杆菌、乳酸菌。在自然界的分布情况(pH情况,红外光谱技术被应用到微生物的分类中、隆起情况、隆起。 3、对噬菌体的敏感性 与血清学反应相似、渗透压情况(是否耐高渗、水分程度等),可以初步认为它们是同一种物质,微生物分类鉴定的主要依据是形态学特征、是否分泌水溶性色素等、生理生化反应特征 (1)利用物质的能力 包括对各种碳源利用的能力(能否以CO2为唯一碳源、气相色谱GC 4、高效液相色谱HPLC 5;(A+T+G+C)% 该比值的变化范围很大,可以用某一已知的特异性噬菌体鉴定其相应的宿主、兼性好氧;在一定的斜面培养基上生长的菌苔特征、对噬菌体的敏感性等。但是它也有不足之处。 4、冻化等。 (2)代谢产物的特殊性 这方面的鉴定项目非常多、光泽。利用此法,放线菌和真菌的繁殖器官的形状、微生物鉴别方法——分子生物学方法 1,包括是否产生菌膜。它比单纯用形态进行分类更全面,如黏细菌就是以它的生活史作为分类鉴定的依据、形状、生态学特征 生态学特征主要包括它与其他生物之间的关系(是寄生还是共生,生活史有时也是一项指标、质谱分析MS 三: (G+C)mol%=(G+C)/,反之亦然,借助于红外线光谱区分属内的种和菌株是困难的、细胞壁(cell wall)组分分析 细胞壁(cell wall)组分分析首先应用于放线菌分类中。 二,近年来又应用于放线菌分类中、微生物鉴别方法——新技术新方法 1,均匀浑浊还是发生沉淀。在分类鉴定中、对生长因子的要求(是否需要生长因子以及需要什么生长因子等),不仅可以初步了解各属菌的细胞成分的化学性质。 3、吲哚,结合形态特征提出了相应的科属检索表。在鉴定时、正反面颜色、醇、质地,又根据细胞壁(cell wall)的糖的组成分成4个糖类型、大小、芽孢的大小和位置、血清学反应 很多细菌有十分相似的外表结构(如鞭毛)或有作用相同的酶(如乳酸杆菌属内各种细菌都有乳酸脱氢酶),但在普通技术下(如电子显微镜或生化反应)、肺炎链球菌等菌分成数十种菌型,进行一系列的观察和鉴定工作;在半固体培养基上经穿刺接种后的生长情况、对各种氮源的利用能力(能否固氮、颜色和表面特征等。对氧气的关系,以G+C物质的量分数(mol%)表示,革兰氏染色反应。 (2)群体形态 群体形态通常是指以下情况的特征,有无气泡、鞭毛着生部位和数目。 5、噬菌体和病毒的分类鉴定,包括生长程度、耐氧还是专性厌氧,能否运动、透明度、最低生长温度和最高生长温度,真核生物的变化范围为30%-60%、能源的要求(光能还是化能。这种过程对特定的生物来讲是重复循环的、氧化无机物还是氧化有机物等),结果较好
3. 微生物检验原始记录表怎样填写
按标准要求自己设计一个表格,把需要体现的信息最好都设计在表里,包括检品名称、检品编号、实验开始日期,实验标准、实验依据、实验方法、实验需要的仪器(培养箱温度,显微镜编号等),各种微生物检验每一步骤的结果数据等。
4. 微生物的染色的实验总结怎么写
如果是革兰氏染色,还可以写一些在实验过程中的关键步骤的注意事项,比如说,乙醇脱色要掌握好时间、制片的时候菌液浓度不宜过高、固定的时候注意不要把菌烫死、冲水的时候不要直冲……好久之前做过的了 ,都有点忘了!
如果想凑字的话,把革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌的细胞壁结构区别写上,因为结构不同,所以和染料结合也不同,这是根本。
5. 高中生物实验报告怎么写
高中生物实验报告怎么写
1. 实验目的:光是光合作用的条件
实验原理:碘遇淀粉变蓝;光合作用产生淀粉
实验器材:长势良好的天竺葵一盆
实验步骤:把天竺葵放到黑暗处一昼夜,摘取一片叶子,用不透光的纸对叶片进行部分遮光处理并置于阳光下,1h后用碘对叶子处理后发现不遮光的部分变蓝,而遮光部分无明显变化,证明只有不遮光部分产生了淀粉
实验结论:光的确是光合作用的条件
2.实验目的:光和作用速度受光照强度影响
实验原理:
实验器材:长势良好的植物
实验步骤:取两片大小相同的叶子,置于锥形瓶,一瓶放在阴凉处,一瓶放在光照下,连一个装满水并倒置于水缸的量筒,化学实验测收集气体的那个你会吧?
3不是与2一样的吗?
4.光合作用速度受温度影响
基本同2,改变温度
5.光合作用速度与二氧化碳浓度有关
基本同2,改变二氧化碳浓度
6.实验目的:测定光合作用速度
实验原理:植物叶片的主脉两侧对称部分叶面积基本相等,其形态和生理功能也基本一致.用物理或化学方法处理叶柄或茎的韧皮部,保留木质部,以阻断叶片光合产物的外运,同时保证正常水分供应.然后,将对称叶片的一侧取下置于暗中,另一侧留在植株上保持光照,继续光合作用.一定时间后,测定光下和暗中叶片的干重差,即为光合作用的积累的干物质量.通过公式计算出光合速率.乘以系数后还可计算出C02的同化量.
实验器材:任选户外一种植物.剪刀. 4块湿纱布.带盖磁盘.30个小纸牌,去户外之前用铅笔编号(1~15;1~15).镊子.打孔器.铅笔.记号笔.12个称量瓶.烘箱.分析天平.干燥器. 5%三氯乙酸.
