灭菌效果生物监测怎么做

1. 脉动真空压力蒸汽灭菌器空锅做生物监测怎么操作

如果是做灭菌效果检测的话，常用下面两种方法：

一、化学指示卡测试法

将化学指示卡放置拟灭菌物品包中央。灭菌后，将包裹取出，观察指示卡，如果指示卡色块颜色达到或深于卡面标准色，说明物品包中心已达到灭菌温度和时间；如果指示剂颜色无变化或变色浅于标准色，则表明未达到规定的灭菌温度和时间。

二、生物监测法。通常采用国际通用的热力灭菌试验菌株为嗜热脂肪芽胞杆菌。将生物指示剂放入标准试验包中心部位。试验包大小为25 cm×30 cm×30 cm。测试设5个点,分别为灭菌柜（上层中心,中层左前,右后,下层左后,排气口附近）。按灭菌操作程序,灭菌结束后，压碎安瓿培养基与菌片混合一起置于56°C培养箱内,24 h～48 h之间观察结果。如培养基的灭菌管，说明无嗜热脂肪芽胞杆菌生长繁殖，表示灭菌彻底；如由紫红色变为黄色，说明有嗜热脂肪芽胞杆菌生长繁殖，表示灭菌失败。

(1)灭菌效果生物监测怎么做扩展阅读：

灭菌原理：利用机械抽真空的方法，使灭菌室内形成负压，蒸汽得以迅速穿透到物品内部，与器械接触后饱和蒸汽释放出大量的潜热（2250KJ），当蒸汽遇到冷的灭菌物品时即冷凝成水，释放全部潜热，使灭菌物品的温度快速的升高，迅速升高的温度使细菌中的蛋白质凝固变性，从而将所有微生物包括细菌芽孢全部杀死。

灭菌过程：待灭菌器械由消毒员放置到专用灭菌架内，推入灭菌器，关闭前门，操作人员运行灭菌器已预先设定好的灭菌程序进行灭菌处理。程序运行过程如下：脉动——升温——灭菌——排汽——干燥——结束。

a．脉动：对灭菌器内室进行抽真空、进蒸汽操作，反复进行三次，然后再次抽真空，待内室压力到达脉动下限后，程序转入升温阶段。经过该阶段后，内室的冷空气排除率可达到99%以上，确保内室无死点，保证灭菌的合格。

b．升温：蒸汽经过灭菌器夹层进入内室，对器械进行加热，同时内室疏水阀间歇性开启，将蒸汽冷凝后产生的水排出。内室温度达到设定值后程序转入灭菌阶段。

c．灭菌：开始灭菌计时，在此期间内室进汽阀受到内室温度和压力的共同控制以确保内室保持在一定的温度范围内对器械进行灭菌。当内室温度高于灭菌器设定的数值上限时，进汽阀关闭，低于数值下限时，进汽阀打开；同时，当内室压力高于数值上限时，进汽阀也会关闭，低于内室压力下限值时，进汽阀打开以确保灭菌阶段温度的上下波动不超过3°。灭菌计时结束后，程序转入排汽阶段。

d．排汽：排汽阀打开，内室的蒸汽在内外压差的作用下排出，经过换热器的作用，大部分蒸汽冷凝成水，少部分蒸汽经过滤后排至大气。内室压力下降到设定值后，程序转入干燥阶段。

