灭菌锅怎么做生物监测

‘壹’ 低温等离子灭菌器生物监测怎么做

高温生物指示剂主要指压力蒸汽灭菌生物指示剂。 低温生物指示剂一般指过氧化氢低温等离子灭菌生物指示剂。 你这是根据灭菌温度不同进行灭菌，不太严谨！高温和低温分别还有干热灭菌生物指示剂，环氧乙烷灭菌生物指示剂和低温甲醛灭菌生物指示剂。
常规的每日监测是由CSSD的人来做，院感科人员检查监测的结果，或者定期抽查监测。当地CDC也会来抽查的。 CSSD的生物监测是一个自含式的菌管，灭菌完成后在培养器中培养，观察结果的。 你所谓“监测报告单”的CSSD是出具不了的

‘贰’ 3M生物培养指示剂的压力蒸汽灭菌生物监测

1262
该压力蒸汽灭菌生物培养指示剂用于压力蒸汽灭菌效果的生物监测(包括下排气锅和预真空锅);通过培养基颜色变化，反应嗜热脂肪杆菌芽孢是否存活，从而判断压力蒸汽灭菌生物监测结果。
1. 将压力蒸汽灭菌生物培养指示剂放于一标准测试包中;
2. 按照国家规范, 分别将测试包放于锅内不同位置;
3. 灭菌完毕, 取出该生物指示剂;
4. 挤破内含的安瓿, 与一支对照管一起放于56℃培养锅内培养;48小时后阅读结果。
结果阅读：
1.培养后指示管不变色(呈紫色), 表示灭菌通过;
2.培养后指示管变色(呈黄色), 表示灭菌不通过,(必须及时查出灭菌失败原因)。
3.同时培养的对照管应为阳性(呈黄色), 如阴性,可能的原因为: 培养条件不符合要求; 生物指示剂有问题; (应及时查出阴性原因)。
注意事项：
1. 灭菌完毕, 含生物指示剂的包裹很热并有一定压力; 需至少冷却10分钟以上, 否则可能引起塑料管内的安瓿破裂, 飞溅的碎片导致损伤;
2. 只有对照管为阳性, 其生物监测结果才算有效。
3. 贮存于室温: 15-30℃; 相对湿度为35-60%;避免靠近灭菌器和化学消毒剂。
1292
该生物指示剂可用以121℃下排气和132℃预真空压力蒸汽灭菌锅。
3M™ ATTESTTM压力蒸汽灭菌生物培养指示剂(快速)在与3M ATTEST 290 培养锅共用时, 通过酶活性的灭活与否，探测嗜热脂肪杆菌芽孢是否存活，从而判断压力蒸汽灭菌结果。
使用方法:
1－在生物指示剂标签上注明灭菌器锅号, 负荷数量, 灭菌日期; 不要在指示剂的瓶或盖上另贴一个标签。将生物指示剂放于一个标准测试包内，并置于最难灭菌的位置。
2- 将含有生物指示剂的测试包放在灭菌器最难灭菌的位置，通常是灭菌器底层，近门或排气口上面。
3- 正常装载。
4－灭菌循环完毕, 取出生物指示剂。
5- 灭菌结束后，从灭菌器内取出含有生物指示剂的测试包，打开散热5分钟后才能取出生物指示剂。同时在压碎安瓿之前，让生物指示剂在培养锅外再冷却10分钟后才能压碎，然后进行生物培养。
6－检查生物指示剂标签上的化学指示剂，颜色由玫瑰色变成棕色证明生物指示剂经过压力蒸汽灭菌过程的处理。该颜色的变化并非表明该处理达到灭菌的目的，如果化学指示剂没有变化，请检查灭菌过程。
7－戴上防护眼镜，挤碎安瓿，然后培养生物指示剂。详细步骤请参阅3M ATTEST 290 培养锅操作说明。
8－每次培养须同时培养一个未灭菌过的生物指示剂进行阳性对照，阳性对照生物指示剂与经过灭菌处理的生物指示剂为相同生产日期和批号。
阳性对照的目的是保证：1）－正确的培养条件
2）－指示剂的活性（不适当的贮存条件可能影响有效期内的指示剂活性）
3）－3M ATTEST 290 培养锅功能完好
9－在3M ATTEST 290 培养锅（培养温度62+/-20C）内，培养阳性对照和已处理的指示剂3小时，读出最终结果。阳性对照必须得出荧光阳性结果(阅读器显示为红灯或+)，如阳性对照读出荧光阴性(绿灯或-)，应检查培养锅温度和操作过程，直至阳性对照为阳性结果，生物监测的结果才是有效的。对于经过灭菌处理的指示剂，荧光阳性(红灯或+)表明灭菌过程失败，荧光阴性(绿灯或-)表明灭菌过程合格。
10－如果需要通过颜色变化检测生物监测结果，应将生物指示剂放在培养锅内继续培养。同时随时监测阳性结果的出现，如8、12、24，直至168小时（7天），最终视觉效果应在168小时（7天）得出。黄色表明细菌生长，灭菌过程失败。168小时（7天）没有颜色变化（培养基为紫色）表明灭菌过程合格。
11－对任何为阳性生物监测结果应立即采取行动，如追回同锅次的灭菌物品，和寻找原因。直至生物指示剂的结果呈阴性。
注意事项:
冷却之前压碎或过度处理生物指示剂可能导致玻璃安瓿的破碎, 飞溅的碎屑会使人员受伤; 因此建议在从灭菌器内取出生物指示剂时戴防护眼镜和手套, 在压碎生物指示剂时也需要戴防护眼镜。
禁忌：该生物指示剂不能用于121℃预真空和132℃下排气压力蒸汽灭菌锅，及干热、化学蒸汽、环氧乙烷和其他的低温灭菌过程的生物监测。
