❶ 菌落总数计数时培养皿侧壁上有好多菌落怎么计数
固体培养基表面及内部的可见菌落(包括小点)均要计数,计数时可用笔在培养皿背面划线,分若干块计数
细菌菌落总数(CFU)的测定
一)平板菌落数的选择
1、进行平皿菌落计数时,记下同一浓度的3个平板(或2个)的菌落总数,计算平均值,再乘以稀释倍数即为1ml水样中的细菌总数。
2、计数时应选择菌落数在30~300/皿之间的稀释倍数进行计数,若同—个稀释度中一个平皿有较大片状菌落生长时,则不宜采用,而应以无片状菌落生长的平皿计数该稀释度的平均菌落数。若片状菌落少于平皿的一半时,而另—半中菌落分布又均匀,则可将其菌落数的2倍作为全皿的数目。在记下各平皿菌落数后,应算出同一稀释度的平均菌数,供下—步计算时用。
(二) 稀释度的选择
l、首先选择平均菌落数在30~300者进行计算,当只有一个稀释度的平均菌落数符合此范围时,即可用它作为平均值乘其稀释倍数。
2、若有两个稀释度的平均菌落数都在30~300之间,则应按两者的比值来决定。若其比值小于2,应报告两者的平均数;若大于2则报告其中较小的菌落数。
3、如果所有稀释度的平均菌落数均大于300,则应按稀释度最高的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。
4、若所有稀释度的平均菌落数均小于30,则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。
5、如果全部稀释度的平均菌落数均不在30~300之间,则以最接近300或30的平均菌落数乘以稀释倍数报告之。
6、菌落计数的报告,菌落在100以内时按实有数报告;大于100时,采用二位有效数字;在二位有效数字后面的数值,以四舍五入方法计算。为了缩短数字后面的零数,也可用10的指数来表示,在所需报告的菌落数多至无法计算时,应注明水样的稀释倍数。
❷ 统计菌落数目的方法有哪些
统计菌落数目的方法有直接计数法 和间接计数法两种。
1. 直接计数法
直接计数法是将稀释的样品滴在计 数板上,盖上盖玻片,然后在显微镜下计 数4〜5个中格的细菌数,并求出每个小 格所含细菌的平均数,再按公式求出每 毫升样品中所含的细菌数。计算公式 为:每毫升原液所含细菌数=每小格平 均细菌数X400X1 000X稀释倍数。这 种方法的优点是所需设备比较简单,能 迅速得到结果,而且在计数的同时还可 以观察到所研究的微生物的形态特征; 缺点是不能区分死菌与活菌。
2. 间接计数法
在应用稀释涂布平板法计数时,首 先要将待测样品配制成均匀的系列稀释 液,尽量使微生物细胞分散开,再把稀释 液接种到平板上,进行培养观察。但值 得注意的是,统计的菌落数往往比活菌 的实际数目低,而且统计的结果一般用 菌落数而不用活菌数来表示。计算公式 为:每克样品中的菌落数= (C+V)X M,其中,C表示某一稀释度下平板上生长的平均菌落数,V表示涂布平板时所 用的稀释液的体积(mL),M代表稀释 倍数。
❸ 菌落总数怎么计算
应该取均值在30-300之间的稀释度进行菌落计数,像你的例子就应该使用10倍稀释度的进行计算。平均值是43,那么样品如果是固体,那么结果就是430CFU/g,如果是液体就是430CFU/ml
应该取均值在30-300之间的稀释度进行菌落计数,像你的例子就应该使用10倍稀释度的进行计算。平均值是43,那么样品如果是固体,那么结果就是430CFU/g,如果是液体就是430CFU/ml
❹ 菌落计数有哪些的方法
测定微生物细胞数目方法有多介绍几种
1.血细胞计数法
稀释菌液样品滴血细胞计数板上显微镜下计算4~5格细菌数并求出每小格所含细菌平均数再此依据估算总菌数
①此法缺点能区分死菌和活菌
②对压小方格界线上细菌应当取平均值计数
③此法用于测定培养液酵母菌种群数量变化
2.稀释涂布平板法
原理:每活细菌适宜培养基和良好生长条件下通过生长形成菌落培养基表面生长菌落来源于样品稀释液活菌
①方法常用来统计样品活菌数目
②统计菌落数往往比活菌实际数目低原因当两活多细胞连起时平板上观察只菌落因此统计结般用菌落数而用活菌数来表示
③土壤、水、牛奶、食品和其材料所含细菌、酵母、芽孢与孢子等数量均用此法测定适于测定样品丝状体微生物例放线菌或丝状真菌或丝状蓝细菌等营养体等
④此法若培养成菌落通过定量菌液均匀地涂布玻片上定面积上经固定染色显微镜下计数样又称涂片计数法染色用台盼蓝台盼蓝能使死细胞染成蓝色分别计数死细胞和活细胞
3.滤膜法
滤膜法当样品菌数低时定体积湖水、海水或饮用水灯样品通过膜过滤器滤膜干燥、染色并经处理使膜透明再显微镜下计算膜上(或定面积上)细菌数
此法也通过培养观察形成菌落数来推算样品菌数例测定饮用水大肠杆菌数目:已知体积水过滤滤膜放伊红美蓝培养基上培养该培养基上大肠杆菌菌落呈现黑色根据培养基上黑色菌落数目计算出水样大肠杆菌数目
此法也统计样品活菌数目
4.比浊法
原理定范围内菌悬液细胞浓度与混浊度成正比即与光密度成正比菌越多光密度越大因此借助与分光光度计定波长下测定菌悬液光密度光密度表示菌量实验测量时定要控制菌浓度与光密度成正比线性范围内否则准确
5.显微镜直接计数法
课本生物选修1生物技术实践P22除了上述活菌计数法外显微镜直接计数也测定微生物数量常用方法里说显微镜直接计数我认应该稀释涂布基础上培养成菌落而通过染色方法显微镜下直接计数再滤膜法也样有两种情况
另外微生物计数法发展迅速多种多样快速、简易、自动化仪器和装置等方法用来统计微生物数目。
来源:http://..com/link?url=ZF7Dq5chhYTeO1xK
❺ 微生物学怎么数菌落数
网络来的~
做样品前首先要根据食品的好坏程度来确定要做的稀释度,不太确定时最好多做几个稀释度。如果细菌长弥漫成片的话就没有任何价值。数菌落时,如菌落不太多时,可以用平均分配的方法,把平皿分四等分或六等分,数相对应的细菌数乘以2或3;菌落过多时可以分别在不同的区域选4个1平方厘米的小方块,数四个小方块的菌落数然后除以4再乘以64就得出菌落数了。