Ⅰ 临床微生物检验的常见标本有哪些
这个可多了,血液、尿液、脑脊液、骨髓液、痰液、关节液、胸水、腹水、脓液分泌物,等等
Ⅱ 微生物检验标本的正确采集及注意事项
微生物检验标本的正确采集及注意事项
正确采集临床微生物标本,直接影响到微生物培养鉴定结果。可靠的检验结果可以指导临床诊断治疗,为临床科学用药和成功的感染控制提供依据,是正确、合理使用抗菌药物,延缓细菌耐药,减少抗菌药物滥用和监测医院感染的第一步,也是最重要的一步。下面是我为大家带来的微生物检验标本的正确采集及注意事项的知识,欢迎阅读。
一、 血液标本的采集
1、 采集方法
(1)75%酒精清洁局部皮肤。
(2)待皮肤干后,再用2%—2。5%碘酒从穿刺点中心部位开始消毒,范围不应小于5cm(直径),且不能用手指触摸消毒后的皮肤。
(3)皮肤碘酒干后(约1min),穿刺采集血液,采血量成人5—10ml,婴幼儿1—5ml。
(4)采血后立即在床旁接种培养瓶,并迅速轻摇,充分混匀防止凝固,但又不可剧震以防溶血。
2、注意事项
(1)怀疑菌血症应尽早采血,体温上升(38。5℃)采血可提高阳性率,但也要防止因等待而延误时机。
(2)对已经使用抗菌药物,而又不能停药者,也应在下次用药前采血。切忌不要在静滴抗菌药物的静脉处采取血标本,也不能从静脉导管及动脉插管中取血。
(3)培养基与血液之比以10:1为宜,以稀释血液中的抗生素,抗体等杀菌物质;有人主张对接受抗菌药物治疗的病人,培养基与采血量之比可为20:1或大于这个比例。
(4)近年研究表明,将血液注入血培养基前,更换针头反而易导致污染。
(5)每例至少采血两次,间隔0。5—1h,以利于提高阳性率和区分感染菌与污染菌。
(6)疑为细菌性心内膜炎及布鲁氏病的病人,以肘动脉或股动脉采血为宜,除在发热期采血外,并要多次采血(24h 3—4次)和增加采血量(可增加10ml)。
(7)采血后立即送检,如不能立即送检可置室温,而不能放置冰箱。
(8)如临床表现很似败血症,而血培养多次阴性者,提示考虑厌氧菌和真菌感染的可能。
二、骨髓的采集
1、采集方法
在病灶部位或髂前(后)上脊处严格消毒后抽取骨髓1ml,注入血培养瓶内。
2、注意事项
(1)骨髓内含有大量的单核巨噬细胞系统的细胞,因而骨髓培养对伤寒病人的.诊断较血培养优越。
(2)用于怀疑细菌性骨髓炎病人。
三、静脉导管标本的采集
1、采集方法
(1)常规导管部位皮肤消毒。
(2)无菌方法从病人体内拔出静脉导管,剪下导管尖端5cm,放入无菌瓶中。
(3)立即(15min内)送检,避免标本干燥。
2、注意事项
(1)剪下的导管立即接种血平皿,可提高阳性率。
(2)肉汤反复冲洗导管腔内,冲洗液做定量培养。
(3)有人将剪下的导管置肉汤增菌液或培养瓶中,此法不能区分导管感染菌与少量定植菌。
(4)卫生部在《医学感染诊断标准》(试行)(2001年1月3日施行)中规定:导管管尖培养其接种方法应取导管尖端5cm,在血平板表面往返滚动一次。细菌≥15cfu/平板,即为阳性。
四、呼吸道
1、痰标本
(1)采集方法
①清晨起床后用凉开水漱口多次,以除去口腔内大量杂菌,用力咳出肺深部的脓痰,置于清洁干燥容器中送检。
②痰量极少者可用45℃ 3%—10%的氯化钠溶液约25ml雾化。对于咯痰量少的幼儿,可轻轻压迫胸骨上部的气管,当其咯痰后用无菌棉棒采集标本。
③咳嗽无力或昏迷病人,可用吸痰管经鼻腔或口腔经气管腔内吸引痰液送检。
④气管切开者可以深入透气孔中取痰。
⑤可用支气管镜直接在病灶部位采集高浓度的病原菌。
⑥用无菌导管经鼻腔插入气管镜内,缓慢注入无菌蒸馏水5ml,取出导管。留取患者在3h内咳出的痰液,放入无菌容器中送检。
⑦胃内采痰法。无自觉症状的结核病人。有时可把痰误咽入胃内,因而可采用胃内溶物做结核菌培养,其阳性结果比咯痰高10%左右,该方法于晨起空腹时,把灭菌的胃管,从鼻腔送入胃内,用20ml注射器抽取胃液。
(2)注意事项
①痰标本的采集以晨痰为准,此时患者痰量较多且含菌量也多。
②标本采集后立即送检,若不能及时送检者,可暂存2—8℃冰箱。若晚1—2h接种,会失去苛氧菌,并使得革兰阴性菌过分生长。
