‘壹’ 如何测定土壤中特定细菌的数量
显微镜直接计数法和稀释平板计数法是测定微生物数量的常用方法。直接计数法中常用的是显微镜直接计数法，这种方法是先将待测样品制成悬液，然后取一定量的悬液放在显微镜下进行计数(图1-3-1)。根据在显微镜下观察到的微生物数目来计算出单位体积内的微生物总数。直接计数法所需设备简单，可迅速得到结果，而且在计数的同时能观察到所研究微生物的形态特征，其缺点是难以计数微小的细菌。这种方法一般适用于纯培养悬浮液中各种单细胞菌体的计数。间接计数法最常用的是稀释平板计数法，它是根据微生物的培养特征而设计的计数方法。这种方法在样品中含菌数较少的情形下，也可以完成计数。应用稀释平板计数法计数时，需要将待测样品配制成均匀的系列稀释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开。再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内；或是将一定量的稀释液，与溶化后冷却至45℃左右的琼脂培养基混合，倾入无菌培养皿中，摇匀、静置待凝。经过培养后，就由单个微生物生长繁殖形成菌落，这样的一个菌落就代表着一个微生物个体。统计培养基中出现的菌落数，即可推算出检测样品中的活菌数。FOR EXAMPLE:] 土壤中好气性细菌的计数土壤中生活的微生物种类和数量是极其丰富的，这些数量众多的微生物对提高土壤肥力有重要作用。因此，测定土壤中的含菌量可以作为判定土壤肥力的一个重要指标。材料器具土壤样品；牛肉膏蛋白胨琼脂培养基(附录二)、无菌水；培养皿、移液管、天平、锥形瓶、试管、酒精灯、恒温培养箱、摇床等。活动程序1.制备土壤稀释液取土壤表层5～10 cm 处的土样。准确称取1 g 土样，放入盛有99 mL 无菌水的锥形瓶(250 mL，放有小玻璃珠)中，用手或摇床振荡20 min，即制成102 倍的稀释液。用1 mL无菌移液管，吸取10 2倍稀释液0.5 mL，移入装有4.5 mL无菌水的试管中，配制成103 倍稀释液。用同样的方法可制成稀释倍数为104、105、106 的系列稀释菌液(图1-3-2)。图移液时，要将移液管插入液面，吹吸3 次，每次吸上的液面要高于前一次，让菌液混合均匀并减少稀释中的误差。每配一个稀释度要换用一支移液管。2.取样及倒平板将无菌培养皿编号，依次为104、105、106，每一号码设置三个重复。用无菌移液管三支，分别吸取稀释倍数为104、105、106的土壤稀释液各0.2 mL，注入到相应编号的培养皿中(每个稀释倍数各三个培养皿)。将已灭菌牛肉膏蛋白胨琼脂培养基溶化，待冷却至45～50 ℃左右，倾入到无菌培养皿中，每皿约15 mL，轻轻转动培养皿，使土壤稀释液与培养基混合均匀。3.培养将上述接种好的平板培养基冷却后，倒置放入28～30 ℃的恒温培养箱中培养24～36 h，直至长出菌落为止。4. 观察记录将实验中得到的菌落数填入表1-3-1。结果分析1.选取具有合适菌落数的稀释倍数并计数。在计算结果时，从接种的3 个稀释度中选择一个合适稀释倍数，统计出菌落数(图1-3-3)。选择的原则是：过(1) 细菌、放线菌、酵母菌以每个培养皿内有30～300 个菌落为宜。霉菌以每个培养皿内有10～100 个菌落为宜。(2) 同一稀释倍数各个重复的菌落数相差不太悬殊。2.将统计出的菌落数按下列公式计算，得出每克样品菌数。每克土壤样品菌数= 某稀释倍数的菌落平均数×稀释倍数
‘贰’ 如何测定土壤中特定细菌的数量
直接计数法和稀释平板计数法是测定微生物数量的常用方法.
