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如何进行生物提纯复壮

发布时间:2022-09-21 17:59:43

Ⅰ 如何对微生物菌种进行活化

有同学已经说的很专业了,我就给你说些简单实用的。不知道你出于何种目的要进行活化。如果你是用冻存管保存的菌株进行活化,取出2颗小珠放在适宜的固体培养基上,合上盖让小珠在平皿上滚动,适宜条件培养就可以了。长出一个菌落,你再繁殖就可以了。如果你是冻干粉的菌种,准备适宜的液体培养基,少少一点点粉末接种就可以了,根据此菌种一般液体培养所需时间,大概在36-48h,你还可以在观察到液体浑浊、试管底部有沉淀时(沉淀者也可能为原本死亡的细菌),取100微升液体涂抹在固体培养基上。
一般的话,复苏的菌种需要重复几次复壮。

Ⅱ 如何进行生物大分子的分离提纯

用凝胶过滤层析法
是最好的方法之一。
可以分离不同大小的物质例如蛋白质混合物、胶体混合物等等。
大分子物质先出来,小分子物质后出来。

Ⅲ 如何进行微生物活化

楼上太绝对了。

除了平板你还可以用液体培养基活化,按照1%的接种量接种到新鲜液体培养基。

如果是甘油管的活化,建议还是液体活化。

保温温度和时间根据不同的菌种自己调整。

Ⅳ 如何纯化微生物

你可以采取以下两种方法:
1.若是你不知道你所要纯化的微生物的特征,最简单的不知道它的菌落特征和形态大小,那现根据你要分离菌的特性,找适合的初筛培养基,找到你要纯化的菌。如纤维素菌,你在培养基中加纤维素粉或CMC-Na作碳源,这样就可以帅选出分解纤维素的菌。然后再用下面的方法继续纯化。
2.若你知道目标菌的形态,可以直接挑混合菌划平板,直到长出当个菌落,并且在镜下没有杂菌即可;或者挑菌稀释涂布得到当个菌落也行。
若有不明白可以问我!

Ⅳ EM生物菌剂如何自行培育

EM有效微生物菌剂是一种新型的复合微生物制剂,呈棕色半透明状液体,PH值在3.5~4.5之间,由光合菌,乳酸菌,酵母菌,放线菌群,醋酸杆菌等5个科10个属80多种厌氧性或嫌氧性正常微生物复合培养而成,不含任何化学有害物质,无毒副作用,不污染环境。土着菌就是em菌, 土着菌就生活在我们周围的自然环境中,走进阔叶树林或竹林,在落叶且腐殖质多地方,扒开树叶或杂草就可以看到细丝壮白色菌落,这就是有益的土着微生物。

土着微生物是多种有益微生物的混合群,土着微生物按好嫌气性分有好气菌、嫌气菌;按菌种分有酵母菌、曲霉菌、放线菌、乳酸菌、芽孢菌等。

可以在不同的季节、不同的地点采集不同的菌种。采集到的原始菌种应放在室内阴凉、干燥处保存。

土着菌采集方法 :

1、采集地方:可以在当地山上落叶聚集较多的山谷、树林中采集。

2、具体办法:把做的稍微有一点硬的大米饭(1kg~1.5kg),装入用干净杉木板做的小木箱(25cm×20cm×10cm)约三分之一,大米饭上面盖上宣纸,封好口,将其埋在当地山上落叶聚集较多的山谷树林中。为防止野生动物糟蹋,木箱最好罩上铁丝网。夏季经三~五天,春秋经六~七天,周边的土着微生物潜入到米饭中,在米饭上形成白色菌落(放置时间稍长时会形成各种颜色菌落,虽然也能利用,但最好还是用白色菌落)。

3、扩陪方法:把变的稀软状态的米饭取回后装入坛子里,土着菌采集成功后掺入原材料量1/3左右的红糖,将其混合均匀(数量按坛子容量的三分之一),把变的稀软状态的米饭装入坛子里,盖上宣纸,用线绳系好口,放置在温度18℃左右地方。大约放置7天左右,就会变成浓稠液体状态,饭粒多少会有些残留,但不碍事。简单过滤后就是土着微生物菌种原液。 用的时候直接稀释后和EM菌种原液一起使用!

