Ⅰ 致病菌感染的微生物学检查基本程序是怎么样的
病原微生物种类繁多,变异迅速,快速鉴定病原微生物的检验技术也在不断发展前进着。目前,应用比较广泛的病原微生物检测方法主要有直接涂片镜检、分离培养、生化反应、血清学反应、核酸分子杂交、基因芯片、多聚酶链反应等,该文对这些检测技术进展做一综述。 对人和动物具有致病性的微生物称为病原微生物,又称病原体,有病毒、细菌、立克次体、支原体、衣原体、螺旋体、真菌、放线菌、朊粒等。这些病原微生物可引起感染、过敏、肿瘤、痴呆等疾病,也是危害食品安全的主要因素之一。近年来出现的SARS、高致病性禽流感、西尼罗病毒感染等疾病的传染性极强,往往造成世界性大流行,因此对病原体的检测必须做到快速、准确。常规病原学检测方法操作繁琐,检测周期长,而且对操作人员技术水平要求比较高。随着医学微生物学研究技术的不断发展,病原学诊断已不再局限于病原体水平,深入到分子水平、基因水平的检测手段不断出现并被应用于临床和实验室 J。核酸分子杂交技术、PCR技术、基因芯片技术等检测方法,自动化程度高,快速省时、无污染、结果精确,可以准确灵敏地鉴定病原微生物。1 传统的病原微生物的检测方法传统的病原微生物学实验室检查以染色、培养、生化鉴定等为主,将标本直接涂片染色镜检和接种在培养基上进行分离培养是对细菌或真菌感染性疾病进行病原学诊断的常用方法。1.1 直接涂片镜检病原微生物体形体积微小,大多无色半透明状,将其染色后可借助显微镜观察其大小、形态、排列等。直接涂片染色镜检简便快速,对那些具有特殊形态的病原微生物感染仍然适用,例如淋球菌感染、结核分枝杆菌、螺旋体感染等的早期初步诊断。直接涂片镜检不需要特殊的仪器和设备,在基层实验室里仍然是十分重要的病原微生物检测手段。1.2 分离培养与生化反应 分离培养主要用于临床标本(如血液、痰、粪便等)或培养物中有多种细菌时对某一种细菌的分离。细菌的生长繁殖需要一定时间,检测周期较长,不能同时处理批量样本。为解决这一问题,各种自动化培养和鉴定系统不断产生,传统鉴定方法也在逐步改进,大大加快了检验速度。例如Microscan WalLCAway全自动微生物分析仪,可同时做细菌鉴定和药敏试验,检验500多个菌种。苛养菌如肺炎链球菌、淋病奈瑟菌、流感嗜血杆菌等对营养要求比较高,常规培养阳性率低。雍刚 等将不要同比例的葡萄糖、玉米淀粉、生长因子、酵母粉、氨基酸等特殊增菌剂加入到巧克力培养基中制成了新型淋病奈瑟菌培养基,大大提高了淋病奈瑟菌的分离培养率。苏盛通等在营养琼脂中加人了中药红枣、赤小豆培养甲型链球菌、乙型链球菌、肺炎链球菌等细菌,生长指数明显高于血平板。1.3 组织细胞培养 活组织细胞培养适于专营活组织细胞内生存的病原体,包括病毒、立克次体、衣原体等。不同病原体敏感的组织细胞是不一样的,将活细胞从病原体敏感的动物组织中取出在体外进行原代培养或用病原体敏感细胞系进行传代培养,再将病原体接种于相应的组织细胞中后,病原体可在其中繁殖增长,引起特异性的细胞病变效应。