荚膜肿胀试验可以鉴别哪些微生物

① 检验科普小知识

1. 检验学小知识(质量检验的基本知识有哪些)
检验学小知识(质量检验的基本知识有哪些) 1.质量检验的基本知识有哪些
1。

掌握质量检验的基本概念。 2。

掌握质量检验的基本要点。 3。

了解质量检验的主要功能。 4。

掌握质量检验的步骤。 5。

熟悉产品验证及监视的概念。 二、产品质量检验的技术方法 1。

掌握理化检验、感官检验、生物检验、在线检测的基本概念。 2。

熟悉理化检验的内容。 3。

熟悉感官检验的内容。 4。

了解生物检验的内容。 5。

熟悉在线检测优点和局限性。 6。

了解在线检测的应用。 备考重点 1。

质量检测的意义 检测就是通过观察和判断，适当是结合测量、试验所进行的符合性评价。 （1）对产品而言，是指根据产品标准或检测规程对原材料、中间产品、成品进行观察适当时进行测量或试验，并把所有得到的特性值做比较，判定出各个物品或成批产品合格与不合格的技术性检查活动。

（2）质量检验就是对产品的一个或多个质量特性进行观察。 测量、试验，并将结果和规定的质量要求进行比较，以确定每项质量特性合格情况的技术性检查活动。

2。质量检测的基本要点 （1）一种产品为满足顾客要求或预期的使用要求和 *** 规律、法规的强制性规定，都要对其技术性能。

安全性能、互换性能及环境和人身安全、健康影响的程度等多方面的要求作出规定，这些规定组成产品相应的质量特性。 不同的产品会有不同的质量特性要求，同一产品的用途不同，其质量特性要求也会相应不同。

（2）对产品的质量特性要求一般都转化为具体的技术要求在产品技术标准（国家标准、行业标准、企业标准）和其他相关的产品设计图样、作业文件或检验规程中明确规定，成为质量检验的技术依据和检验后比较检验结果的基础。 经对照比较，确定检验的每项质量特性是否符合标准和文件规定的要求。

产品适用性是重要的质量特性。 （3）产品质量特性是在产品实现过程形成的，是由产品的原材料、构成产品的各个组成部分（如零部件）的质量决定的，并与产品实现过程的专业技术、人员水平、设备能力甚至环境条件密切相关。

因此，不仅要对过程的作业（操作）人员进行技能培训、合格上岗，对设备能力进行核定，对环境进行监控，明确规定作业、过程方法。必要时，对作业、过程参数进行监控。

而且还要对产品进行质量检验，判定产品的质量状态。 （4）质量检验是要对产品的一个或多个质量特性，通过物理的、化学的和其他科学技术手段和方法进行观察、测量、试验，取得证实产品质量的客观证据。

因此，需要有适用的检测手段（包括各种计量检测器具、仪器仪表、试验设备等），并且对其实施有效控制，保持检测所需的准确度和精密度及一致性。 （5）质量检验的结果，要依据产品技术标准和相关的产品图样、过程（工艺）文件或检验规程的规定进行对比，确定每项质量特性是否合格（符合），从而对单件（项）产晶或批产品质量进行判定。

（6）质量检验要为判断产品质量符合性和适用性及决定产品质量重大决策提供正确、可靠依据，这就要保证产品质量检验结果的正确和准确。 3。

质量检验的主要功能 （1）鉴别功能 根据技术标准、产品图样、作业（工艺）规程或订货合同、技术协议的规定，采用相应的检测、检查方法观察、试验、测量产品的质量特性，判断产品质量是否符合规定的要求求，这是质量检验的鉴别功能。 （2）“把关”功能 对鉴别发现的不合格品把住不交付预期使用的“关口”。

（3）预防功能 ①通过过程（工序）能力的测定和控制图的使用起预防作用； ②通过过程（工序）作业的首检和巡检起预防作用； ③广义预防作用。 （4）报告功能 为了使相关的管理部门及时掌握产品实现过程中的质量状况，评价和分析质量控制的有效性，把检验获取的数据和信息，经汇总、整理、分析后写成报告，为质量控制、质量改进、质量考核、质量监督以及管理层进行质量决策提供重要信息和依据。

