微生物该怎么读数

① 测微目镜如何读数

首先要知道目镜和物镜的放大倍数以及测微目镜的刻度长度。

比如测微目镜上一格的长度为0.5mm，在显微镜上观察是细胞的长度刚好是一格，那细胞的真实长度=0.5mm/（目镜放大倍数*物镜放大倍数）。

测微尺与测微目镜均是显微镜的配件，常用于对微小物体进行形态度量分析，如测定微生物的大小，测定动、植物细胞中微小结构的大小等。

(1)微生物该怎么读数扩展阅读：

结构

JCW一测微目镜由横尺及其手轮、目镜、主件三部份组成，横尺上的刻度为0~10mm，即测微目镜的有效测量范围为0~10mm，横尺上的手轮有0~99个刻度，旋转手轮一圈即为1毫米，手轮上的一个刻度为10微米。目镜有25X和15X两种，可选用任一种使用。主件内有一标有“十”字的圆形玻片，它通过手轮上的螺钉随手轮转动而左右移动。

使用

用测微目镜置换显微镜目镜，选定物镜，移动标本，用测微目镜调焦，使物象清晰后就可进行测定。

现以测定枯草杆菌的大小为例说明，把枯草杆菌标本置于载物台上，用测微目镜调焦，使菌体清晰，移动标本玻片和转动测微目镜，使测微目镜内的“+”字标线的纵标线与被测菌体边缘线重合，记下测微目镜横尺与手轮上的刻度数值，转动手轮，使纵标线与菌体对应边缘线重合，记下刻度数值，两刻度数值之差，再除以物镜放大倍数，就可得出结果。

注意事项

1、在测定时，要一手把着测微目镜的手轮，另一手把着测微目镜主件，以防测微目镜晃动，影响测定的精确度。

2、旋转手轮时动手要轻、慢，否则控制手轮转动的螺旋易损坏。

3、在旋转手轮时，最好是同一方向旋转，以减少间隙误差。

参考资料来源：网络-测微目镜

② 如何测量微生物细胞大小和质量

如何测量微生物细胞大小和质量
微生物细胞的大小是微生物重要的形态特征之一，由于菌体很小，只能在显微镜下来测量。用于测量微生物细胞大小的工具有目镜测微尺和镜台测微尺。目镜测微尺是一块圆形玻片，在玻片中央把5mm长度刻成50等分，或把10 mm长度刻成100等分。测量时，将其放在接目镜中的隔板上来测量经显微镜放大后的细胞物象。由于不同目镜、物镜组合的放大倍数不相同，目镜测微尺每格实际表示的长度也不一样，因此目镜测微尺测量微生物大小时须先用置于镜台上的镜台测微尺校正，以求出在一定放大倍数下，目镜测微尺每小方格所代表的相对长度。镜台测微尺是中央部分刻有精确等分线的载玻片，一般将lmm等分为100格，每格长l0μm，是专门用来校正目镜测微尺的。校正时，将镜台测微尺放在载物台上，目镜测微尺镜台测微尺由于镜台测微尺与细胞标本是处于同一位置，都要经过物镜和目镜的两次放大成象进入视野，即镜台测微尺随着显微镜总放大倍数的放大而放大，因此从镜台测微尺上得到的读数就是细胞的真实大小，所以用镜台测微尺的已知长度在一定放大倍数下校正目镜测微尺，即可求出目镜测微尺每格所代表的长度，然后移去镜台测微尺，换上待测标本片，用校正好的目镜测微尺在同样放大倍数下测量微生物大小。

③ 微生物怎么拼音

微生物怎么拼音

微生物拼音

[wēi shēng wù]

[释义]：生物的一大类，形体微小，结构简单，繁殖很快，如细菌、病毒等

④ 微生物检测手段及注意事项

1. 微生物计量法

1.1 体积测量法

又称测菌丝浓度法，通过测定一定体积培养液中所含菌丝的量来反映微生物的生长状况。方法是，取一定量的待测培养液(如10 mL)放在有刻度的离心管中，设定一定的离心时间(如5 min)和转速(如5000 rpm)，离心后，倒出上清夜，测出上清夜体积为v，则菌丝浓度为(10-v)/10。菌丝浓度测定法是大规模工业发酵生产上微生物生长的一个重要监测指标。这种方法比较粗放，简便，快速，但需要设定一致的处理条件，否则偏差很大，由于离心沉淀物中夹杂有一些固体营养物，结果会有一定偏差。

