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微生物检验员需要注意什么

发布时间:2022-10-08 22:03:45

1. 微生物日常检验过程中的注意事项

微生物日常检验过程中的注意事项

在微生物检验操作过程中,要保证检测环境(如超净台、检测室)以及所用工器具的洁净程度,同时保证人员各种操作的规范性,尽量保证其无菌性,防止因人为原因操作失误而出现误差结果,同时在适宜温度进行培养,为合理决策和指导生产提供依据。下面是我为大家带来的关于微生物日常检验过程中的注意事项的知识,欢迎阅读。

培养基的灭菌及使用

1.每次配制时,要注意其生产日期是否在保质期内,查看其开瓶日期及瓶口密封性,保证其未变质,并且未吸潮。

2.培养基配制时,称量要准确,包括盐水的分装要准确。

3.一定要保证现配制现灭菌,未灭菌的配好培养基不能长时间放置,更不可隔夜。

4.灭菌时要保证恒温、恒压,同时要保证有效的灭菌时间。

5.灭菌过的培养基要冰箱保存,可保存一周,一般不超过 3 天。而且要遵循“先入先出”原则,先配制的要先使用。

6.在使用时,要根据当班次的使用量,用水浴锅先将培养基溶化为液态,然后及时调低水浴温度(先化好的可从水浴取出,放在水浴锅锅盖上)待用,千万不可长时间使培养基处于高温状态。

7.做产品微生物检测时,倾倒培养基温度在 45℃左右,不可过烫,避免将菌烫死;也不可过凉,化好的培养基又结块凝固,不便于观察结果。

8.每瓶培养基均要做空白。

9.尽量集中做样,避免频繁打开同一瓶培养基瓶塞,增大培养基的污染几率,出现误差结果。

10.培养基剩余过少时,可先将其倾倒成空白用板。

检测环境的维持

一、大环境(检测室)

1.检测时,窗户和空调要关闭,或用酒精对房间进行喷雾消毒,避免房间内空气流通影响超净台内部环境(最好在有通排风系统的恒温恒湿无菌间进行操作)。

2.如果在原来的原料微生物检测室进行检测,要定期开启紫外灯,对房间进行杀菌。

二、小环境(超净工作台)

1.定期清洁初效过滤器,要及时更换。

2.检测前,将超净台内部进行清洁,用 75%酒精进行擦拭消毒,并提前半小时将超净台紫外灯打开,对超净台内部环境进行杀菌。

3.关紫外灯,开风机,调整合适进风量,风量不可过低。

4.每次检测后,要对超净台内部进行清理、清洁,并用 75%酒精进行擦拭消毒。

5.紫外灯根据其使用寿命要及时更换。

6.检测同时,要做上相应菌落检测的`环境空白。

7.检测区域的选择:

a、一般在距离超净台外沿的 1/3-2/3 区域进行无菌操作;

b、要在酒精灯火焰的外焰保护区域进行操作。

工器具的洁净度

1.玻璃器皿:采用干热灭菌方式进行灭菌。

2.检测用剪刀、勺子等物品要做到检测专用,不可与其它操作器具混用,使用时,先用75%酒精消毒,再采用灼烧方式进行灭菌。

3.接种针(环)采用灼烧方式进行灭菌,但要注意检测时要先将接种针(环)进行冷却。

样品的采集及检测

一、保证采样器具的无菌性

1.玻璃器皿:采用干热灭菌方式进行灭菌,保证恒温、时间足够(但不可时间过长,容易导致玻璃器皿易裂纹而报废)。

2.取样筐:使用前要用75%酒精进行喷洒消毒。

3.取样勺:要保证其清洁消毒,清洁后用75%酒精进行擦拭消毒。

4.取样袋:可先用酒精进行擦拭消毒,再在超净台用紫外灯照射消毒,(包装车间要在传递窗用紫外灯照射消毒)。

5.电子称表面用 75%酒精消毒。

二、人员操作

1.保证手部的清洗、消毒:取样前及检测前都要先洗手再消毒。

2.取样要具有代表性(随机样、目的样、综合样)且要标示清楚。

3.取样完毕,不可在车间逗留,要及时将样品放入超净台,对其外表面进行紫外灯照射消毒。

4.在要求的检测区域进行操作。

5.检测前,要用 75%酒精棉球对样品袋口部进行擦拭消毒,再开口。

6.往盐水瓶加样品时,要注意勺子或袋子尽量不接触瓶口。

7.样品计量要准确,稀释倍数也要准确(1mL 吸管不允许将管口敲掉),进行 100 倍稀释时,1mL 吸管要伸入盐水中,不可以将样品从管壁流下去,同时要避免将管底部捅破。