2)水田土着微生物采集方法
秋天,在刚收割后的稻茬上有白色液体溢出。把装好米饭并盖宣纸的木箱倒扣在稻茬上,这样稻茬穿透宣纸接触米饭,很容易采集到稻草菌。约7天后,木箱的米饭变成粉红色稀泥状态,同(1)方法,米饭与红糖以2:1比例拌匀装坛子、盖宣纸、系绳。5-7后内容物变成原液(原原种)。

以下步骤适用于菌种生产单位实验室!普通用户可以不做!

4、提纯复壮: 有条件的可以在实验室进行

一般情况下,采来的样品可以直接进行分离,但是如果样品中我们所需要的菌类含量并不很多,而另一些微生物却大量存在。此时,为了容易分离到所需要的菌种,让无关的微生物至少是在数量上不要增加,即设法增加所要菌种的数量,以增加分离的几率。可以通过选择性的配制培养基(如营养成分、添加抑制剂等),选择一定的培养条件(如培养温度、培养基酸碱度等)来控制。具体方法是根据微生物利用碳源的特点,可选定糖、淀粉、纤维素,或者石油等,以其中的一种为唯一碳源,那么只有利用这一碳源的微生物才能大量正常生长,而其他微生物就可能死亡或淘汰。对G一菌有选择的培养基(如结晶紫营养培养基、红—紫胆汁琼脂、煌绿胆汁琼脂等)通常含有5%~10%的天然提取物。在分离细菌时,培养基中添加浓度一般为50μg/m1的抗真菌剂(如放线菌酮和制霉素),可以抑制真菌的生长。在分离放线菌时,通常于培养基中加入1~5m1天然浸出汁(植物、岩石、有机混合腐质等的浸出汁) 作为最初分离的促进因子,由此可以分离出更多不同类型的放线菌类型;放线菌还可以十分有效地利用低浓度的底物和复杂底物(如几丁质),因此,大多数放线菌的分离培养是在贫脊或复杂底物的琼脂平板上进行的,而不是在含丰富营养的生长培养基上分离的;在放线菌分离琼脂中通常加入抗真菌剂制霉菌素或放线菌酮,以抑制真菌的繁殖;此外,为了对某些特殊种类的放线菌进行富集和分离,可选择性地添加一些抗生素(如新生霉素)。在分离真菌时,利用低碳/氮比的培养基可使真菌生长菌落分散,利于计数、分离和签定;在分离培养基中加入一定的抗生素如氯霉素、四环素、卡那霉素、青霉素、链霉素等即可有效地抑制细菌生长及其菌落形成;抑制细菌的另外一些方法有:在使用平皿之前,将平皿先干燥3~4天;降低培养基的pH值或在无法降低pH时,加入1:30000玫瑰红。这样有利于下阶段的纯种分离。

通过增殖培养,样品中的微生物还是处于混杂生长状态。因此还必须分离,纯化。在这一步,增殖培养的选择性控制条件还应进一步应用,而且要控制得细一点,好一点。同时必须进行纯种分离,常用的分离方法有稀释分离法、划线分离法和组织分离法。稀释分离法的基本方法是将样品进行适当稀释,然后将稀释液涂布于培养基平板上进行培养,待长出独立的单个菌落,进行挑选分离。划线分离法要首先倒培养基平板,然后用接种针(接种环)挑取样品,在平板上划线。划线方法可用分步划线法或一次划线法,无论用哪种方法,基本原则是确保培养出单个菌落。组织分离法主要用于食用菌菌种或某些植物病原菌的分离。分离时,首先用10%漂白粉或0.1%升汞液对植物或器官组织进行表面消毒,用无菌水洗涤数次后,移植到培养皿中的培养基上,于适宜温度培养数天后,可见微生物向组织块周围扩展生长。经菌落特征和细胞特征观察确认后,即可由菌落边缘挑取部分菌种进行移接斜面培养。

对于有些微生物如毛霉、根霉等在分离时,由于其菌丝的蔓延性,极易生长成片,很难挑取单菌落。常在培养基中添加0.1%的去氧胆酸钠或在察氏培养基中添加0.1%的山梨糖及0.01%的蔗糖,利于单菌落的分离。