1.2称 干重法

可用离心或过滤法测定。一般干重为湿重的10~20%。在离心法中，将一定体积待测培养液倒入离心管中，设定一定的离心时间和转速，进行离心，并用清水离心洗涤1~5次，进行干燥。干燥可用烘箱在105 ℃或100 ℃下烘干，或采用红外线烘干，也可在80 ℃或40 ℃下真空干燥，干燥后称重。如用过滤法，丝状真菌可用滤纸过滤，细菌可用醋酸纤维膜等滤膜过滤，过滤后用少量水洗涤，在40 ℃下进行真空干燥。称干重发法较为烦琐，通常获取的微生物产品为菌体时，常采用这种方法，如活性干酵母(Activity Dry Yeast, ADY),一些以微生物菌体为活性物质的饲料和肥料。

1.3 比浊法

微生物的生长引起培养物混浊度的增高。通过紫外分光光度计测定一定波长下的吸光值，判断微生物的生长状况。对某一培养物内的菌体生长作定时跟踪时，可采用一种特制的有侧臂的三角烧瓶。将侧臂插入光电比色计的比色座孔中，即可随时测定其生长情况，而不必取菌液。该法主要用于发酵工业菌体生长监测。如使用UNICO公司的紫外-可见分光光度计，在波长600 nm处用比色管定时测定发酵液的吸光光度值OD600，以此监控E.coli的生长及诱导时间。

1.4 菌丝长度测量法

对于丝状真菌和一些放线菌，可以在培养基上测定一定时间内菌丝生长的长度，或是利用一只一端开口并带有刻度的细玻璃管，到入合适的培养基，卧放，在开口的一端接种微生物，一段时间后记录其菌丝生长长度，借此衡量丝状微生物的生长。

2. 微生物计数法

2.1 血球计数板法

血球计数板是一种有特别结构刻度和厚度的厚玻璃片，玻片上有四条沟和两条嵴，中央有一短横沟和两个平台，两嵴的表比两平台的表面高0.1 mm，每个平台上刻有不同规格的格网，中央0.1 mm2面积上刻有400个小方格。通过油镜观察，统计一定大格内微生物的数量，即可算出1 mL菌液中所含的菌体数。这种方法简便，直观，快捷，但只适宜于单细胞状态的微生物或丝状微生物所产生的孢子进行计数，并且所得结果是包括死细胞在内的总菌数。

2.2 染色计数法

为了弥补一些微生物在油镜下不易观察计数，而直接用血球计数板法又无法区分死细胞和活细胞的不足，人们发明了染色计数法。借助不同的染料对菌体进行适当的染色，可以更方便的在显微镜下进行活菌计数。如酵母活细胞计数可用美蓝染色液，染色后在显微镜下观察，活细胞为无色，而死细胞为蓝色。

2.3 比例计数法

将已知颗粒(如霉菌孢子或红细胞)浓度的液体与一待测细胞浓度的菌液按一定比例均匀混合，在显微镜视野中数出各自的数目，即可得未知菌液的细胞浓度。这种计数方法比较粗放。并且需要配制已知颗粒浓度的悬液做标准。

2.4 液体稀释法

对未知菌样做连续十倍系列稀释，根据估计数，从最适宜的三个连续的10倍稀释液中各取5 mL试样，接种1 mL到3组共15只装培养液的试管中，经培养后记录每个稀释度出现生长的试管数，然后查最大或然数表MPN(Most Probable Number)得出菌样的含菌数，根据样品稀释倍数计算出活菌含量。该法常用于食品中微生物的检测，例如饮用水和牛奶的微生物限量检查。

2.5 平板菌落计数法

这是一种最常用的活菌计数法。将待测菌液进行梯度稀释，取一定体积的稀释菌液与合适的固体培养基在凝固前均匀混合，或将菌液涂布于已凝固的固体培养基平板上。保温培养后，用平板上出现的菌落数乘以菌液稀释度，即可算出原菌液的含菌数。一般以直径9 cm的平板上出现50~500个菌落为宜。但方法比较麻烦，操作者需有熟练的技术。平板菌落计数法不仅可以得出菌液中活菌的含菌数，而且同时将菌液中的'细菌进行了一次分离培养，获得了单克隆。