4。质量检验的步骤 （1）检验的准备。

熟悉规定要求，选择检验方法，制订检验规范。在检验的准备阶段，必要时要对检验人员进行相关知识和技能的培训和考核，确认能否适应检验工作的需要。

（2）获取检测的样品。样品是检测的对象，质量特性是客观存在于样品之中的，排除其他因素的影响后，可以说样品就客观决定了检测结果。

获取样品的途径主要有两种：一种是送样，另一种是抽样。 （3）样品和试样的制备。

（4）测量或试验。按已确定的检验方法和方案，对产品质量特性进行定量或定性的观察、测量、试验，得到需要的量值和结果。

测量和试验前后，检验人员要确认检验仪器设备和被检物品试样状态正常， 保证测量和试验数据的正确、有效。 （5）记录和描述。

对测量的条件、测量得到的量值和观察得到的技术状态用规范化的表格和要求予 以记载或描述，作为客观的质量证据保存下来。 （6）比较和判定。

由专职人员将检验的结果与规定要求进行对照比较，确定每一项质量特性是否符 合规定要求，从而判定被检验的产品是否合格。 （7）确认和处置。

检验有关人员对检验的记录和判定的结果进行签字确认。对产品（单件或批）是 否可以“接收”、“放行”作出处置。

5。产品验证的概念 验证是指通过提供客观证据对规定要求已得到满足的认定。

它是一种管理性的检查活动。 6。

监视 监视是对某项事。
2.医学检验有哪些复习知识要点呢
1。

中性粒细胞的生物化学与代谢包括：趋化作用、调理作用、变形性和粘附性、杀菌作用、吞噬作用； 2。 黄疸的发生机制：红细胞破坏过多、肝细胞摄取胆红素能力下降、肝细胞处理胆红素能力下降、胆道梗阻； 3。

可用于荚膜肿胀试验分型的细菌为：肺炎链球菌； 4。 沙门菌属的Vi抗原属于表面抗原； 5。

软性下疳的病原菌是：杜克嗜血杆菌； 6。 ELISA间接法、间接法荧光免疫技术可用一种标记物检测多种被测物； 7。

E花环试验是通过检测SRBC受体而对T细胞进行计数的一种试验； 8。 在补体结合试验中能够检测病人血清中抗体； 9。

支气管哮喘属于I型变态反应； 10。 单向琼脂扩散法的检测敏感度：不高，检测进间长达48~72小时； 11。

实际碳酸氢盐（AB）大于标准碳酸氢盐（SB）提示为呼吸性酸中毒； 12。 血友病类出血性疾病：APTT延长、PT正常、，加正常血浆能纠正； 13。

FVII缺乏症：APTT正常、PT延长、，加正常血浆能纠正； 14。 类肝素物质增多：APTT延长、PT延长、TT延长、加甲苯胺蓝能纠正； 15。

嗜碱性点彩红细胞检查的染色方法是：碱性美蓝染液； 16。 能反映肝内或肝外胆汁淤积的试验是血清胆红素测定、血清总胆汁酸测定、血清ALP及其同工酶、血清GGT; 17。

能用于人工被动免疫的制品有：抗毒素、丙种球蛋白； 18。 先天性免疫包括：吞噬细胞的吞噬作用、皮肤和黏膜的屏障、体液中的抗微生物物质； 19。

中性粒细胞碱性磷酸酶积分值降低的疾病有：慢粒和PNH、MDS、恶性组织细胞病等； 20。 血象中出现幼稚粒细胞的疾病有：慢粒、急性白血病、再障、PNH和缺铁性贫血； 21。

嗜酸性粒细胞减低见于伤寒和烧伤病人； 22。 输血传播的疾病有：肝炎、艾滋病、巨细胞病毒、疟疾、梅毒； 23。

酸性尿中常见的结晶有：非晶形尿酸盐、尿酸结晶、草酸钙结晶、三联磷酸盐结晶、磷酸钙结晶； 24。 肝硬化不会引起血尿酸增高； 25。

普通实验室常规测定香草扁桃酸（VMA）使用的方法是：化学显色法； 26。 新生霉素敏感试验适用于腐生葡萄球菌的鉴定； 27。

鉴别脑膜炎奈瑟氏菌和淋病奈瑟菌有关的是麦芽糖发酵； 28。 精密度是指：对同一样品重复进行检测时所得结果的符合程度； 29。

免疫反应的特异性是指：检测物与其对应物之间选择性反应。
3.医学检验都要学什么啊
医学检验是对病人的血液、体液、分泌物或脱落细胞等标本，进行化验检查，以获得病原、病理变化及脏器功能状态等资料。其专业就是学习检验的方法、原理、结果分析等技术的专门学科。

