如何建立细菌生物膜

A. 请教高手：96孔板培养细菌生物膜如何操作

应该是用96孔板液体培养吧！然后去其菌膜吧，96孔板应该起到的是多培养筛选吧。

B. 细菌生物膜的内容

细菌的生理特性受到种群密度及与其他微生物相互作用的极大影响，而附着性是其显着特征之一。生物膜的生理学研究今年取得重大突破。很大程度是由于应用激光共聚焦扫描显微镜（CLSM）和荧光原位杂交（FISH）技术的结果。单种的细菌的生物膜形成过程被认为是一种向多细胞生活方式发展的形式（有研究者将之比作组织）。有机分子(主要是多糖和蛋白质)会在几分钟的之内覆盖于任何置于海水中的物体表面，形成一层临时性膜。细菌在物体表面定植的起始步骤，通常包括细菌向物体表面的移动和微粘度的改变，而微粘度的改变会引起细菌在靠近表面时移动性下降。这时细菌在静电引力和范德华力的作用下，会短暂、可逆地趋向表面。通过构建生物膜缺陷型突变的遗传学研究发现，细菌为了与其他细菌接触以形成微菌落，其通过表面的运动非常重要，而细菌的运动主要归功于鞭毛和Ⅳ型纤毛。细菌在与物体表面的接触过程中，经历了细胞形态和鞭毛合成的巨大变化，这牵扯到基因表达调控的巨大变化。细菌一旦固着，其鞭毛合成可能完全被抑制。特定的基因表达与底物的性质密切相关。
附着后，最重要的生长变化是胞外多聚物（EPS）的大量表达。这些多聚物提供了一个坚固而有黏性的骨架，将细胞固定在一起。胞外多聚物的化学和物理特性是多变的，其特性和分泌量取决于细菌的种类、特定底物的浓度及环境条件。绝大多数的胞外多聚物为多聚阴离子。胞外多聚物通常以相互交叉的长链形成的复杂结构包围着细胞（糖被）。赋予生物膜以刚性与柔韧性。生物膜一旦建成，细菌排列密集且其代谢转换为产生胞外多聚物，因此细胞代谢的活跃，但是以很低的速度分裂。

C. 生物膜由什么组成

生物膜是由生物大分子如蛋白质、多糖、DNA、RNA、肽聚糖、脂和磷脂等物质组成。
生物膜也称为生物被膜，是指附着于有生命或无生命物体表面被细菌胞外大分子包裹的有组织的细菌群体。生物膜细菌对抗生素和宿主免疫防御机制的抗性很强。生物膜中存在各种主要的生物大分子如蛋白质、多糖、DNA、RNA、肽聚糖、脂和磷脂等物质。生物膜多细胞结构的形成是一个动态过程，包括细菌起始粘附、生物膜发展和成熟扩散等阶段。
生物被膜是微生物有组织生长的聚集体。细菌不可逆的附着于惰性或活性实体的表面，繁殖、分化，并分泌一些多糖基质，将菌体群落包裹其中而形成的细菌聚集体膜状物。单个生物被膜可由一种或多种不同的微生物形成。通过对微生物在固体表面定植中起支配作用的特殊现象进行了大量研究，逐渐认识到这些微生膜的形成包含复杂的理化过程和生物群落的相互作用。在海洋环境中，所有类型的表面，如岩石、植物、动物和装配式结构都可能被生物膜侵占。
细菌生物被膜主要包括分泌的多糖蛋白、多糖基质、纤维蛋白、脂蛋白等多糖蛋白复合物。成熟生物被膜模型从外到内包括主体生物膜层、连接层、条件层、基质层。
 

D. 细菌生物膜构造和检测是否形成。的试验过程和检测方法，包括染色，观察等。详细点，谢谢各位大大了。

生物膜？我们实验室是做这个的……biofilm
宝你是谁啊？
嗯，观察生物膜形成情况可用比色杯或者ELISA板儿养菌液，24~72小时，分组，养到时见后小心吸走液体，膜就留在杯里了，此时用结晶紫染色，可看到膜形成与否以及厚度

E. 细菌生物膜的介绍

生物膜由依靠胞外产物而吸附于固体表面的微生物集落构成，并能结合有机和无机成分；形成包含复杂的理化过程和生物群落的相互作用。生物膜系统是真核细胞特有的系统，由细胞器膜，细胞膜和核膜构成，这些生物膜的组成成分和结构相似，结构和功能密切相关，表现着协调统一性。

F. 如何制取纯净的细胞膜

理论上细胞膜成分都是类似的（真核细胞有胆固醇，但是功能上没有太大变化），但是一般不会那样做。

一般用红细胞制取细胞膜，那是因为红细胞在低渗溶液中会吸水膨胀破裂，导致磷脂析出。但是细菌有细胞壁阻挡渗透压，不会因为吸水而破裂，要提取细菌的细胞膜需要大费周折，没有谁会放着简单易得数量巨大的红细胞不用，而去给细菌破壁的

G. 怎么诱导金黄色葡萄球菌在体外形成生物膜

生物膜形成主要分为两个阶起始的黏附和接下来的成熟。在慢性感染中，毒力决定因子是金黄色葡萄球菌感染的关键，已经段，确定许多蛋白和这一过程相关，如多糖细胞间黏附素、凝聚因子A、金黄色葡萄球菌表面蛋白、生物膜形成相关蛋白等。细菌生物膜（BF）是细菌在生长过程中为适应生存环境的变化而附着于机体组织或生物材料表面形成的一种与浮游细胞相对应的生长方式，由细菌和胞外基质组成。生物膜形成后，细菌被包裹于胞外基质中，对机体免疫清除作用及抗生素的杀菌作用的抵抗力增强，使得这两种机制均难以有效地清除感染灶，且生物膜内的细菌还可不断生长并释放入血，造成慢性感染和停用抗生素后感染复发，导致疾病迁延不愈。

H. 器械如何形成生物膜，生物膜定义，危害

生物膜是紧密黏附于医疗器械表面并且难以去除的细菌团块与细胞外基质的复合体。通俗地说，生物膜是由细菌在其分泌的粘液（粘多糖）内形成的结构。当生物膜积累到一定厚度，消毒及灭菌因子均难以杀灭包裹于其中的细菌。

去除方法：
1、防止有机污染物干涸
对使用后的器械应尽早进行清洗，采用一切措施防止血液和组织结块。使用后立即进行浸泡。以酶为基础的保湿，可以快速高效分解有机污染物。
2、注重清洗剂的选择和合理应用
应选择有机物和生物膜清除能力更佳, 对器械腐蚀力更小,环保的清洗剂产品。
3、保证器械干燥
保证器械管腔和关节干燥彻底，特别对于隔夜存放的高水平消毒类器械。加强对内镜储存环境的温湿度管理。
4、加强清洗质量检测

I. 细菌生物膜的简介

是指正常菌群与上皮细胞表面受体结合而黏附，并分泌胞外多糖聚合物，使细菌以非常精细的方式相互粘连，形成的膜状物，能发挥屏障和占位性保护作用，使外来病菌不能定植而通过侵入门户侵袭机体。
通过对微生物在固体表面定植中起支配作用的特殊现象进行了大量研究，逐渐认识到这些微生膜的形成包含复杂的理化过程和生物群落的相互作用。
在海洋环境中，所有类型的表面，如岩石、植物、动物和装配式结构都可能被生物膜侵占。