❶ 微生物的平板划线实验中中划线部分的菌落数量很少,仅仅在第三次划线的尾部可以观察到菌落,原因是
应该是操作的原因。
平板划线法是在平板上实现混合菌种或单菌种分离,并选取单细菌菌落纯培养的常用方法。
在平板划线实验中,要严格按照操作规程和方法进行,否则很难得到理想的结果。
其过程是:
1、选用平整、圆滑的接种环,按无菌操作法挑取少量菌种。或用移液管吸取少量菌液。
2、拿接种环先在培养基一侧划3—4条连续的平行线(线条多少应依挑菌量的多少面定)。划完后应立即烧掉环上的残菌,以免因菌过多而影响后面各区的分离效果。或用移液管向培养基近边缘处的表面滴入一滴(不高于0.1 ml)菌液,再用接种环按上面的方法以菌液为起始点划线。
3、平板转动一个方向,用接种环从上次划线的末端开始,向另一方向划3-4条平等线。
4、依此类推,再在培养基其他未划过线的地方划线。
如此操作,应当能在培养基上获得单细胞菌落,且越是后来划的线,菌落越是稀疏。
❷ 生物中接种方法→平板划线法要注意什么
(1)要注意全程无菌操作;
(2)滑动时用力要均匀,切勿将接种环嵌入培养基内;
(3)平板应较硬、较厚、表面干燥;
(4)需要分区的时候,划完一个区后必须烧去接种环上的残菌,待冷却后再划另一个区;
(5)划线的线条宜平行、密集、整齐。
接种是食用菌生产中的关键环节之一,如果接种技术不过关,即会造成杂菌污染,成活率低而前功尽弃。无论是菌种分离、传代还是扩繁,都要在无菌条件下严格按照无菌操作规程进行。
(2)如何划板微生物扩展阅读
常用的接种方法
1、三点接种
在研究霉菌形态时常用此法。此法是把少量的微生物接种在平板表面上,成等边三角形的三点,让它各自独立形成菌落后,来观察、研究它们的形态。除三点外,也有一点或多点进行接种的。
2、穿刺接种
在保藏厌氧菌种或研究微生物的动力时常采用此法。做穿刺接种时,用的接种工具是接种针,用的培养基一般是半固体培养基。用接种针蘸取少量的菌种,沿半固体培养基中心向管底作直线穿刺,如某细菌具有鞭毛而能运动,则在穿刺线周围能够生长。
3、浇混接种
将待接的微生物和45℃左右的固体培养基进行混合,这样菌液就达到稀释的目的,待平板凝固之后,置合适温度下培养,就可长出单个的微生物菌落。
4、涂布接种
将菌液倒入凝固的平板上面,用涂布棒在表面作来回左右的涂布,让菌液均匀分布,就可长出单个的微生物的菌落
5、注射接种
用注射的方法将待接的微生物转接至活的生物体内,如人或其它动物中,常见的疫苗预防接种,就是用注射接种,接入人体,来预防某些疾病。
6、活体接种
活体接种是专门用于培养病毒或其它病原微生物的一种方法,因为病毒必须接种于活的生物体内才能生长繁殖。所用的活体可以是整个动物;也可以是某个离体活组织,例如猴肾等;也可以是发育的鸡胚。接种的方式是注射,也可以是拌料喂养。
❸ 微生物的选择培养可以用平板划线法吗
1. 接种环 (1)灭菌,将接种环置于本生灯火焰中灼烧直至变红。 (2)冷却,将接种环触碰无菌琼脂平板的表面直至其不发出咝咝声。二、实验步骤1. 采用无菌操作技术,用接种环将接种物从平板的一侧开始划线。 2. 重新消毒接种环,从第一划线处将样品划线至平板的其佘部分,重复划线直至覆盖整个平板。3. 于37℃培养直至长出单菌落。 4. 如果要从很多的菌液中分离单克隆,可以将平 板分为4、6或8小份,在每个小份中划出单克隆。 ...
❹ 微生物的分离平板涂布法和平板划线法分离微生物的区别
微生物的分离平板涂布法和平板划线法分离微生物的区别
由接种环以菌操作沾取少许待分离的材料,在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线,微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少,并逐步分散开来,如果划线适宜的话,微生物能一一分散,经培养后,可在平板表面得到单菌落。
先将待分离的材料用无菌水作一系列的稀释(如 1 ∶ 10 、 1 ∶ 100 、 1 ∶ 1000 、 1 ∶ 10000 …),然后分别取不同稀释液少许,与已溶化并冷却至 45 ℃左右的琼脂培养基混合,摇匀后,倾入灭过菌的培养皿中,待琼脂凝固后,制成可能含菌的琼脂平板,保温培养一定时间即可出出菌落。如果稀释得当,在平板表面或琼脂培养基中就可出现分散的单个菌落,这个菌落可能就是由一个细菌细胞繁殖形成的。随后挑取该单个菌落,或重复以上操作数次,便可得到纯培养。 稀释涂布法:
优点:可以计数,可以观察菌落特征。
缺点:吸收量较少,较麻烦,平板不干燥效果不好,容易蔓延。
一般用于平板培养基的回收率计数!!