① 高中生物 为什么先制片后水解 到底什么叫制片
观察DNA和RNA的分布实验。用口腔上皮细胞或洋葱鳞片叶表皮细胞。先制片的目的是为了让细胞贴附在载玻片上。后解离是为了便于改变细胞膜的通透性,利于染色剂进入细胞,以及便于染色剂着色。
如果先解离,细胞已经被分散开或破坏,则无法使其固定在玻片上。解离完之后还要冲洗,则可能导致细胞被冲走。所以先固定。
② 生物制作临时装片的过程
一擦二滴三取四浸五盖六染七吸.
1:擦净载玻片和盖玻片
2:滴一滴清水于洁净的载玻片上
3:取材
4:将材料放入载玻片的液滴中展平
5:盖上盖玻片,注意轻放,防止产生气泡
6:将染液滴于盖玻片的一侧
7:用吸水纸从另一侧吸染液,让染液通过材料,给材料着色
③ 生物切片怎么做
①用纱布将玻片擦拭干净;
②在洁净的载玻片上滴一滴清水(动物细胞用0.9%的生理盐水),水量不宜过多,也不能太少; ③从生物体上取材,放在水滴中;
④对撕取的薄膜要展平,挑取的材料要涂抹几下,避免细胞重叠,看不清细胞机构;
⑤用镊子夹起盖玻片,使它的一侧先接触载玻片上的水滴(为防止产生气泡),然后缓缓地盖在要观察的材料上;
⑥在盖玻片的一侧滴加染液;
⑦在与滴染液相对的一侧用吸水纸吸取多余的染液。
(纯手工码字,希望满意)
④ 怎么制作微生物的制片,然后用显微镜观察
(1) 以油性签字笔在载玻片之背面画个圈 并写上所要鉴定之细菌的名称。
,
(2) 在圆圈正面滴上一滴水,水滴越小滴越好,如有需要,可将多馀的水
擦去。
(3) 用牙签沾取一点菌落涂于载玻片正面的圆圈中(勿沾取太多的细菌)。
(4) 待涂布的菌液完全风乾后(切记不可用火烧乾,以免破坏细菌细胞壁的
结构),让载玻片在火上來回數次,使细菌固定(每次通过火焰后均需
稍冷却,载玻片之温度以不烫手为原则)。
一)正置显微镜
1、安放
右手握住镜臂,左手托住镜座,使镜体保持直立。桌面要清洁、平稳,要选择临窗或光线充足的地方。单筒的一般放在左侧,距离桌边3~4厘米处。
2、清洁
检查显微镜是否有毛病,是否清洁,镜身机械部分可用干净软布擦拭。透镜要用擦镜纸擦拭,如有胶或粘污,可用少量二甲苯清洁之。
3、对光
镜筒升至距载物台1~2厘米处,低倍镜对准通光孔。调节光圈和反光镜,光线强时用平面镜,光线弱时用凹面镜,反光镜要用双手转动。
若使用的为带有光源的显微镜,可省去次步骤,但需要调节光亮度的旋钮。
4、安装标本
将玻片放在载物台上,注意有盖玻片的一面一定朝上。用弹簧夹将玻片固定,转动平台移动器的旋钮,使要观察的材料对准通光孔中央。
5、调焦
调焦时,先旋转粗调焦旋钮慢慢降低镜筒,并从侧面仔细观察,直到物镜贴近玻片标本,然后左眼自目镜观察,左手旋转粗调焦旋钮抬升镜筒,直到看清标本物像时停止,再用细调焦旋钮回调清晰。
操作注意:不应在高倍镜下直接调焦;镜筒下降时,应从侧面观察镜筒和标本间的间距;要了解物距的临界值。
若使用双筒显微镜,如观察者双眼视度有差异,可靠视度调节圈调节。另外双筒可相对平移以适应操作者两眼间距。
6、观察
若使用单筒显微镜,两眼自然张开,左眼观察标本,右眼观察记录及绘图,同时左手调节焦距,使物象清晰并移动标本视野。右手记录、绘图。
镜检时应将标本按一定方向移动视野,直至整个标本观察完毕,以便不漏检,不重复。