1276
3M™Attest™压力蒸汽灭菌标准生物测试包能够可靠地检测压力蒸汽灭菌过程的生物监测结果。通过培养基颜色变化，反应嗜热脂肪杆菌芽孢是否存活，从而判断压力蒸汽灭菌生物监测结果。该生物测试包用于132℃预真空压力蒸汽灭菌器时在132℃运行≥4分钟。
1-在生物测试包标签上注明灭菌器，负荷数，灭菌日期，将测试包置于灭菌器最难灭菌的位置。
2-最难灭菌的位置，通常是底层，近门或排气口上面。
3-正常装载。
4-灭菌循环完毕，取出生物测试包。
注意事项：
冷却之前压碎或过度挤压生物指示剂可能导致玻璃安瓿瓶的破碎，飞溅的碎屑会使人员受伤。因此建议在从灭菌器内取出生物测试包时戴防护眼镜和手套，在从测试包内取出及压碎生物指示剂时也需要戴防护眼镜。
1－从灭菌器内取出测试包，打开散热5分钟后才能取出生物指示剂，在压碎之前，让生物指示剂在培养器外再冷却10分钟后才能压碎。
2－检查生物指示剂标签上的化学指示剂，颜色由玫瑰色变成棕色证明生物指示剂经过压力蒸汽灭菌过程的处理。该颜色的变化并非表明该处理达到灭菌的目的，如果化学指示剂没有变化，请检查灭菌过程。
3－戴上防护眼镜，挤碎安瓿瓶，然后在56±2°C培养生物指示剂。
4－每次培养须同时培养一个未处理的测试包的生物指示剂进行阳性对照，包内阳性对照生物指示剂与处理的生物指示剂为相同制造日期和标号。
阳性对照的目的是保证：1）－正确的培养条件
2）－指示剂的活性（不适当的贮存条件可影响有效期内的指示剂活性）
3）- 培养基促进细菌快速生长的能力
5－通过颜色变化检测生物监测结果，随时监测阳性结果出现，如8、12、24，直至48小时（2天）。最终视觉效果应在48小时（2天）得出。黄色表明细菌生长，灭菌过程失败。48小时（2天）没有颜色变化（培养基为紫色）表明灭菌过程合格。
8－对任何为阳性生物监测结果应立即采取行动，直至生物指示剂的结果呈阴性。
禁忌：该生物指示剂不能用于121℃预真空和132℃下排气压力蒸汽灭菌锅，及干热、化学蒸汽、环氧乙烷和其他的低温灭菌过程。
1296
3M™Attest™压力蒸汽灭菌标准生物测试包(快速) 内含有3M™压力蒸汽灭菌生物指示剂(快速)，在与3M™Attest™阅读器配合使用时，能够迅速可靠地检测压力蒸汽灭菌过程的生物监测结果。
通过阅读器观测荧光发生与否或者后继培养基颜色变化与否，反应嗜热脂肪杆菌芽孢是否存活，从而判断压力蒸汽灭菌生物监测结果。该生物测试包用于132℃预真空压力蒸汽灭菌器时在132℃运行≥4分钟。
1-在生物测试包标签上注明灭菌器，负荷数，灭菌日期，并将测试包置于灭菌器最难灭菌的位置。
2-最难灭菌的位置，通常是底层，近门或排气口上面。
3-正常装载。
4-灭菌循环完毕，取出生物测试包。
注意事项：
冷却之前压碎或过度挤压生物指示剂可能导致玻璃安瓿瓶的破碎，飞溅的碎屑会使人员受伤。因此建议在从灭菌器内取出生物测试包时戴防护眼镜和手套，在从包内取出生物指示剂及压碎时也需要戴防护眼镜。
1－从灭菌器内取出测试包，打开散热5分钟后才能取出生物指示剂，在压碎之前，让生物指示剂在阅读器外再冷却10分钟后才能压碎，不要用手指压碎玻璃安瓿瓶。
2－检查生物指示剂标签上的化学指示剂，颜色由玫瑰色变成棕色证明生物指示剂经过压力蒸汽灭菌过程的处理。该颜色的变化并非表明该处理达到灭菌的目的，如果化学指示剂没有变化，请检查灭菌过程。
3－戴上防护眼镜，挤碎安瓿瓶，然后培养生物指示剂。详细步骤请参阅Attest™290阅读器操作说明。
4－每次培养须同时培养一个未处理的生物测试包的指示剂进行阳性对照，包内阳性对照生物指示剂与处理的生物指示剂为相同制造日期和标号。
阳性对照的目的是保证：1）－正确的培养条件
2）－指示剂的活性（不适当的贮存条件可影响有效期内的指示剂活性）
3）－Attest™阅读器功能完好
5－在Attest™阅读器60+/-20C内，培养阳性对照和已处理的指示剂3小时，读出最终结果。阳性对照必须得出荧光阳性结果(阅读器显示为红灯或+)，如阳性对照读出荧光阴性(绿灯或-)，应检查阅读器温度和紫外灯，直至阳性对照为阳性结果，生物监测的结果才是有效的。对于经过灭菌处理的指示剂，荧光阳性(红灯或+)表明灭菌过程失败，荧光阴性(绿灯或-)表明灭菌过程合格。
6－如果通过颜色变化检测生物监测结果，应在阅读器内继续培养，如培养基仍为紫色，检查阅读器温度和贮存条件。该指示剂应在专门的阅读器60+/-20C的湿性环境中培养，避免干燥。随时监察阳性结果的出现,如8、12、24，直至168小时（7天）。最终视觉效果应在168小时（7天）得出。黄色表明细菌生长，灭菌过程失败。168小时（7天）没有颜色变化（培养基为紫色）表明灭菌过程合格。