也可以将病原体直接接种于敏感动物体内,引起相应组织器官出现特异的病理学改变。往往可以根据这些特异的病变对病原体进行鉴定。2 血清学与免疫学检测血清学检测是通过已知的抗体或抗原来检测病原体的抗原或抗体从而对病原体进行快速鉴定的技术,简化了鉴定步骤,常用的方法包括血清凝集技术、乳胶凝集实验、荧光抗体检测技术、协同凝集试验、酶联免疫测试技术等。酶联免疫技术的应用大大提高了血清学检测的敏感性和特异性,不仅可检测样本中病原体抗原,也可检测机体的抗体成分。幽门螺奸菌在我国人群感染率高达50% ~80% ,应用酶联免疫吸附法(ELISA)检测唾液中抗HP抗体来诊断HP感染,其结果满意。乙型肝炎病毒(HBV)在我国人群中感染率极高,ELISA应用于乙型肝炎病人早期血清学诊断的效果最为明显。临床上致病菌往往和非致病菌混合在一起,如何从这些细菌中分离出目标菌是关键。免疫磁珠分离技术(IMBS)是近年来发展起来的在微生物检测领域中一种新技术。其基本原理是将特定病原体的单抗或多抗或二抗偶联到磁珠微球上,通过抗原抗体反应形成磁珠一目标病原体复合物或磁珠一一抗一目标病原体复合物,在外部磁场磁力的作用下,将目标病原体分离出来。目前已经开发出了针对各种病原体的免疫磁珠,如大肠埃希菌、李斯特菌、白色念珠菌、军团菌等,广泛应用到各级科研和实验室 。经IMBS分离出的白色念珠菌可直接在显微镜下检测,检测时间缩短至4 h。IM—Bs还可以和其它检测技术联合来检测病原菌,免疫磁珠分离得到的目标菌可继续用于分离培养使大肠埃希菌0157最低检测限由200 cfu·g 提高到2 cfu·g~;IMBS结合聚合酶链反应(IMBS—PCR)可对培养条件比较特殊的细菌如苛养菌、厌氧菌进行快速检测,肉类中的产毒素型产气荚膜梭菌经IMBS.PC
Ⅱ 临床微生物送检率包括哪些项目。。。。
送检率%=送标本的病例数/治疗使用抗菌药物的病例数*100%
按照感染性疾病病原诊断与管理要求,以下各项检查可以作为计算微生物检查送检率的项目。
1.无菌体液细菌涂片染色细菌检查 。
2.合格标本细菌培养 。
3.肺炎链球菌尿抗原 。
4.军团菌抗原/抗体检查 。
5.真菌涂片及培养
6.血清真菌G实验或GM实验 。
7.降钙素原检测(PCT)。
Ⅲ 临床医学微生物学有哪些重要实验
1、细菌正常形态与各种特殊结构的观察;
2、细菌动力学检查法;
3、细菌染色检查法;
4、细菌的培养法;
5、细菌的生化实验——代谢产物的检查;
6、抗链球菌溶血素“o”测定(ASO试验);
7、肥达氏反应;
8、肠道感染的细菌学检查;
9、生物因素对细菌的影响;
10、细菌的耐药性变异机制——R因子传递试验;
11、真菌学;
12、病毒的形态学;
13、病毒的培养法;
14、病毒的血清学实验。
这是我们学校的,你们的我就不清楚了,参考下吧!