光强的调节:一般情况下,染色标本光线宜强,无色或未染色标本光线宜弱;低倍镜观察光线宜弱,高倍镜观察光线宜强。除调节反光镜或光源灯以外,虹彩光圈的调节也十分重要。
(1)低倍镜观察
观察任何标本时,都必须先使用低倍镜,因为其视野大,易发现目标和确定要观察的部位。
(2)高倍镜观察
从低倍镜转至高倍时,只需略微调动细调焦旋钮,即可使物像清晰。
使用高倍镜时切勿使用粗调焦旋钮,否则易压碎盖玻片并损伤镜头。
转动物镜转换器时,不可用手指直接推转物镜,这样容易使物镜的光轴发生偏斜,转换器螺纹受力不均匀而破坏,最后导致转换器就会报废。
(3)油镜的观察
先用低倍镜及高倍镜将被检物体移至视野中央后,再换油镜观察。油镜观察前,应将显微镜亮度调整至最亮,光圈完全打开。
使用油镜时,先在盖玻片上滴加一滴香柏油(镜油),然后降低镜筒并从侧面仔细观察,直到油镜浸入香柏油并贴近玻片标本,然后用目镜观察,并用细调焦旋钮抬升镜筒,直到看清标本的焦段时停止并调节清晰。
香柏油滴加要适量。油镜使用完毕后一定要用擦镜纸沾取二甲苯擦去香柏油,并再用干的擦镜纸擦去多余二甲苯。
7、结束操作
观察完毕,移去样品,扭转转换器,使镜头V字型偏于两旁,反光镜要竖立,降下镜筒,擦抹干净,并套上镜套。
若使用的是带有光源的显微镜,需要调节亮度旋钮将光亮度调至最暗,再关闭电源按钮,以防止下次开机时瞬间过强电流烧坏光源灯
⑤ 生物制片的基本步骤
一 目的:
1.学习并掌握临时装片的制作方法。
2.完成基本实验要求的基础上,依自己的兴趣,制作更多的临时装片
二 背景知识(点击展开)
三 实验内容
制作洋葱表皮细胞临时装片
四 实验用品
滴管、纱布、镊子、吸水纸、载玻片、盖玻片、清水、刀片、染液(碘液)
五 实验材料
洋葱表皮细胞、其他感兴趣的生物材料
六 实验步骤
1.擦拭载玻片、盖玻片(动画)
2.在载玻片的中央滴一滴清水(动画)(图zx-21)
3.在洋葱内表皮用刀片划出一个约1cm2的正方形(在使用刀片时注意安全),用镊子撕取洋葱内表皮(动画)(图zx-22)
4.将内表皮置于载玻片的清水中,并使之铺开(动画)(图zx-23)
5.从一侧开始慢慢盖上盖玻片,不能有气泡产生(动画) (图zx-24)
6.在盖玻片的一侧滴一滴染液(动画)
7.然后用吸水纸从另一侧吸取多余的染液,使洋葱表皮细胞均匀染色(动画)
8.显微镜下观察。(图zx-25)
染色后的洋葱细胞(示细胞核)(图)
显微镜使用的注意事项
1.搬动显微镜时,要一手握镜臂,一手扶镜座,两上臂紧靠胸壁。切勿一手斜提,前后摆动,以防镜头或其他零件跌落。
2.观察标本时,显微镜离实验台边缘应保持一定距离(5cm),以免显微镜翻倒落地。镜柱与镜臂间的倾斜角度不得超过45度,用完立即还原。
3.使用时要严格按步骤操作,熟悉显微镜各部件性能,掌握粗、细调节钮的转动方向与镜筒升降关系。转动粗调节钮向下时,眼睛必须注视物镜头。
4.观察带有液体的临时标本时要加盖片,不能使用倾斜关节,以免液体污染镜头和显微镜。
5.粗、细调节钮要配合使用,细调节钮不能单方向过度旋转,调节焦距时,要从侧面注视镜筒下降,以免压坏标本和镜头。
