1. 培养箱内培养皿如何摆放
培养箱内培养皿如何摆放微生物洁净室需要进行环境监控。项目有温度、相对湿度、风速、换气次数、静压差、悬浮粒子、浮游菌、沉降菌、表面微生物。洁净室的年度监测一般由有资质的机构进行。依据:GB/T 27405-2008 实验室质量控制规范食品微生物检测5.2.2 附录C.3和 《检验检测机构资质认定能力评价 检验检测机构通用要求》(RB/T 214-2017):4.3.3。GB 50591《洁净室施工及验收规范》
2、无菌室温湿度要求多少?
GB/T27405-2008实验室质量控制规范 食品微生物检测附录B 1.6无菌室推荐温度为20℃,相对湿度为40%-60%。
3、培养皿放进培养箱培养到底怎么放?
细菌培养:倒放。倒置的平板不仅使杂菌不易沉降到培养基表面并且琼脂水分不易蒸发保持细菌容易繁殖和生存的环境,同时也避免平皿盖上的水蒸汽冷凝后回滴到琼脂表面导致菌落蔓延。
霉菌培养:正放。避免霉菌在反复观察的过程中因上下颠倒平板导致霉菌孢子散落形成次生小菌落,造成计数结果不准确。
4、负压用什么样的压差表呢?
洁净室常用的微压差表均可,有嵌入式和悬挂式,安装在洁净室墙体外部,比如下图产品量程为0-60Pa的微压差计,安装时通过调整连接内外室的小导管安装方向,读取正压还是负压的结果,仪表无区别。
5、霉菌培养需要单独的培养室吗?湿度有要求吗?
目前没有硬性规定,如果当评审专家问你如何避免霉菌培养不影响其它检验结果时,能说出几条有效措施,就可以不单独设置。如果不能,建议单独设置霉菌培养室。
霉菌培养湿度目前GB 4789.15-2016没有明确要求湿度。建议RH 60~85%。参考依据是根据霉菌生长的特点当水活度(Aw)在0.7以下,低于RH30%时,霉菌的繁殖会受到抑制。环境大于RH60%霉菌即可生长,大多数霉菌在相对湿度高于80%时极易生长,因此建议的控制RH 60~85%,过高易造成菌落蔓延。有些霉菌培养箱不具备湿度调节功能,按美国公共卫生协会要求培养48小时琼脂失水不超过15%评价可能涉及理化实验。因此,除肉眼观察平板是否干裂外,建议通过方法验证,用实验数据确认所设的霉菌培养箱在某个湿度下,挑战菌回收率符合要求。
6、没有霉菌培养室的怎么弥补?
按照GB 4789.1-2016 食品微生物学检验 总则2.2.1实验室环境不应影响检验结果的准确性 的规定需要实验室自行确定是否有影响,针对每一条影响因素比如空气流向、物品转移、计数方式、消毒方式、人员操作技术等,提出预防措施。
7、 霉菌室应有哪些设备?霉菌计数有环境要求吗?
霉菌培养室一般放置霉菌培养箱、生物安全柜、显微镜等。霉菌计数环境符合一级实验室环境要求即可,霉菌计数是个短暂的过程,只要不打开平皿,一般的环境条件不会对计数结果产生影响,但是要考虑霉菌孢子对环境的污染,计数时最好在生物安全柜里进行。
8、霉菌的培养必须用恒温恒湿培养箱吗?
非必须,但推荐恒温恒湿培养箱。部份霉菌培养箱比生化培养箱多了紫外消毒功能,无湿度调节功能,也可以用。
2. 请你思考一下环境微生物中,划线分离完毕后,培养皿将如何摆放呢
①取1克样,在火焰旁加进装有99毫升无菌水的锥形瓶中,堵塞棉塞,制成菌悬液待用。 ②取一培养皿置于实验台上,左手将培养皿打开稍许,向培养皿内注入熔化的营养固体培养基10~12毫升,轻轻转动培养皿,使其中的培养基分布均匀,平放桌上,使其凝成平板。然后在皿底用蜡笔划分A、B、C、D几个区。应连续制作几份平板培养基。 ③将培养皿底部用姆指和无名指固定成倾斜状态,在火焰旁将培养皿稍微打开。在此同时,用环状接种针在火焰旁取少许菌悬液,迅速送入培养皿内,在平板培养基的一边,作第1次平行划线 6~7条,转动培养皿约70°角,用烧过冷却的接种针,通过第1次划线部分作第2次平行划线,然后再用同样方法,作第3次平行划线。划线时,应使平板培养基表面向下,以免空气中杂菌落入。接种针应与平板表面成30°角左右。不要使接种针碰到培养皿边缘,也不要将培养基划破。 ④将划线后的培养皿倒放在28℃左右的温暖处进行培养,待长出菌落后,鉴定微生物类群,并根据镜检结果,判断是否已分离到了纯菌种。如果菌种很纯,则可转移到斜面培养基上进一步培养。连续稀释分离法和平板划线法,均须在无菌室或接种箱内进行。
3. 微生物实验室仪器摆放要注意什么
微生物实验室仪器摆放要注意什么
微生物实验室是生物学领域必备实验室。如何配置才能成就一个完备的微生物实验室,哪些仪器必不可少,哪些仪器可有可无?