e．干燥：真空泵打开对内室进行抽真空，同时夹层保持一定的压力和温度，起到烘干器械的作用。

f．结束：蜂鸣器呼叫，此时可以打开门将灭菌车推出进行器械的晾放。

2. 3M生物培养指示剂的压力蒸汽灭菌生物监测

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该压力蒸汽灭菌生物培养指示剂用于压力蒸汽灭菌效果的生物监测(包括下排气锅和预真空锅);通过培养基颜色变化，反应嗜热脂肪杆菌芽孢是否存活，从而判断压力蒸汽灭菌生物监测结果。
1. 将压力蒸汽灭菌生物培养指示剂放于一标准测试包中;
2. 按照国家规范, 分别将测试包放于锅内不同位置;
3. 灭菌完毕, 取出该生物指示剂;
4. 挤破内含的安瓿, 与一支对照管一起放于56℃培养锅内培养;48小时后阅读结果。
结果阅读：
1.培养后指示管不变色(呈紫色), 表示灭菌通过;
2.培养后指示管变色(呈黄色), 表示灭菌不通过,(必须及时查出灭菌失败原因)。
3.同时培养的对照管应为阳性(呈黄色), 如阴性,可能的原因为: 培养条件不符合要求; 生物指示剂有问题; (应及时查出阴性原因)。
注意事项：
1. 灭菌完毕, 含生物指示剂的包裹很热并有一定压力; 需至少冷却10分钟以上, 否则可能引起塑料管内的安瓿破裂, 飞溅的碎片导致损伤;
2. 只有对照管为阳性, 其生物监测结果才算有效。
3. 贮存于室温: 15-30℃; 相对湿度为35-60%;避免靠近灭菌器和化学消毒剂。
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该生物指示剂可用以121℃下排气和132℃预真空压力蒸汽灭菌锅。
3M™ ATTESTTM压力蒸汽灭菌生物培养指示剂(快速)在与3M ATTEST 290 培养锅共用时, 通过酶活性的灭活与否，探测嗜热脂肪杆菌芽孢是否存活，从而判断压力蒸汽灭菌结果。
使用方法:
1－在生物指示剂标签上注明灭菌器锅号, 负荷数量, 灭菌日期; 不要在指示剂的瓶或盖上另贴一个标签。将生物指示剂放于一个标准测试包内，并置于最难灭菌的位置。
2- 将含有生物指示剂的测试包放在灭菌器最难灭菌的位置，通常是灭菌器底层，近门或排气口上面。
3- 正常装载。
4－灭菌循环完毕, 取出生物指示剂。
5- 灭菌结束后，从灭菌器内取出含有生物指示剂的测试包，打开散热5分钟后才能取出生物指示剂。同时在压碎安瓿之前，让生物指示剂在培养锅外再冷却10分钟后才能压碎，然后进行生物培养。
6－检查生物指示剂标签上的化学指示剂，颜色由玫瑰色变成棕色证明生物指示剂经过压力蒸汽灭菌过程的处理。该颜色的变化并非表明该处理达到灭菌的目的，如果化学指示剂没有变化，请检查灭菌过程。
7－戴上防护眼镜，挤碎安瓿，然后培养生物指示剂。详细步骤请参阅3M ATTEST 290 培养锅操作说明。
8－每次培养须同时培养一个未灭菌过的生物指示剂进行阳性对照，阳性对照生物指示剂与经过灭菌处理的生物指示剂为相同生产日期和批号。
阳性对照的目的是保证：1）－正确的培养条件
2）－指示剂的活性（不适当的贮存条件可能影响有效期内的指示剂活性）
3）－3M ATTEST 290 培养锅功能完好
9－在3M ATTEST 290 培养锅（培养温度62+/-20C）内，培养阳性对照和已处理的指示剂3小时，读出最终结果。阳性对照必须得出荧光阳性结果(阅读器显示为红灯或+)，如阳性对照读出荧光阴性(绿灯或-)，应检查培养锅温度和操作过程，直至阳性对照为阳性结果，生物监测的结果才是有效的。对于经过灭菌处理的指示剂，荧光阳性(红灯或+)表明灭菌过程失败，荧光阴性(绿灯或-)表明灭菌过程合格。
10－如果需要通过颜色变化检测生物监测结果，应将生物指示剂放在培养锅内继续培养。同时随时监测阳性结果的出现，如8、12、24，直至168小时（7天），最终视觉效果应在168小时（7天）得出。黄色表明细菌生长，灭菌过程失败。168小时（7天）没有颜色变化（培养基为紫色）表明灭菌过程合格。
11－对任何为阳性生物监测结果应立即采取行动，如追回同锅次的灭菌物品，和寻找原因。直至生物指示剂的结果呈阴性。
注意事项:
冷却之前压碎或过度处理生物指示剂可能导致玻璃安瓿的破碎, 飞溅的碎屑会使人员受伤; 因此建议在从灭菌器内取出生物指示剂时戴防护眼镜和手套, 在压碎生物指示剂时也需要戴防护眼镜。
禁忌：该生物指示剂不能用于121℃预真空和132℃下排气压力蒸汽灭菌锅，及干热、化学蒸汽、环氧乙烷和其他的低温灭菌过程的生物监测。
