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微生物菌株如何研究

发布时间:2022-11-14 22:35:19

1. 微生物菌种保藏的方法有哪些

菌种的优劣是食用菌生产成败的关键。菌种是国家重要的生物资源,也是微生物工厂首要的生产资料。由于微生物繁殖快、易变异,因此微生物菌种特别需要妥善保藏。世界各国对微生物菌种都很重视。中国科学院微生物研究所专门设立了菌种的保藏机构,为各生产单位收藏和供应各种优良菌种。当然就具体的生产单位而言,大量的生产用菌种还得靠自己来生产和保藏。
菌种保藏的目的:是使优良菌种经过较长时间后,仍能保持菌种的优良性状、生活能力及纯度,降低菌种的衰亡速度,确保菌种的纯一,防止杂菌污染及绝种。
保藏菌种的方法:人们在长期的生产实践中,积累了不少保藏菌种的经验,常用的保藏方法有:斜面低温保藏法、液体石蜡保藏法、砂土管保藏法、滤纸片保藏法、谷粒保藏法等。常用保藏菌种的方法有以下几种:
(1)斜面低温保藏法这是最简单最普通的保藏方法。首先将菌种在适宜的斜面培养基(一般PDA)上培养成熟后,选择菌丝生长粗壮,边缘保存。一般保存温度4~6℃,除草菇和银耳菌种外(10~15℃),此方法对其他食用菌都适宜,一般菌种可保藏2~4个月,所以需定时移接。此法保藏虽然方便,但是保藏时间短,需经常转管,也很容易发生衰退变异现象。因此,不能用作长期保藏,最好与其他方法结合起来保藏。
另外,为了减少保藏期间培养基水分蒸发,琼脂最好加到2.5%。为防止菌种在保藏过程中产酸分的积累,应加入0.2%的磷酸氢二钾、磷酸二氢钾等缓冲盐类,同时,培养成熟后,最好将棉塞管口外剪平,并用矿蜡封或换以无菌木塞,这样做也可以减少培养基水分的散失,延长保存时间。
在农村如果没有冰箱,可采用土法保藏。即把保藏用的斜面菌种换上无菌橡皮塞,并用矿烛蜡封后密闭的广口瓶中,悬入井底保藏。(2)贮藏室保藏法原种和栽培种一般只在贮藏室短期保藏,贮藏室温度0~10℃为好。室内应清洁、干燥、无光,应经常检查温度和湿度,以降低其生活力,减少变异退化,防止杂菌污染,避免过早出菇。温度越高,保存的时间越短。

2. 微生物学实验设计

没有什么时间,我简单解释一下,语言你可以自己组织,意思对了丰富一下以下内容就可以了哈:
1、取材。指材料选择,微生物分离一般来源是自然界的土壤及其他生物体内。你最好选择在常年高温的环境中采样。譬如火山口,热泉口,常年高温的戈壁沙漠土壤等。
2、分离。指分离野生菌株。在实验室,分离微生物的传统途径是选择合适的培养基选择性分离土壤中的微生物,这个题目的要求说明实验中需要在高温条件培养,最好选用多种培养基,以便于分离到种类较多的各类微生物。相关实验技术请自行查阅书籍。
3、纯化。微生物分离过程中重要一步,目的是需要得到菌株的纯培养,即多次纯化过程中需挑取单菌落接种扩培,同时可以起到活化菌株生命力的作用。当然此过程中合适的培养基相当重要。否则菌株可能反而退化失活。
4、筛选。获得适合高温生长的菌株库之后,依据要求筛选菌株。即指提供单因子培养条件筛选,譬如选择能产高温蛋白酶的,需要在培养基中单一添加高级蛋白(即未降解过的或未胨化过的)作为氮源,以葡萄糖或其他易利用糖类作单一碳源。又如选择产高温淀粉酶的,以淀粉作为单一碳源,补充其他无碳利用的氮源。能在选择条件下生长的为目的菌株。
5、确证。得到目的菌株后即可通过相应的酶提取方法确证。提取总酶在高温条件下进行体外蛋白消化或者淀粉消化实验来确证。