③可接受的标本:痰;支气管灌洗液,支气管刷,支气管活检;肺吸出物和肺活检。不能接受的标本:唾液;24h留的痰(结核杆菌培养除外);拭子。
④ 痰标本的质量评价:(用显微镜筛选)在低倍镜下,检查鳞状上皮细胞,至少10个视野,集中在有白细胞处,合格标本为白细胞与鳞状上皮细胞比例大于2:1。
2、鼻拭子
(1)用湿的拭子(生理盐水);
(2)需插两个鼻孔;
(3)深入3。3cm左右,转动4—5次;
(4)以上用于诊断金黄色葡萄球菌暴发时的鼻带菌者。
3、咽拭子、口腔拭子
(1)采集方法(到细菌室取专用拭子)
①患者清水漱口后,由检查者将其舌外拉,用棉拭子将咽后壁或悬雍垂的后侧反复擦拭数次;
②化脓性扁桃体炎、口腔念珠菌病时,直接用棉拭子在病灶部位擦拭;
③插入运送培养基中立即送检,防止干燥。
(2)注意事项
①棉拭子应避免触及舌、口腔黏膜和唾液;
②采集标本前数小时不可用消毒药物漱口或接触病灶局部。
五、胃肠道
1、粪便
(1)采集方法
选取脓血、黏液粪便2—3g,液体粪便取絮状物1—2ml。盛于灭菌瓶中或蜡纸盒中及时送检。
(2)注意事项
①标本要采集新鲜的,陈旧标本影响阳性检出率;
②切忌粪尿混合;
③若要分离阿米巴,标本要立即送检并注意保温;
④运送培养基可提高阳性率;
⑤分离难辨梭菌时需选不成形或水样便;
⑥霍乱弧菌、大肠杆菌Ο157感染的腹泻便则为水样便或血性便;
⑦标本在病理早期或治疗前采集;
⑧一般认为用抗菌药三天后,标本培养病原菌阴性。
2、肛拭子
在无法获得粪便的情况下,可用经无菌甘油水或无菌生理盐水湿润的肛拭子插入肛门4—5cm(幼儿2—3cm)处,轻轻旋转擦取直肠表面黏液后取出,置运送培养基中送检。
六、泌尿道
根据卫生部《医学感染诊断标准》(试行)通知,泌尿系统临床诊断为:患者出现尿频、尿急、尿痛等尿路刺激症状,或有下腹触痛、肾区叩痛、伴或不伴发热,并具有下列情况之一:
(1)尿检白细胞男性≥5个/高倍视野,女性≥10个/高倍视野,插导尿管患者应结合尿培养;
(2)临床已诊断为泌尿道感染,或抗菌治疗有效而认定的泌尿道感染。
1、中段尿
(1)采集方法
①女性 采样前用肥皂水或0。1%的高锰酸钾溶液冲洗外阴,用手指阴x分开排尿,弃其前段尿,不终止排尿,留取中段尿10ml于灭菌容器内。
②男性 用肥皂水清洗尿道口,或0。1%的碘伏溶液消毒尿道口,灭菌纱布擦干,上翻包皮,弃其前段尿,不终止排尿,留取中段尿10ml于灭菌容器内。
(2)注意事项
①导尿虽然可以减少污染,但是多次重复导尿可以造成逆行性感染,因此近年来大多采用中段尿。
②女性病人最好采取膀胱截石位由护士采取标本,减少污染。
③采集标本以晨起第一次尿液为佳。
④采集标本后,若不能在1h内送检,暂放4℃冰箱,但不能超过8h。若尿液标本在室温下放置超过2h,即使接种培养结果细菌数≥104 cfu/ml获103cfu/ml,也不能作为诊断依据,应重新留取标本送检。
⑤疑为尿道炎时可将最初3—4ml尿液收集在灭菌容器内。该尿中即使有少数细菌,如反复检查为同一细菌,也应考虑为病原菌。
⑥儿童在多数情况下,仅冲洗外阴是不够的,故采集标本较为困难。如果尿内细菌明显增多,可以高度怀疑为尿路感染,无菌则可否定。
⑦若细菌培养结果为两种或两种以上细菌,需考虑污染可能,建议重新留取标本送检。
⑧尿液中不得加入防腐剂,消毒剂否则影响阳性检出率。
2、膀胱穿刺采集法
避免污染是很困难的,培养结果与病情不符时,或尿厌氧菌培养,或婴幼儿中段尿采集困难时,可以用耻骨上穿刺膀胱内采尿。
3、留置导尿者采集法
拔去闭式引流的集尿袋,弃去导尿管前段尿液,留无污染的膀胱内尿液10ml送检。不可从集尿袋下端留取标本。
七、脑脊液
1、采集方法
由临床医师以无菌方法收集脑脊液3—5ml(细菌1ml,真菌2ml抗酸杆菌2ml,病毒1ml)盛于无菌试管或小瓶中立即送检。
2、注意事项
(1)采集标本后立即送检,因脑膜炎奈瑟菌离体后迅速自溶,肺炎链球菌及流感嗜血杆菌也易死亡;
(2)疑为上述细菌感染时,应注意保温,不可置冰箱或低温保存。