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3M™Attest™压力蒸汽灭菌标准生物测试包能够可靠地检测压力蒸汽灭菌过程的生物监测结果。通过培养基颜色变化，反应嗜热脂肪杆菌芽孢是否存活，从而判断压力蒸汽灭菌生物监测结果。该生物测试包用于132℃预真空压力蒸汽灭菌器时在132℃运行≥4分钟。
1-在生物测试包标签上注明灭菌器，负荷数，灭菌日期，将测试包置于灭菌器最难灭菌的位置。
2-最难灭菌的位置，通常是底层，近门或排气口上面。
3-正常装载。
4-灭菌循环完毕，取出生物测试包。
注意事项：
冷却之前压碎或过度挤压生物指示剂可能导致玻璃安瓿瓶的破碎，飞溅的碎屑会使人员受伤。因此建议在从灭菌器内取出生物测试包时戴防护眼镜和手套，在从测试包内取出及压碎生物指示剂时也需要戴防护眼镜。
1－从灭菌器内取出测试包，打开散热5分钟后才能取出生物指示剂，在压碎之前，让生物指示剂在培养器外再冷却10分钟后才能压碎。
2－检查生物指示剂标签上的化学指示剂，颜色由玫瑰色变成棕色证明生物指示剂经过压力蒸汽灭菌过程的处理。该颜色的变化并非表明该处理达到灭菌的目的，如果化学指示剂没有变化，请检查灭菌过程。
3－戴上防护眼镜，挤碎安瓿瓶，然后在56±2°C培养生物指示剂。
4－每次培养须同时培养一个未处理的测试包的生物指示剂进行阳性对照，包内阳性对照生物指示剂与处理的生物指示剂为相同制造日期和标号。
阳性对照的目的是保证：1）－正确的培养条件
2）－指示剂的活性（不适当的贮存条件可影响有效期内的指示剂活性）
3）- 培养基促进细菌快速生长的能力
5－通过颜色变化检测生物监测结果，随时监测阳性结果出现，如8、12、24，直至48小时（2天）。最终视觉效果应在48小时（2天）得出。黄色表明细菌生长，灭菌过程失败。48小时（2天）没有颜色变化（培养基为紫色）表明灭菌过程合格。
8－对任何为阳性生物监测结果应立即采取行动，直至生物指示剂的结果呈阴性。
禁忌：该生物指示剂不能用于121℃预真空和132℃下排气压力蒸汽灭菌锅，及干热、化学蒸汽、环氧乙烷和其他的低温灭菌过程。
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3M™Attest™压力蒸汽灭菌标准生物测试包(快速) 内含有3M™压力蒸汽灭菌生物指示剂(快速)，在与3M™Attest™阅读器配合使用时，能够迅速可靠地检测压力蒸汽灭菌过程的生物监测结果。
通过阅读器观测荧光发生与否或者后继培养基颜色变化与否，反应嗜热脂肪杆菌芽孢是否存活，从而判断压力蒸汽灭菌生物监测结果。该生物测试包用于132℃预真空压力蒸汽灭菌器时在132℃运行≥4分钟。
1-在生物测试包标签上注明灭菌器，负荷数，灭菌日期，并将测试包置于灭菌器最难灭菌的位置。
2-最难灭菌的位置，通常是底层，近门或排气口上面。
3-正常装载。
4-灭菌循环完毕，取出生物测试包。
注意事项：
冷却之前压碎或过度挤压生物指示剂可能导致玻璃安瓿瓶的破碎，飞溅的碎屑会使人员受伤。因此建议在从灭菌器内取出生物测试包时戴防护眼镜和手套，在从包内取出生物指示剂及压碎时也需要戴防护眼镜。
1－从灭菌器内取出测试包，打开散热5分钟后才能取出生物指示剂，在压碎之前，让生物指示剂在阅读器外再冷却10分钟后才能压碎，不要用手指压碎玻璃安瓿瓶。
2－检查生物指示剂标签上的化学指示剂，颜色由玫瑰色变成棕色证明生物指示剂经过压力蒸汽灭菌过程的处理。该颜色的变化并非表明该处理达到灭菌的目的，如果化学指示剂没有变化，请检查灭菌过程。
3－戴上防护眼镜，挤碎安瓿瓶，然后培养生物指示剂。详细步骤请参阅Attest™290阅读器操作说明。
4－每次培养须同时培养一个未处理的生物测试包的指示剂进行阳性对照，包内阳性对照生物指示剂与处理的生物指示剂为相同制造日期和标号。
阳性对照的目的是保证：1）－正确的培养条件
2）－指示剂的活性（不适当的贮存条件可影响有效期内的指示剂活性）
3）－Attest™阅读器功能完好
5－在Attest™阅读器60+/-20C内，培养阳性对照和已处理的指示剂3小时，读出最终结果。阳性对照必须得出荧光阳性结果(阅读器显示为红灯或+)，如阳性对照读出荧光阴性(绿灯或-)，应检查阅读器温度和紫外灯，直至阳性对照为阳性结果，生物监测的结果才是有效的。对于经过灭菌处理的指示剂，荧光阳性(红灯或+)表明灭菌过程失败，荧光阴性(绿灯或-)表明灭菌过程合格。
6－如果通过颜色变化检测生物监测结果，应在阅读器内继续培养，如培养基仍为紫色，检查阅读器温度和贮存条件。该指示剂应在专门的阅读器60+/-20C的湿性环境中培养，避免干燥。随时监察阳性结果的出现,如8、12、24，直至168小时（7天）。最终视觉效果应在168小时（7天）得出。黄色表明细菌生长，灭菌过程失败。168小时（7天）没有颜色变化（培养基为紫色）表明灭菌过程合格。