3. 如何从环境中分离产蛋白酶的微生物菌株如何对该菌株进行鉴定

用低浓度氨基酸的培养基培养,然后再逐步降低氨基酸浓度到零做富集。最后得到的应该就是能产蛋白酶的菌株

4. 微生物菌种保藏的方法有哪些

菌种的优劣是食用菌生产成败的关键。菌种是国家重要的生物资源,也是微生物工厂首要的生产资料。由于微生物繁殖快、易变异,因此微生物菌种特别需要妥善保藏。世界各国对微生物菌种都很重视。中国科学院微生物研究所专门设立了菌种的保藏机构,为各生产单位收藏和供应各种优良菌种。当然就具体的生产单位而言,大量的生产用菌种还得靠自己来生产和保藏。
菌种保藏的目的:是使优良菌种经过较长时间后,仍能保持菌种的优良性状、生活能力及纯度,降低菌种的衰亡速度,确保菌种的纯一,防止杂菌污染及绝种。
保藏菌种的方法:人们在长期的生产实践中,积累了不少保藏菌种的经验,常用的保藏方法有:斜面低温保藏法、液体石蜡保藏法、砂土管保藏法、滤纸片保藏法、谷粒保藏法等。常用保藏菌种的方法有以下几种:
(1)斜面低温保藏法这是最简单最普通的保藏方法。首先将菌种在适宜的斜面培养基(一般PDA)上培养成熟后,选择菌丝生长粗壮,边缘保存。一般保存温度4~6℃,除草菇和银耳菌种外(10~15℃),此方法对其他食用菌都适宜,一般菌种可保藏2~4个月,所以需定时移接。此法保藏虽然方便,但是保藏时间短,需经常转管,也很容易发生衰退变异现象。因此,不能用作长期保藏,最好与其他方法结合起来保藏。
另外,为了减少保藏期间培养基水分蒸发,琼脂最好加到2.5%。为防止菌种在保藏过程中产酸分的积累,应加入0.2%的磷酸氢二钾、磷酸二氢钾等缓冲盐类,同时,培养成熟后,最好将棉塞管口外剪平,并用矿蜡封或换以无菌木塞,这样做也可以减少培养基水分的散失,延长保存时间。
在农村如果没有冰箱,可采用土法保藏。即把保藏用的斜面菌种换上无菌橡皮塞,并用矿烛蜡封后密闭的广口瓶中,悬入井底保藏。(2)贮藏室保藏法原种和栽培种一般只在贮藏室短期保藏,贮藏室温度0~10℃为好。室内应清洁、干燥、无光,应经常检查温度和湿度,以降低其生活力,减少变异退化,防止杂菌污染,避免过早出菇。温度越高,保存的时间越短。

5. 如何对一株细菌进行种属鉴定

一般来说,对一株从自然界或其他样品中分离纯化的未知菌种的鉴定要做以下几个方面工作。①个体形态观察,进行革兰氏染色,分辨是G(+)菌还是G(-)菌。并观察其形状、大小、有无芽孢及其位置等;②菌种形态观察,主要观察其形态、大小、边缘情况、隆起度、透明度、色泽、气味等特征;③做动力试验,看他能否运动及其鞭毛着生类型(端生、周生);④做生理生化反应及做血清学反应实验。最后根据以上实验项目的结果,通过查阅微生物分类检索表,给未知菌进行命名。

6. 想进行微生物实验 怎样获得常用的细菌

想进行微生物实验 怎样获得常用的细菌
获得方法:一是野生株,就是自分离菌株,也就是检测过程中分离出的大肠埃希氏菌.2是买标准菌株,比如ATCC或者CICC标准菌,保存的话有很多种方法,
保存方法:一般是纯培养后用LB或者营养肉汤隔夜培养然后加10-20%的灭菌甘油分装1.5ml离心管后贴签,-70℃冻存或者直接带吸附珠的冻存管冻存,有说明的,也很好用.
微生物实验用的微生物都是纯培养微生物,不能用多菌种混合培养的,以免造成实验结果的不准确。
而要得到纯培养微生物,首先要保证实验用的器皿没有微生物,这就要求在使用前,所使用的器皿先进行灭菌。而包装是为了器皿在灭菌后、使用前不受到微生物的二次污染。

7. 如何从环境中分离淀粉酶的微生物菌株的实验原理和实验设计

以淀粉作为惟一碳源(其它物质必需物质都有)的培养基培养未分离细菌(先制备固体培养基,凝固后,在表面涂一层淀粉溶液),能产淀粉酶的细菌能生长,且菌落周围出现透明圈(淀粉不透明,被消化后变透明),则菌群被分离。

