生物实验动物细胞如何获得

① 动物细胞是如何获得能量的

细胞内存在一种称为ATP（三磷酸腺苷）的能量载体,即一个ATP的能量较小,适合细胞直接利用.植物细胞和动物细胞都是通过利用它来获得活动的能量.

② 为了进行细胞培养,首先要从生物体取得细胞,目前获取细胞的方法有两种,分离法

实验:细胞培养

1.实验目的

初步掌握哺乳动物细胞的原代培养与传代培养的基本操作过程，为生物工程在医学上的应用打下基础。

实验原理 2.

从生物体中取出某种组织或细胞，模拟体内生理条件，在人工培养条件下使其生存、生长、繁殖或传代，这一过程称为细胞培养。细胞培养技术的最大优点是使我们得以直接观察活细胞，并在有控制的环境条件下进行实验，避免了体内实验时的许多复杂因素，还可以与体内实验互为补充，可同时提供大量生物性状相同的细胞作为研究对象，耗费少，比较经济，因此成为生物学研究的重要手段。近年来，在体细胞遗传、分化、胚胎发生、肿瘤发生、免疫学、细胞工程、放射生物学以及老年学等一系列的研究领域中得到广泛的应用，并取得了丰硕的成果。

细胞培养可分为原代培养和传代(继代)培养。直接从体内获取的组织细胞进行首次培养为原代培养;当原代培养的细胞增殖达到一定密度后，则需要做再培养，即将培养的细胞分散后，从一个容器以1:2或其他比率转移到另一个或几个容器中扩大培养，为传代培养，传代培养的累积次数就是细胞的代数。

细胞培养是一种程序复杂、要求条件多而严格的实验性工作。所有离体细胞的生长都受温度、渗透压、pH值、无机盐影响，消毒、配液等均有严格的规范和要求，特别是无菌操作是细胞培养成败的关键。

③ 动物细胞培养原理

动物细胞培养的原理是细胞增殖，动物细胞培养就是从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。

一、细胞增殖的意义：

1、细胞增殖是生物繁殖的基础：单细胞生物以细胞分裂的方式产生后代；多细胞生物的繁殖和发育的基础、

2、细胞增殖是高等生物完成正常生命活动的基础：细胞增殖是生物体生长、发育、繁殖和遗传的基础。

二、细胞通过分裂进行增殖：

细胞增殖是细胞重要的生命活动，是生物体生长、发育、繁殖、遗传的基础。

1、单细胞生物：细胞增殖而繁衍。

2、多细胞生物：从受精卵开始，要进行细胞的增殖和分化逐渐发育成个体。

3、真核细胞的分裂方式：有丝分裂、无丝分裂、减数分裂。

④ 如何获得动物工程细胞

1.动物细胞培养.
动物细胞取自动物胚胎或刚出生不久的幼龄动物的器官或组织.用胰蛋白酶处理使之分散为单个细胞,再配置一定浓度的细胞悬浮液培养.并定期用胰蛋白酶使细胞从瓶壁上脱离下来.
2.动物细胞融合.
用灭活的病毒或聚乙二醇诱导融合.
3.单克隆抗体.
4,胚胎移植.
5.核移植.

⑤ 从成体活体动物中获得干细胞的方法有哪些

从骨髓里面可以获得间充质干细胞，直接冲洗即可，但培养起来有难度，很耗钱。。

⑥ 动物细胞培养的基本过程

一、准备工作

准备工作对开展细胞培养异常重要，工作量也较大，应给予足够的重视，准备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行。准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒，培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌，无菌室或超净台的清洁与消毒，培养箱及其他仪器的检查与调试。

二、取材

在无菌环境下从机体取出某种组织细胞（视实验目的而定），经过一定的处理（如消化分散细胞、分离等）后接入培养器皿中，这一过程称为取材。如是细胞株的扩大培养则无取材这一过程。机体取出的组织细胞的首次培养称为原代培养。

理论上讲各种动物和人体内的所有组织都可以用于培养，实际上幼体组织（尤其是胚胎组织）比成年个体的组织容易培养，分化程度低的组织比分化高的容易培养，肿瘤组织比正常组织容易培养。

