微生物的无菌操作有哪些

① 无菌技术操作的基本要求有哪些

无菌技术指在执行医疗护理操作过程中，防止一切微生物进入机体和保持无菌物品及无菌区域不被污染的操作和管理方法。
原则：
1）环境要清洁。进行无菌技术操作前30min，停止清扫工作，减少走动，防止尘埃飞扬。
）工作人员操作前，修剪指甲，洗手，戴口罩、帽子。
3）无菌物品和非无菌物品分别放置。无菌物品必须存放在无菌容器内。一经取出就认为是相对无菌，虽未使用，也不可放回无菌容器。
4）无菌包外应注明物品名称、灭菌日期。无菌包应放在清洁、干燥、固定的地方，保存期为7—14d。过期或包布受潮，均应重行灭菌处理。
5）取无菌物品须用无菌持物钳。未经消毒的用物、手、臂不可触及无菌物品，不可跨过无菌区。操作时，身体应与无菌区域保持一定的距离，手、臂须保持在腰部水平以上。
6）无菌区的边缘向内3㎝为相对无菌区：3㎝以内是无菌的安全范围。
7）一切无菌操作，均应使用无菌物品，禁用未经灭菌或疑有污染的物品。
8）一份无菌操作，仅供一位患者使用一次。

② 微生物实验中什么叫无菌操作

即操作环境中的物体表面、空气中除了你瓶中培养的微生物，没有其它活的微生物，确保培养菌的纯净。主要有紫外线空气杀毒、喷洒灭菌水在无菌室、酒精灯火焰操作。

③ 请结合你所学到的微生物学实验知识,谈谈在实验进行过程中,需要采取哪些无菌操

实验过程中无菌操作:
操作室、工作台、衣服消毒。
使用工具、容器均要灭菌。
操作在酒精灯火焰旁。

④ 微生物实验中无菌操作具体有哪些要求

无菌操作需在火焰旁进行，手不可触摸试管口端，以防烫伤；接种时接种环不要碰触试管口边，
防止污染；塞盖不可放在桌面上，应该用右手手缘或右手指间夹住，或玻璃盖放后火焰灭菌盖上。操作台及不可高温蒸汽灭菌物品使用前和使用后用75%酒精消毒。
以上就是“微生物实验中无菌操作具体有哪些要求？”的相关介绍，有疑问可询安徽人和净化。

⑤ 微生物的几种灭菌方法

方法较多，方法有化学试剂灭菌、射线灭菌、干热灭菌、湿热灭菌和过滤除菌等。

1、化学灭菌法是指用化学药品直接作用于微生物而将其杀死的方法。

对微生物具有杀灭作用的化学药品称为杀菌剂，可分为气体灭菌剂和液体灭菌剂。杀菌剂仅对微生物繁殖体有效，不能杀灭芽孢。化学杀菌剂的杀灭效果主要取决于微生物的种类与数量，物体表面的光洁度或多孔性以及杀菌剂的性质等。化学灭菌的目的在于减少微生物的数目，以控制一定的无菌状态。

2、干热灭菌法是指在干燥环境（如火焰或干热空气）进行灭菌的技术。一般有火焰灭菌法和干热空气灭菌法。适用于干燥粉末、凡士林、油脂等。

3、过滤除菌法是用物理阻留的方法将液体或空气的细菌除去，以达到无菌目的。所用的器具是含有微小孔径的滤菌器。主要用于血清、毒素、抗生素等不耐热生物制品及空气的除菌。常用的滤菌器有薄膜滤菌器(0.45μm和0.22μm孔径)、陶瓷滤菌器、石棉滤菌器、烧结玻璃滤菌器等。