7－对任何阳性生物监测结果应立即采取行动，直至生物测试包内生物指示剂的结果呈阴性。
禁忌：该生物测试包不能用于121℃预真空和132℃下排气压力蒸汽灭菌锅，及干热、化学蒸汽、环氧乙烷和其他的低温灭菌过程。
41382
该产品用于压力蒸汽灭菌过程常规检测。该产品用于121°C（≥30分钟）下排气或132°C（≥4分钟）预真空压力蒸汽灭菌器中装载棉布包、金属器械及硬质容器等的灭菌监测。每个测试包含一个1292 3M™ATTEST™压力蒸汽灭菌生物培养指示剂(快速)(棕色瓶盖)，一片记录卡，和一个1243 3MTM压力蒸汽灭菌包内化学指示卡(爬行式)。在蒸汽条件下，化学指示卡中的黑色颜料染料条达到或通过ACCEPT区，并且1292安瓿瓶上的化学指示剂由玫瑰色变为棕色，同时培养和阅读1292生物指示剂。
1292 3M™ATTEST™压力蒸汽灭菌生物培养指示剂(快速) 是一种双重阅读生物指示系统，当结合3M ATTEST 190/290阅读器共用时，可以快速可靠的监测压力蒸汽灭菌过程。1292 3M™ATTEST™压力蒸汽灭菌生物培养指示剂(快速) 通过酶活性的灭活与否，探测嗜热脂肪杆菌芽孢是否存活。通过非荧光培养基中酶分解产生的荧光剂来检测酶的存在。荧光剂的产生可以通过3M ATTEST 190/290阅读器检测。荧光剂的变化指示压力蒸汽灭菌过程失败。
1292 3M™ATTEST™压力蒸汽灭菌生物培养指示剂(快速) 也可以通过可见的颜色变化判断嗜热脂肪杆菌芽孢的存在。嗜热脂肪杆菌芽孢的繁殖和代谢会产生酸性副产品，pH降低导致培养基颜色由紫色变为黄色，指示压力蒸汽灭菌过程的失败。然而，由于3小时荧光结果的高灵敏性，就没必要培养1292 3M™ATTEST™压力蒸汽灭菌生物培养指示剂(快速)超过3小时。
使用方法:
1. 将该测试包标签朝上放在满负载的灭菌器中最难灭菌的区域，通常为灭菌器底层、近门处和排气口上方。
2. 按照程序运行灭菌循环。
3. 灭菌循环结束后，佩戴好防护眼镜和手套将灭菌器的门完全打开冷却至少5分钟，然后取出测试包。
4. 打开测试包冷却5分钟，然后取出生物指示剂再冷却10分钟后才能压碎。
5. 取出指示剂。
6. 阅读1243化学指示卡。当黑色颜料块到达化学指示卡的ACCEPT窗口时说明整个灭菌负荷达到灭菌条件；当黑色颜料块没有到达化学指示卡的ACCEPT窗口时即在REJECT区域时说明未达到灭菌条件。视为灭菌失败，此时须察看灭菌过程。
7. 检查1292生物指示剂标签上的化学指示剂，颜色由玫瑰色变成棕色证明生物指示剂经过压力蒸汽灭菌过程的处理。该颜色的变化并非表明该处理达到灭菌的目的，如果化学指示剂没有变化，请检查灭菌过程。
8. 在1292生物指示剂标签上注明灭菌器锅号, 负荷数量, 灭菌日期。
9. 在记录卡和1243化学指示卡背面填写必要的灭菌信息作为永久记录；记录生物指示剂的监测结果。
10. 丢弃测试包，因为该测试包为一次性使用，反复使用导致测试结果无效。
11. 戴上防护眼镜，挤碎安瓿，然后培养生物指示剂。详细步骤请参阅3M ATTEST 190/290 培养锅操作说明。
12. 每次培养须同时培养一个未灭菌过的1292生物指示剂进行阳性对照，阳性对照生物指示剂与经过灭菌处理的生物指示剂为相同生产日期和批号。
13. 在阳性对照1292指示剂标签上注明C和日期。挤碎安瓿，然后培养阳性对照生物指示剂。详细步骤请参阅3M ATTEST 190/290 培养锅操作说明。
14. 在3M ATTEST 190/290 培养锅内，培养阳性对照和已处理的指示剂3小时，读出最终结果。
15. 得到结果后，可丢弃生物指示剂。也可以通过阳性对照生物指示剂的目测颜色变化来指示蒸汽灭菌过程。这样可以确保：
 正确的培养条件
 指示剂的活性（不适当的贮存条件可能影响有效期内的指示剂活性）
 培养基的能力
3M ATTEST 190/290 培养锅功能完好
黄色表明细菌生长，灭菌过程失败。没有颜色变化表明灭菌过程合格。最终阴性结果应在培养48小时后得出。阳性对照为阳性结果时，生物监测的结果才是有效的。
16. 记录经过灭菌过程和阳性对照指示剂的结果。对任何结果为阳性的生物监测结果应立即采取行动。如追回同锅次的灭菌物品，和寻找原因。直至生物指示剂的结果呈阴性。
警告：
冷却之前压碎或过度处理生物指示剂可能导致玻璃安瓿的破碎，飞溅的碎屑会使人员受伤，因此需要注意以下事项：
 将安瓿瓶挤碎前需要冷却一定时间
 从灭菌器内取出生物指示剂时戴防护眼镜和手套
 在压碎生物指示剂时也需要戴防护眼镜
 不要用手指直接挤碎玻璃安瓿瓶
 不要在手指间滚动瓶子避免弄湿孢子带