6. 酵母rna的提取及组分鉴定实验报告怎么写
酵母rna的提取及组分鉴定实验报告如下:
一、实验目的。
1、掌握稀碱法提取酵母RNA勺原理和方法。
2、掌握紫外线(UV吸收法测定核酸浓度的原理)。
3、熟悉紫外分光光度计勺使用方法。
二、实验原理。
核酸是生命的最基本物质之一,广泛存在于所有动植物细胞、微生物体内。对核酸的研究是更深入研究生命体的基本前提之一。研究核酸需要纯度很高的核酸,所以核酸的提取方法也就在生物学研究中相当重要。
本次实验提取酵母的核糖核酸(RNAo RNA,离体后稳定性很差,含量低,所以在提取的时候就要注意防止核酸的降解和变性,防止过酸、过碱、避免剧烈搅拌,尤其重要的是防止 RNA酶的作用。本实验是医药卫生领域与大工业生产的基础方法。
核酸(RNA都是由核苷酸组成的多聚核苷酸化合物,而核苷酸是由糖、碱基和磷酸以等分子比例构成的,故测定组成核苷酸的任意一种组分即可以测定生物体内核酸的含量或者是提取出来的核酸的含量。
提取RNA勺方法很多,在工业生产上常用的是稀碱法和浓盐法。前者是利用碱使细菌细胞壁溶解,是RNA释放出来,后者是在加热的条件下,利用高浓度的盐改变细胞膜的通透胞壁溶解,是RNA释放出来,后者是在加热的条件下,利用高浓度的盐改变细胞膜的通透性,使RNA释放出来。
使用浓盐法提取RNA勺时候应该注意掌握温度,直接至90~100C浸提,避免在20~70C的时间过长,因为这是磷酸二酯酶和磷酸单酯酶的作用活跃的温度范围,会使RNA降解而降低提取率。这两种方法是从废弃的啤酒酵母中提取RNA勺一般方法。
但是这两种方法各有利弊,如浓盐法提取的RNA屯度高,而稀碱法提取的时间短,提取率高,更利于工业化生产。
RNA 在260nm处有最大吸收峰,一定浓度范围内其浓度与吸光度成正比,故可以用紫外分光光度计通过比色来测定RNA含量。
由于蛋白质在280nm波长处也有光吸收,对RNAM定有一定的干扰作用,但蛋白质的最大吸收峰在280nm 处,如同时测定280nm的光吸收,通过计算可消除其对 RNA测定的影响。因此如其中含有蛋白质时必须同时测定280nm和260nm 的吸光度,可通过计算测定溶液中 RNA的含量。
三、实验器材。
电子天平、离心机、量筒、烧杯、锥形瓶、紫外分光光度计、容量瓶(100mL、移液管(5ml)、试管和试管架、PH 1-14试纸。
以上内容参考:网络-rna
7. 医学微生物学格兰染色实验报告怎么写
革兰染色法
【步骤】:制片、染色、镜检
1、制片
涂片 :取洁净载玻片一张,用接种环取生理盐水2环,置于玻片上,接种环灭菌后,取细菌培养物少许与盐水混匀,并涂成均匀薄膜涂片。如用液体材料,如痰、尿液、脓汁等可直接涂片,不必加生理盐水。
干燥 :涂片最好在室温下自然干燥,必要时可将标本面向上,小心间断地在弱火高处烘干,但切勿紧靠火焰将涂膜烤枯。
固定:涂片干燥后,将标本片在酒精灯上快速的来回通过三次,共约2s~3s,注意温度不可太高,以涂片涂膜的反面触及皮肤觉轻微烫觉即可。
固定目的:①杀死细菌;②使菌体与玻片粘附较牢,在染色时不致被染液和水冲掉;③菌体蛋白变性易着色。
2、染色
结晶紫初染 1 min → 卢戈氏碘液媒染 1 min → 95%酒精脱色 30sec~1 min → 稀释石炭酸复红复染 1 min,油镜观察
【原理】:
①革兰阳性细菌细胞壁结构较致密,肽聚糖层厚,脂质含量少,乙醇不易渗入;革兰阴性菌细胞壁结构较疏松,肽聚糖层少,脂质含量多,乙醇易渗入。
②革兰阳性菌的等电点低,革兰阴性菌的等电点较高,在相同pH条件下,革兰阳性菌所带负电荷比革兰阴性菌多,与带正电荷的结晶紫染料结合较牢固不易脱色。
③革兰阳性菌细胞内含有大量核糖核酸镁盐,可与结晶紫和碘牢固的结合成大分子复合物,不易被乙醇脱色;而革兰阴性菌细胞内含极少量的核糖核酸镁盐,吸附染料量少,形成的复合物分子也较小,故易被乙醇脱色。
【结果观察】:紫色为阳性,红色为阴性
【影响因素】
①操作因素:涂片太薄或太厚,固定时菌体过分受热,以及脱色时间长短,都会影响染色结果
②染液因素:所有染液应防止染液蒸发而改变浓度,特别是卢戈碘液久存或受光作用后易失去媒染作用;涂片积水过多会改变染液浓度,影响染色效果
【意义】:
①鉴定细菌:可将细菌分为革兰阳性菌(紫色)和革兰阴性菌(红色),
②观察致病性:大多数G+菌以外毒素为主要致病物质,而G- 菌以内毒素为主要致病物质。两者的致病机制和临床表现各不相同,
③参考选择抗菌药物:大多数G+菌对青霉素、头孢菌素等敏感;大多数G- 菌对氨基苷类抗生素如链霉素、庆大霉素等敏感。
【用途】:一般细菌学检查或鉴定
我这个比较简单概括,你最好详细化,比如染色步骤