取材后应立即处理，尽快培养，因故不能马上培养时，可将组织块切成黄豆般大的小块，置4℃的培养液中保存。取组织时应严格保持无菌，同时也要避免接触其他的有害物质。取病理组织和皮肤及消化道上皮细胞时容易带菌，为减少污染可用抗菌素处理。

三、培养

将取得的组织细胞接入培养瓶或培养板中的过程称为培养。如系组织块培养，则直接将组织块接入培养器皿底部，几个小时后组织块可贴牢在底部，再加入培养基。如系细胞培养，一般应在接入培养器皿之前进行细胞计数，按要求以一定的量（以每毫升细胞数表示）接入培养器皿并直接加入培养基。细胞进入培养器皿后，立即放入培养箱中，使细胞尽早进入生长状态。

正在培养中的细胞应每隔一定时间观察一次，观察的内容包括细胞是否生长良好，形态是否正常，有无污染，培养基的PH是否太酸或太碱（由酚红指示剂指示），此外对培养温度和CO2浓度也要定时检查。一般原代培养进入培养后有一段潜伏期（数小时到数十天不等），在潜伏期细胞一般不分裂，但可贴壁和游走。过了潜伏期后细胞进入旺盛的分裂生长期。

细胞长满瓶底后要进行传代培养，将一瓶中的细胞消化悬浮后分至两到三瓶继续培养。每传代一次称为“一代”。二倍体细胞一般只能传几十代，而转化细胞系或细胞株则可无限地传代下去。转化细胞可能具有恶性性质，也可能仅有不死性（Immortality）而无恶性。培养正在生长中的细胞是进行各种生物医学实验的良好材料。

四、冻存及复苏

为了保存细胞，特别是不易获得的突变型细胞或细胞株，要将细胞冻存。冻存的温度一般用液氮的温度—－196℃，将细胞收集至冻存管中加入含保护剂（一般为二甲亚砜或甘油）的培养基，以一定的冷却速度冻存，最终保存于液氮中。

在极低的温度下，细胞保存的时间几乎是无限的。复苏一般采用快融方法，即从液氮中取出冻存管后，立即放入37℃水中，使之在一分钟内迅速融解。然后将细胞转入培养器皿中进行培养。冻存过程中保护剂的选用、细胞密度、降温速度及复苏时温度、融化速度等都对细胞活力有影响。

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进入细胞间开始细胞培养时，注意事项：

①确定所有的细胞操作用的溶液和耗材都已经消毒并检测没有问题，不确定的溶液和耗材请勿使用，除非特殊情况，不要借用别人的溶液。

②确定衣服的袖口已经卷起或者白大褂的袖口已经扎紧。

③确定酒精灯内的酒精量，需要的话及时进行补充。

④确定所有需要用到的溶液和耗材都放在伸手可及的位置。为了方便单手开启瓶盖，实验开始前可以把所有瓶盖旋松。

⑤尽量不要直接倾倒溶液，除非瓶口没有被烧坏。如果倾倒失败，溶液粘在瓶口，请用喷过75%酒精的纸巾仔细清洁瓶口周围（不要接触到瓶口）后在火焰上简单烧灼。

⑥操作时如果不能肯定所用的耗材是洁净的，必须及时更换。

⑦实验完毕及时收拾，保持工作区域清洁整齐，最后用75%酒精清洁台面。

⑦ 动物细胞培养需要哪些条件

一、细胞培养的条件和要求
1.所有与细胞接触的设备、器材和溶液等，都必须保持绝对无菌，避免细胞外微生物的污染。

目前最可靠和最常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌。
如：玻璃制品、布类、金属制品：6.8kg20min。
橡胶制品：3.6～4.5kg10min。
培养用液，如Hanks液，水解乳蛋白：3.6～ 4.5kg10min。
实验中染菌物品和动物尸体等：6.8 kg20min。

试管、吸管等，则可采用干热灭菌；
一切不适于加热灭菌的液体，如人工合成培养液、小牛血清、胰蛋白酶等溶液，可采用过滤法除菌。

细胞培养中常用的消毒剂浓度及其使用场合

2.必须有足够的营养供应，而绝对不可有有害的物质，包括极微量的有害离子的掺入，为此必须注意器材的清洗和配液用水的质量。

细胞培养中对水的质量要求很高（见水处理）。

3.保证有适量的氧气供应。

细胞代谢需要有空气，否则细胞死亡。在用培养瓶进行静止培养，或用转瓶进行旋转培养时，只要培养的液体量不超过总容量的30％，通过与液面的空气交换，可以保证细胞有足够的氧气。当用罐子深层培养时，则必须通气，一般采用含5％CO2的空气，或根据需要将CO2、N2、O2和空气以不同比例混合，过量氧对细胞的生长也不利。