‘叁’ 怎样进行高压灭菌生物监测法

用生物指示剂（自含式）：
1、将自含式生物指示剂置于灭菌最难达到的位置；
2、对负载灭菌，应根据有关规定，放置遍及负载的足够数量的自含式生物指示剂。注：建议不少于2个，通常每个循环使用10个。
3、使负载暴露于一个灭菌循环；
4、暴露后，在负载冷却或接触空气时尽快取出自含式生物指示剂；
5、压碎装有培养基的小玻璃瓶；
6、在适宜条件下培养，达规定时间后进行观察，读取结果；
7、若经过一个灭菌周期后，若有芽孢存活，则培养液会变浑浊或由紫色变为黄色；若芽孢被全部杀死，则培养液会保持最初的颜色。
8、记录试验结果；
9、阳性样品需经高压蒸汽灭菌处理。

自含式生物指示剂是一种带培养液的生物指示剂，根据其构造的不同可分为两类，一类是将菌片与装有培养液的小玻璃安瓿同放在一塑料软管中，软管顶端有滤纸封好的通气孔，灭菌后压碎安瓿，培养液与菌片混合之后培养观察；另一类是将培养液与细菌芽孢一同封于小玻璃安瓿中制成，灭菌后直接进行培养观察。不同类型的自含式生物指示剂适用于不同的灭菌方法、灭菌环境。自含式生物指示剂使用方便，具有无需无菌移种和无菌配制培养基、可避免假阳性结果、且培养时间短等优点，在医疗卫生及工业领域应用广泛。

‘肆’ 怎样进行压力蒸汽灭菌生物监测谢谢

1、检测方法:
将压力蒸汽灭菌生物指示剂放于标准测试包中，分别将测试包放于锅内不同位置，灭菌完毕，取出该生物指示剂，挤破内含的安瓿，于56℃培养锅内培养，48小时后阅读结果。
2、结果判定:
每个指示剂接种的溴甲酚紫蛋白胨水培养基都不变色，判定为灭菌合格；指示菌片之一接种的溴甲酚紫蛋白胨水培养基，由紫色变为黄色时，则灭菌过程不合格。
3、注意事项:
监测所用菌片须经卫生部认可，并在有效期内使用。生物指示物监测应1月1次。

‘伍’ 3M生物培养指示剂的环氧乙烷灭菌生物监测

1264
用途:用于环氧乙烷灭菌锅的生物监测;
机理：芽胞为枯草杆菌黑色变种芽胞, 选用标准抗力仪测试: 存活时间大于或等于15分钟, 杀灭时间小于或等于60分钟.
使用方法:
1. 将环氧乙烷灭菌生物培养指示剂放于一标准测试包中;
2. 按照国家规范, 分别将测试包放于锅内不同位置;
3. 灭菌完毕, 取出生物指示剂;
4. 挤破内含的安瓿, 与一支对照管一起放于37℃培养锅培养;
5. 48小时后, 阅读结果。
阅读方法:
1. 培养后, 灭菌管不变色(呈绿色), 表示灭菌通过;
2. 培养后, 灭菌管变色(呈黄色), 表示灭菌不通过;(必须及时查出灭菌失败原因)。
3. 同时培养的对照管应为阳性(呈黄色), 如阴性,可能的原因为: 培养条件不符合要求; 生物指示剂问题;(应及时查出阴性原因)。
如何丢弃：阳性的指示剂, 须环氧乙烷灭菌后丢弃.
有效期: 自生产日期起为2年。
保存方法:
1. 贮存于室温: 15-30℃; 相对湿度为35-60%;
2. 避免靠近灭菌器和化学消毒剂。
注意事项:只有对照管为阳性, 其生物监测结果才能有效。
建议使用:建议每锅均应放生物指示剂监测, 用于考核整个负荷的灭菌质量。