医学检验分为临床检验与医学实验技术两方面。临床检验是临床医生确诊的必要手段之一，而医学实验技术主要侧重于实验操作方面，为研究所、实验室输送实验师（技师）。本专业还设有病理诊断技术方向，通过基础医学、临床医学、病理诊断的基本知识和基本技能的学习，具备病理诊断和病理切片技术等能力。

该专业培养具有医学基本理论、基本知识和较强的实践技能，能在各级医院、血站、教学单位从事医技、科研和管理工作的医学高级专门人才。毕业生可到各级医疗单位的病理科和医学院校的实验室工作。

主要课程：生物化学、医学统计学、分析化学、检验仪器学、生理学、病理学、寄生虫学及检验、微生物学及检验、免疫学及检验、血液学检验、临床生物化学及检验、诊断学、内科学、药理学、计算机基础与应用等。
4.怎样学好医学检验技术
医学检验技术专业应获得以下知识和能力：

1、医用化学、医用物理学和基础医学的基本理论知识和实验技能；

2、临床疾病诊断的基本知识；

3、临床医学检验的基本理论知识和实验操作技能；

4、数理统计和计算机应用的基本知识和技能；

5、各种常用医学检验分析仪器的构造和操作技能；

6、与健康相关检验的基本知识与技能；

7、具有临床医学检验科研工作的初步能力。

培养目标：

本专业培养具有基础医学、临床医学、医学检验等方面的基本理论知识和基本能力，能在各级医院、血站及防疫等部门从事医学检验及医学类实验室工作的医学高级专门人才。学生应掌握基础医学、临床医学、医学检验、实验诊断等方面的基本理论知识和实验操作能力，同时比较全面的掌握自然科学和人文社会科学知识。毕业后能够从事临床各科医学检验、医学检验教学与科研工作。

主要课程：

有机化学、无机化学、物理化学、生物化学、分子生物学、医学统计学、分析化学、检验仪器学、生理学、病理学、系统解剖学、局部解剖学、寄生虫学及检验、微生物学及检验、免疫学及检验、血液学检验、临床生物化学及检验、临床输血与检验、临床基础检验、医学英语、诊断学、内科学、外科学、妇产科学、儿科学、传染病、药理学、计算机基础与应用等。
5.请教：医学检验学专业（本科）都学些什么
1.公共课：英语、政治类；基础课：解剖、生理、病理、化学等；专业课：临床检验、生物化学及检验技术、免疫学及检验技术、血液学及检验技术、微生物学及检验技术、寄生虫学及检验技术、分子生物学及检验技术，实验室管理等。

2.解剖、生理、病理、以及各专业都必须有实验，并且实验要考核

3.到实习医院实习，各个检验专业都要实习到

4.就业压力比医生相对小一些

感受就是新的知识技术更新很快，不学习就落后。

② 链球菌属及其检验“微生物检验”

⒈分类

链球菌的分类方法尚未统一。常用下列两种方法。

⑴根据溶血现象：分为3类。

①甲型溶血性链球菌(α-hemolytic streptococcus)：菌落周围有1～2mm宽的草绿色溶血环，称甲型溶血或α溶血，该类菌又称草绿色链球菌，为条件致病菌。

②乙型溶血性链球菌(β-hemolytic streptococcus)：菌落周围有2～4mm宽的透明溶血环，称乙型溶血或β溶血，该类菌又称溶血性链球菌，致病性强，常引起人和动物多种疾病。