2.6 试剂纸

在平板计数法的基础上，发展了小型商品化产品以供快速计数用。形式有小型厚滤纸片，琼脂片等。在滤纸和琼脂片中吸有合适的培养基，其中加入活性指示剂2, 3, 5-氯化三苯基四氮唑(TTC，无色)待蘸取测试菌液后置密封包装袋中培养。短期培养后在滤纸上出现一定密度的玫瑰色微小菌落与标准纸色板上图谱比较即可估算出样品的含菌量。试剂纸法计数快捷准确，相比而言避免了平板计数法的人为操作误差。

2.7 膜过滤法

用特殊的滤膜过滤一定体积的含菌样品，经丫叮橙染色，在紫外显微镜下观察细胞的荧光，活细胞会发橙色荧光，而死细胞则发绿色荧光。

3. 间接测定法

微生物的生长伴随着一系列生理指标发生变化，例如酸碱度，发酵液中的含氮量，含糖量，产气量等，与生长量相平行的生理指标很多，它们可作为生长测定的相对值。因此可利用生理指标等间接参数来测定生物量。

3.1 测定含氮量

大多数细菌的含氮量为干重的12.5%，酵母为7.5%，霉菌为6.0%。根据含氮量×6.25，即可测定粗蛋白的含量。含氮量的测定方法有很多，如用硫酸，过氯酸，碘酸，磷酸等消化法和Dumas测N2气法。Dumas测N2气法是将样品与CuO混合，在CO2气流中加热后产生氮气，收集在呼吸计中，用KOH吸去CO2后即可测出N2的量。

3.2 测定含碳量

将少量(干重0.2~2.0 mg)生物材料混入1 mL水或无机缓冲液中，用2 mL 2%的K2Cr2O7溶液在100 ℃下加热30分钟后冷却。加水稀释至5 mL，在580 nm的波长下读取吸光光度值，即可推算出生长量。需用试剂做空白对照，用标准样品做标准曲线。

3.3还原糖测定法

还原糖通常是指单糖或寡糖，可以被微生物直接利用，通过还原糖的测定可间接反映微生物的生长状况，常用于大规模工业发酵生产上微生物生长的常规监测。方法是，离心发酵液，取上清液，加入斐林试剂，沸水浴煮沸3分钟，取出加少许盐酸酸化，加入Na2S2O3临近终点时加入淀粉溶液，继续加Na2S2O3至终点，查表读出还原糖的含量。

3.4 氨基氮的测定

离心发酵液，取上清液，加入甲基红和盐酸作指示剂，加入0.02 mol/L的NaOH调色至颜色刚刚褪去，加入底物18%的中性甲醛，反应数刻，加入0.02 mol/L的使之变色，根据NaOH的用量折算出氨基氮的含量。根据培养液中氨基氮的含量，可间接反映微生物的生长状况。

3.5 其他生理物质的测定

P，DNA，RNA，ATP，NAM(乙酰胞壁酸)等含量以及产酸，产气，产CO2(用标记葡萄糖做基质)，耗氧，黏度，产热等指标，都可用于生长量的测定。也可以根据反应前后的基质浓度变化，最终产气量，微生物活性三方面的测定反映微生物的生长。如在BMP-2的发酵生产上，随时监测溶氧量的变化和酸碱度的变化，判断细菌的长势。

4. 商业化快速微生物检测法

微生物的检测，其发展方向是快速，准确，简便，自动化，当前很多生物制品公司利用传统微生物检测原理，结合不同的检测方法，设计了形式各异的微生物检测仪器设备，正逐步广泛应用于医学微生物检测和科学研究领域。例如：

4.1 试剂盒，培养基等手段

抗干扰培养基和微生物数量快速检测技术结合解决了传统微生物检测手段不能解决的难题，为建立一套完整的抗干扰微生物检测系统奠定了坚实的基础。如：抗干扰微生物培养基，新型生化鉴定管，微生物计数卡，环境质量检测试剂盒等，可方便的用于多项检测。

4.2 借助新型先进仪器

BACTOMETER全自动各类总菌数及快速细菌检测系统可以数小时内获得监测结果，样本颜色及光学特征都不影响读数，对酵母和霉菌检测同样高度敏感原理是利用电阻抗法(Impedance Technology)将待测样本与培养基置于反应试剂盒内，底部有一对不锈钢电极，测定因微生物生长而产生阻抗改变。如微生物生长时可将培养基中的大分子营养物经代谢转变为活跃小分子，电阻抗法可测试这种微弱变化，从而比传统平板法更快速监测微生物的存在及数量。测定项目包括总生菌数，酵母菌，大肠杆菌群，霉菌，乳酸菌，嗜热菌，革兰氏阴性菌，金黄色葡萄球菌等。