1294
3MTM 环氧乙烷灭菌快速生物培养指示剂在与3M ATTEST 阅读器共同使用时, 能够迅速可靠地观察环氧乙烷灭菌过程。
工作原理:
枯草杆菌黑色变种芽胞在特定条件下, 存活时间大于或等于15分钟，杀灭时间小于或等于60分钟。
枯草杆菌黑色变种芽胞生长过程中会自然产生－葡萄糖苷酶，采用专门配置的生物指示剂阅读器可以检测到酶衰减过程中而产生的荧光物质。经过4个小时的培养，如果检测到荧光物质，则说明灭菌过程失败；如果检测不到荧光物质，则说明灭菌过程成功。
观察频度：
应放在适当的测试包和包裹内，用来观察每次灭菌过程的质量。
使用范围：
3MTM 环氧乙烷灭菌生物培养指示剂（快速）适用于监测：
1－100%环氧乙烷灭菌过程。
2－所有氟里昂（CFC）和氢化氟里昂（HCFC）与环氧乙烷混合物的灭菌循环。
警告：
生物指示剂塑料管内有一玻璃安瓿。
· 冷却之前压碎或过度处理生物指示剂可能导致玻璃安瓿的破碎, 飞溅的碎屑会导致人员受伤。
· 建议从灭菌器内取出生物指示剂时戴防护眼镜和手套,。
· 压碎生物指示剂时戴防护眼睛。
· 压碎和敲击生物指示剂应关闭帽子。
· 不要用手指压碎玻璃安瓿。
· 不要在手指间捻搓生物指示剂菌片使其湿润。
注意事项：
不要用3MTM 环氧乙烷灭菌快速生物培养指示剂监测：
1－压力蒸汽灭菌过程。
2－干热，化学气体或其它低温灭菌过程。
使用说明：
1. 在生物指示剂标签上注明灭菌器, 负载数, 处理日期; 不要在指示剂的瓶或盖上另贴一个标签。
2. 按照消毒学技术规范将生物指示剂放于一个合适的测试包内和最难灭菌的位置，避免将指示剂和化学指示卡放在一起，以免引起荧光物质转移。
3. 将指示剂放在满负载最难灭菌的位置，通常是负载的中间。
4. 正常装载。
5. 灭菌过程完毕, 两种方法取出：
A． 通风前取出指示剂测试包：
按照厂家要求打开灭菌器门，取出测试包。从测试包内取出生物指示剂和化学指示卡。将测试包其余物品放回锅内。
B． 通风后取出指示剂测试包：
测试包的通风时间同锅内其它包裹相同。通风完毕，从测试包内取出生物指示剂和化学指示卡。按照医院要求丢弃其余物品。
6 检查指示剂上的化学标签。暴露于环氧乙烷灭菌过程的标签颜色变成绿色。此颜色变化不能表示此过程足够达到无菌。如果化学指示剂没有变化, 请检查灭菌过程。
7 戴上防护眼镜, 按压帽下，挤碎安瓿, 抓住指示剂在硬表面敲击直到菌片被培养基润湿。然后培养指示剂; 详细步骤请参阅ATTEST生物指示剂专门的培养器操作说明。
8 每次培养须至少同时培养一个未处理的生物指示剂( 阳性对照)，阳性对照生物指示剂与灭菌过的生物指示剂应该有相同的制造日期和标号。
9 在专门的培养锅内（372C）培养阳性对照和已灭菌的生物指示剂4小时; 读出最终结果. 详细步骤请参阅生物指示剂专用的ATTEST培养器操作说明。2和3小时可早期发现阳性对照和阳性灭菌管。丢弃灭菌过的生物指示剂。
10 要得出视觉上颜色变化, 应在培养锅内继续培养48小时; 如培养基变为黄色, 表明生物指示剂为阳性; 如培养基仍为紫色, 表明生物指示剂为阴性。
阳性对照的目的是保证:
· 正确的培养条件。
· 指示剂的活性。
· 快速的培养基及合适的阅读器。
阅读结果：