③丙型链球菌(γ-streptococcus)：菌落周围无溶血环，因而又称不溶血性链球菌，一般不致病。

⑵根据抗原结构：按链球菌细胞壁中多糖抗原不同，可分成A、B、C、D …等20个群。同群链球菌间，因表面蛋白质抗原不同又分若干型。如A群根据其M抗原不同，可分成约100个型;B群分4个型。对人致病的链球菌菌株，主要是 A群，多数呈现乙型溶血。

⒉细菌特性

⑴链球菌

① 形态染色 球形或椭圆形，直径0.5～1.0μm，链状排列，链的长短与细菌的种类和生长环境有关，在液体培养基中形成的链较长。无芽胞，无鞭毛。多数菌株在培养早期(2～4h)形成透明质酸的'荚膜。革兰染色阳性。

②分离培养 营养要求较高，培养基中需加入血液或血清、葡萄糖、氨基酸、维生素等物质。多数菌株兼性厌氧，少数为专性厌氧。在液体培养基中呈沉淀生长，在血平板上，37℃18～24h后可形成灰白色、圆形、凸起、光滑、直径为0.5mm～0.75mm的细小菌落，菌落周围出现不同类型的溶血环。 www.labdd.com

③生化反应 触酶阴性、一般不分解菊糖，不被胆汁溶解，这两特性可用来鉴别甲型溶血性链球菌和肺炎链球菌。

④抗原构造 主要有三种：

蛋白质抗原：或称表面抗原。具型特异性有M、T、R、S 4种，位于C抗原外层。与致病性有关的是M抗原。

多糖抗原：或称C抗原。为群特异性抗原，位于细胞壁。根据C抗原的不同，将链球菌分为20群。对人致病的90%属A群。

核蛋白抗原：或称P抗原。无特异性，为各种链球菌所共有，并与葡萄球菌有交叉。

⑤抵抗力 不强，60℃30min即被杀死。对常用消毒剂敏感。乙型链球菌对青霉素、红霉素、四环素及磺胺类敏感。

⑵ 肺炎链球菌

① 形态染色 革兰阳性球菌，菌体呈矛头状、成双排列，宽端相对，尖端向外，在脓液、痰液及肺组织病变中亦可呈短链状，无鞭毛，无芽胞，在机体内或含血清的培养基中可形成荚膜。

②分离培养 营养要求高，在血平板上形成灰白色、圆形、直径为0.5mm～1.0mm的扁平菌落，周围有草绿色溶血环。培养时间长时可产生自溶酶。

③生化反应 多数菌株分解菊糖，胆盐溶解试验阳性和optochin敏感试验阳性，籍此可与草绿色链球菌相区别。

④抗原结构

荚膜多糖抗原 可将肺炎链球菌分为85个血清型。肺炎链球菌14型与人类A血型抗原有交叉反应。

多糖抗原 为各型菌株所共有。可被血清中一种C反应蛋白(C reactive protein,CRP)所沉淀。正常人血清中只含微量CRP，急性炎症者含量增高，故常以测定CRP作为诊断的依据。 检验地带网

M蛋白：为型特异抗原，与A群链球菌M蛋白类似，但抗原性不同，与毒力无关。

⑤抵抗力 本菌抵抗力弱，对一般消毒剂敏感。有荚膜菌株抗干燥力较强，在干痰中可存活1～2月。对青霉素、红霉素、洁霉素敏感。

⑥ 变异性 有荚膜的肺炎链球菌经人工培养后可发生菌落由光滑型向粗糙型，即S-R变异，同时随着荚膜的消失，毒力亦随之减弱。将R型菌落的菌株接种动物或在血清肉汤中培养，则又可恢复S型。

⒊临床意义

⑴化脓性链球菌

A群链球菌也称化脓性链球菌(pyogenic streptococcus)，致病力强，占人类链球菌感染的90%，能产生多种外毒素和侵袭性酶，如链球菌溶素O和S、M蛋白、脂磷壁酸、链激酶、链道酶、透明质酸酶等，可引起急性咽炎、呼吸道感染、丹毒、脓疱病、软组织感染、心内膜炎、脑膜炎及变态反应性疾病如急性肾小球肾炎、风湿热等，产毒株还可引起猩红热。链球菌型别多，各型间无交叉免疫，故常反复感染。