经过分离培养,在平板上出现很多单个菌落,通过菌落形态观察,选出所需菌落,然后取菌落的一半进行菌种鉴定,对于符合目的菌特性的菌落,可将之转移到试管斜面纯培养。这种从自然界中分离得到的纯种称为野生型菌株,它只是筛选的第一步,所得菌种是否具有生产上的实用价值,能否作为生产菌株,还必须采用与生产相近的培养基和培养条件,通过三角瓶的容量进行小型发酵试验,以求得适合于工业生产用菌种。这一步是采用与生产相近的培养基和培养条件,通过三角瓶的容量进行小型发酵试验,以求得适合于工业生产用菌种。如果此野生型菌株产量偏低,达不到工业生产的要求,可以留之作为菌种选育的出发菌株。

活性好的土着菌可以用由人工培养、扩陪成纯度高的微生物菌群!
土着菌发酵床养猪技术、养鸡技术是利用自然环境中的生物资源,采集土壤中的多种有益微生物进行培养扩繁,使其形成有相当活力的微生物母种,再按一定比例将微生物母种与锯木屑等辅料和活性剂混合发酵形成有机垫料。让猪、鸡从小到大都生活在这种有机垫料上,猪、鸡的排泄物被有机垫料里的微生物迅速降解、消化,不需进行人工处理,达到零排放。

Ⅵ 如何对微生物菌种进行活化

菌种活化就是将保藏状态的菌种放入适宜的培养基中培养,逐级扩大培养是为了得到纯而壮的培养物,即获得活力旺盛的、接种数量足够的培养物。菌种发酵有一般需要2-3代的复壮过程,因为保存时的条件往往和培养时的条件不相同,所以要活化,让菌种逐渐适应培养环境
要明白菌种活化的情况就需要了解菌种保藏的方式和方法。目前国际国内常用的菌种保存方法包括:定期移植法、液体石蜡法、沙土管法、真空冷冻干燥法、80℃ 冰箱冻结法、液氮超低温冻结法。
对于不同的保存方式活化的方式也不同:
1 定期移植法的菌种复苏较简单,直接转接即可;
2 液体石蜡法保存的菌种在复苏时,挑取少量菌体转接在适宜的新鲜培养基上,生长繁殖后,再重新转接一次;
3 沙土管法保存菌种在复苏时,在无菌条件下打开沙土管,取部分沙土粒于适宜的斜面培养基上,长出菌落后再转接一次。或取沙土粒于适宜的液体培养基中,增殖培养后再转接斜面;
4 真空冷冻干燥法保存菌种在复苏时先用70%酒精棉花擦拭安瓿上部,将安瓿管顶部烧热, 用无菌棉签沾冷水,在顶部擦一圈,顶部出现裂纹,用挫刀或镊子颈部轻叩一下,敲下已开裂的安瓿管的顶端,用无菌水或培养液溶解菌块,使用无菌吸管移入新鲜培养基上,进行适温培养;
5 -80℃ 冰箱冻结法保存菌种复苏时,从冰箱中取出安瓿管或塑料冻存管,应立即放置38℃-40℃水浴中快速复苏并适当快速摇动。直到内部结冰全部溶解为止,约需50秒-100秒。开启安瓿管或塑料冻存管,将内容物移至适宜的培养基上进行培养
6 液氮超低温冻结法保存菌种复苏与-80℃ 冰箱冻结法保存菌种复苏相似,从液氮罐中取出安瓿管或塑料冻存管,应立即放置在38℃-40℃水浴中快速复苏并适当摇动。直到内部结冰全部溶解为止,一般约需50秒-100秒。开启安瓿管或塑料冻存管,将内容物移至适宜的培养基上进行培养。
总结一下菌种活化需要以下几个步骤:

第一配置菌种适宜生长的培养基

第二将菌种从保藏状态恢复到室温状态,比如将冷冻的菌种解冻

第三将通过操作将保藏的菌种接种到培养基中培养,此步骤称为菌种复壮

第四步挑选培养基茁壮的菌落,挑选其中部分菌落接种到新的培养基中培养,重复此步骤2-3次,从而得到生长良好的菌落

经过这四个步骤就到达将菌种从保藏状态活化的目的

希望对你有帮助!