八、胆汁
1、十二指肠引流法
在无菌操作下,将十二指肠导管吞咽至十二指肠乳头部(距齿65—70cm)时,收集A液(来自总胆管,为橙黄或金黄色),随之注入25%硫酸镁溶液40ml,经1—2min后再采取B液(来自胆囊,为棕黄绿色),随后收取C液(来自肝胆管,为柠檬色),一般认为B液做细菌培养意义较大。
2、胆囊穿刺法
胆囊造影术时,可同时采取胆汁。
3手术采取法
由总胆管、胆囊直接穿刺采取胆汁。
以上采集之标本应立即送检,否则置于4℃冰箱内,采集时需小心,避免被唾液、十二指肠液细菌污染。
九、穿刺液标本
穿刺液包括胸水、腹水、心包液、关节液、鞘膜液。
1、采集方法
由临床医师行穿刺术抽取。胸腹水可收集5—10ml,心包液、关节液收集2—5ml,置于无菌含抗凝剂的试管或小瓶中,充分混匀后,立即送检。抗凝剂10%EDTA二钠盐,标本与抗凝剂之比10:1。
2、注意事项
⑴标本采集应在患者用药之前或停止用药1—2天后进行;
⑵不能立即送检可置4℃冰箱保存;
⑶疑为淋病性关节炎患者的关节液,采集后立即送检,或床旁培养为佳;
⑷不能用棉拭子浸蘸标本送检。
十、脓汁及病灶分泌物
1、伤口
⑴表面伤口拭子采集方法及注意事项
① 仅限于皮肤与皮下组织,包括手术切口、褥疮溃疡、新生儿脐炎、婴儿脓疮病。
②用无菌生理盐水或75%的酒精擦去病灶表面渗液;
③用无菌棉拭子抹去及较深部的脓汁分泌物或组织送检;
④采集褥疮溃疡标本时应采集褥疮边缘的脓性分泌物,拭子放在运送培养基中立即送检,不要采集创口表面的渗液。
⑵伤口、脓肿、窦道、坏疽组织采集方法及注意事项
①闭锁性脓肿用碘酒和酒精消毒皮肤后,用灭菌注射器穿刺抽取全部脓液送检,疑为厌氧菌感染时,排去针管内空气将针头插入灭菌橡胶塞内送检;
②伤口处若有脓及渗出物要用无菌棉签深入各种窦道中擦拭,用小刀刮取,穿刺抽吸或手术切除获得深处伤口标本;
③当创伤出血时,敷有药物在2h以内及烧伤在12h内均不应采集标本,此时获得阳性结果机会甚少。
④采集标本注意观察脓汁及分泌物性状、色泽、气味等。可为培养鉴定提供依据。
⑶烧伤创面
①烧伤创面需要脓性分泌物,焦痂迅速分离变棕黑、黑或紫罗兰色,烧伤边缘水肿。患者发烧>38℃或低体温<36℃,合并低血压。
②用无菌生理盐水冲洗伤口创面。
③由于创面部位不同,细菌种类也不尽相同,要用灭菌棉拭子采集多个部位的炎症区送检。
④采集痂下变黑或变性的不健康区边缘或引流液等做定量培养及组织活检。
2、厌氧伤口拭子
⑴厌氧专用棉棒或玻璃棒触及深部脓汁;
⑵可用注射器抽吸,排去针管内空气将针头插入灭菌橡胶塞内送检;
⑶立即送检,送检过程中必须保持在无氧条件;
⑷不宜做厌氧菌培养的有痰、喉拭子、鼻咽拭子、齿龈拭子、直肠、阴道和宫颈拭子以及回肠、结肠造瘘术的流出物,胃、小肠及大肠内容物等。
3、尿道口分泌物拭子
⑴男性用无菌纱布擦拭和清洗尿道口,然后采取从尿道口溢出的脓性分泌物;
⑵采集前列腺液时,先将尿道、膀胱冲洗,然后从肛门用手指按摩前列腺,促使前列腺液溢出;
⑶女性病人先用灭菌纱布或棉拭子仔细擦拭或清洗尿道口,然后从阴道内诊压迫尿道,使分泌物溢出;
⑷取子宫颈分泌物,先用内窥镜扩张阴道,然后从宫颈口用灭菌棉拭子采取分泌物,尽量避免被阴道宫颈附近正常菌群的污染。
4、蜂窝织炎
⑴用无菌生理盐水或酒精消毒皮肤;
⑵用细针在炎症最显着处穿刺吸引;
⑶抽少量灭菌生理盐水在针管内;
⑷注入无菌试管内送检。
5、组织标本
⑴活体组织采取的微量标本,可直接接种在培养基内;
⑵表浅组织可直接用棉拭子擦拭、小刀刮去;
⑶较大组织块的表面可采用烧灼或浸入沸水中5—10s,然后用灭菌剪刀切开,取其中的脓汁;
⑷深部组织标本可经皮肤穿刺或手术切取送检;
⑸组织标本不可用福尔马x固定;
⑹有时也可将沾有脓汁的最内层敷料放入无菌平皿内送检。
十一、眼标本采集
⑴一般细菌,以无菌棉拭子采集眼分泌物,尤其脓性分泌物;
⑵沙眼衣原体,首先擦去眼结膜上面的分泌物,然后用无菌小刀刮取穹窿部及眼结膜上皮细胞,用链霉素处理后备用;
⑶对于刚治疗或药物冲洗过的患者最好12—24h后采集标本;