7－对任何阳性生物监测结果应立即采取行动，直至生物测试包内生物指示剂的结果呈阴性。
禁忌：该生物测试包不能用于121℃预真空和132℃下排气压力蒸汽灭菌锅，及干热、化学蒸汽、环氧乙烷和其他的低温灭菌过程。
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该产品用于压力蒸汽灭菌过程常规检测。该产品用于121°C（≥30分钟）下排气或132°C（≥4分钟）预真空压力蒸汽灭菌器中装载棉布包、金属器械及硬质容器等的灭菌监测。每个测试包含一个1292 3M™ATTEST™压力蒸汽灭菌生物培养指示剂(快速)(棕色瓶盖)，一片记录卡，和一个1243 3MTM压力蒸汽灭菌包内化学指示卡(爬行式)。在蒸汽条件下，化学指示卡中的黑色颜料染料条达到或通过ACCEPT区，并且1292安瓿瓶上的化学指示剂由玫瑰色变为棕色，同时培养和阅读1292生物指示剂。
1292 3M™ATTEST™压力蒸汽灭菌生物培养指示剂(快速) 是一种双重阅读生物指示系统，当结合3M ATTEST 190/290阅读器共用时，可以快速可靠的监测压力蒸汽灭菌过程。1292 3M™ATTEST™压力蒸汽灭菌生物培养指示剂(快速) 通过酶活性的灭活与否，探测嗜热脂肪杆菌芽孢是否存活。通过非荧光培养基中酶分解产生的荧光剂来检测酶的存在。荧光剂的产生可以通过3M ATTEST 190/290阅读器检测。荧光剂的变化指示压力蒸汽灭菌过程失败。
1292 3M™ATTEST™压力蒸汽灭菌生物培养指示剂(快速) 也可以通过可见的颜色变化判断嗜热脂肪杆菌芽孢的存在。嗜热脂肪杆菌芽孢的繁殖和代谢会产生酸性副产品，pH降低导致培养基颜色由紫色变为黄色，指示压力蒸汽灭菌过程的失败。然而，由于3小时荧光结果的高灵敏性，就没必要培养1292 3M™ATTEST™压力蒸汽灭菌生物培养指示剂(快速)超过3小时。
使用方法:
1. 将该测试包标签朝上放在满负载的灭菌器中最难灭菌的区域，通常为灭菌器底层、近门处和排气口上方。
2. 按照程序运行灭菌循环。
3. 灭菌循环结束后，佩戴好防护眼镜和手套将灭菌器的门完全打开冷却至少5分钟，然后取出测试包。
4. 打开测试包冷却5分钟，然后取出生物指示剂再冷却10分钟后才能压碎。
5. 取出指示剂。
6. 阅读1243化学指示卡。当黑色颜料块到达化学指示卡的ACCEPT窗口时说明整个灭菌负荷达到灭菌条件；当黑色颜料块没有到达化学指示卡的ACCEPT窗口时即在REJECT区域时说明未达到灭菌条件。视为灭菌失败，此时须察看灭菌过程。
7. 检查1292生物指示剂标签上的化学指示剂，颜色由玫瑰色变成棕色证明生物指示剂经过压力蒸汽灭菌过程的处理。该颜色的变化并非表明该处理达到灭菌的目的，如果化学指示剂没有变化，请检查灭菌过程。
8. 在1292生物指示剂标签上注明灭菌器锅号, 负荷数量, 灭菌日期。
9. 在记录卡和1243化学指示卡背面填写必要的灭菌信息作为永久记录；记录生物指示剂的监测结果。
10. 丢弃测试包，因为该测试包为一次性使用，反复使用导致测试结果无效。
11. 戴上防护眼镜，挤碎安瓿，然后培养生物指示剂。详细步骤请参阅3M ATTEST 190/290 培养锅操作说明。
12. 每次培养须同时培养一个未灭菌过的1292生物指示剂进行阳性对照，阳性对照生物指示剂与经过灭菌处理的生物指示剂为相同生产日期和批号。
13. 在阳性对照1292指示剂标签上注明C和日期。挤碎安瓿，然后培养阳性对照生物指示剂。详细步骤请参阅3M ATTEST 190/290 培养锅操作说明。
14. 在3M ATTEST 190/290 培养锅内，培养阳性对照和已处理的指示剂3小时，读出最终结果。
15. 得到结果后，可丢弃生物指示剂。也可以通过阳性对照生物指示剂的目测颜色变化来指示蒸汽灭菌过程。这样可以确保：
 正确的培养条件
 指示剂的活性（不适当的贮存条件可能影响有效期内的指示剂活性）
 培养基的能力
3M ATTEST 190/290 培养锅功能完好
黄色表明细菌生长，灭菌过程失败。没有颜色变化表明灭菌过程合格。最终阴性结果应在培养48小时后得出。阳性对照为阳性结果时，生物监测的结果才是有效的。
16. 记录经过灭菌过程和阳性对照指示剂的结果。对任何结果为阳性的生物监测结果应立即采取行动。如追回同锅次的灭菌物品，和寻找原因。直至生物指示剂的结果呈阴性。
警告：
冷却之前压碎或过度处理生物指示剂可能导致玻璃安瓿的破碎，飞溅的碎屑会使人员受伤，因此需要注意以下事项：
 将安瓿瓶挤碎前需要冷却一定时间
 从灭菌器内取出生物指示剂时戴防护眼镜和手套
 在压碎生物指示剂时也需要戴防护眼镜
 不要用手指直接挤碎玻璃安瓿瓶
 不要在手指间滚动瓶子避免弄湿孢子带