1. 阳性对照的生物指示剂必须得出阳性的荧光结果(红灯或+); 如阳性对照的生物指示剂读出阴性荧光结果(绿灯或-), 应检查培养锅温度和紫外灯; 重新试验得出新的阳性对照生物指示剂，直至为阳性的荧光结果, 灭菌后的指示剂结果才是有效的。对于灭菌后的指示剂, 阳性的荧光结果(红灯或+)表明灭菌过程失败; 阴性荧光结果(绿灯或-)表明灭菌过程可以接受。
2. 对任何生物指示剂为阳性的结果，应立即冻结灭菌物品，检查灭菌过程直至生物指示剂的结果呈阴性。
3. 在丢弃前应对任何阳性生物指示剂进行灭菌。 1298
3M™环氧乙烷快速生物测试包内含有“3MTM环氧乙烷灭菌快速生物培养指示剂”，可对常规的环氧乙烷或其它混合型的环氧乙烷气体灭菌过程进行监测，用于环氧乙烷灭菌器的装载过程控制。
工作原理:
枯草杆菌黑色变种芽胞在特定条件下, 存活时间大于或等于15分钟，杀灭时间小于或等于60分钟。
枯草杆菌黑色变种芽胞生长过程中会自然产生－葡萄糖苷酶，采用专门配置的生物指示剂阅读器可以检测到酶衰减过程中而产生的荧光物质。经过4个小时的培养，如果检测到荧光物质，则说明灭菌过程失败；如果检测不到荧光物质，则说明灭菌过程成功。
使用方法：
1-在生物测试包可上注明灭菌器号，装载号，灭菌日期，将测试包置于灭菌器最难灭菌的位置。
2-最难灭菌的位置，通常是负载的中间。
3-正常装载。
4-灭菌过程完毕, 取出测试包。
5-检查3M™环氧乙烷灭菌快速生物培养指示剂上的化学标签。暴露于环氧乙烷灭菌过程的标签颜色变成绿色。此颜色变化不能表示此过程足够达到无菌。如果化学指示剂没有变化, 请检查灭菌过程。
6-在生物指示剂标签上注明灭菌器号, 装载号, 灭菌日期。
7-丢弃余下的测试包。如果重复使用该测试包，会导致测试结果无效。
8-戴上防护眼镜, 按压帽下，挤碎安瓿, 抓住指示剂在硬表面敲击直到菌片被培养基润湿。然后培养指示剂。详细步骤请参阅3M™环氧乙烷灭菌快速生物培养指示剂专门的培养器操作说明。
9-每次培养须至少同时培养一个未处理的生物指示剂( 阳性对照)，阳性对照生物指示剂与灭菌过的生物指示剂应该有相同的生产日期和批号。
阳性对照的目的是保证:
 正确的培养条件。
 芽孢的生物活性。
 培养基（复苏芽孢的能力）的活性。
10-在专门的培养锅内（37±2oC）培养阳性对照和已灭菌的生物指示剂4小时; 读出最终结果。丢弃灭菌过的生物指示剂。详细步骤请参阅生物指示剂专用的ATTEST培养器操作说明。
阅读结果：
1. 阳性对照的生物指示剂必须得出阳性的荧光结果(红灯或+); 如阳性对照的生物指示剂读出阴性荧光结果(绿灯或-), 应检查培养锅温度和紫外灯; 重新试验得出新的阳性对照生物指示剂，直至为阳性的荧光结果, 灭菌后的指示剂结果才是有效的。对于灭菌后的指示剂, 阳性的荧光结果(红灯或+)表明灭菌过程失败; 阴性荧光结果(绿灯或-)表明灭菌过程可以接受。
2. 对任何生物指示剂为阳性的结果，应立即冻结灭菌物品，检查灭菌过程直至生物指示剂的结果呈阴性。
3. 在丢弃前应对任何阳性生物指示剂进行灭菌。
注意事项：
1－在灭菌开始前，不要打开测试包。
2－不要用该测试包监测压力蒸汽灭菌过程、干热、化学气体或其它低温灭菌过程。
3－只有对照管为阳性, 其生物监测结果才算有效。
保存方法：
贮存于室温，相对湿度为35%-60%，避免靠近灭菌器和化学消毒剂。