⑷对于泪囊炎患者可稍加挤压后以无菌棉拭子采集标本。
;Ⅲ 病原微生物检验和药敏培养,抗菌药物使用过程中哪些情况必须送检,和最好送检。送检物如何取
我来回答你吧!一般来说现在医院做培养和药敏做的比较多的都是细菌。意义在于鉴定患者所感细菌的种属以及鉴定所感细菌的敏感药物,以便临床医生诊疗疾病。怀疑有细菌感染都会送检。标本多为血液,尿液,大便,分泌物,唾液,痰液,脓液,脑脊液,胃液等等!取什么标本根据临床医生初步诊断决定,也由医生护士取送检物到医院检验科细菌室尽快接种培养!希望帮到你
Ⅳ 微生物标本采集方法及注意事项
一、粪便标本采集和处理
(1)采集方法
1.自然排便法:取新鲜粪便的黏液、脓血、或絮状物等有意义成分,2~3g或 1~2 m1,盛无菌容器内或置于保存液或增茵液内送检;若疑似霍乱者应置于碱性蛋白胨水中(PH8.6)。
2. 直肠拭子法:难以获得粪便或排便困难患者及幼儿可采用此法,将拭子前端用无菌甘油或生理盐水湿润,然后插入肛门约 4~5cm(幼儿 2~3cm),轻轻在直肠内旋转。擦取直肠表面粘液后取出,盛于无菌试管中或保存液中送检。
(2) 注意事项
1.尽可能在抗生素使用之前采集标本。
2.所挑取的粪便不应接触其他部位(如便盆),粪便样本中不应混入尿液及其他异物,采集过程应尽量无菌操作。
3.不应用厕纸收集粪便。
4.对同一病人在同一天不宜重复送检。
5.宜在感染急性期(通常是5d-7d内)采集标本。
6.下列腹泻患者应连续3d送检标本
--社区获得性腹泻(入院前或72h内出现症状)
--医院腹泻(入院72h后出现症状),且至少有下列情况之一:大于65岁并伴有内科疾病、HIV感染、粒缺(中性粒细胞<0.5)及疑似院内暴发。
--怀疑肠道感染的非腹泻性表现。
7.肠炎和发热病人建议做血培养。
8.伤寒沙门菌感染时骨髓培养高出血培养。
9新鲜粪便标本应在采集后尽快送检,不应超过2h。
(3)标本拒收
干燥的.拭子、含钡粪便、黄软成形便、干便、明显污染的粪便、一日内重复送检的标本,应设法与临床医师联系,可要求重新留取标本,并做好记录,在没有与医师沟通之前标本不应丢弃,仍按实验室标本保存原则存放。
二 、尿液标本采集和处理
(1)采集方法
1. 中段尿采集法: 清晨起床后用肥皂水清洗尿道口和外阴部,再用清水冲洗尿道口周围,然后排尿弃去前段尿液,收集中段尿 5~10ml盛于带盖的无菌容器内立即送检,采集后于0.5h内进行接种。
2. 耻骨上膀胱穿刺法:评估膀胱内细菌感染的“金标准”。培养结果与临床病情矛盾时可采用此法,一般较少应用。
3. 导尿法:采用无菌技术用注射器经导尿管抽取尿液,导取 10~15ml 尿液,置无菌容器中送检,尿液标本不能通过收集袋引流管口流出的方式采集。长期留置导尿管的患者进行常规尿培养意义不大,这些患者通常会培养出大量定植菌。
(2)注意事项
正常人的尿液是无菌的,除外尿道有正常菌群外,还有条件致病菌,而这些细菌又是尿路感染中常见的致病菌,故应该注意无菌采集。
(3)标本拒收
1.标本取自导尿患者尿袋。
2.标本送检时容器有渗漏。
3.未用无菌容器采集标本。
4.除耻骨上膀胱穿刺法外,采用其他方法采集标本申请做厌氧菌培养
三、 痰及下呼吸道标本采集和处理
(1)采集方法
1.自然咳痰法:①晨痰为佳;②先冷开水洗漱、清洁、口腔和牙齿;③再用力咳出呼吸道深部的痰,吐至无菌容器中;④痰量不得少于1ml;⑤痰咳出困难 时可先雾化吸入 NaCl溶液(100g/L,加温到45℃)使痰容易咳出。查结核分枝杆菌,应留取24小时痰。
2. 小儿取痰法:用弯压舌板向后压舌,将拭子深入咽部,小儿因压舌板刺激引起咳嗽,喷出的肺或气管分泌物粘在拭子上即可送检。
3.支气管镜、支气管穿刺、支气管肺胞灌洗等采集法,此采集方法必须由医生操作。
(2)注意事项
1.痰经过口腔,所以患者应用清水漱口数次,尽量排除口腔内大量杂菌。
2.用无菌防漏容器收集标本,应在2h内(室温)送至微生物实验室。若延长送检,将导致非苛养的口咽部定植菌过度生长,有临床意义的病原菌数量相对减少。
(3)筛选并拒收的标本