⑵乳链球菌

B群链球菌学名无乳链球菌(S.agalactiae)是新生儿败血症和脑膜炎的常见菌，对成人主要引起肾盂肾炎、子宫内膜炎等。

⑶ 肺炎链球菌

肺炎链球菌(S.pneumoniae)，俗称肺炎球菌(pneumococcus)，是大叶性肺炎、支气管炎的病原菌，还可引起中耳炎、乳突炎、鼻窦炎、脑膜炎等。其荚膜在细菌的侵袭力上有重要作用，此外溶血素、神经氨酸酶是主要致病物质。感染后机体可产生牢固的型特异性免疫。但因菌型多，可再感染其他型。 检验地带网

⑷ 草绿色链球菌

草绿色链球菌亦称甲型溶血性链球菌。是人体口腔、消化道、女性生殖道的正常菌群，可引起亚急性细菌性心内膜炎。

⒋微生物学检验

⑴链球菌

检验程序

链球菌检验程序见图9-2。

⑵标本采集 根据不同疾病采集不同标本。

⑶检验方法

显微镜检查 标本涂片革兰染色，镜检见链状排列革兰阳性球菌可初报。

分离培养 血液标本先增菌培养，脓液、咽拭可接种血琼脂平板并涂片染色镜检，初代分离需5%C02，35℃24h观察菌落性状。

⑵肺炎链球菌

①检验程序

②标本采集 根据病变部位采集不同标本。 检验地带网

③检验方法

显微镜检查： 除血液外，痰、脓液等均可直接涂片染色镜检。如发现革兰阳性矛头状双球菌，周围有较宽的透明区，经荚膜染色确认后可初报“找到肺炎链球菌”。

分离培养：血液、脑脊液先增菌，可呈均匀混浊，有绿色荧光。痰液、脓液可直接接种血平板，5%～10%CO2培养后，取可疑菌落进一步作optochin敏感实验、胆盐溶菌试验与菊糖发酵试验，以区别于甲型链球菌。

动物试验：小鼠对肺炎链球菌敏感，12～36h死亡。

荚膜肿胀试验：如遇同型免疫血清，则肺炎链球菌荚膜出现肿胀，为阳性。

④鉴定与鉴别

①Lancefield群特异性抗原鉴定：B群为无乳链球菌，F群为米勒链球菌，A、C、G群抗原不是种特异性抗原，还需根据菌落大小和生化反应进一步鉴定。

②PYR试验：化脓性链球菌为阳性。

③杆菌肽(bacitracin)敏感试验：化脓性链球菌为阳性，有别于其他PYR阳性的β溶血性细菌(猪链球菌、海豚链球菌)和A群小菌落β溶血性链球菌(米勒链球菌)。此法可作为筛选试验。

④VP试验：可鉴别A、C、G群β溶血的大、小两种不同菌落。

⑤CAMP试验：无乳链球菌能产生CAMP因子，它可促进金黄色葡萄球菌溶血能力，使其产生显着的协同溶血作用。试验时先将金黄色葡萄球菌(ATCC25923)，沿直径划线接种，再沿该线垂直方向接种无乳链球菌，两线不得相接，间隔约3～4mm。35℃孵育过夜，两种划线交界处出现箭头状溶血，即为阳性反应。本法可作为无乳链球菌的初步鉴定试验。

③ 临床检验技士《微生物学检验》巩固训练题(2)