(5)微生物的无菌操作有哪些扩展阅读：

灭菌的基本要求：

重复使用的诊疗器械、器具和物品，使用后应先清洁，再进行消毒或灭菌。

被朊病毒、气性坏疽及突发不明原因的传染病病原体污染的诊疗器械、器具和物品，应执行WS/T 367第11章的规定。

耐热、耐湿的手术器械，应首选压力蒸汽灭菌，不应采取化学消毒剂浸泡灭菌。

环境与物体表面，一般情况下先清洁，再消毒；当受到患者血液、体液等污染时，先去除污染物，再清洁与消毒。

医疗机构消毒工作中使用的消毒产品应经卫生行政部门批准或符合相应标准技术规范，并应遵循批准使用的范围、方法和注意事项。

⑥ 微生物学实验室常用的灭菌方法有哪些

物理方法

1、温度

利用温度进行灭菌、消毒或防腐，是最常用而又方便有效的方法。高温可使微生物细胞内的蛋白质和酶类发生变性而失活，从而起灭菌作用，低温通常起抑菌作用。

1 干热灭菌法：

a.灼烧灭菌法：利用火焰直接把微生物烧死。此法彻底可靠，灭菌迅速，但易焚毁物品，所以使用范围有限，只适合于接种针、环、试管口及不能用的污染物品或实验动物的尸体等的灭菌。

b.干热空气灭菌法：这是实验室中常用的一种方法，即把待灭菌的物品均匀地放入烘箱中，升温至160℃，恒温1小时即可。此法适用于玻璃皿、金属用具等的灭菌。

2 湿热灭菌法：

在同样的温度下，湿热灭菌的效果比干热灭菌好，这是因为一方面细胞内蛋白质含水量高，容易变性。另一方面高温水蒸汽对蛋白质有高度的穿透力，从而加速蛋白质变性而迅速死亡。

a.巴氏消毒法：有些食物会因高温破坏营养成分或影响质量，如牛奶、酱油、啤酒等，所以只能用较低的温度来杀死其中的病原微生物，这样既保持食物的营养和风味，又进行了消毒，保证了食品卫生。该法一般在62℃，30分钟即可达到消毒目的。此法为法国微生物学家巴斯德首创，故名为巴氏消毒法。

b.煮沸消毒法：直接将要消毒的物品放入清水中，煮沸15分钟，即可杀死细菌的全部营养和部分芽孢。若在清水中加入1%碳酸钠或2%的石炭酸，则效果更好。此法适用于注射器、毛巾及解剖用具的消毒。

c.间歇灭菌法：上述两种方法在常压下，只能起到消毒作用，而很难做到完全无菌。若采用间歇灭菌的方法，就能杀灭物品中所有的微生物。具体做法是：将待灭菌的物品加热至100℃，15~30分钟，杀死其中的营养体。然后冷却，放入37℃恒温箱中过夜，让残留的芽孢萌发成营养体。第2天再重复上述步骤，三次左右，就可达到灭菌的目的。此法不需加压灭菌锅，适于推广，但操作麻烦，所需时间长。

d. 加压蒸汽灭菌法：这是发酵工业、医疗保健、食品检测和微生物学实验室中最常用的一种灭菌方法。它适用于各种耐热、体积大的培养基的灭菌，也适用于玻璃器皿、工作服等物品的灭菌。

加压蒸汽灭菌是把待灭菌的物品放在一个可密闭的加压蒸汽灭菌锅中进行的，以大量蒸汽使其中压力升高。由于蒸汽压的上升，水的沸点也随之提高。在蒸汽压达到1.055公斤/厘米2时，加压蒸汽灭菌锅内的温度可达到121℃。在这种情况下，微生物（包括芽孢）在15~20分钟便会被杀死，而达到灭菌目的。如灭菌的对象是砂土、石蜡油等面积大、含菌多、传热差的物品，则应适当延长灭菌时间。

在加压蒸汽灭菌中，要引起注意的一个问题是，在恒压之前，一定要排尽灭菌锅中的冷空气，否则表上的蒸汽压与蒸汽温度之间不具对应关系，这样会大大降低灭菌效果。

3 影响灭菌的因素：

a.不同的微生物或同种微生物的不同菌龄对高温的敏感性不同。多数微生物的营养体和病毒在50~65℃，10分钟就会被杀死；但各种孢子、特别是芽孢最能抗热，其中抗热性最强的是嗜热脂肪芽孢杆菌，要在121℃，12分钟才被杀死。对同种微生物来讲，幼龄菌比老龄菌对热更敏感。

b.微生物的数量多少显然会影响灭菌的效果，数量越多，热死时间越长。

c.培养基的成分与组成也会影响灭菌效果。一般地讲，蛋白质、糖或脂肪存在，则提高抗热性，pH在7附近，抗热性最强，偏向两极，则抗热能力下降，而不同的盐类可能对灭菌产生不同的影响；固体培养基要比液体培养基灭菌时间长。