1.24h内重复采集的痰细菌培养标本。
2.唾液。
3.未经保护套管收集的支气管刷培养标本。
4.痰的厌氧菌培养标本。
四、血培养标本采集和处理
(1)血培养标本采集指征
对入院的危重患者未进行系统性抗生素治疗前,应及时进行血液培养,患者出现以下体征可作为血培养的重要指征:
1.发热(≥38℃)或低热(≤36℃)
2. 寒热
3. 白细胞增多(>10×109/L,特别是在有“核左移”未成熟的或带状的白细胞增多时)
4.粒细胞减少(成熟的多核白细胞<1×109/L)
5. 血小板减少
6.皮肤粘膜出血
7.昏迷
8.多器官衰竭
(2)注意事项
1.血液在正常情况下为无菌标本,应严格按照无菌操作,避免杂菌污染。
2.培养瓶分为需氧瓶和厌氧瓶两种。每瓶需要 8~10ml。儿童瓶为需氧瓶每瓶需血液1~3ml.
3.血瓶接种顺序:用注射器或针采血时,应先接种厌氧瓶;用蝶形针采血时,应先接种需氧瓶;采血量不够时先接种需氧瓶,剩余量再接种厌氧瓶。
4.采血后尽快送至微生物室,如有耽搁,室温放置,不要冷藏。
Ⅳ 微生物学的检查方法是有哪些
微生物学检查法
标本
因鼠疫传染性极强,采集标本时必须严格无菌操作。根据病型采取淋巴结穿刺液、肿胀部位组织液、脓汁,血液和痰等。人和动物尸体可取肝、脾、肺、病变淋巴结以及心血等。陈旧尸体取骨髓。将采集标本送至有严密防护措施的专门实验室进行检查,禁止在一般实验室进行操作。
直接涂片镜检
除血液标本外,一般均需涂片或印片,干燥后用甲醇固定,革兰染色或吕氏美兰染色,镜检。在不同材料中,菌体大小、形态有很大差异,除典型形态外,往往可见菌体呈多形态性,需加以注意。
分离培养与鉴定
血液标本需先置肉汤中进行增菌培养。分离培养一般选用血琼脂平板,28摄氏度24小时后,可见较小的露滴状菌落,继续培养则菌落增大至1~2毫米,中央厚而致密,周边逐渐变薄。取可疑菌落进行涂片染色镜检,噬菌体裂解试验,血清凝集试验,特异荧光抗体染色等作出鉴订。
血清学试验
可用于检查鼠疫耶尔森菌抗原或特异性抗体。敏感而特异的试验方法有ELISA、固相放射免疫分析,SPA协同凝集试验等。
检测核酸
用DNA探针杂交方法或PCR技术检测鼠疫耶尔森菌核酸,有助于鼠疫的诊断。PCR敏感性极高,蚤体内有10个鼠疫耶尔森菌感染即可用PCR技术检出。
诊断检查
诊断:取决于病人有接触史及肺部受累表现,病因诊断取决于痰、血或淋巴结吸出物革兰染色、培养,有条件的单位可作直接荧光素标记抗体染色,可提供快速的病因诊断。
Ⅵ 微生物检验的标本采集和运送原则
微生物检验的标本采集和运送原则
正确的标本采集和及时送检是保证细菌学检验质量的关键 !其目的是要捕捉到与感染相关的病原菌并保持其活性,同时尽可能的减少其它与感染无关细菌的干扰。下面是我为大家带来的关于微生物检验的标本采集和运送原则的知识,欢迎阅读。
采样时机
抗生素使用前(停用抗生素3至5天或下次用药前)采样
采样方法
采集无菌部位的标本应严格无菌操作,非无菌部位尽量减少正常菌群的污染,采样量足。
采样容器
专用的无菌,防渗漏,有盖,无酸、碱、防腐剂及消毒剂污染。
送检
尽快送检,一般不超过2小时。
若不能及时送检可于4-8℃保存,但对可疑淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌、肺炎链球菌等对外界环境敏感的苛养菌感染的患者标本应室温保存。
当标本量小于1ml时应于15~30分钟内送检,防止挥发和干燥。
微生物检查的标本采集和运送原则
1.发现感染应及时采集微生物标本作病原学检查。
2.尽量在抗菌药物使用前,或停药3至5天后采集标本,如不能停用抗菌药物,应于下次抗菌药物应用前采集。应在感染的急性期或伤口局部治疗前采集标本。
3.选择正确的解剖部位,并以适当的技术、方法与容器收集足量的标本。
4.采样时应严格执行无菌操作,将污染可能降至最低。
5.收集真正感染的病灶处的`标本,且避免邻近区域常居菌群的污染。
6.采用专用无菌容器收集标本。容器须灭菌处理,防止渗漏,但不得使用消毒剂。标本中不可添加防腐剂。
