1. 原核生物没有切割内含子和外显子的机制,但是为什么可以把真核生物的基因导入到原核生物当中表达
是可以表达,但应该是会将内含子去掉之后再转入大肠进行表达的吧,因为真核生物中内含子是非编码区,不然在原核生物中表达出的蛋白也和真核生物不一样了啊
2. 原核生物基因表达过程
高中生物书讲得够清楚啊。复制:基因在解旋酶作用下解旋并以解旋后的两条链为模版以游离脱氧核糖核酸为原料,在DNA聚合酶作用下,根据碱基互补配对原则合成新的DNA子链。转录:基因在解旋酶作用下解旋。RNA聚合酶与原核基因编码区上游RNA聚合酶结合位点结合,在其作用下游离核糖核苷酸与原核基因模版链根据碱基互补配对原则编码并聚合成mRNA。翻译:mRNA为模版,由tRNA携带游离氨基酸,在核糖体内经酶的作用根据碱基互补配对原则mRNA上的密码子与tRNA上的反密码子配对。同时,tRNA携带的氨基酸在氨基酸聚合酶作用下形成肽链。
3. 含有内含子的DNA片段导入原核生物的基因中能表达吗有什么影响
理论上说是能够表达的,只是原核生物没有切除内含子的机制,表达出的肽链含有内含子对应氨基酸,此蛋白不能正确折叠不具有功能。
4. 含有内含子的目的基因不能在原核细胞内正确表达,因此什么方法适用于提取原核生物中的目的基因
真核生物的基因一般用人工合成方法获得,原核生物的基因则可直接用限制酶从DNA切取。因为原核生物的基因是连续不间隔的,直接切取就可得到目的基因。而真核细胞的基因是间隔的、不连续的,含有不表达的内含子。
不能用鸟枪法,因为若用鸟枪法,得到的真核生物的目的基因中含有内含子.原核生物中没有相应的机制,不能切除内含子转录的部分,所以内含子转录的部分要表达,结果和供体细胞合成的蛋白质不同.
5. 真核生物蛋白如何在原核生物中表达
首先,蛋白是无法表达的,LZ想说的应该是能表达出这种蛋白的基因
那先要获取表达出此蛋白的基因(目的基因)
然后将此基因整合进原核生物的DNA中
若要检测目的基因是否表达,可以将一段可以表达出抗药性的基因与目的基因一同转入,之后可将抗生素加入被植入目的基因的原核生物培养基中,则存活下来的个体就能将该蛋白合成
6. 真核细胞的基因导入到原核生物中,能表达么
基因表达调控,分几个步骤,其实也不能说是步骤,而是在不同阶段上的调控。首先是基因的表达,和原核生物不同,真核生物的DNA和组蛋白结合,常态下是被拧成的一种短粗的形态,就是染色质,这个时候RNA聚合酶是无法在DNA上正常工作的。通常,真核生物需要调节因子来调节基因的表达,通过解开组蛋白的封闭形态,使RNA聚合酶可以工作。而在原核生物中,由于没有组蛋白,DNA暴露在细胞质中,所以原核生物采用的是负的调控来调节基因的表达,也就是一些分子会阻止RNA聚合酶的工作,或者遮盖住启动子等方法。而原核生物需要快速复制和生长,其基因的内容也很少,所以一般的原核生物的大多数基因都处于表达状态,这也是很适应原核生物繁殖的手段。其次在翻译水平的调节我具体不太了解真核生物和原核生物有什么不同,和真核生物是如何复杂的进行调控的,目前mRNA的分解也是一个很热门的研究领域。至于蛋白质的加工,我也不太了解,但是真核生物的平均蛋白质的种类肯定是高于原核生物的。
7. 1.“内含子”真的不能表达吗2.难道只有真核生物才有内含子吗
终于在《分子遗传学》(南京大学出版社 孙乃恩、孙东旭、朱德煦编着)中找到几个例证。 1.70年代末刚发现intron(内含子)时,人们普遍认为它是真核基因的“真质标记”,是一种不表达成蛋白质的(即内含而不外显的)核酸序列,因而中译名把它叫做“内含子”。可是时过不久,人们就发现酵母线粒体细胞色素b基因的一个intron是编码一种叫做成熟酶的蛋白质的,而且这个蛋白质是细胞色素bmRNA前体的拼接过程所不可缺少的。 2.关于exon(外显子),通常真核生物基因的首尾两个exon也只有一部分序列编码蛋白质;后来又相继发现若干基因的首尾exon完全不编码蛋白质的情况,例如人类尿激酶原基因的第一个exon的88个核苷酸全部不编码蛋白质。 3.1984年,Chu等人发现了T4噬菌体胸腺嘧啶核苷酸合成酶的基因中有一个1017个核苷酸的intron,这就使得intron是真核基因的真质标记之说从此告终。
8. 如何使基因在原核生物中表达
1.获取目的基因:最简单的是直接从cDNA文库找,不然就要自己用mRNA逆转录出cDNA,然后PCR,电泳检测,回收。
2.酶切和连接:找一个质粒载体,根据载体的说明书选择内切酶,一般是双酶切。把载体和你的目的片段用一样的酶切了,然后混合了连接。
3、转化:找一种工程菌,把它弄成感受态,把你连接好了的重组质粒和菌混了,让质粒钻到菌里面去。
4、检验(筛选培养):看看质粒进到菌里面没有,目的基因连接到了质粒上了没有,一般是蓝白斑+抗生素抗性+电泳。
5、诱导表达:加入诱导剂,等着菌表达
6、检测,看看产物出来没有,量多少、有没有活性,etc。
完了,具体问题具体分析,思路以上。
9. 真核生物基因中通常有内含子,而原核生物基因中没有
真核生物的基因中编码蛋白质的序列中有内含子和外显子之分,其中内含子是不能决定氨基酸的序列。真核生物的细胞核基因转录成mRNA后要进行加工,将内含子转录的部分剪切掉,只剩下外显子转录的部分。
而原核生物的基因中没有内含子和外显子之分,基因转录后也不进行上面所说的那些加工过程。所以基因工程中如果将真核生物的基因转入原核生物的细胞中是不能表达出原来的蛋白质的。
10. 在真核细胞中,能够编码蛋白质的基因中含有为什么是若干个外显子和内含子内含子不是不能编码蛋白质
内含子只是一个相对的概念,并不是绝对的,某些基因存在选择性剪接的,对于一个蛋白质来说可能一段序列是内含子,但是对于另一个蛋白质来说这段序列就是外显子,因此,不能一概而论就说内含子不能编码蛋白这是不确切的说法们这是第一个要注意的事情。第二,大多数真核细胞的结构基因(也就是编码蛋白的基因)都有内含子,它们在基因转录的时候也一并被转录了,产物就是hnRNA(核内不均一RNA),这个过程是发生在细胞核内的,然后这个hnRNA还要被剪接,将其中的内含子部分剪掉,然后各个外显子再连接到一起,然后再5端加帽子,3端加polyA,然后才能被运输到核外,没有被正确加工的hnRNA是不会被转运到核外的。