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灭菌对培养基成分的影响：

a.pH值普遍下降。

b.产生混浊或沉淀，这主要是由于一些离子发生化学反应而产生混浊或沉淀。例如Ca+2与PO4-3化合，就会产生磷酸钙沉淀。

c.不少培养基颜色加深。

d.体积和浓度有所变化。

e.营养成分有时受到破坏。

2、辐射

利用辐射进行灭菌消毒，可以避免高温灭菌或化学药剂消毒的缺点，所以应用越来越广，目前主要应用在以下几个方面：

1）接种室、手术室、食品、药物包装室常应用紫外线杀菌。

2）应用β射线作食品表面杀菌，γ射线用于食品内部杀菌。经辐射后的食品，因大量微生物被杀灭，再用冷冻保藏，可使保存期延长。

3、过滤

采用机械方法，设计一种滤孔比细菌还小的筛子，做成各种过滤器。通过过滤，只让液体培养基从筛子中流下，而把各种微生物菌体留在筛子上面，从而达到除菌的目的。这种灭菌方法适用于一些对热不稳定的体积小的液体培养基的灭菌以及气体的灭菌。它的最大优点是不破坏培养基中各种物质的化学成分。但是比细菌还小的病毒仍然能留在液体培养基内，有时会给实验带来一定的麻烦。

二 化学方法

一般化学药剂无法杀死所有的微生物，而只能杀死其中的病原微生物，所以是起消毒剂的作用，而不是灭菌剂。

能迅速杀灭病原微生物的药物，称为消毒剂。能抑制或阻止微生物生长繁殖的药物，称为防腐剂。但是一种化学药物是杀菌还是抑菌，常不易严格区分。消毒剂在低浓度时也能杀菌（如1：1000硫柳汞）。由于消毒防腐剂没有选择性，因此对一切活细胞都有毒性，不仅能杀死或抑制病原微生物，而且对人体组织细胞也有损伤作用，所以只能用于体表、器械、排泄物和周围环境的消毒。

常用的化学消毒剂有：石碳酸、来苏水（甲醛溶液）、氯化汞、碘酒、酒精等。答案来自

⑦ 中学生物中微生物培养常用的无菌操作有哪些 越全越好，感激不尽。

嗯 你问的是无菌操作对吧?那设备我就不写了
90%酒精消毒镊子等工具 75%酒精擦手 这个属于消毒 不能完全灭菌
高压蒸汽灭菌 紫外灯灭菌(这个最好在没有人的时候)
在酒精灯外焰附近无菌区操作

⑧ 什么是无菌术，它包括哪些内容灭菌和消毒有什么区别

无菌术是指针对微生物及感染途径所采取的一系列预防措施，其中包括灭菌法、消毒法、操作规则及管理制度。灭菌是指杀灭一切活的微生物。消毒是指灭病原微生物和其他有害微生物，但不要求清除或杀灭所有微生物。

常用灭菌法包括：

1、高压蒸汽灭菌法，这是手术用品灭菌最常用最可靠是方法；

2、煮沸灭菌法，用于金属器械、玻璃、橡胶类物品；

3、火烧法，用于紧急情况下使用的器械。消毒法包括药液浸泡消毒法和甲醛蒸汽熏蒸法。

灭菌和消毒的区别：

1、概念不一样

消毒是指杀死病原微生物、但不一定能杀死细菌芽孢的方法。

灭菌是采用强烈的理化因素使任何物体内外部的一切微生物永远丧失其生长繁殖能力的措施。

2、方法不一样

消毒有有物理方法，化学方法及生物方法等。如物理消毒法中的机械消毒一般应用肥皂刷洗，流水冲净，可消除手上绝大部分甚至全部细菌，使用多层口罩可防止病原体自呼吸道排出或侵入。应用通风装置过滤器可使手术室、实验室及隔离病室的空气，保护无菌状态。

灭菌有热灭菌法、干热灭菌、湿热灭菌、间歇灭菌、辐射灭菌、渗透压灭菌、化学试剂灭菌等。

3、目的不一样

消毒的目的是防止病原体播散到社会中等。

灭菌，达到无菌保障水平。经过灭菌处理后，未被污染的物品，称无菌物品。经过灭菌处理后，未被污染的区域，称为无菌区域。