8. 如何了解未知微生物菌株的背景及其应用

菌种活化就是将保藏状态的菌种放入适宜的培养基中培养,逐级扩大培养是为了得到纯而壮的培养物,即获得活力旺盛的、接种数量足够的培养物。菌种发酵有一般需要2-3代的复壮过程,因为保存时的条件往往和培养时的条件不相同,所以要活化,让菌种逐渐适应培养环境
要明白菌种活化的情况就需要了解菌种保藏的方式和方法。目前国际国内常用的菌种保存方法包括:定期移植法、液体石蜡法、沙土管法、真空冷冻干燥法、80℃ 冰箱冻结法、液氮超低温冻结法。
对于不同的保存方式活化的方式也不同:
1 定期移植法的菌种复苏较简单,直接转接即可;
2 液体石蜡法保存的菌种在复苏时,挑取少量菌体转接在适宜的新鲜培养基上,生长繁殖后,再重新转接一次;
3 沙土管法保存菌种在复苏时,在无菌条件下打开沙土管,取部分沙土粒于适宜的斜面培养基上,长出菌落后再转接一次。或取沙土粒于适宜的液体培养基中,增殖培养后再转接斜面;
4 真空冷冻干燥法保存菌种在复苏时先用70%酒精棉花擦拭安瓿上部,将安瓿管顶部烧热, 用无菌棉签沾冷水,在顶部擦一圈,顶部出现裂纹,用挫刀或镊子颈部轻叩一下,敲下已开裂的安瓿管的顶端,用无菌水或培养液溶解菌块,使用无菌吸管移入新鲜培养基上,进行适温培养;
5 -80℃ 冰箱冻结法保存菌种复苏时,从冰箱中取出安瓿管或塑料冻存管,应立即放置38℃-40℃水浴中快速复苏并适当快速摇动。直到内部结冰全部溶解为止,约需50秒-100秒。开启安瓿管或塑料冻存管,将内容物移至适宜的培养基上进行培养
6 液氮超低温冻结法保存菌种复苏与-80℃ 冰箱冻结法保存菌种复苏相似,从液氮罐中取出安瓿管或塑料冻存管,应立即放置在38℃-40℃水浴中快速复苏并适当摇动。直到内部结冰全部溶解为止,一般约需50秒-100秒。开启安瓿管或塑料冻存管,将内容物移至适宜的培养基上进行培养。
总结一下菌种活化需要以下几个步骤:

第一配置菌种适宜生长的培养基

第二将菌种从保藏状态恢复到室温状态,比如将冷冻的菌种解冻

第三将通过操作将保藏的菌种接种到培养基中培养,此步骤称为菌种复壮

第四步挑选培养基茁壮的菌落,挑选其中部分菌落接种到新的培养基中培养,重复此步骤2-3次,从而得到生长良好的菌落

9. 微生物的菌种鉴定方法与步骤(鉴定到“株”一级)

基本上认可的方法就是随机扩增多态性RAPD

10. 微生物试验中,菌种的传代实验怎么做微生物的酶活怎么测

微生物传代最常用的就是斜面接种法,大致意思就是你从原代菌种里挑一点划线法保存到小试管里的斜面培养基上,进而让菌种不断增殖保存下来。 其方法步骤如下:首先,点燃酒精灯。将菌种和斜面培养基的两只试管平行放在左手上,用拇指与其它四指夹住,并使中指位于两试管之间,两试管的管口齐平(图9-5①)。其次,用右手先将棉塞拧转松动,并稍拉出一些,以利又质卑纬觯ㄍ?9-5②)。第三,右手持接种针,在酒精灯将针头部分烧红灭菌(图9-5③)。针头以上凡是接种时可能进入试管的部分,均应用火灼烧。以下操作都要使试管口靠近火旁。第四,用右手的小指与掌间拔掉左手上两只试管上的棉塞,同时迅速将试管口在酒精灯上烧灼3秒钟左右,使管口上可能沾染的少量杂菌得以烧死。第五,将烧过的接种针伸入菌种管内,先将针头接触培养基上没有菌的部位(如斜面的顶端),使其冷却,以免烫死被接种的菌体。然后轻轻接触菌体,取出少许,慢慢将接种针抽出试管,接种针抽出时不要使针头部分碰到管壁和管口,取出后,不可使针头通过火焰,更不可触及其它无关物品或桌面。第六,迅速将接种针伸进另一试管,在培养基上轻轻划线,接种菌体于其上。划线时,要由底部起划较密的平行线,一直划到顶部,以充分利用斜面面积,但不要将培养基划破。第七,烧灼试管口,将棉塞塞上。塞棉塞时,不要移动试管迎接棉塞,以免试管在移动中纳入可能含菌的空气。第八,将针头在火焰上烧灼灭菌。放回原处后,腾出手将棉塞塞紧。二、关于微生物酶活性测定,比较复杂,网上比较多,不同酶测定方法也不一样,同学你自己慢慢查吧,O(∩_∩)O哈哈~

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