(1)超净工作台
微生物的培养都是在特定培养基中进行无菌培养,那么无菌培养必然需要超净工作台提供一个无菌的工作环境。超净工作台的用途是微生物的接种及处理时的无菌操作。
(2)培养箱
培养箱有多种类型,它的作用在于为微生物的生长提供一个适宜的环境。 培养箱有多种类型,包括生化培养箱,霉菌培养箱,厌氧培养箱等。具体来说区别如下: a. 生化培养箱只能控制温度。可作为一般细菌的平板培养。 b. 霉菌培养箱可以控制温度和湿度。可作为霉菌的培养。 c. CO2培养箱适用于厌氧微生物的培养,例如双歧杆菌。
(3)天平
天平用于精确称量各类试剂。实验室常用的是电子天平,电子天平按照精度不同有不同的级别。
(4)微生物均质器
用于从固体样品中提取细菌。用微生物均质器制备微生物检测样本具有样品无污染、无损伤、不升温、不需要灭菌处理,不需洗刷器皿等特点,是微生物实验中使用较为方便的仪器。
(5)菌落计数器
菌落计数仪可协助操作者计数菌落数量。通过放大,拍照,计数等方式准确的获取菌落的数量。有些高性能的菌落计数器还可连接电脑完成自动计数的操作。
(6)微波炉/电炉
用于溶液的快速加热,微生物固体培养基的加热溶化。
(7)高压灭菌锅
微生物学所用到的大部分实验物品、试剂、培养基都应严格消毒灭菌。灭菌锅也有不同大小型号,有些是手动的,有些是全自动的。用户需要根据自己的需要选购。
(8)移液器
液体量器用于精密量取各类液体。常见的液体量器有量筒、移液管、微量取液器、刻度试管、烧杯。
(9)冰箱
冰箱是实验室保存试剂和样品必不可少的仪器。微生物学实验中用到的试剂有些要求是4度保存,有些要求是负20度保存,实验人员一定要看清试剂的保存条件,放置在恰当的温度下保存。具体来说,不同温度下保存的物品如下: a. 4℃适合储存某些溶液、试剂、药品等。 b. -20℃适用于某些试剂、药品、配好的抗生素等。 c. -80℃适合某些长期低温保存的样品、大肠杆菌菌种、感受态等的保存。
(10)生物安全柜
微生物实验中涉及的试剂和样品微生物有些是有毒的,对于操作人员来说伤害较大。为了防止有害悬浮微粒、气溶胶的扩散,可以利用生物安全柜对操作人员、样品及样品间交叉感染和环境提供安全保护。
(11)摇床
摇床是实验室常用的一种仪器,在微生物实验操作过程中,液体培养基培养细菌时需要在特定温度下振荡使用。
(12)纯水装置
纯水装置包括蒸馏水器和纯水机。蒸馏水器的价格便宜,但在造水过程中需要有人值守;纯水机价格高些,但是使用方便,可以储存一定量的纯水。纯水使用也有不同的级别,实验中配制试剂,配制培养基均需用纯水。
(13)生物显微镜
由于微生物体积较小,所以在观察时需要借助生物显微镜。生物显微镜用于微生物和微小物品结构,形态等的观察。
(14)冷冻干燥机
主要适用于细菌、微生物、酵母等的干燥。用于干燥保存易脱水的产品,在加水以后能够再次恢复原材料的特性,不影响其生物活性等。通过冷冻干燥,细菌之类的材料成为干燥状态,从而不会发生化学改变。
(15)分光光度计
分光光度计在微生物试验中用于测定微生物悬液的浓度,可以正确选取合适的培养时间。一般是在600nm波长测定菌液浓度。
(16)恒温干燥箱
恒温干燥箱是用于灭菌和洗涤后的物品烘干。烘箱有不同的控温范围,用户可以根据实验需求进行选择。例如,有些塑料用具只能在42-45℃的烤箱中进行烘干,一般玻璃用具的烘干可以选择60℃。
(17)恒温水浴锅
水浴锅是一种控温装置,水浴控温对于样品来说比较快速且接触充分。有些微生物反应需要在37度,42度,56度下水浴进行,所以恒温水浴锅可以提供需要的温度。
(18)酸度计