7.采样后应立即送检,最好在2h内。如不能及时送检,应将标本置于适当的储存环境待送,但不超过24小时。对可疑淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌、肺炎链球菌等对外界环境敏感的苛养菌感染的患者标本应室温保存。当标本量小于1ml时应于15~30分钟内送检,防止挥发和干燥。
8.尽量不要以一般棉花拭子收集标本,应使用专用的纤维拭子。
9.每份标本都应贴上标签并标明必要信息,在检验申请单上填写足够的有关临床资料。(要标明病区、病人姓名、感染状况、近期抗菌药物使用情况、标本来源、检验目的、采集部位、采集及送检时间等)
10.同一天同一检测目的、相同标本(血液标本除外)一般只需送检一次(份)。涂片检查最好和细菌培养同时做!
;Ⅶ 微生物检验标本采集和运送原则
采样时机
抗生素使用前(停用抗生素3至5天或下次用药前)采样
采样方法
采集无菌部位的标本应严格无菌操作,非无菌部位尽量减少正常菌群的污染,采样量足。
采样容器
专用的无菌,防渗漏,有盖,无酸、碱、防腐剂及消毒剂污染。
送检
尽快送检,一般不超过2小时。
若不能及时送检可于4-8℃保存,但对可疑淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌、肺炎链球菌等对外界环境敏感的苛养菌感染的患者标本应室温保存。
当标本量小于1ml时应于15~30分钟内送检,防止挥发和干燥。
微生物检查的标本采集和运送原则
1.发现感染应及时采集微生物标本作病原学检查。
2.尽量在抗菌药物使用前,或停药3至5天后采集标本,如不能停用抗菌药物,应于下次抗菌药物应用前采集。应在感染的急性期或伤口局部治疗前采集标本。
3.选择正确的解剖部位,并以适当的技术、方法与容器收集足量的标本。
4.采样时应严格执行无菌操作,将污染可能降至最低。
5.收集真正感染的病灶处的标本,且避免邻近区域常居菌群的污染。
6.采用专用无菌容器收集标本。容器须灭菌处理,防止渗漏,但不得使用消毒剂。标本中不可添加防腐剂。
7.采样后应立即送检,最好在2h内。如不能及时送检,应将标本置于适当的储存环境待送,但不超过24小时。对可疑淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌、肺炎链球菌等对外界环境敏感的苛养菌感染的患者标本应室温保存。当标本量小于1ml时应于15~30分钟内送检,防止挥发和干燥。
8.尽量不要以一般棉花拭子收集标本,应使用专用的纤维拭子。
9.每份标本都应贴上标签并标明必要信息,在检验申请单上填写足够的有关临床资料。(要标明病区、病人姓名、感染状况、近期抗菌药物使用情况、标本来源、检验目的、采集部位、采集及送检时间等)
10.同一天同一检测目的、相同标本(血液标本除外)一般只需送检一次(份)。涂片检查最好和细菌培养同时做!
拓展:
1.糖类的分解:细菌分泌胞外酶,将菌体外的多糖分解成单糖(葡萄糖)后再吸收。各种细菌将多糖分解为单糖,进而转化为丙酮酸,这一过程是一致的。丙酮酸的利用,需氧菌和厌氧菌则不相同。需氧菌将丙酮酸经三羧酸循环彻底分解成CO2和水。厌氧菌则发酵丙酮酸,产生各种酸类(如甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、乳酸、琥珀酸等)、醛类(如乙醛)、醇类(如乙醇、乙酸甲基甲醇、异丙醇、丁醇等)、酮类(如丙酮)。不同细菌具有不同的酶,对糖类的分解能力和代谢产物也不同,借此可以鉴别细菌。
2.蛋白质的分解:蛋白质分子在细菌分泌的蛋白质水解酶的作用下,在肽键处断裂,生成多肽和二肽。多肽和二肽在肽酶的作用下水解,生成各种氨基酸。二肽和氨基酸可被细菌吸收,氨基酸在体内脱氨基酶的作用下,经脱氨基作用生成氨。不同种细菌在不同的条件下所进行的脱氨基作用的方式(氧化脱氨基、水解脱氨基、还原脱氨基)及代谢产物也不同。可借此鉴别细菌。如有些细菌能使色氨酸氧化脱氨基,生成吲哚、C02和H20.细菌还可以用脱羧酶使氨基酸脱羧,生成胺类(如组胺)和C02.