23.细菌酶测定的阳性组合不正确的是

A 血浆凝固酶----金黄色葡萄球菌 B 卵磷脂酶----产气荚膜梭菌

C 触酶----草绿色链球菌 D 氧化酶----铜绿假单胞菌

E 耐热DNA酶----中间型葡萄球菌

24.关于Optochin抑菌试验不正确的是

A 用于鉴定肺炎链球菌 B 与胆盐溶菌试验意义相同

C 是一种药物抑菌试验 D 抑菌环直径>14mm为敏感

E 用于指导临床用药

25.用于检测血浆凝固酶的细菌为

A 肺炎链球菌 B 表皮葡萄球菌

C 甲型溶血性链球菌 D 乙型溶血性链球菌

E 金黄色葡萄球菌

26.CAMP试验阳性结果的溶血特点为

A 箭头状 B 线状

C 月牙状 D 环状

E S状

27.链球菌—与葡萄球菌的属间鉴别，可作初步确定的是

A DNA酶试验 B 触酶试验

C 氧化酶试验 D 葡萄糖发酵试验

E 过氧化氢酶抑制试验

28.可以拉丝的菌落是

A 金黄色葡萄球菌 B 肺炎克雷伯菌

C 链球菌 D 军团菌

E 大肠杆菌

29. 属于直接凝集反应的是

A 抗“O”试验 B 肥达试验

C 病毒的血凝抑制试验 D 病毒血凝试验

E 锡克试验

30.测定病人血清中反应素常用的抗原是

A 钩体类属抗原 B 梅毒特异性抗原

C 半抗原 D 异嗜性抗原

E 表面抗原

31.肠杆菌科细菌与O特异型抗血清反应常不出现凝集是因为

A 细菌表面抗原的存在 B 细菌O抗原发生变异

C 细菌鞭毛抗原的存在 D 反应条件不当

E 其他原因

32.荚膜肿胀试验可用来鉴定

A 痢疾志贺菌 B 伤寒沙门菌

C 肺炎克雷伯菌 D 大肠埃希菌

E 变形杆菌

33.关于协同凝集试验不正确的是

A 原理类似于反向间接血凝 B 载体是金黄色葡萄球菌

C 用于检测未知抗原 D 出现明显的`凝集线

E 目前用于流脑等的早期诊断

34.肺炎球菌在体外多次传代后会失去荚膜，使其恢复的常用方法是

A 在血清肉汤中连续传代3次

B 在鸡蛋斜面培养基上连续传代3次

C 小白鼠腹腔接种

D 小白鼠脑内接种

E 营养培养基接种

35. 目前广泛用于麻风分枝杆菌研究的动物模型是

A 大白鼠 B 小白鼠

C 恒河猴 D 犰狳

E 豚鼠

36.细菌培养常用的血琼脂平板，其血液采自哪一动物

A 绵羊 B 家兔

C 豚鼠 D 小鼠

E 鸡

37. 检测肉毒毒素常用

A SPA快速诊断 B ELISA

C Northern blot D Southern blot

E 动物实验

38.病毒血凝试验所用红细胞，一般采自

A 人 B 鸡

C 豚鼠 D 家兔

E 绵羊

39. 通过动物试验测定白喉棒状杆菌毒力，描述不正确的是

A 常用动物为豚鼠 B 一般选用两只，一只试验.另一只对照

C 腹腔注射白喉抗毒素 D 皮内注射待检菌培养液

E 试验后动物不致死

40.关于破伤风梭菌毒力试验，错误的是

A 常用动物为小白鼠

B 接种方法为肌肉注射

C 毒力试验阳性者，出现无力、麻痹、甚至死亡

D 保护性试验作为毒力试验的对照

E 保护性试验阳性，证明注射液中破伤风毒素的存在

41.金黄色葡萄球菌与表皮葡萄球菌的共同特点是

A 噬菌体分型 B SPA

C 人群带菌率高 D 耐热核酸酶

E 溶血素

42.菊糖发酵试验可用来鉴别

A 伤寒沙门菌与副伤寒沙门菌 B 布鲁菌与霍乱弧菌

C 炭疽芽胞杆菌与枯草芽胞杆菌 D 百日咳鲍特菌与流感嗜血杆菌

E 肺炎链球菌与甲型溶血性链球菌

④ P.350细菌检验基本技术

微生物细胞含大量水分（一般在80%~90%以上） ，绝大多数必须染色，才能显微镜观察。

借助物理因素和化学因素的作用进行

细菌的 等电点较低，pH在2~5之间 ，故在中性、碱性、弱酸性溶液中，<u>菌体蛋白质</u>电离后带 负电荷 ；而碱性染料电离时<u>染料离子</u>带 正电 。
所以，细菌学上常用 碱性染料 染色。
染色操作程序：<u>制片→固定→媒染→染色→脱色→复染→水洗→干燥→镜检</u>