Ⅳ 微生物检验是查什么的
病情分析:
微生物检验主要查人体寄生的致病微生物,如呼吸道,生殖道等处的微生物检验。
指导意见:
非正常微生物菌群的存在,是会致病的,引起相应部位的病症表现。
Ⅳ 微生物实验室主要检测的项目有哪些
主要应用于微生物学、生物医学、生物化学、动物实验、基因重组以及生物制品等研究使用。
一级生物安全防护实验室:实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对健康成年人已知无致病作用的微生物,如用于教学的普通微生物实验室等。
二级生物安全防护实验室:实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于对人或环境具有中等潜在危害的微生物。
三级生物安全防护实验室:实验室结构和设施、安全操作规程、安全设备适用于主要通过呼吸途径使人传染上严重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素,通常已有预防传染的疫苗。艾滋病病毒的研究(血清学实验除外)应在三级生物安全防护实验室中进行。
(5)医院微生物实验检查些什么扩展阅读
实验室的设立单位应当指定专门的机构或者人员承担实验室感染控制工作,定期检查实验室的生物安全防护、病原微生物菌(毒)种和样本保存与使用、安全操作、实验室排放的废水和废气以及其他废物处置等规章制度的实施情况。
负责实验室感染控制工作的机构或者人员应当具有与该实验室中的病原微生物有关的传染病防治知识,并定期调查、了解实验室工作人员的健康状况。
Ⅵ 实验室通常检查哪些内容
实验室检查主要包括生物学检查和理化检查。生物学检查又包括微生物学和寄生虫学,它们分别确定传染病的病原和寄生虫病的病原;理化检查是确定由中毒或者代谢原因导致的疾病理化因素。以下简单介绍有关的主要实验室检查内容。
(1)微生物学检查。
病料涂片镜检:对于一些具有特征性形态的病原体,比如曲霉菌、巴氏杆菌、葡萄球菌等,通过取有显着病变的特定组织器官作的涂片和染色镜检作出初步诊断。
用病料直接制作触片或涂片镜检的方法较简单,但因为细菌太少,常难以观察到。有条件时应将病料接种到培养基上进行培养,然后用培养物涂片镜检。这样不仅能观察到大量细菌,还可根据培养后细菌菌落大小、形态、颜色来鉴别细菌。
分离培养和鉴定:用人工培养的方法,如用鸡胚、组织培养及人工培养基培养等,将病原体从病料中分离出来,并进一步对所分离的病原体进行形态学、培养特性、生化特性检查和动物接种以及血清学检查等作出准确的鉴定。
动物接种实验:将分离或可疑的病料接种于易感的实验动物,如雏鸡,小白鼠,豚鼠等,根据接种动物所出现的临床症状和病理变化等特征来进行诊断。
血清学诊断:血清学诊断是利用抗原和抗体之间的特异性反应来进行疾病确诊。该法具有高度的特异性和敏感性。可用已知抗原或抗体测未知的抗体或抗原,是传染病的重要诊断方法。常用的血清学方法有凝集反应、琼脂扩散反应、中和试验和免疫荧光抗体技术等。
(2)寄生虫学检查。鸡体内的寄生虫,如球虫、滴虫、蛔虫和绦虫等大都寄生于消化道内,它们的虫卵、卵囊、虫体和幼虫一般都是通过粪便排出体外,所以采其粪便进行直接涂片,或离心沉淀浮卵、饱和盐水浮卵和水洗沉淀等方法在显微镜下观察。
(3)病理组织学检查。一些疾病的组织器官有特征性典型病变,比如马立克氏病、白血病、包涵体肝炎等均可选取这些病变组织器官,通过常规病理组织学检查进行确诊。
(4)理化检查。主要是毒理学检查,鸡的中毒性疾病可根据临床症状、剖检变化并结合病因的调查作出初步诊断,但确诊需要根据家禽中毒的类型,如农药、饲料和药物等,选用不同的检查方法进行实验室检验。
Ⅶ 微生物室常用的病原真菌检查方法有哪些
您好!