3.细菌对其他物质的分解:细菌除能分解糖和蛋白质外,对一些有机物和无机物也可分解利用。各种细菌产生的.酶不同,其代谢的基质不同,代谢的产物也不一样,故可用于鉴别细菌。
(1)对其他有机物的分解:如变形杆菌具有尿素酶,可以水解尿素,产生氨。乙型副伤寒沙门菌和变形杆菌都具有脱硫氢基作用,使含硫氨基酸(胱氨酸)分解成氨和H2S.
(2)对其他无机物的分解:产气肠杆菌分解柠檬酸盐生成碳酸盐,并分解培养基中的铵盐生成氨。细菌还原硝酸盐为亚硝酸盐,氨和氮气的作用,称为硝酸盐还原作用。
4.细菌合成代谢产物的意义
(1)热原质:大多数为革兰阴性菌合成的菌体脂多糖。注入人体或动物体内能引起发热反应,故称热原质。
(2)毒素和侵袭性酶:细菌产生毒素,包括内毒素和外毒素。内毒素为草兰阴性菌的脂多糖。外毒素是革兰阳性菌产生的蛋白质,毒性强且有高度的选择性。有些细菌还能产生具有侵袭性的酶,如卵磷脂酶、透明质酸酶等。毒素和侵袭袭性酶在细菌致病性中甚为重要。
(3)色素:有水溶性色素(铜绿假单胞菌的色素)和脂溶性色素(金黄色葡萄球菌的色素)。不同细菌产生不同的色素,在鉴别细菌上有一定意义。
(4)抗生素:是由某些微生物代谢过程中产生的、能抑制或杀死另一些微生物和癌细胞的微量生物活性物质。
(5)细菌素:某些细菌菌株产生的一类具有抗菌作用的蛋白质,细菌素作用范围狭窄,仅对与产生该种细菌素的细菌有近缘关系的细菌才能起作用,如大肠菌素、绿脓菌素、变形菌素和弧菌素等。
Ⅷ 微生物学检查主要包括哪三样
微生物学检查的方法
临床微生物学实验室接到标本后应立即进行微生物学检验。主要包括直接镜检、检测特异性抗原或病原体成分、进行分离培养和鉴定、体外药敏试验等。
(一)直接镜检
标本经涂片染色或制备湿片镜检,有些标本如尿液、脑脊液等经过离心浓缩后镜检出其初步结果对有些病人标本有诊断参考价值。直接镜检对于确定进一步检出步骤及鉴定方法也很有帮助。另外,直接镜检还可评价标本是否符合检验要求。
(二)快速诊断
快速检测病原体成分主要是指特异性抗原和核酸检测。特异性抗原检测包括免疫荧光技术、胶乳凝集试验、酶免疫技术、对流免疫电泳、化学发光免疫测定等。核酸检测包括核酸探针杂交、PCR技术。其他快速检测法还有气-液相色谱法、化学发光、生物发光测定法和基因或蛋白微型阵列芯片技术等。
(三)直接药敏试验
直接药敏试验即在分离培养病原体的同时,直接将临床标本接种于平板,用抗生素纸片作药物敏感性试验,在18~24h内可获得结果。但因其在试验时接种量难以标准化,且对混有杂菌和混合感染的标本不易明确其结果,故分离出纯培养物后应再作体外药物敏感试验。
(四)常规检验
1.分离培养:通常由正常无菌部位采取的标本接种血平板,置于空气或含5%~10%CO2的气缸中培养,大部分细菌可于24~48h生长良好。若原始培养为阴性,但据镜检结果和临床信息提示可能有病原菌存在,则应再采集大量标本,离心浓缩或溶解离心法处理,取沉淀接种营养丰富的需氧或厌氧培养基来培养。
对于存在正常菌群部位采集的标本,分离时应采用选择培养基以利于病原菌生长,也可加某些抗生素抑制污染菌的生长。对于某些感染标本中发现的细菌,如尿路感染的尿液中检出大肠埃希菌,可能是病原菌,也可能是污染菌或正常菌群,其临床意义的确定有赖于定量培养法。即取一定量的标本如液体标本用液体培养基作一系列稀释;组织标本称量后制成悬液,并稀释成l0-1,10-2,10-3等,分别取0.1ml涂布于血琼脂平板或倾注培养,35℃24h后计算每克标本所含细菌数。
2.鉴定:分离出的细菌一般应经过细菌形态、菌落特点、生化反应、血清学试验、动物接种等鉴定。目前尚有某些微量鉴定系统,其鉴定快速、简便,值得推广。如用于鉴定肠杆菌科的20E,鉴定非发酵菌的20NE及鉴定厌氧菌的20A等。