3. 高压灭菌锅生物监测怎么做芽胞试纸不被污染

摘要 按照WS/T367的规定。将嗜热脂肪杆菌芽胞生物指示物置于标准测试包的中心部位，生物指示物应符合国家相关管理要求。标准测试包由16条41cmX66cm的全棉手术巾制成，即每条手术巾的长边先折成3层，短边折成2层，然后叠放，制成23cmX23cmX151.5KG的标准测试包。

4. 求助：灭菌后植入物（钢板）如何做生物检测

灭菌后植入物（钢板）如何做生物检测
其实生物监测主要是是对灭菌效果的监测，安全阀主要是对一起本身的保护期作用，故不需要做生物监测。但是对于具体的情况，如贵方出于某种政策需要，可做一次生物监测，保存记录，作为应对不时之需。而且做一次生物监测本身也可以检验你仪器的效用是否正常，一举多得。意见仅供参考哈。

5. 低温等离子灭菌器生物监测怎么做

高温生物指示剂主要指压力蒸汽灭菌生物指示剂。 低温生物指示剂一般指过氧化氢低温等离子灭菌生物指示剂。 你这是根据灭菌温度不同进行灭菌，不太严谨！高温和低温分别还有干热灭菌生物指示剂，环氧乙烷灭菌生物指示剂和低温甲醛灭菌生物指示剂。
常规的每日监测是由CSSD的人来做，院感科人员检查监测的结果，或者定期抽查监测。当地CDC也会来抽查的。 CSSD的生物监测是一个自含式的菌管，灭菌完成后在培养器中培养，观察结果的。 你所谓“监测报告单”的CSSD是出具不了的