主要依据：

油浸物镜、观察完毕、<u>先用擦镜纸</u>擦去镜头上的油、在用擦镜纸蘸少许 乙醚乙醇混合液（乙醚2份、无水乙醇3份）or二甲苯 ，擦去残留油迹，最后再用擦镜纸擦拭2~3下（朝一个方向）
普通光学显微镜<u>不能观察细胞和细菌的亚结构。</u>

设计原理： 丁达尔现象
光源的中央光束被阻挡、散射的光线投入物镜、整个视野是黑暗的。
暗视野中观察到的是 被检物体的衍射光图像 、并非物体本身、所以只能看到物体的 存在和运动 ，（ 不能 辨清物体的 细微结构 ）。用于→未染色标本的<u>活的</u>细菌、真菌，并可观察活细胞内的 线粒体及细菌鞭毛的运动 。观察 螺旋体 时多用暗视野显微镜。
暗视野聚光器→显微镜的聚光器支架上、显微镜灯照明， 聚光器和标本片之间要加一滴<u>香柏油</u> 。目的：避免聚光镜全反射。

将光线通过透明标本细节产生的 光程差（相位差）转化为光强差 的特种显微镜。
适用于对<u>活体细胞生活状态下的生长、运动、增殖情况及 细微结构 </u>的观察。
放上绿色滤光片

高发光效率的点光源→滤色系统→一定波长的光<u>（紫外光365nm、紫蓝光420nm）作为激发光</u>→激发标本内的荧光物质发射出荧光。
敏感性高、用于细胞结构和功能以及化学成分等的研究。
荧光光源一般采用 超高压汞灯（50~200W）、激发滤片（紫外、紫色、蓝色、绿色） 、阻断（或压制）滤光片
按光路区分

传统细菌：指人工培养基上易于增殖的细菌

“三段划线” 、目的：使细菌分散、生长为 单个菌落 、便于挑选目标细菌

类型：

烛缸、严格的分离操作-处理标本开始无氧的手套箱

使用特殊的培养基：添加胆固醇、马血清、酵母提取物、抗生素等。液体-添加酚红指示剂
固体培养基、5%CO2、37℃、 7日后用60倍低倍镜 斜投射光 观察是否生长、一般 3周左右 长成菌落。菌落中心 陷入平皿生长、“油煎蛋”样
支原体菌落坚实、无法挑取、灭菌 刀片切取菌落琼脂块 →移入液体培养基→棕红色变为黄绿色提示生长、支原体小→液体培养不会明显浑浊
反复2~3次。

L型→细胞壁缺损的细菌
在普通渗透压下、细胞壁缺损的细菌会“涨破”死亡→分离L型的培养基必须 高渗透压 。
<u>琼脂浓度0.5%（ 0.3 _{0.5%半固体、1.5%} 2.5%固体 ）以下的半固体培养基，加马血清及10%蔗糖维持渗透压</u>（3%~5%NaCL？）L型可生长成 “油煎蛋”样细小菌落 。

专性细胞内寄生菌、必须动物及细胞分离
姬姆尼茨、吉姆萨染色

常用动物：小鼠、大鼠、豚鼠
注射：皮下、腹腔、静脉or特殊器官（如颅内接种）
已分离的病原菌在保存过程中突变→丧失致病能力→制成悬液<u>接种于动物→重新从动物分离出来→成为完整毒力的培养物</u>，过去是保存病原菌的常规做法→ 菌株的“复壮” （实际上是利用动物的疾病过程，将残留的具有毒力的致病细菌从大量无毒力的突变细菌中重新 分离出来 ）