3.体外纯菌药物敏感性试验:常用方法包括抑菌试验、杀菌试验、联合药敏试验和检测细菌产生的抗生素灭活酶等。
(五)报告
直接镜检要求2h报告,说明标本是否合格,发现微生物情况和特点;初步鉴定和直接药敏结果于24h或次晨报告,报告可能的病原菌和直接药敏结果;最后鉴定和细菌药敏结果一般不超过3天,还规定除血培养外,所有送检标本必须在24h内预报。
Ⅸ 临床微生物送检率包括哪些项目。。。。
送检率%=送标本的病例数/治疗使用抗菌药物的病例数*100%
按照感染性疾病病原诊断与管理要求,以下各项检查可以作为计算微生物检查送检率的项目。
1.无菌体液细菌涂片染色细菌检查
。
2.合格标本细菌培养
。
3.肺炎链球菌尿抗原
。
4.军团菌抗原/抗体检查
。
5.真菌涂片及培养
6.血清真菌g实验或gm实验
。
7.降钙素原检测(pct)。
Ⅹ 微生物检验标本采集规范
微生物检验标本采集规范
正确采集、运送、保存及处理微生物检验标本,对于保证微生物检验质量至关要,为了准确检出病原菌,避免漏检及误诊,临床医护人员及实验室工作人员应掌握微生物检验标本采集、运送、保存及处理原则。下面是我为大家带来的关于微生物检验标本采集规范的知识,欢迎阅读。
标本采集的`一般原则:
1、早期采集:采集时间最好是病程早期,急性期,且必须在使用抗菌药物(俗称消炎药)之前采集,确保病原菌的检出;
2、无菌操作:采集标本时应尽量减少或避免感染部位附近皮肤或黏膜常居菌群污染和防止外源性细菌污染标本,采集的标本盛于无菌容器内送检。盛装标本的容器不能使用消毒剂处理,标本中也不得添加防腐剂,以免降低病原菌的分离率;
3、适量标本:标本量过少可能导致假阴性结果。
各种标本采集注意事项:
一、呼吸道标本采集
(1) 送检指征:凡是发热、咳嗽和咳痰,痰呈脓性,黏稠或血性,并伴有胸痛,气急,外周血白细胞总数及中性粒细胞比例明显增高,应采集痰液或下呼吸道标本。
(2) 标本采集时间:a、以晨痰为好,患者清晨用凉开水反复漱口后用力自气管咳出第一口痰,将痰采集于无菌容器中尽快送检。b、在应用抗菌药物之前采集标本。
二、脓液及创伤感染分泌物标本采集
(1) 送检指征:红、肿、热、痛和功能障碍是化脓性感染的五个典型特征。
(2) 采集方法:a、开放性脓肿标本:包括眼、耳、扁桃体、术后切口感染等脓性分泌物。首先用无菌生理盐水清洗病灶表面的污染杂菌,然后采取靠近组织部分脓液及病灶深部的分泌物立即送检。b、闭锁性脓肿标本:指有完整脓壁与体腔、与外界不相通的脓肿。闭锁脓肿应采集渗出物和脓肿壁标本。注意不主张用拭子采集标本,对患者病灶局部及皮肤或黏膜消毒后,用无菌注射器将脓肿内容物吸出,然后切开脓肿,引流采集脓汁(大于1ml)用于检验。
(3) 送检时间:标本采集后应在2小时内(室温放置)送至细菌室。一般在患者使用抗菌药物之前或停止用药后1-2日采集。
三、泌尿生殖道标本采集
(1) 送检指征:尿路感染、肾结核、泌尿系结石、肉眼脓尿或血尿,尿常规检查有白细胞或亚硝酸盐阳性,不明原因发热,尿道口有脓性分泌物等。
(2) 采集时间及方法:应选择在抗菌药物应用之前采集尿液,通常应采集晨起第1次尿液送检,确保尿液在膀胱内停留4小时以上。方法是患者留取标本的前一天晚上少饮水,晨起女性先用肥皂水清洗外阴部(男性翻转包皮,清洗尿道口),再以无菌盐水冲洗尿道口,然后排尿弃去前段,留取中段尿10-15ml于灭菌容器中,立即加盖送检。
四、粪便标本采集
(1) 送检指征:腹泻、大便每日≥3次,粪便的形状异常,可为稀便、水样便、粘液便、脓血便及血便,可伴有恶心、呕吐、食欲不振、发热、腹痛及全身不适等。
(2) 采集方法:自然排便后,挑取有脓血或黏液部位的粪便,液状粪便取絮状物盛于无菌的容器中送检。
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