6. 压力蒸汽灭菌器灭菌效果的监测

B-D试验是用于检测预真空（脉动真空）压力蒸汽灭菌器冷空气排出情况的试验，该试验是根据指示图颜色的改变是否均匀来判断灭菌器在灭菌过程中是否有冷空气团残留。
1 材料与方法
1.1 材料 采用江苏连云港医疗器械厂生产的DMQ－0.3型脉动真空压力灭菌器，3M公司生产的B-D测试纸，自制纯棉布标准包。
1.2 方法 B-D试验包由纯棉布巾50cm×90cm大小的50条组成，布巾先横折为3层，再纵折形成6层。将折好的布巾一条摞一条至25cm高度，摞放时，各层布巾按折叠侧左右交替摆放，以使两侧厚度相等。布巾摆好后，将化学指示图水平的夹放于中央层布巾之间，然后用布将所有布巾包成一试验包，外面用3M化学指示剂胶带固定，整个布巾包的大小，高约25cm，宽23cm，长27cm，重4kg。将试验包水平放于空锅内，靠近柜门与排气口处，在蒸汽源压力0.30～0.50MPa，水源压力0.15～0.30MPa条件下，抽真空3次，以真空度为0.086MPa，达到工作压力0.21MPa，温度134℃，灭菌3.5～4min，取出后观察判断结果。
2 判断标准B-D测试纸显示黑白线条分明，颜色均匀，清晰，说明蒸汽快速渗透，冷空气排除，无明显空气泄漏，无冷空气团存在，表示测试合格。B-D测试纸出现变色不均匀或测试纸中间部位比外部颜色淡，表示监测不合格。

3讨论分析脉动真空压力蒸汽灭菌器B-D试验失败的原因主要有：（1）新棉布巾未洗净，有浆存在，蒸汽难以穿透;（2）旧棉布巾测试后未洗涤，布与布之间受高热蒸汽的影响，互相压紧，使蒸汽不容易穿透，影响潜伏热的释放，试纸图案中间色泽浅［1］；（3）测试包包扎过紧，影响蒸汽穿透，图案黑白线不清；（4）蒸汽压力不足，蒸汽压力不到0.3MPa；（5）灭菌器使用前预热时间不够，特别是冬季，如预热时间少于10min，也会出现图案中间部位颜色比外部淡；（6）布巾过分干燥，造成布巾湿度过低，蒸汽进入灭菌柜后不能凝结成水和释放潜能，产生过度饱和状态，图案呈不均匀灰色［2］；（7）布巾过于潮湿，高温蒸汽进入柜室内遇到冷的潮湿的布巾，迅速凝结成水，多余的水份向测试纸渗透形成水渍，影响热穿透，图案白色线条边缘黄褐色［2］；（8）灭菌器出现故障，真空泵效果下降，致使柜室未达到应有的真空程度；自控系统失灵，抽气时间缩短，密封圈老化，不能维持规定的负压，造成排除冷空气的同时仍有冷空气的渗入，影响测试结果［1］。通过对B-D试验包的规范制作，并做到每次测试后的布巾都必须洗涤后方才使用；避免布巾过干或过湿；布巾包松紧适宜；灭菌器出现故障时，及时请专业维修人员进行检修，灭菌器维修后，进行复测B-D试验。经查找原因并改进后2005年进行的145次B-D试验全部合格。供应室灭菌质量的保证是防止医院感染的重要措施之一。而脉动真空压力蒸汽灭菌器内冷空气团的残留，将影响灭菌器的灭菌效果。B-D试验是检测脉动真空压力灭菌器是否达到灭菌要求的重要指标之一。因此，高压灭菌前，必须对脉动真空压力（预真空）灭菌器进行B-D试验。分析B-D试验失败的原因，避免因技术因素所致的B-D试验失败而造成的人力、物力、时间等资源的浪费，保证压力蒸汽灭菌器灭菌效果的可靠性。

7. 高压灭菌的温度,时间,适用范围,如何对高压灭菌效果进行监测

压力蒸汽灭菌效果监测包括物理监测、化学监测和生物监测。
(1)物理监测：每次灭菌应连续监测并记录灭菌时的温度、压力和时间等灭菌参数。温度波动范围在+3℃以内，时间满足最低灭菌时间的要求，同时应记录所有临界点的时间、温度与压力值，结果应符合灭菌的要求。
(2)化学监测：包括包外、包内化学指示物监测。具体要求为灭菌包包外应有化学指示物，高度危险性物品包内应放置包内化学指示物，放于包内最难灭菌的部位。通过观察化学指示物颜色的变化，判定是否达到灭菌合格要求。采用快速压力蒸汽灭菌程序灭菌时，应直接将包内化学指示物置于待灭菌物品旁进行化学监测。
(3)生物监测：将嗜热脂肪杆菌芽孢片制成标准生物测试包、生物PCD（灭菌过程验证装置），或使用一次性标准生物测试包，对灭菌器的灭菌质量进行生物监测。将生物监测包置于灭菌器最难灭菌的部位，并设阳性对照和阴性对照。根据微生物芽孢的死亡情况来判断灭菌是否成功，考核灭菌器负荷是否达到无菌保障水平，这是确定压力蒸汽灭菌是否有效的最可靠的方法