8.盐水温度以 40℃左右为宜,不能过热,会将部分微生物烫死;也不能温度太低,不能将样品溶解完全。

9.进行稀释时,要摇匀,保证溶液的均一性。

10.倾倒平皿时,要注意培养基瓶口不要接触到平皿;倾倒的培养基要适量,不可以太少,在培养过程中易干掉,微生物亦死亡,以 15mL 左右为宜。

11.做大肠菌群样时,要提前将乳糖胆盐培养基培养管按需要量备好,放入超净台对外表面进行紫外线灭菌。

12.接二步时,要注意先将接种针(环)进行冷却,避免出现接不上菌落的情况,导致无法判断、确认。

13.检测完毕,及时放入相应培养箱进行培养,并清理清洁超净台。

微生物的培养

1.在培养过程中,要随时监控培养箱温度,保证其在适宜的温度进行培养。

2.要按照《微生物检验规范》要求及时观察结果,出现异常,要及时分析原因进行反馈。

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2. 微生物检验时的注意事项

微生物检验时的注意事项

微生物(microorganism),包括细菌、病毒、真菌以及一些小型的原生动物等在内的一大类生物群体,个体微小,与人类生活密切相关。广泛涉及健康、医药、工农业、环保等诸多领域。在中国大陆地区的教科书中,均将微生物划分为以下8大类:细菌、病毒、真菌、放线菌、立克次体、支原体、衣原体、螺旋体。下面是我为大家带来的微生物检验的注意事项的知识,欢迎阅读。

一、培养基的灭菌及使用

(1)每次配置时,要注意其生产日期是否在保质期内,查看其开瓶日期及瓶口密封性,保证其未变质,并且未吸潮。

(2)培养基配置时,称量要准确,包括盐水的分装要准确。

(3)一定要保证现配制现灭菌,未灭菌的配好培养基不能长时间放置,更不可隔夜。

(4)灭菌时要保证恒温、恒压,同时要保证有效灭菌时间。

(5)灭菌过的培养基要冰箱保存,可保存一周,一般不超过 3 天。而且要遵循“先入先出”原则,先配制的要先使用。

(6)在使用时,要根据当班次的.使用量,用水浴锅先将培养基溶化为液态,然后及时调低水域温度(先化好的可从水域取出,放在水浴锅锅盖上)待用,千万不可长时间使培养基处于高温状态。

(7)做产品微生物检测时,倾倒培养基温度在 45℃左右,不可过烫,避免将菌烫死;也不可过凉,化好的培养基又结块凝固,不便于观察结果。

(8)每瓶培养基均要做空白。

(9)尽量集中做样,避免频繁打开同一瓶培养基瓶塞,增大培养基的污染几率,出现误差结果。

(10)培养基剩余过少时,可先将其倾倒成空白用板。

二、 做样环境的维持

(1)大环境(房间)

1)做样时,窗户和空调要关闭,或用酒精对房间进行喷雾消毒,避免房间内空气流通影响超净台内部环境(最好在有通排风系统的恒温恒湿无菌间进行操作)。

2)如果在原来的原料微生物检测室进行做样,要定期开启紫外灯,对房间进行杀菌。

(2)小环境(超净台)

1)定期清洁初效过滤器,要及时更换。

2)做样前,将超净台内部进行清洁,用 75%酒精进行擦拭消毒,并提前半小时将超净台紫外灯打开,对超净台内部环境进行杀菌。

3)关紫外灯,开风机,调整合适进风量,风量不可过低。

4)每次做样后,要对超净台内部进行清理、清洁,并用 75%酒精进行擦拭消毒。

5)紫外灯根据其使用寿命要及时更换。

6)做样同时,要做上相应菌落检测的环境空白。

7)做样区域的选择:

a、一般在距离超净台外沿的 1/3-2/3 区域进行无菌操作;