6.用单筒显微镜观察标本,应双眼同时睁开,左眼观察物像,右眼用以绘图,左手调节焦距,右手移动标本或绘图。
7.禁止随意拧开或调换目镜、物镜和聚光器等零件。
8.显微镜光学部件有污垢,可用擦镜纸或绸布擦净,切勿用手指、粗纸或手帕去擦,以防损坏镜面。
9.凡有腐蚀性和挥发性的化学试剂和药品,如碘、乙醇溶液、酸类、碱类等都不可与显微镜接触,如不慎污染时,应立即擦干净。不要任意取下目镜,谨防灰尘落入镜筒。
10.使用油镜观察样品后,随即用二甲苯将油镜镜头和载波片擦净,以防其他的物镜玻璃上沾上香柏油。二甲苯有毒,使用后马上洗手。
11.实验完毕,要将玻片取出,用擦镜纸将镜头擦拭干净后移开,不能与通光孔相对。用绸布包好,放回镜箱。切不可把显微镜放在直射光线下曝晒。
显微摄影操作的重要注意事项
1.摄影者对显微摄影装置的调整:包括两目镜瞳孔间距的调整和个人屈光不正的校正。前者指将两目镜的距离按个人的瞳孔间距进行调整,拉动目镜或捻转瞳孔间距调节螺旋。校正屈光时应转动目镜筒上的屈光度调节环,使物镜视野中心的“十”字由单线调成双线,达到完全清晰,并且左右眼应分别调整。每个拍摄者都不宜省略这一步。
2.物镜与摄相目镜不同组合的选择:摄影目镜除放大功能外,并不具备空间分辨功能,只有物镜才具有空间分辨力。在一般条件下,对组织切片厚度在20 μm以下者,应尽量选择较高倍物镜,例如欲放大实物50倍时,选择“20×”物镜配以“2.5×”目镜的组合方式,其清晰度比“10×”物镜及“5×”目镜的组合方式要高些。但是也要考虑切片薄厚和观察标本的特异性的问题,例如在厚度为30 μm以上的冰冻切片上,观察蜿蜒走行的神经纤维或血管时,由于较低倍物镜的焦点深度较长,有利于从不同深度、层次或角度,连续观察分析不在同一平面上走行的神经或血管影像。在这种情况下,还可将物镜与目镜不同组合多次拍摄,最终择其效果最佳者。
3.聚光器的调控使用问题:经验较少的摄影者往往缺少对聚光器高度的调节,也不知光源是否偏离视野中心。不少人只进行了物镜与组织切片间的所谓“上聚焦”,而没有进行聚光器与组织切片间的“下聚焦”,这当然也无法获得最佳清晰度的成像底片。 Kohler 照明法操做步骤如下:①将视场光阑缩至最小,使光阑叶片的通孔呈现其八角形影像;②两手分别捻转载片台下的左右定心螺丝,使光阑影像与视场中心圆圈重合,以校正光路;③调节聚光器高度,使八角形光阑影像由模糊变清晰,即“下聚焦”;④散大该光阑至135帧幅边框(指常规135型负片画幅,24 mm×36 mm)影像外周。再次微调聚光器高度,使光阑象最清晰为止。每变换一次放大倍率时,都要重复进行如上调整步骤。
4.提高摄影反差:组织结构对比反差的好坏,当然取决于组织制备技术的质量。这是提高显微摄影质量的重要环节。但是一般情况下,为了弥补切片中对比反差的不足,常可采用如下的补救措施:①按照物镜上的数值孔径值即NA值,相应地进行聚光器孔径光阑的匹配调节。一般质量优良的物镜镜头上,除标有放大倍率外,同时还标有NA值,NA值越大者空间分辨率相对越高。②如果按此法调节NA值转盘后,若由于组织制备欠佳致使影像反差仍然不足时,则可将物镜孔径光阑的NA值再适当缩小,例如10x物镜可调至0.19等。③如经过上述措施影像反差仍不好,则可将视场光阑从135(指常规135照片画幅24 mm×36 mm)边框外缩至边框内,然后在暗室扩放时,再将视场光阑影像除去。当然,上述的后两种措施,只不过是一种稍作修正的补救办法而已。