测量土壤中微生物，一般采用平板计数法，因为直接计数法只能依靠肉眼在显微镜下观察，误差较大。
1、采集特定地区的土壤作为待测样品。
2、要将待测样品配制成均匀的系列稀释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开。
3、再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内； 或是将一定量的稀释液，与溶化后冷却至45℃左右的琼脂培养基混合，倾入无菌培养皿中，摇匀、静置待凝。（选用细菌培养基：牛肉膏、蛋白胨、琼脂、氯化钠）
4、经过培养后，就由单个微生物生长繁殖形成菌落，这样的一个形态的菌落就代表着一个微生物个体。统计培养基中出现的菌落数，即可推算出检测样品中的活菌数。
‘叁’ 怎么测定土壤中微生物啊大家来帮帮忙！
，加入蒸馏水，小心震荡。
2作为土壤微生物，应为它们种类繁多，如果真菌的颜色不明，要有一个提取的过程。
1，可以用高倍的光学显微镜.制作土壤浸出液。
4：取干净土壤.培养：使用完全培养皿，滴入浸出液，培养
3.长出菌落后，根据菌落的形状大小，有些是真菌菌落，有些是细菌菌落，真菌菌落可先用肉眼观察，再都制成生物涂片，分层后取出上层清液。观察真菌可以用较低倍数的光学显微镜，可染色处理，对于细菌的观查，共生在一起，要想观察好
‘肆’ 土壤微生物数量的测定方法
很恶心的方法 您确定要试么
有一个叫做微生物细胞数量的平板培养记数法
原理就是通过将样品制作成一系列不同稀释浓度的稀释液 使样品中的微生物细胞充分分散 形成耽搁细胞存在. 然后 取一定量的稀释液接种 均匀分布在特定的培养基上. 经过培养后 有单个微生物生长繁殖形成菌落. 根据平板上的菌落数 计算样品中的微生物活菌数量
步骤包括 均样品稀释液的制备;平板接踵培养及记数等几个步骤
一般要做3种培养基 常见的是 细菌-牛肉膏蛋白胨琼脂培养基; 真菌-马铃薯琼脂培养基; 放线菌-淀粉铵琼脂培养基
公式 每克干样品含菌数=[菌落平均数*稀释倍数]/[接种量毫升数*(1-含水量)]
总之是恶心又麻烦 劳民伤财的实验.....
土壤的话 可以测湿土和烘干后的 公式8一样
‘伍’ 土壤微生物数量的测定方法
取一定重量的土壤，称取1g，置于100ml无菌水中，充分振荡，然后离心，取上清液，就得到土壤浸出液（可以看做土壤中的微生物全部转移至水中）。然后做梯度稀释，取一定稀释度的溶液，涂平板，培养后数菌落数，然后乘上稀释倍数，就可得到1g土壤中该微生物的数量。
例如，你在稀释10的7次方的平板上数出了15个菌落，则1g土壤中微生物数量为1.5×10的8次方个。
‘陆’ 测定微生物的生物量有哪些主要方法
测定微生物的生物量有哪些主要方法
测定的方法主要有四种：
1.直接计数测定：根据微生物种类，有血球计数板和细菌计数板；
2.比浊法：根据菌悬液的浓度在一定范围内与光密度成正比，可以用分光光度计测OD值，用OD值表示样品菌液浓度；
3.核酸计数法：荧光定量PCR技术；
4.活菌计数法：MPN和平板计数法由于测定方法的限制。新鲜土样经氯仿熏蒸后（24h），土壤微生物死亡细胞发生裂解，释放出微生物生物量碳，用一定体积的LK2SO4溶液提取土壤，借用有机碳自动分析仪测定微生物生物量碳含量。根据熏蒸土壤与未熏蒸土壤测定有机碳的差值及转换系数（KEC），从而计算土壤微生物生物量碳。
‘柒’ 如何调查土壤中微生物种类
按照我理解的“土壤中微生物的种类”是指古菌、细菌、真菌等生命体而不包括藻类、原生动物等低等动植物。
土壤中微生物的种类数量的调查属于微生态区系分析的范畴。
一般说来，我们所开展的研究工作主要采用以下两类方法进行研究分析：
1、经典的选择培养法：
即采用选择培养的方法，对土壤样品中的细菌、放线菌、酵母菌、丝状真菌等几大类微生物进行分类培养，还可以采用详细的选择培养方式比如无氮培养基培养固氮微生物、利用MPN法测定氮循环微生物等等，从功能角度再细分一下微生物的种类组成；还可以通过寡营养、富营养、长周期培养等方法做进一步详细的分析。
此类方法工作量大，分析精度和全面性都有一定的局限性。但同时是任何层面的研究都不可以忽略的方式方法，是获得微生物菌种资源纯培养以进行深入研究的唯一方法。
2、分子微生态学方法