8. 怎样进行压力蒸汽灭菌生物监测谢谢

1、检测方法:
将压力蒸汽灭菌生物指示剂放于标准测试包中，分别将测试包放于锅内不同位置，灭菌完毕，取出该生物指示剂，挤破内含的安瓿，于56℃培养锅内培养，48小时后阅读结果。
2、结果判定:
每个指示剂接种的溴甲酚紫蛋白胨水培养基都不变色，判定为灭菌合格；指示菌片之一接种的溴甲酚紫蛋白胨水培养基，由紫色变为黄色时，则灭菌过程不合格。
3、注意事项:
监测所用菌片须经卫生部认可，并在有效期内使用。生物指示物监测应1月1次。

9. 小型压力蒸汽灭菌器的监测怎么做测试包是多大尺寸

小型压力蒸汽灭菌器因一般无标准生物监测包，应选择灭菌器常用的、有代表性的灭菌制作生物测试包或生物PCD(灭菌过程验证装置Process Challenge Device,PCD)，置于灭菌器最难灭菌的部位，且灭菌器应处于满载状态。生物测试包或生物PCD应侧放，体积大时可平放。

压力蒸汽灭菌B-D测试方法： 具体作法是:B-D测试包由100%脱脂纯棉布折叠成长30cm±2cm、宽25cm±2cm、高25cm～28cm大小的布包裹；将专门的B-D测试纸，放入布测试包的中间；测试包的重量为4kg±5%或用一次性B-D测试包。B-D测试包水平放于灭菌柜内灭菌车的前底层，靠近柜门与排气口底前方；柜内 除测试包外无任何物品; 134℃，3.5min～4min后，取出B-D测试纸观察颜色变化，均匀一致变色，说明冷空气排除效果良好，灭菌锅可以使用；反之，则灭菌锅有冷空气残留，需检查B-D测试失败原因，直至B-D测试通过后该锅方能使用。

需要纠正一个概念，用于化学监测即B-D试验的是B-D测试包，需每日进行一次。而标准包一般是指用于生物监测。

用于预真空和脉动真空压力蒸汽灭菌器的标准包制作方法则是：16条全棉手术巾每条41cm×66cm，将每条手术巾的长边折成3层，短边折成2层，然后叠放，包裹成大小为23cm×23cm×15cm即可。将两个生物指示剂置于标准包中心部位，后将包至于灭菌柜内排气口上方。经过一个灭菌周期后，将生物指示剂取出培养，并设阴性和阳性对照，观察其颜色变化以判断灭菌效果。

10. 怎样进行高压灭菌生物监测法

用生物指示剂（自含式）：
1、将自含式生物指示剂置于灭菌最难达到的位置；
2、对负载灭菌，应根据有关规定，放置遍及负载的足够数量的自含式生物指示剂。注：建议不少于2个，通常每个循环使用10个。
3、使负载暴露于一个灭菌循环；
4、暴露后，在负载冷却或接触空气时尽快取出自含式生物指示剂；
5、压碎装有培养基的小玻璃瓶；
6、在适宜条件下培养，达规定时间后进行观察，读取结果；
7、若经过一个灭菌周期后，若有芽孢存活，则培养液会变浑浊或由紫色变为黄色；若芽孢被全部杀死，则培养液会保持最初的颜色。
8、记录试验结果；
9、阳性样品需经高压蒸汽灭菌处理。

自含式生物指示剂是一种带培养液的生物指示剂，根据其构造的不同可分为两类，一类是将菌片与装有培养液的小玻璃安瓿同放在一塑料软管中，软管顶端有滤纸封好的通气孔，灭菌后压碎安瓿，培养液与菌片混合之后培养观察；另一类是将培养液与细菌芽孢一同封于小玻璃安瓿中制成，灭菌后直接进行培养观察。不同类型的自含式生物指示剂适用于不同的灭菌方法、灭菌环境。自含式生物指示剂使用方便，具有无需无菌移种和无菌配制培养基、可避免假阳性结果、且培养时间短等优点，在医疗卫生及工业领域应用广泛。