⑴ 配置微生物培养基的过程中需要注意什么
1、根据不同微生物的营养需要配制不同的培养基。
2、注意各种营养物质的浓度及合适配比,保持合适渗透压。
3、将培养基的 pH 控制在适宜的范围之内,以利于不同类型微生物的生长繁殖或代谢产物的积累。
4、要注意各种原料的配比,每种培养基的配比合适的配比,可以按照老师的要求去做。
5、如需要加热的时候注意时间的把握。
步骤:(一)准确称量试剂:根据不同的菌类和用途,选择适宜的培养基,培养基所需试剂必须纯净。(二)校正pH值:将称量好的中海培养基各种成分放入容器内,标记划线,加热溶解,补充水分,测定酸碱度,常用pH6.8~8.0的精密试纸或酸度计测定。用1NNaOH和1N HCl调节pH值到适宜范围内。(三)过滤:将玻璃漏斗置铁架上,再用纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中,将上述培养基倒入其中过滤至透明。(四)分装:将过滤后的培养基分装于中试管或三角瓶内(试管内每支装5mL;三角瓶中装100~150ml),塞好棉塞用牛皮纸包扎好,准备灭菌。(五)灭菌:培养基的灭菌,常用高压蒸汽灭菌法。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死,但细菌的芽胞有较强的抗热性,须经高压蒸汽灭菌才能达到彻底灭菌的目的。根据蒸汽温度随压力升高而上升的原理,即压力越大,蒸汽温度就越高。因此,在同一温度条件下,采用高压蒸汽灭菌比干热灭菌法效果要好。而且在湿热情况下,菌体吸收水分后,其蛋白质易于凝固变性,因为蒸汽的穿透力强,杀菌效果好
⑵ 微生物配置培养基用什么水
不同的培养基选用不同的水
细胞培养基一般用新鲜三蒸水或Millipore超纯水(分子生物学及生命科学,动物细胞及植物细胞培养,组织培养,试管婴儿,电泳、凝胶分析,生物工程,培养基制备)
医院检验科培养病人标本的培养基用的是普通蒸馏水
现在有的实验室使用的是反渗透纯水,应用:① 实验室器皿的最后清洗② 缓冲液、化学试剂配制用水③ 微生物培养基制备用水④ 氢气发生器、室内加湿器、高压消毒锅用纯水⑤ 人或实验动物饮用水等
超纯水的应用① 医院、医药制剂室及中心供应室用纯化水和高纯水② 各种医疗用生化仪、分析仪、血液透析仪用水③ 分析试剂及药品配置稀释用水④ 生理、病理、毒理学实验用水⑤ 动、植物细细胞培养用水⑥ 原子吸收光谱用水⑦ 试管婴儿用水⑧ 各种高效液相色谱、离子色谱用水⑨ 其他各种实验室用水和医药用水
⑶ 微生物培养基配置的基本步骤
什么培养基啊,
一般步骤是:1、计算
2、称量药品,如牛肉膏、蛋白胨;
3、溶化 按照顺利加入,防治沉淀产生;对于可溶性淀粉,先用少量冷水调成糊状,再放入沸水中。琼脂溶化温度96℃,凝固温度~40 ℃。
4、调pH值
5、分装
6、加塞;
7、包扎:注明培养基的名称、组别、配制日期;
8、灭菌 。0.1MPa,121℃,灭菌20min即可。
9、搁置斜面:斜面长度不超过试管高度的1/2左右为宜;
10、无菌检查
望采纳。
⑷ 生物微生物培养中,“培养基” “培养皿” “平板” 这三个词的区别是什么..
培养基 培养基(Medium)是供微生物、植物和动物组织生长和维持用的人工配制的养料,一般都含有碳水化合物、含氮物质、无机盐(包括微量元素)以及维生素和水等。有的培养基还含有抗菌素和色素,用于单种微生物培养和鉴定。
培养皿 用于盛载液体培养液或固体琼脂培养液进行细胞培养的玻璃或塑料圆形器皿
平板是培养基
⑸ 微生物配置培养基用什么水
不同的培养基选用不同的水
细胞培养基一般用新鲜三蒸水或Millipore超纯水(分子生物学及生命科学,动物细胞及植物细胞培养,组织培养,试管婴儿,电泳、凝胶分析,生物工程,培养基制备)
医院检验科培养病人标本的培养基用的是普通蒸馏水
现在有的实验室使用的是反渗透纯水,应用:①
实验室器皿的最后清洗②
缓冲液、化学试剂配制用水③
微生物培养基制备用水④
氢气发生器、室内加湿器、高压消毒锅用纯水⑤
人或实验动物饮用水等
超纯水的应用①
医院、医药制剂室及中心供应室用纯化水和高纯水②
各种医疗用生化仪、分析仪、血液透析仪用水③
分析试剂及药品配置稀释用水④
生理、病理、毒理学实验用水⑤
动、植物细细胞培养用水⑥
原子吸收光谱用水⑦
试管婴儿用水⑧
各种高效液相色谱、离子色谱用水⑨
其他各种实验室用水和医药用水
⑹ 为什么培养微生物时,培养基和培养皿要分开消毒,而在配置植物组培的培养基时,可以把培养基倒入锥形瓶一
其实很多微生物培养基都能在锥形瓶中直接消毒,消毒结束后在温度约60℃时分装在培养皿中。如果说非要解释它们的不同个人认为可能原因有二:
培养微生物时,部分微生物的培养要求比较高,因为防止它们被支原体或者衣原体感染(这些高压灭菌未必能消除)培养皿消毒前需要用消毒水浸泡后高压灭菌,而培养基当然不能泡在消毒水中,所以要分开消毒。
与培养基内组成成分有关,就像葡萄糖水的灭菌要求是在111℃灭菌30min如果在超过111℃时葡萄糖水会变成中褐色液体,其他培养基则需要在121℃下灭菌30min。所以如果要配与葡萄糖混合的培养基需要灭菌后混合使用。其次,一些培养基的组分时不能高温灭菌的。就拿我做的实验来说,我配置MD培养基时,其中YNB(无氨基酵母氮源)是不能高温灭菌的,需要用虑头过滤除菌使用,所以需要分开灭菌。
希望能够帮到你吧!