b、要在酒精灯火焰的外焰保护区域进行操作。

三、 工器具的洁净度

(1)玻璃器皿:采用干热灭菌方式进行灭菌。

(2)做样用剪刀、勺子等物品要做到做样专用,不可与其它操作器具混用,使用时,先用75%酒精消毒,再采用灼烧方式进行灭菌。

(3)接种针(环)采用灼烧方式进行灭菌,但要注意做样时要先将接种针(环)进行冷却。

四、样品的采集及检测

(1)保证采样器具的无菌性

1)玻璃器皿:采用干热灭菌方式进行灭菌,保证恒温、时间足够(但不可时间过长,导致玻璃器皿易裂纹而报废)。

2)取样筐:使用前要用 75%酒精进行喷洒消毒

3)取样勺、浓奶取样提子:要保证其清洁消毒,清洁后用 75%酒精进行擦拭消毒。

4)取样袋:可现用酒精进行擦拭消毒,再在超净台用紫外灯照射消毒,(包装车间要在传递窗用紫外灯照射消毒)。

5)电子称表面用 75%酒精消毒。

(2)人员操作

1)保证手部的清洗、消毒:取样前及做样前都要先洗手再消毒。

2)取样要具有代表性(随机样、目的样、综合样)且要标示清楚。

3)取样完毕,不可在车间逗留,要及时将样品放入超净台,对其外表面进行紫外灯照射消毒。

4)在要求的做样区域进行操作。

5)做样前,要用 75%酒精棉球对样品袋口部进行擦拭消毒,再开口。

6)往盐水瓶加样品时,要注意勺子或袋子尽量不接触瓶口。

7)样品计量要准确,稀释倍数也要准确(1mL 吸管不允许将管口敲掉),进行 100 倍稀释时,1mL 吸管要伸入盐水中,不可以将样品管壁流下去,同时要避免将管底部捅破。

8)盐水温度以 40℃左右为宜,不能过热,将部分微生物烫死,也不能温度太低,不能将奶粉溶解完全。

9)进行稀释时,要摇匀,保证溶液的均一性。

10)倾倒平皿时,要注意培养基瓶口不要接触到平皿;倾倒的培养基要适量,不可以太少,在培养过程中干掉,微生物亦死亡,以 15mL 左右为宜。

11)做大肠菌群样时,要提前将乳糖胆盐培养基培养管按需要量备好,放入超净台对外表面进行紫外线灭菌。

12)接二步时,要注意先将接种针(环)进行冷却,避免出现接不上菌落的情况发生,导致无法判断、确认。

13)做样完毕,及时放入相应培养箱进行培养,并清理清洁超净台。

五、 微生物的培养

(1)在培养过程中,要随时监控培养箱温度,保证其在适宜的温度进行培养。

(2)要按照《微生物检验规范》要求及时观察结果,出现异常,要及时分析原因进行反馈。

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3. 实验室微生物检验需要注意哪些问题

微生物检验无菌操作的注意事项有很多细节,日常的微生物检验过程中要注意无菌操作,除了要在洁净台和操作器皿上的消毒,还需要注意人员卫生和环境的卫生。

【操作技巧】

进行培养时,动作要准确敏捷,但又不必太快,以防空气流动,增加污染机会。不能用手触及已消毒器皿,如已接触,要用火焰烧灼消毒或取备品更换。为拿取方便,工作台面上的用品要有合理的布局,原则上应是右手使用的东西放置在右侧,左手用品在左侧,酒精灯置于中央。工作由始至终要保持一定顺序性,组织或细胞在未做处理之前,勿过早暴露在空气中。同样,培养液在未用前,不要过早开瓶;用过之后如不再重复使用,应立即封闭瓶口直立可增加落菌机会。吸取营养液、PBS、细胞悬液及其它各种用液时,均应分别使用吸管,不能混用,以防扩大污染或导致细胞交叉污染。工作中不能面向操作野讲话或咳嗽,以免唾沫把细菌或支原体带入工作台面发生污染。操作前用酒精擦拭超净台面及双手。手或相对较脏的物品不能经过开放的瓶口上方,瓶口最易污染,加液时如吸管尖碰到瓶口,则应将吸管丢掉。

【培养前准备】

在开始实验前要制定好实验计划和操作程序。有关数据的计算要事先做好。根据实验要求,准备各种所需器材和物品、清点无误后将其放置操作场所(培养室、超净台)内,然后开始消毒。这可以避免开始实验后.囚物品不全往返拿取而增加污染机会。

【火焰消毒】

在无菌环境进行培养或做其它无菌工作时,首先要点燃酒精灯或煤气灯。以后一切操作,如按装吸管帽、打开或封闭瓶口等,都需在火焰近处并经过烧灼进行。但要注意:金属器械不能在为焰中烧的时间过长,以防退火,烧过的金属镊要待冷却后才能挟取组织,以免造成组织损伤。吸取过营养液后的吸管不能再用火焰烧灼,因残留在吸管头中营养液能烧焦形成炭膜,再用时会把有害物带入营养液中。开启、关闭长有细胞的培养瓶时,火焰灭菌时间要短。防止因温度过高烧死细胞。另外胶塞过火焰时也不能时间长,以免烧焦产生有毒气体,危害培养细胞。