1、真菌镜检
是最简单也是很有价值的实验室诊断方法。其优点在于简便、快速,无菌部位的阳性结果可直接确定真菌感染。但是由于阳性率较低,阴性结果亦不能排除诊断。直 接镜检对于浅表和皮下真菌感染最有帮助。在皮肤刮屑、毛发或甲标本中发现皮肤癣菌、念珠菌和马拉色菌的成分可提供对相应真菌病的可靠诊断。如在无菌体液的 直接镜检中发现真菌成分常可确立深部真菌病的诊断,例如在脑脊液中检测到带荚膜的新生隐球菌酵母细胞,或外周血涂片中检测到荚膜组织胞浆菌细胞。但一般在 有菌部位则只有发现大量真菌菌丝方才有意义,通过直接镜检一般可以区分念珠菌、隐球菌、暗色真菌、毛霉(接合菌)等菌的感染,进一步明确鉴定菌种需要通过 培养鉴定来完成。
2、真菌培养
真菌培养是实验室检查中的重要环节,培养出致病真菌是进一步鉴定菌种的前提条件。真菌培养第一步是从临床标本中培养真菌的初代培养,初代培养后进一步进行 分离纯化培养和鉴定培养。不同致病真菌每一步所采用的培养基,培养时间和培养温度存在一定的差异。常规的真菌培养需要在28-30°C温度下培养3-4 周,一般初代培养选用沙氏培养基(SDA)或者马铃薯琼脂培养基(PDA),采用试管培养,一般同时培养两管,其中一管可添加抗生素(氯霉素或庆大霉素均 可)。在培养1周内,应该每天观察有无真菌生长。一般培养4周后,如果无真菌生长可报阴性。发现培养出真菌,直接挑取少量菌体或者小培养后,用乳酸酚棉兰 制成涂片显微镜下观察,结合菌落大体形态,典型菌种可直接报告种属。不典型菌种根据基本表现,采用适当的标准鉴定培养基,标准培养条件培养,必要时要结合 生理学和分子生物学方法进行鉴定。
3、真菌鉴定
对常见致病真菌要掌握的鉴定原则是首先区分酵母菌和霉菌。
如果初代培养基上培养出酵母样菌落,在鉴定前应进行分离纯化。在去除细菌和其他真菌污染,区分混合感染后,对纯菌落进行鉴定。酵母菌鉴定主要根据形态学特 征和生理生化特点,按照一定的流程进行。首先根据菌落颜色进行分类。临床最为常见的是白色或奶白色菌落,这类菌进一步做芽管试验,若芽管试验是阳性则为白 念珠菌,若阴性则通过Vitek YBC或API20C及玉米吐温琼脂上培养的形态特征来鉴定。另外,还可以应用念珠菌显色琼脂、尿素酶试验等试验来辅助鉴定。
检验地带网
霉菌的鉴定非常复杂,有许多标准包括形态学特征、温度耐受性,放线菌酮抗性、双相性、营养需求、蛋白分解活动以及水解尿素能力等。现代分类学鉴定方法主要 依据分生孢子的个体发生过程结合其他特征来进行鉴定。初代培养后根据形态学特征一般可鉴定到属的水平,再依据不同真菌的鉴定要求,采用标准培养基和培养条 件进一步完成菌种鉴定。例如:曲霉属鉴定时需要采用标准培养基,即察氏培养基和麦芽琼脂,25℃培养7天后与曲霉形态鉴定检索表对应得到正确的结果。
Ⅷ 微生物检验知识
微生物检验知识大全
你知道什么是微生物检验吗?你对微生物检验知识了解吗?下面是我为大家带来的关于微生物检验的知识,欢迎阅读。
一.涂片镜检结果与培养结果不吻合?
1、涂片结果是报告所有检见病原菌,而培养的目的是检出致病菌,因此会产生不一致的情况。
2、一些苛养菌需要在特殊环境或培养基上生长,因此常规培养不一定能得到结果。
我们先来谈谈这第一个问题:涂片镜检结果与培养结果不吻合?。正如谢轶老师说的那样:首先我们的搞懂什么是涂片?什么是培养?涂片的原则在排除一些检查前或检验中的因素后其实就是:所见即所得!而培养呢?是根据检验的目的,检出可能的致病菌,因此会产生不一致的情况;也正如一些老师聊到的那样:一些苛养菌,厌氧菌等需要在特殊环境或培养基上生长,因此常规培养不一定能得到结果。
二.取的明显是脓液标本,为何培养报告为无菌生长?