微生物OD值是反映菌体生长状态的一个指标，OD是Optical Density(光密度)的缩写，表示被检测物吸收掉的光密度。通常400～700 nm 都是微生物测定的范围，需要紫外分光光度计测最大吸收波长。用得最多的是：505 nm测菌丝菌体、560 nm测酵母、600 nm测细菌。用测OD方法画微生物生长曲线时，同一株菌的起始培养浓度可以准备多管(根据检测点的需要，如需检测10个点，就准备10管)，然后每个点取一管出来测OD值就行了。

一般测菌体密度的OD的波长范围是580 nm-660 nm，如枯草芽孢杆菌用600 nm，已经属于可见光区(200 nm～400 nm为紫外光区，400 nm～800 nm为可见光区)。空白如用水做，需要离心洗涤菌体;空白如用不接种的培养基做就不需要洗涤，但是不接种的培养基要和接种的同时培养以求条件一致，最后注意一般OD值在控制在0.1~0.4最好，在这个区内的值就可靠，如果OD大于1.0，一般要稀释后再测，因为OD太大，分光光度计的灵敏度就会显着降低。

一般都测吸光值，而且最好是整个实验过程中，保持发酵液或菌体的稀释倍数一致，吸光值与稀释倍数不一定成正比，可保证整个实验点有可比性。且取值的时候要连续读数，重复3次的数最好。

另，用分光光度计测微生物的OD值为什么要把波长设为600 nm

这个波长其实只是针对浊度，而分光光度计在600 nm处对浊度的反应比较灵敏。测吸收峰的实际意义并不大，比如LB摇瓶培养过夜的大肠杆菌，其实在400多纳米处的吸收最大，但那很可能是培养液的吸收峰。

⑤ 做微生物三个稀释度都没长怎么读数

写＜最低稀释度的值，比如，最低稀释度为10的6次方，就标为该微生物活菌量为＜10的6次方CFU/g（mL）。

⑥ 细菌cfu的单位怎样读

cfu代表“colony forming units”。cfu/m3就是读作细菌群落总数每立方米。

菌落形成单位(CFU，Colony-Forming Units)指单位体积中的细菌、霉菌、酵母等微生物的群落总数。

菌落的个数，传统上叫“个”。但是，一个菌落并不一定是一个细菌所生成，也可能是由一簇细菌（一个细菌团）所生成，因此叫“个”不太准确，准确的叫法是“菌落形成单位”。就像“公斤”和“千克”，只是叫法不同，数量上没有变化。

cfu/mL指的是每毫升样品中含有的细菌菌落总数；cfu/g指的是每克样品中含有的细菌菌落总数；cfu/cm2指的是每平方厘米样品中含有的细菌菌落总数。

(6)微生物该怎么读数扩展阅读：

平板计数法

CFU法 (colony forming units)即平板计数法，是食品和药品检验中常用的方法。该方法测定的是样品中所含的现时可培养的活的微生物数量，所以称之为活菌计数法。对于那些不可培养的微生物，将不可能统计在内。该方法可以用于样品中诸如细菌总量、真菌总量、放线菌总量等的定量测定。

活菌计数法中，每个菌落由一个单细胞繁殖而成，为肉眼可见的细胞群体，一般来说在每个平板上形成30~300个菌落属于有效范围，该法所测量数值有可能偏低，因为有可能两个或以上的单细胞在一起形成一个菌落。