⑺ 为什么培养微生物的培养基分装到培养皿
不能把热熔琼脂培养基分装到培养皿后再高压,
首先,培养皿比较低,放到高压锅灭菌时,容易洒出(这个你可以通过灭已用过的琼脂平板发现)
其次,板不好放平,如果你等从高压锅冷却之后再拿出,你会发现很多板都是斜的,有的已经洒出,不能保证板的均一,同时板的盖子上有许多水,使用时容易污染;如果你准备不等冷却直接拿出,在拿板的过程中很容易污染,此时的培养皿也很烫,拿的过程中也容易洒.
还有,倒平皿的时候,培养基的温度不能过高,这样容易产生大量水蒸气,对培养基浓度有影响,同时水蒸气跑到盖子上不好吹掉,容易污染
其实,培养皿本来就是要装固体培养基的,你很少见过有人装液体培养基来回移动,而你高压过程中热熔琼脂不是液体的么?而你又需要来移动,这样本来就容易污染.里面的琼脂产生很多蒸气更容易污染.
⑻ 培养微生物的方法步骤介绍
微生物培养所培养的微生物通常是病菌、细菌、放线菌、真菌等,属于生物培养的一种。
微生物培养步骤:
1.配置不同浓度的营养液稀释液:取营养液1ml溶于9ml无菌水中,振荡 5min配成10%的溶液.
2.将容器口靠近(注意不是对着)酒精灯灯焰用吸管从此溶液中吸取1ml加入到装有9ml无菌水的试管中.以此类推制成1%,0.1%,0.01%等不同浓度的稀释液.
3.将试管口靠近(注意不是对着)酒精灯灯焰,左手拿试管,右手托培养皿(仅露一条小缝,且靠近灯焰).将溶液倒入培养皿中,在各培养皿上标上浓度.
4.将有细菌生长的样品容器口靠近(注意不是对着)酒精灯灯焰,用接种环挑取菌落上的少量菌体加入10%的营养液中.把接种环放在酒精灯上灼烧灭菌,再次取样加入盛1%的营养液的培养皿(仅露一条小缝,且靠近灯焰)中.重复这个操作,将各浓度的营养液接上种.
5.轻轻摇匀接上种的培养皿,置于恒温箱内37摄氏度保存,3天后就有菌落出现.
微生物培养的基本条件:
1、影响微生物生长的因素
微生物的生长,除了受本身的遗传特性决定外,还受到外界许多因素的影响。影响微生物生长的因素很多,简要介绍如下。
1) 营养物浓度
细菌的生长率与营养物的浓度有关:μ=μmax*C/(K+C) ,营养物浓度与生长率的关系曲线是典型的双曲线。
K值是细菌生长的很基本的特性常数。它的数值很小,表明细菌所需要的营养浓度非常之低,所以在自然界中,它们到处生长。然而营养太低时,细菌生长就会遇到困难,甚至还会死亡。这是因为除了生长需要能量以外,细菌还需要能量来维持它的生存。这种能量称为维持能。另一方面,随着营养物浓度的增加,生长率愈接近最大值。
2)温度
在一定的温度范围内,每种微生物都有自已的生长温度三基点:最低生长温度、最适生长温度和最高生长温度。在生长温度三基点内,微生物都能生长,但生长速率不一样。微生物只有处于最适生长温度时,生长速度才最快,代时最短。超过最低生长温度,微生物不会生长,温度太低,甚至会死亡。超过最高生长温度,微生物也要停止生长,温度过高。也会死亡。一般情况下,每种微生物的生长温度三基点是恒定的。但也常受其它环境条件的影响而发生变化。
根据微生物最适生长温度的不同,可将它们分为三个类型:
a.嗜冷微生物:其是适生长温度多数在-10℃-20℃之间
b.中温微生物:其最适生长温度一般在20℃-45℃之间
c.嗜热微生物:生长温度在45℃以上。
3)水分
水分是微生物进行生长的必要条件。芽孢、孢子萌发,首先需要水分。微生物是不能脱离水而生存的。但是微生物只能在水溶液中生长,而不能生活在纯水中。各种微生物在不能生长发育的水分活性范围内,均具有狭小的适当的水分活性区域。
4)氧气
按照微生物对氧气的需要情况,可将它们分为以下五个类型。
a.需氧微生物:这类微生物需要氧气供呼吸之用。没有氧气,便不能生长,但是高浓度的氧气对需氧微生物也是有毒的。很多需氧微生物不能在氧气浓度大于大气中氧气浓度的条件下生长。绝大多数微生物都属于这个类型。