1、涂片结果是报告所有检见病原菌,而培养的目的是检出致病菌,因此会产生不一致的情况;
2、一些苛养菌需要在特殊环境或培养基上生长,因此常规培养不一定能得到结果。
我们先来谈谈这第一个问题:涂片镜检结果与培养结果不吻合?正如谢轶老师说的那样:首先我们的搞懂什么是涂片?什么是培养?涂片的原则在排除一些检查前或检验中的因素后其实就是:所见即所得!而培养呢?是根据检验的目的,检出可能的致病菌,因此会产生不一致的情况;也正如一些老师聊到的那样:一些苛养菌,厌氧菌等需要在特殊环境或培养基上生长,因此常规培养不一定能得到结果。
标本采集和培养方式:
1、未破裂脓肿:消毒覆于脓肿表面的皮肤,用注射器将脓肿内容物吸出,注射器针头扎入无菌橡胶瓶盖(青霉素小瓶橡胶塞)。---厌氧培养or需氧培养
2、开放病灶和脓肿:不建议做厌氧培养;用无菌生理盐水或70%酒精擦拭除去表面分泌物,尽量去除表面菌群,用拭子采集病灶底部或边缘的标本,置于需氧培养基中。---需氧培养。
三.今天的培养结果与前一天的'不一样?
1、取材是否一致;
2、痰标本,选择优势菌做鉴定药敏,就可能导致两次结果不一致。
四.明显是稀便,培养结果为何正常?
1. 大便培养,通常只能鉴定志贺菌、沙门菌感染。
2. 很少医院常备致病性大肠杆菌鉴定血清。
3. 很少医院能够做艰难梭菌培养,但有一部分医院能做培养和毒素检测。
4. 很少医院能常备霍乱弧菌血清。
与国际微生物检验的差距-缺项
1. 艰难梭菌:医院感染常见病原菌,一些发达国家中排名第一
2. 肺炎链球菌尿抗原检测
3. 军团菌尿抗原检测
4. 非典型分枝杆菌
5. 呼吸道感染病毒
五.培养阳性的病原菌都需要用抗菌药物治疗吗?
1. 不是;
2. 培养阳性≠感染,可能为污染(血培养),可能为定植(痰培养);
3. 任何结果必须结合临床情况进行评价(重要);
4. 感染部位的清创、引流、换药比使用抗菌药更重要;
改善患者全身情况:器官功能支持、纠正酸碱平衡、电解质紊乱、低蛋白血症、高血糖等。
六.选择药敏报告敏感的药物,为什么临床疗效无效?
1. 体外药敏试验只能预测体内治疗效果,一般规律,耐药=治疗无效;敏感≠治疗有效;
2. 可能不是真正的致病菌(定植或污染);
3. 细菌本身因素(如诱导耐药,生物被膜);
4. 感染部位的药代动力学因素;
5. 药敏试验中有些药物单独使用无效,但可以与其他药物联合用药。
“严重的肠球菌感染,如心内膜炎,除非证明其对庆大霉素和链霉素高水平耐药外,可用氨苄西林、青霉素或万古霉素(对于敏感株)加一种氨基糖苷类进行联合治疗,起到协同杀菌作用。”
铜绿假单胞菌:对氨苄西林、阿莫西林、阿莫西林-克拉维酸、复方新诺明、1、2代头孢天然耐药。对三代头孢(噻肟、曲松)即使药敏试验敏感,在实际里程治疗中也需要超大剂量才会取得疗效。头孢中仅他啶和吡肟。
铜绿假单胞菌有对跟多药物的诱导耐药性,在体外试验可能没有表现出来,但一旦接触某种抗生素,其沉默的耐药基因可能被诱导激活,耐药性则表现出来,这种特性在β-内酰胺抗生素中尤为明显,可导致体外敏感,但实际治疗却无效。
;Ⅸ 微生物实验室是主要做什么临床检验
主要做无菌的菌种检测 比如水质,或者病毒累类