参考资料：网络-CFU （微生物学名词）

⑦ 微生物读数方法有哪些参考什么国标

具体如下。
GB 4789.1_2016 食品安全国家标准食品微生物学检验 总则；GB 4789.2_2016 食品安全国家标准食品微生物学检验 菌落总数测定；
GB 4789.3_2016 食品安全国家标准食品微生物学检验 大肠菌群计数；
GB 4789.4_2016 食品安全国家标准食品微生物学检验 沙门氏菌检验；
GB 4789.5_2012 食品安全国家标准食品微生物学检验 志贺氏菌检验；
GB 4789.6_2016 食品卫生微生物学检验 致泻大肠埃希氏菌检验；
GB 4789.7_2013 食品安全国家标准食品微生物学检验验 副溶血性弧菌检验；
GB 4789.8_2016 食品安全国家标准食品微生物学检验 小肠结肠炎耶尔森氏菌检验；
GB 4789.9_2014 食品安全国家标准食品微生物学检验 空肠弯曲菌检验；
GB 4789.10_2016 食品安全国家标准食品微生物学检验 金黄色葡萄球菌检验；
GB 4789.11_2014 食品安全国家标准食品微生物学检验 溶血性链球菌检验；
GB 4789.12_2016 食品安全国家标准食品微生物学检验 肉毒梭菌及肉毒毒素检验；
GB 4789.13_2012 食品安全国家标准食品微生物学检验 产气荚膜梭菌检验；
GB 4789.14_2014 食品安全国家标准食品微生物学检验 蜡样芽胞杆菌检验；GB 4789.15_2016 食品安全国家标准食品微生物学检验 霉菌和酵母计数；
GB 4789.16_2016 食品安全国家标准食品微生物学检验 常见产毒霉菌的鉴定；
GB/T 4789.17_2003 食品卫生微生物学检验 肉与肉制品检验；
GB 4789.18_2010 食品安全国家标准食品微生物学检验 乳与乳制品检验；
GB/T 4789.19_2003 食品卫生微生物学检验 蛋与蛋制品检验；
GB/T 4789.20_2003 食品卫生微生物学检验 水产食品检验；
GB/T 4789.21_2003 食品卫生微生物学检验 冷冻饮品、饮料检验；
GB/T 4789.22_2003 食品卫生微生物学检验 调味品检验；
GB/T 4789.23_2003 食品卫生微生物学检验 冷食菜、豆制品检验；
GB/T 4789.24_2003 食品卫生微生物学检验 糖果、糕点、蜜饯检验；
GB/T 4789.25_2003 食品卫生微生物学检验 酒类检验；
GB 4789.26_2013 食品卫生微生物学检验 罐头食品商业无菌的检验；
GB/T 4789.27_2008 食品卫生微生物学检验 鲜乳中抗生素残留检验；
GB 4789.28_2013 食品安全国家标准食品微生物学检验 培养基和试剂的质量要求；
GB/T 4789.29_2003 食品卫生微生物学检验椰毒假单胞菌酵米面亚种检验；
GB 4789.30_2016 食品安全国家标准食品微生物学检验 单核细胞增生李斯特氏菌检验；
GB 4789.31_2013 食品安全国家标准食品微生物学检验 沙门氏菌、志贺氏菌和致泻大肠埃希氏菌的。

⑧ 22℃细菌从什么时候开始读数

22℃细菌从10分钟后开始读数。大部分细菌都是不耐高温的，在高温环境下10分钟就可以杀灭杀菌。有少数细菌低于高温以及低温都具有一定的耐受性，比如细菌芽孢即便在120℃的高温环境下，也需要15～20分钟才可以杀灭，而煮沸水，一般至少需要40分钟才可以杀灭细菌。大部分细菌都是不可以承受高温的。细菌是一种微生物，是由蛋白质成分构成的，而高温会导致蛋白质出现不可以逆转的变性，继而丧失生命活动。

⑨ 微生物涂抹怎么计数啊

单位是cfu/ml ，其中cfu是活菌数目，你所采用的方法是活菌计数法，计数结果为每个平板的菌落数比上涂抹的量（即多少毫升或微升）。一般情况下活菌技术需要2个以上的重复以提高准确度，具体的操作可以参考微生物实验手册中的微生物计数方法。另外一种计数方法是直接计数，即将涂抹液滴入血球计数板上，直接计数，但这种方法计数的结果误差较大，且不能代表活菌的数目。

⑩ 国标法微生物计数需要每天读数吗

如果只有一个稀释度平板上的菌落数在适宜计数范围内.2-2010食品安全国家标准 食品微生物学检验 菌落总数测定》中对于菌落总数计算的规定试验时应该不止做了10倍稀释这一组，那么应计算两个平板菌落数的平均值，一般会选择连续几个可能的稀释梯度进行试验，作为每 g（ mL）样品中菌落总数结果，再将平均值乘以相应稀释倍数。如果所有稀释度的平板菌落数均小于 30 CFU，则应按稀释度最低的平均菌落数乘以稀释倍数计算。根据现行国标《GB 4789