【洗手和着装】

原则上和外科手术相同。平时仅做观察不做培养操作时,可穿装细胞培养室内紫外线照射30min的清洁工作服。在利用超净台工作时,因整个前臂要伸入箱内,应着长袖的清洁工作服,并于开始操作前要用75%酒精消毒手。如果实验过程中手触及可能污染的物品和出入培养室都要重新用消毒液洗手。进入原代培养室需彻底洗手还要戴口罩、着消毒衣帽。

【操作台消毒】

体外培养细胞缺乏抗感染能力,所以防止污染是决定培养成功或失败的首要条件。即便使用设备完善的实验室。若实验者粗心大意,技术操作不规范,也会导致污染。因而.为在一切操作中为最大可能的保证无菌.每一项工作都必须做到有条不紊和完全靠。无菌培养室每天都要用0.2%的新洁尔灭拖洗地面—次(拖布要专用).紫外线照射消毒30-50min,超净工作台台面每次实验前要用75%酒精擦洗。然后紫外线淌毒30min。在工作台面消毒时切勿将培养细胞和培养用液同时照射紫外线,消毒时工作台面上用品不要过多或重叠放置.否则会遮挡射线降低消毒效果。—些操作用具如移液器、废液缸、污物盒、试管架等用75%酒精擦洗后置于台内同时紫外线消毒。

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4. 微生物检测应注意什么事项

1、工作室要矮小平整、光滑、无凹凸不平或棱角、四壁及屋顶用不透水之材质,便于擦洗及杀菌。

2、室内采光面积应大,从室外应能看到室内的情况。

3、为保证无菌室的洁净,无菌室周围需设缓冲走廊,走廊旁再设缓冲间,其面积可小于无菌室。

4、无菌室、缓冲走廊及缓冲间均设有日光灯及紫外灯,杀菌紫外灯离工作台以一米为宜,其电源开关应设在室外。

5、无菌室与缓冲间进出口应设推拉门,门与窗平齐,门缝要封紧,两门要错开,以免空气对流造成污染。

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5. 简述进行卫生微生物检验时,样品的采集及送检需要注意哪几个方面

简述进行卫生微生物检验时,样品的采集及送检需要注意哪几个方面。

答:采集的样品必须有代表性;采集样品在无菌条件下进行;采集数量视不同种类,按国家标准或有关规定进行;采样前后应立 即做好标记;采集后样品应及时送到微生物检验室,以免样品中微生物的增殖或死亡,食品.或水样不应超过3小时。

6. 做微生物检验要注意什么

1、室验需在洁净台进行
2、操作前用75%酒精擦洁净台面及四周,放好需用的实验器材及各种溶液,开紫外灯消毒30分钟,在关掉紫外灯30分钟后方能进入。
3、进入无菌室前应用肥皂洗手,然后用75%酒精球棉将手擦干净。
4、进入无菌间必须穿的专用工作服、帽及拖鞋、口罩,应放在无菌室缓冲间,工作前经紫外线消毒后使用。
5、操作开始前用0.1%的新洁尔灭或75%的酒精对手、手臂及所要用到的超净台台面进行消毒。
6、使用的吸管、平皿及培养基等必须经消毒灭菌,打开包装未使用的器皿,不能放置再用,消毒用器皿放置不得超过一周。
7、从包装中取出吸管时,吸管尖部不能触及外露部位及试管或平皿边。
8、接种样品必须在酒精灯前操作,接种样品时,吸管从包装中取出后及打开试管塞都要通过火焰消毒。
9、实验完毕,清洁操作台面。
10、用过的器材进行整理,污染细菌的器材需经高压灭菌或煮沸消毒。
11、实验过程中,及时用0.1%的新洁尔灭溶液对手、手臂及可能被污染了的区域进行消毒。
12、换下的隔离衣、帽等进行紫外线,拖鞋放回原处。
13、用毕,再开紫外灯消毒 30分钟。

7. 药厂微生物检验岗位有何风险 如何预防

首先,作为微生物检验岗位的人员必须具备最基本的微生物学常识,这样才能上岗工作;第二,在对微生物有一定了解的基础上进行微生物操作其实并不是太危险的,药企一定有岗位的SOP,一定按照SOP进行操作,这样基本没有什么风险;第三,平常进行微生物操作的,手上有伤口的时候尽量避免微生物操作,这样会增加感染的风险;第四,了解自己岗位经常进行检验的菌种主要是哪一类菌种:细菌、真菌(酵母或丝状真菌即霉菌),每种菌消毒时间的长短不同,对于产芽孢的菌种,要进行二次灭菌,这样才能消毒彻底;了解菌种特性,是否是致病菌,那么防护工作一定要做好。最后只要是对微生物有一定了解的人,操作这一方面的实验其实不用有太多的担心,按照SOP操作,不会有大问题。希望能帮到你!

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