Ⅶ 如何从自然界中分离纯化自己想要的目的微生物

这个过程叫做“筛选”。
首先确定你所要筛选的目的微生物,并设计好“筛子”。以纤维素酶产生菌的筛选为例。
先找可能存在此类微生物的环境,如森林里的枯枝烂叶和腐质土。采好样品,拿回实验室,首先进行扩大培养。就是把样品中所有的微生物都培养增殖。一般就用全营养培养基。
培养液稀释不同倍数后,做平板单细胞培养,这时就要用到“筛子”了。对于纤维素酶产生菌,筛子可选用可溶性纤维素。平板培养时,用可溶性纤维素作唯一碳源,不产生纤维素酶的微生物就不能生长(或生长极弱),把生长良好的微生物挑选出来,再进行扩大培养,再用纤维素唯一碳源的培养基进行筛选,并挑选生长优势菌落,重复以上步骤(可以多挑选几支进行对比选择)。几次以后,用纤维素粉(不溶性的)做唯一碳源的培养基,进行平板培养,纤维素酶产生量越大、活性越高,产生的透明圈直径就越大。用这种办法可能对酶产生量大、活性高的菌种做进一步筛选。
其它目的微生物的筛选步骤也差不多。
关键是采样地点的选择和“筛子”的设计。
希望对你有用。

Ⅷ EM水是什么

EM是由乳酸菌群、酵母菌群、光合菌群等五大类微生物中的多种有益微生物组成有效微生物群。是由日本琉球大学比嘉照夫教授经过多年研究取得的科技成果。在此基础上,徐会连博士(可以在网络上,搜徐会连,了解他的事迹和科研成果)等生物学家又进行了更深入的研究,通过对EM菌群的提纯复壮,分离优势菌株,经科学加工而制成EM益生菌多效活性液系列产品。EM益生多效活性液的面世,对发展有机农业和高效农业,加快我国由传统农业与国际农业接轨,必将起到巨大的促进作用。

Ⅸ 如何纯化微生物

1选择适合于待分离微生物的生长条件,如营养,酸碱度,温度和氧等要求或加入某种抑制造成只剩于该微生物生长,而抑制其他微生物生长的环境,从而淘汰一些不需要的微生物
2微生物在固体培养基上生长形成的单个菌落可以是由一个细胞繁殖而成的集合体

Ⅹ 水稻种子怎么提纯,要注意什么

优良水稻品种经多年种植就会混杂、退化,导致水稻产量降低,品质变劣。因此,在种植过程中需要不断地进行提纯复壮,保持水稻品种的纯度和种性,才能持续高产稳产。现介绍水稻品种提纯复壮关键技术,供稻农自选自留自用水稻品种时参考。
1.防混杂
为了保持良种的种性,在水稻生产栽培和良种繁殖的过程中,应严防机械混杂和生物混杂,注意去杂去劣,延缓良种使用年限。一般混杂退化的种子减产5%-10%以上,所以提醒稻农自己选留稻种防止混杂是重要的一环。
2.片选法
片选法可以在品种纯度较高的水稻生产田或种子田进行。片选田块越早确定越好,以便注意防止混杂和加强田间管理,最晚在出穗后成熟前,选择整齐一致无病虫的田块,进行去杂去劣,拔除病株、劣株,成熟后单收、单打、单藏,作为下年用种。
3.穗选法
穗选法是一种简单有效的水稻品种提纯复壮方法。穗选一般于水稻成熟时收割前,在品种纯度较高、栽培管理水平较好的田块进行。根据品种特征特性,选择典型穗,要防止见大穗就选的倾向。将选出的稻穗扎成把、挂起风干,经脱谷后,妥善保管,留作下年种子田用。
4.扩大繁殖
片选、穗选的种子若不够生产用种应扩大繁殖,选择条件较好的田块作种子田,一个品种应连片种植,附近的田块也应种植同一品种,以减少天然杂交和机械混杂。生育期间进行去杂去劣,加强田间管理,秋后单收单打,作为下年生产用种。

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