用于配置试剂时精确测量PH值,从而保证配置的溶液的精确性。有时也需要利用pH计测定样品溶液的酸碱度。
(19)离心机
用于收集微生物菌体以及其他沉淀物。离心机有冷冻和常温之分。有些样品由于在常温下不太稳定,需要低温环境,要视样品的种类而定。
(20)液氮罐
液氮罐储存液氮,可用于细菌、酵母、霉菌和大型真菌等各种微生物的长期保存。以上介绍的是微生物实验室的基本仪器配置,在组建实验室时还需要其他一些耗材,例如酒精灯,试管架,三角瓶,量筒,玻璃试管,灭菌吸管,凉干架,剪刀,镊子,脱脂棉,纱布,试管筐,无菌采样及称样袋,接种环,过滤器等。实验人员可以根据自己的需求为微生物实验室配置合适的仪器和耗材。
微生物实验室管理制度
一、实验室管理制度
1.实验室应制定仪器配备管理、使用制度,药品管理、使用制度,玻璃器皿管理、使用制度,并根据安全制度和环境条件的要求,本室工作人员应严格掌握,认真执行。
4. 微生物培养皿的放置方式
将培养皿倒扣在恒温箱内,防止盖子上的冷凝水落下
5. 空气培养皿的放置方法及时间
在做空气培养皿前1小时,关闭室内门窗,打开层流,减少室内人员走动,使空气静止。在采样时禁止有人走动,采样结束后,盖好玻璃培养皿,包裹好后送去培养室培养48小时即可。6. 培养箱内培养皿如何摆放
培养箱内培养皿如何摆放?1、培养皿尽量避免直接放在风机口附近,放在那培养皿容易干枯掉;
2、培养皿可叠放,但验证时需要做最大装载,最大装载的情况下要方便拿取且拿取时间不宜过长,拿取时间过长的话容易影响温度;
3、箱子验证后需要确认温度波动最大的点,日常温度计要放于此处观察温度;
4、验证最大装载后,以后箱内培养物品的放置最好和验证保持统一。培养细菌要在洁净的环境中接种,需要超净工作台、酒精灯;配制培养基的试剂如:酵母膏、蛋白胨、各种无机盐、琼脂等,或买现成的培养基;培养基灭菌需要高压灭菌锅;接种需要接种环或接种针,液体接种需要移液管或移液器和灭菌的吸头;固体培养需要培养皿,在恒温培养箱中静态培养;液体培养需要三角瓶在摇床(恒温振荡器)中培养;培养好后检验还需要光学显微镜、染色还需要染色剂;菌种保藏需要试管(带透气的塞子)制作斜面,并保藏在冰箱中;如果大规模培养还需要发酵罐及其附属设备;厌氧菌培养还需要厌氧培养箱和操作台。
7. 微生物培养时,培养皿为什么要倒置
【主回答】
皿盖向上培养时,培养基蒸发的水分会凝结在皿盖上,并可能掉落到培养基表面,影响培养结果。
而培养皿倒置,水分蒸发会在培养基表面均匀凝结,并且蒸发与凝结会形成平衡,不会影响培养结果。这是主要原因。
其次是倒置不会在拿起时只拿起皿盖。而正置时拿培养皿,可以只把皿盖拿起来,让培养基暴露在空气中。
【(7)浮游微生物采样器培养皿怎么放扩展阅读】
培养平板培养基(culture plate)是被用于获得微生物纯培养的最常用的固体培养基形式,它是冷却凝固后的固体培养基在无菌培养皿中形成的培养基固体平面,常被简称为培养平板(plate)。也叫平面培养基、平皿培养基。
平板培养基常用于单孢分离,测定菌丝生长速度,观察菌落的形态,拮抗实验,测定接种空间杂菌数。
由人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质,在微生物学中称为微生物培养基。由于各类微生物对营养基质的要求各不同,因此微生物培养基类型很多,不同培养基可根据实际需要,添加一些自身无法合成的化合物。
由于各类微生物对营养的要求不同及科学研究的目的或生产实践的需要不同,因而培养基的种类很多。迄今为止,已有数千种不同的培养基。
按培养基组成物质的化学成分区分,分为天然培养基、合成培养基、半合成培养基。