是基于DNA分析和测序基础上的分子微生态学研究方法，常用的有DGGE（变性梯度凝胶电泳）、克隆文库构建、T-RFLP以及宏基因组技术，对样品中的DNA进行电泳乃至测序分析，从分子水平确定样品中微生物的种类和数量。
从全面性和深度以及工作效率方面都教常规方法有大幅度提升，但目前仍然有不成熟的地方。另外其成本远高于常规方法。
‘捌’ 如何测定土壤中特定细菌的数量
显微镜直接计数法和稀释平板计数法是测定微生物数量的常用方
法。
直接计数法中常用的是显微镜直接计数法，这种方法是先将待
测样品制成悬液，然后取一定量的悬液放在显微镜下进行计数(图1-
3-1)。根据在显微镜下观察到的微生物数目来计算出单位体积内的微
生物总数。直接计数法所需设备简单，可迅速得到结果，而且在计数
的同时能观察到所研究微生物的形态特征，其缺点是难以计数微小的
细菌。这种方法一般适用于纯培养悬浮液中各种单细胞菌体的计数。
间接计数法最常用的是稀释平板计
数法，它是根据微生物的培养特征而设计
的计数方法。这种方法在样品中含菌数较
少的情形下，也可以完成计数。
应用稀释平板计数法计数时，需要
将待测样品配制成均匀的系列稀释液，尽
量使样品中的微生物细胞分散开。再取一
定稀释度、一定量的稀释液接种到平板
中，使其均匀分布于平板中的培养基内；
或是将一定量的稀释液，与溶化后冷却至
45℃左右的琼脂培养基混合，倾入无菌培
养皿中，摇匀、静置待凝。经过培养后，
就由单个微生物生长繁殖形成菌落，这样
的一个菌落就代表着一个微生物个体。统
计培养基中出现的菌落数，即可推算出检
测样品中的活菌数。
FOR EXAMPLE:]
土壤中好气性细菌的计数
土壤中生活的微生物种类和数量是极其丰富的，这些数量众多的
微生物对提高土壤肥力有重要作用。因此，测定土壤中的含菌量可以
作为判定土壤肥力的一个重要指标。
材料器具
土壤样品；牛肉膏蛋白胨琼脂培养基(附录二)、无菌水；培养皿、
移液管、天平、锥形瓶、试管、酒精灯、恒温培养箱、摇床等。
活动程序
1.制备土壤稀释液
取土壤表层5～10 cm 处的土样。准确称取1 g 土样，放入盛有
99 mL 无菌水的锥形瓶(250 mL，放有小玻璃珠)中，用手或摇床振荡
20 min，即制成102 倍的稀释液。
用1 mL无菌移液管，吸取10 2倍稀释液0.5 mL，移入装有4.5 mL
无菌水的试管中，配制成103 倍稀释液。
用同样的方法可制成稀释倍数为104、105、106 的系列稀释菌液
(图1-3-2)。
图
移液时，要将移液管插入液面，吹吸3 次，每次吸上的液面要高
于前一次，让菌液混合均匀并减少稀释中的误差。每配一个稀释度要
换用一支移液管。
2.取样及倒平板
将无菌培养皿编号，依次为104、105、106，每一号码设置三个
重复。
用无菌移液管三支，分别吸取稀释倍数为104、105、106的土壤稀释
液各0.2 mL，注入到相应编号的培养皿中(每个稀释倍数各三个培养皿)。
将已灭菌牛肉膏蛋白胨琼脂培养基溶化，待冷却至45～50 ℃左
右，倾入到无菌培养皿中，每皿约15 mL，轻轻转动培养皿，使土壤
稀释液与培养基混合均匀。
3.培养
将上述接种好的平板培养基冷却后，倒置放入28～30 ℃的恒温
培养箱中培养24～36 h，直至长出菌落为止。
4. 观察记录
将实验中得到的菌落数填入表1-3-1。
结果分析
1.选取具有合适菌落数的稀释倍数并计数。
在计算结果时，从接种的3 个稀释度中选择一个合适稀释倍数，
统计出菌落数(图1-3-3)。选择的原则是：
过
(1) 细菌、放线菌、酵母菌以每个培养皿内有30～300 个菌落为
宜。霉菌以每个培养皿内有10～100 个菌落为宜。
(2) 同一稀释倍数各个重复的菌落数相差不太悬殊。
2.将统计出的菌落数按下列公式计算，得出每克样品菌数。
每克土壤样品菌数= 某稀释倍数的菌落平均数×稀释倍数
‘玖’ 土壤微生物数量的测定方法
称取10g土壤2份，一份置于烘箱中烘至恒重，称重。另一份置于装有90ml无菌水和若干玻璃珠的250ml三角瓶中，充分振荡20分钟，静置1分钟，无菌操作取1ml，做10倍梯度稀释，取连续3个稀释度的溶液，涂平板或倾注平板（计数放线菌和真菌要用选择培养基），每个稀释度2~3个重复，培养后数菌落数，然后乘上稀释倍数，就可得到1g湿土壤中该微生物的数量，1g干土壤中该微生物的数量再将前面结果除以干土百分比。