4.需随时清除细胞代谢中产生的有害产物。

细胞在代谢过程中会产生大量代谢废物，如CO2、乳酸、氨、尿素、吲哚等，这些产物对细胞的生存有害，必须及时清除。在小量培养时，当培养基中酚红指示剂显示黄色，表示已有相当量乳酸产生，要及时更换新鲜的培养基。在大量培养时，则需随时测定葡萄糖和乳酸等含量，并调节灌流速度，使代谢产物保持在无害水平下。

5.有良好的适于其生存的外界环境，包括温度、pH、渗透压和离子浓度等。

不同的细胞对pH的要求不同，一般来说适于细胞生长的pH在6.8～7.4，过高或过低均不利于细胞生长。如上所述，细胞在代谢过程中会产生大量乳酸，使培养的pH下降。为了保持培养液的pH，常在培养液内加入各种缓冲系统，如Na2HPO4/Na2HPO4、NaHCO3/H2CO3（CO2）、Tricineglycine，以及加缓冲剂Hepes液（常用浓度为10～50mol/L）.

6.及时分种，保持合适的细胞密度（见细胞传代）

⑧ 鸡胚细胞怎样制备

A、材 料
a、1 0 －1 3 龄 S P F鸡胚。
b、D ME M原粉购自美国 G I B C O公司，按说明书添加双蒸水、N a H C O ， ， 调 p H值至 7 ． 2， 正压滤过除菌， 4 ~ C 保存 。使用前添加 1 0 ％（灭活）胎牛牛血清、 1 ％广普抗生素。
c、Ha n k s 液 用前调pH值至 7.2—7.6,4℃保存。
d、0.125－0.25％胰蛋白酶消化液。
B、鸡胚成纤维细胞的制备 取 1 0 1 3龄鸡胚 2个 ， 用无菌方法将胚提出放入无菌平皿中，去喙、爪 、 翅和内脏 ， 剪成小块以 H a nk s 液洗 2～3次， 然后以每个鸡胚 1 0 mL的量加入胰蛋白酶消化液， 室温 30 mi n 左右。 消化完毕， 以 8 层灭菌纱布滤过， 将滤液离心去除胰蛋白酶消化液，再用 DMEM细胞培养液将细胞悬起计数分装于细胞培养瓶 中，置 3 7 ~ C 含5％CO2的培养箱中培养 2 4 h 。

⑨ 初一动物细胞模型制作方法是什么

1、液体部分用水笔在纸面进行绘制，因为液体部分完全不用真是模拟出来。

2、用剪刀按照你需要的形状用泡沫大致剪出，使用砂纸进行打磨，同时用彩笔染色。之后将细胞器放入白纸扣空的细胞器内进行配对。

3、所有的细胞器都完成之后并且配对完成可以沾到纸板之上进行保存。有条件可以用玻璃进行装裱。

动物细胞与植物细胞的区别：

植物细胞：细胞壁,细胞膜,细胞质,细胞核,液泡,叶绿体,线粒体.动物细胞：细胞膜,细胞质,细胞核,线粒体.植物细胞与动物细胞的主要区别：动物细胞没有细胞壁、叶绿体,通常也没液泡.

动物细胞有细胞核、细胞质和细胞膜，没有细胞壁，液泡不明显，含有溶酶体，动物细胞的结构有细胞膜、细胞质、细胞器、细胞核；它们的主要作用是控制细胞的进出、进行物质转换、生命活动的主要场所、控制细胞的生命活动。

细胞内部有细胞器：细胞核，双层膜，包含有由DNA和蛋白质构成的染色体。内质网分为粗面的与滑面的，粗面内质网表面附有核糖体，参与蛋白质的合成和加工；光面内质网，表面没有核糖体，参与脂类合成。

⑩ 生物细胞是由什么获取能量的

大部分植物是由光合作用获取能量
而动物细胞是从外界获取食物然后由呼吸作用产生能量