培养基按其物理状态可分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基三类。
8. 培养皿的盖子要怎么放
将培养皿容器的盖子或塞子打开,将外植体接种在培养基上。如果使用的是玻璃器皿,把瓶口放在酒精灯焰上烘烤数秒,然后迅速用瓶盖或瓶塞盖严。
培养皿材质基本上分为两类,主要为塑料和玻璃的,玻璃的可以用于植物材料、微生物培养和动物细胞的贴壁培养也可能用到。塑料的可能是聚乙烯材料的,有一次性的和多次使用的,适合实验室接种、划线、分离细菌的操作,可以用于植物材料的培养。
一般经过浸泡、刷洗、浸酸、和清洗四个步骤。
1.浸泡:新的或用过的玻璃器皿要先用清水浸泡,软化和溶解附着物。新玻璃器皿使用前得先用自来水简单刷洗,然后用5%盐酸浸泡过夜;用过的玻璃器皿往往附有大量蛋白质和油脂,干涸后不易刷洗掉,故用后应立即浸入清水中备刷洗。
2.刷洗:将浸泡后的玻璃器皿放到洗涤剂水中,用软毛刷反复刷洗。不要留死角,并防止破坏器皿表面的光洁度。将刷洗干净的玻璃器皿洗净、晾干,备浸酸。
3.浸酸:浸酸是将上述器皿浸泡到清洁液中,又称酸液,通过酸液的强氧化作用清除器皿表面的可能残留物质。浸酸不应少于六小时,一般过夜或更长。放取器皿要小心。
4.冲洗:刷洗和浸酸后的器皿都必须用水充分冲洗,浸酸后器皿是否冲洗干净,直接影响到细胞培养的成败。手工洗涤浸酸后的器皿,每件器皿至少要反复“注水-倒空”15次以上,最后用重蒸水浸洗2-3次,晾干或烘干后包装备用。
9. 微生物实验中,移液枪,移液管和培养皿怎么包扎 如果有视频和图示更好。
1、移液枪:用八层纱布包裹,然后牛皮纸包裹,然后棉绳紧密包扎。问题是大多数的枪都是不能灭菌的,你得先确认你的枪可以灭菌。
2、移液管:一般情况下传统的方法是用报纸撕成4公分宽50公分长的条,斜着包扎,然后将很多根包好的再用一张大报纸包在一起。不过我们的方法是:用八层纱布车成一个袋子,一头长一些做盖子,然后袋子中间车成一条一条的,约1公分宽,然后将移液管分别单独放入,再将长一些的那头盖过来,卷成一卷,外面用报纸抱住,再用棉绳紧密包扎。
3、培养皿:一般8到12套为一组,叠在一起后横过来,放在报纸的一头,然后慢慢卷起来,以便卷一边将两头的纸折起来。最后将纸头塞在折缝里就行。
视频几乎没有,除非我帮你拍一段,可是怎么给你呢。图片我先找下,你可以加我Hi好友。
10. 空气培养皿的放置方法及时间是什么
空气培养皿的放置方法技巧:主要为塑料和玻璃的,玻璃的可以用于植物材料、微生物培养和动物细胞的贴壁培养也可能用到。塑料的可能是聚乙烯材料的,有一次性的和多次使用的,适合实验室接种、划线、分离细菌的操作,可以用于植物材料的培养。
空气培养皿的放置时间:一般放48小时。
(10)浮游微生物采样器培养皿怎么放扩展阅读
使用小技巧:
1、浸泡:新的或用过的玻璃器皿要先用清水浸泡,软化和溶解附着物。新玻璃器皿使用前得先用自来水简单刷洗,然后用5%盐酸浸泡过夜;用过的玻璃器皿往往附有大量蛋白质和油脂,干涸后不易刷洗掉,故用后应立即浸入清水中备刷洗。
2、刷洗:将浸泡后的玻璃器皿放到洗涤剂水中,用软毛刷反复刷洗。不要留死角,并防止破坏器皿表面的光洁度。将刷洗干净的玻璃器皿洗净、晾干,备浸酸。
3、浸酸:浸酸是将上述器皿浸泡到清洁液中,又称酸液,通过酸液的强氧化作用清除器皿表面的可能残留物质。浸酸不应少于六小时,一般过夜或更长。放取器皿要小心。
4、冲洗:刷洗和浸酸后的器皿都必须用水充分冲洗,浸酸后器皿冲洗干净,直接影响到细胞培养的成败。手工洗涤浸酸后的器皿,每件器皿至少要反复“注水-倒空”15次以上,最后用重蒸水浸洗2-3次,晾干或烘干后包装备用。