‘陆’ 小型压力蒸汽灭菌器的监测怎么做测试包是多大尺寸

小型压力蒸汽灭菌器因一般无标准生物监测包，应选择灭菌器常用的、有代表性的灭菌制作生物测试包或生物PCD(灭菌过程验证装置Process Challenge Device,PCD)，置于灭菌器最难灭菌的部位，且灭菌器应处于满载状态。生物测试包或生物PCD应侧放，体积大时可平放。

压力蒸汽灭菌B-D测试方法： 具体作法是:B-D测试包由100%脱脂纯棉布折叠成长30cm±2cm、宽25cm±2cm、高25cm～28cm大小的布包裹；将专门的B-D测试纸，放入布测试包的中间；测试包的重量为4kg±5%或用一次性B-D测试包。B-D测试包水平放于灭菌柜内灭菌车的前底层，靠近柜门与排气口底前方；柜内 除测试包外无任何物品; 134℃，3.5min～4min后，取出B-D测试纸观察颜色变化，均匀一致变色，说明冷空气排除效果良好，灭菌锅可以使用；反之，则灭菌锅有冷空气残留，需检查B-D测试失败原因，直至B-D测试通过后该锅方能使用。

需要纠正一个概念，用于化学监测即B-D试验的是B-D测试包，需每日进行一次。而标准包一般是指用于生物监测。

用于预真空和脉动真空压力蒸汽灭菌器的标准包制作方法则是：16条全棉手术巾每条41cm×66cm，将每条手术巾的长边折成3层，短边折成2层，然后叠放，包裹成大小为23cm×23cm×15cm即可。将两个生物指示剂置于标准包中心部位，后将包至于灭菌柜内排气口上方。经过一个灭菌周期后，将生物指示剂取出培养，并设阴性和阳性对照，观察其颜色变化以判断灭菌效果。

‘柒’ 高压灭菌的温度,时间,适用范围,如何对高压灭菌效果进行监测

压力蒸汽灭菌效果监测包括物理监测、化学监测和生物监测。
(1)物理监测：每次灭菌应连续监测并记录灭菌时的温度、压力和时间等灭菌参数。温度波动范围在+3℃以内，时间满足最低灭菌时间的要求，同时应记录所有临界点的时间、温度与压力值，结果应符合灭菌的要求。
(2)化学监测：包括包外、包内化学指示物监测。具体要求为灭菌包包外应有化学指示物，高度危险性物品包内应放置包内化学指示物，放于包内最难灭菌的部位。通过观察化学指示物颜色的变化，判定是否达到灭菌合格要求。采用快速压力蒸汽灭菌程序灭菌时，应直接将包内化学指示物置于待灭菌物品旁进行化学监测。
(3)生物监测：将嗜热脂肪杆菌芽孢片制成标准生物测试包、生物PCD（灭菌过程验证装置），或使用一次性标准生物测试包，对灭菌器的灭菌质量进行生物监测。将生物监测包置于灭菌器最难灭菌的部位，并设阳性对照和阴性对照。根据微生物芽孢的死亡情况来判断灭菌是否成功，考核灭菌器负荷是否达到无菌保障水平，这是确定压力蒸汽灭菌是否有效的最可靠的方法