最常用-革兰染色、特殊反应-荚膜肿胀试验等

霍乱弧菌鉴定：噬菌体-生物学分型

单克隆抗体检测特异性抗原：凝集试验、ELISA、免疫荧光试验、胶体金免疫吸附试验等

最常用实验同四

比抗原检测敏感性更高

通常使用 动物试验 。半数致死量为指标。

每 一次分离过程 、获得的纯培养物→称作 一“株” 该种细菌
所保存的培养物→称为该种细菌的“菌种”。
将细菌增殖到所需数量→这一过程称为“培养”。

⑤ 病原微生物的鉴别染色法有哪些药剂怎么配置怎么操作

检验常用染色法包括
1）革兰氏染色法
2）抗酸染色法
3）美兰染色法
4）异染颗粒染色法
5）细菌鞭毛染色法
6）荚膜染色法芽孢染色法
7)布氏杆菌科兹洛夫斯基染色法
8)结核杆菌荧光染色法等主要染色法
革兰氏染色法染液配制
1。结晶紫染液：称取结晶紫（龙胆紫）14g，溶于95%酒精100ml中，配成饱和液，再取饱和液20ml与1%草酸铵溶液（1g草酸铵溶于100ml蒸馏水溶解即成）80ml混匀即成2。卢戈氏碘液：碘化钾2g于10ml蒸馏水中，再加碘1g，待碘全部溶解后（时间较长）加蒸馏水200ml即成3。95%酒精4。（1）石碳酸复红液：称取碱性复红（碱性品红）4g溶于95%酒精100ml中成饱和液，再取饱和液10ml与5%石碳酸溶液（5ml石碳酸溶于100ml蒸馏水）90ml混匀即成，（2）稀释石碳酸复红液：取石碳酸复红液10ml加入蒸馏水90ml即成染色方法：1。涂片
将菌液直接涂在载玻片上，经培养的菌落要加生理盐水混匀涂片，等待干燥（固定）2。将结晶紫染液滴加在已固定的涂片上，染色1分钟后用水冲去剩余燃料3。滴加卢戈氏碘液1分钟后水洗，在滴加95%酒精脱色，摇动玻片至紫色不在脱色为止（约需1分钟），水洗4。用稀释石碳酸复红液复染30秒至1分钟5。水洗待干，镜检6。革兰氏阳性菌染成紫色，革兰氏阴性菌染成红色

⑥ 叙述炭疽杆菌的微生物学诊断方法

炭疽的微生物学检查
1、标本的采集：分泌物、痰、血液、粪便、呕吐物、脑脊液等，严禁宰杀解剖死畜。
2、标本的处理：液体标本取沉渣分离培养；固体标本用生理盐水浸泡，水浴杀死非芽胞菌；血液、脏器、渗出液增菌或直接分离培养。
3、涂片染色：革兰阳性大杆菌、竹节状排列、有明显荚膜和芽胞—初步报告。荚膜荧光抗体染色或荚膜肿胀试验
4、核酸检测：核酸杂交
5、分离培养：BAP或戊烷脒多粘菌素B等选择性培养基。 2%兔血清肉汤增菌→分离培养
6、鉴定试验：
①串珠试验：接种于含青霉素(0.05～0.5U/ml)的肉汤中，37℃培养6h，形成大而均匀成串的圆球状菌体，与青霉素抑制细菌细胞壁合成有关，类炭疽无此现象。
②青霉素抑制试验：接种于含青霉素5、10、100U/ml琼脂平板，37℃培养24h。后两者不生长，前者生长。
③串珠和青霉素抑制联合试验
7、其他试验
①噬菌体裂解试验：AP631炭疽噬菌体
②NaHCO3毒力试验：接种于含0.5%NaHCO3和10%马血清的平板，10%CO2、37℃、24～48h，有毒株形成荚膜 — 黏液型菌落，无毒株不形成荚膜 — 粗糙型菌落
③毒素动物试验：小鼠、家兔或豚鼠皮下接种
④植物凝集素试验：荧光或酶标记PHA与菌体多糖反应
⑤Ascoli 热沉淀试验：可作追溯性诊断

⑦ 克雷伯氏菌的简介

一、生物学形状为较短粗的杆菌，大小0.5～0.8×1～2um,单独、成双或短链状排列。无芽胞，无鞭毛，有较厚的荚膜，多数有菌毛。
营养要求不高，有普通琼脂培养基上形成较大的灰白色粘液菌落，以接种环挑之，易拉成丝，有助鉴别。在肠道杆菌选择性培养基上能发酵乳糖，呈现有色菌落。
具有O抗原与K抗原，后者用以分型。利用荚膜肿胀试验，本属K抗原可分为82型。肺炎克氏菌大多属3型和12型；臭鼻克氏菌主要属4型，少数为5型或6型；鼻硬结克氏菌一般属3型，但并非所有3型均为该菌。
本属细菌55℃30分钟被杀死。在培养基上可存活数周至数月。