A. TUNEL实验中几个关键步骤是什么
1. 充分脱蜡和水化。脱蜡可以先60度20 min,再用二甲苯两次5~10 min;而水化用梯度乙醇从高浓度到低浓度浸洗,这些以便后面的结合反应充分、均匀。
2. 把握好细胞通透的时间。一般根据切片的厚薄,选择蛋白酶k的孵育时间,常用10~30 min,几um切片用短时间;几十um切片用长时间,通过摸索达到既不脱片,有能够使后面的酶和抗体进入胞内。
3. 适当延长TUNEL反应液的时间。一般是37度1h,你也可以根据你的凋亡损伤程度,选择更长的时间,可长至2 h,但要结合你最终的背景着色。
4. DAB显色条件的选择。一般DAB反应10分钟左右,结合镜下控制背景颜色,最长不超过30 min;我不喜欢用promega公司提供的DAB液(桃红色),不利于辨认棕褐色。
5.PBS的充分清洗。我个人认为,在TUNEL反应后和酶标反应后的清洗应十分严格,可增加次数达5次,因为这些清洗直接决定最后切片的非特异性着色。
6. 此外,内源性POD的封闭也十分关键。对于肝脏、肾脏等血细胞含量多的组织,我的经验是适当延长封闭时间和升高过氧化氢的浓度,可以达到很好的封闭效果,且不影响最终的特异性染色。
南昌中洪博元技术部
B. 有人在中洪博元生物外包过实验吗,到底怎么样
试验拖了3个月才给结果,而且结果还到处是问题。差点耽误毕业,还好后来运气好找了其他公司,才赶上毕业
C. 南昌生物公司有哪些
据我所知道的有一家公司叫做南昌中洪博元生物公司,南昌这种生物公司并不多见,沿海城市比较多,这家中洪博元生物总部也是在深圳,南京也是有分公司,如果你要做实验的话,你可以去他们公司看看。
D. 江西中洪博元公司正规吗
据我了解中洪博元是2015年成立的,公司总部在南昌市小蓝。我去年的时候手上有一个动物实验自己做了一部分,和中洪博元合作了一部分。合作之前去他们实验室参观了一下,总体来说还算是正规的。
E. 江西中洪博元,深圳中洪博元他们是一个老板吗
没有去过,但是根据企查查企业注册信息来看,应该是同一家族运营的公司,两家公司法定代表人都是姓江,两家公司的法定代表人可能为近亲。
F. 中洪博元生物技术公司可信度怎么样
服务不错,合作都会有签协议书,实验进展的情况都会定期反馈