‘捌’ 供应室灭菌锅常规监测是什么意思呢

供应室灭菌锅常规监测是指在日常灭菌工作中运用物理、化学、生物监测技术，对每一灭菌锅次进行实时监控，并且依照指示物的监测结果进行灭菌质量的判定。供应室消毒灭菌监测供应室负担着全院的医疗器械、物品的回收、清洗、包装、消毒灭菌、储存、发放等工作。其工作质量直接影响医疗护理质量和患者安危。物理监测：每锅监测，并详细记录（锅号、锅次、压力、温度、时间、灭菌物品、灭菌日期及失效期、灭菌操作者签名等）。化学监测：灭菌包包外应有化学指示物，包内放置的化学指示物置于最难灭菌的部位。生物监测：生物监测应每周进行，灭菌器新安装、移位和大修后必须进行物理监测、化学监测和生物监测。物理监测和生物监测通过后，生物监测应空载连续监测三次，合格后才能使用。脉动真空压力蒸汽灭菌器应进行B-D测试并重复3次，连续监测合格后，方可使用，投入使用后每天先进行B-D测试。对拟采用的的新包装材料及方法、摆放方式、排气方式及特殊灭菌工艺，也必须先进行生物监测，合格后才可使用。每年对压力和安全阀进行检测校验，有记录。

‘玖’ 高压消毒锅的灭菌监测包括3点。

1， 生物学监测：使用活的细菌芽孢制成生物指示剂，其抗力均大于或等于各种致病微生物。在第 1个灭菌周期(灭菌时间3 min)对嗜热脂肪杆菌(ATCC7953)芽孢未全部杀灭。经过第 1个周期后(灭菌时间5、7、9min)对嗜热脂肪杆菌(ATCC7953)芽孢全部杀灭。

用生物指标剂来证明灭菌物品内微生物是否全部死亡，是判断灭菌是否合格的直接指标，也是最可靠的监测方法。高压蒸汽灭菌所用生物指示剂是用嗜热脂肪杆菌芽孢制备，干热灭菌和环氧乙烷灭菌所用生物指示剂则是以枯草杆菌黑色变种芽孢制备的。

但由于使用生物指示剂操作复杂，几天后才能出结果，不适于日常监测。卫生部《消毒技术规范》要求，使用生物法监测高压蒸汽消毒锅每月1次。监测使用的生物指示管必须放于标准包内，标准包放在消毒锅的最低层，主要考虑蒸汽穿透物品的时间和高压蒸汽消毒锅温度最低处，具有代表性。

2，化学监测：用某些热敏化学物质配成印墨印制而成。在一定温度的饱和蒸汽条件下作用一定时间，使其颜色改变，再根据标准色来判断是否达到灭菌条件，因此是间接指标，种类有B—D试验指标图、化学指示胶带和化学指示卡。

B-D测试(Bowie—Dick test) 专门用于预真空(包括脉动式喷射式等)高压蒸汽消毒锅空气排除效果的监测。预真空不可能达到绝对真空(约有 2%空气)。因此，空气的存在影响蒸汽对物品的穿透和杀菌效果，可导致灭菌失败。所以，高压蒸汽灭菌时以物品包中是否有空气团的存在作为灭菌能否成功的一个重要指标。卫生部《消毒技术规范》要求：每日进行一次B-D测试。如B—D测试失败，须仔细查找原因，直至B-D测试通过后，该消毒锅方能使用。B-D测试设计原理是使试验包成为消毒锅内残留空气的聚焦点，因为热蒸汽进入柜内时，它相对较大的体积和可透气性布料极易吸附、“捕捉”残留空气。真空测试图上的化学指示剂对残留空气具有敏感性，能检测出残留空气在试验包中是否存在。

化学指示胶带 (包外指示胶带) 用于每个包裹的包外，指示已暴露于某种灭菌过程，以区分灭菌和未灭菌的物品，而不能作为灭菌可靠与否的指示剂。

化学指示卡(包内指示卡) 是对消毒锅灭菌温度、时间、饱和蒸汽的综合反映，用于考核每个包裹内部灭菌情况，如果灭菌过程中出现消毒锅，蒸汽质量和人为因素都会使监测结果不准。