5.低倍摄影难度大:低倍摄影有其特殊优点,例如在1(物)×2.5(目)放大倍率下,可拍摄大鼠脑切片一侧全貌,对总览特异性标记物的分布有一目了然之效果,但是低倍物镜分辨力低,焦深较长,利用微调螺旋进行精确聚焦有一定难度。为避免视力的个体差异,应采取欠焦、过焦、正焦3步,聚焦不宜反复进行。
6.油浸镜头的使用:100×的物镜多为油浸镜头,然而,使用后常因镜头擦不净而使镜头受损。替代的办法是滴加超纯水或双蒸水,观察效果与香柏油差别不大。由于100×物镜镜头与切片距离极近,极易碰损镜头,必须先以40×物镜聚焦,再转至100×物镜,轻轻转动聚焦微调螺旋至焦点。为避免镜头损伤,新型100×物镜常有弹簧装置,可使镜头微动伸缩而避免其损伤。
7.其它注意事项: ①按照常规,彩色胶卷应加LBD(色温变换)滤片,黑白胶卷应加IF550(绿色)滤片。LBD滤片可使日光型彩卷获得最佳色温补偿,IF550 滤片则可使黑白卷分光感度与人眼者接近。尽管有人认为不一定需要滤光处理,但因为摄影取决于胶片的化学感光度,并不取决于人们眼睛对视野的直观感受,还是加滤光片为好。②曝光时间的选定,也是一个必需注意的问题。已知在光强与曝光时间两个参数之间,有许多不同的组合,均在曝光的“安全”范围内,但所谓的“安全”范围,并不等于最佳条件,所以作者认为限定曝光时间还是十分必要的,其道理在于胶卷化学感光度有一定限制,一个胶卷36个帧幅若随意变动曝光时间,在36张之间差异将很大,而冲洗胶卷是在同一条件下,难免有些帧幅显影不佳。依据作者的经验,曝光时间一般限定在0.5~1 s,底片的影像效果较佳。③要将重点拍摄的结构置于视场中心,因为自动曝光装置测得的曝光时间,是以视场中心区为标准,而偏离中心区越远越不准。有时为了兼顾结构局解关系,而重点结构又不在视场中心时,则可采取点(spot)曝光法。④若需将一张切片上的结构拍为几张,之后拼接时,可在New Vanox 显微摄影仪器上设有一个锁定键(lock),有利于解决这一问题,以使同一结构的几个帧幅曝光时间一致,然后在洗照片时将这组照片同时放入显影液与定影液。
⑥ 高中生物中制片是什么
是生物实验中为了在显微镜下观察而制作的标本切片
一般来说会是植物的根,叶之类的
具体的制作方法书上有讲,到实验室后老师会演示的
⑦ 几种生物制片方法各适宜观察什么生物样品
装片:可观察从生物体上取下来的细胞(如口腔上皮细胞、洋葱鳞片叶内表皮细胞)或个体微小的生物如衣藻、水绵、水螅、青霉结构
切片:用于观察用特制刀具把生物体的组织或矿物切成的薄片,如叶片切片(观察叶片结构气孔等结构)
切片:用于观察悬液状态的生物材料,如人的血液血细胞的观察
⑧ 生物实验时制片顺序为什么不同(如观察dna和有丝分裂)
吹气球。
⑨ 生物中制片是什么意思
制片,就是制作组织或细胞的装片或切片,以便在光学显微镜或电子显微镜下观察。
⑩ 【高中生物】求列举高中生物常见的临时装片的制片方法,和它与永久装片的主要区别,谢谢^ω^
一个盖片一个不盖片 印象中这样