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如何稀释微生物培养液

发布时间:2023-02-05 17:13:10

⑴ 寡营养培养基是怎么稀释的

寡营养培养基的分离用稀释十倍的Zobell2216e培养基。将常规的培养基进行稀释,能显着提高微生物的可培养率。Janssen等采用最大似然值法(Mostprobablenumber)比较了澳大利亚牧场土壤中微生物在稀释100倍的肉汤培养基(DNM)和普通肉汤培养基中的生长效果,证明稀释的培养基上可以得到更多的微生物。

⑵ 微生物限度稀释液选择氯化钠还是ph7.0氯化钠蛋白胨溶液

用氯化钠蛋白胨缓冲溶液做稀释剂,我们实验过程中用PH7.0氯化钠蛋白胨缓冲溶液做稀释剂的,也可以用生理盐水做稀释剂。在实验过程中每张过滤膜不可超过1000ml的稀释剂冲洗量。将纯水倒入薄膜过滤后,在放入培养皿里之前,还需要加缓冲液冲洗薄膜,冲洗量可以每张膜控制在100-200ml。然后用无菌镊子取出过滤膜,贴于培养基上,去除气泡

⑶ 微生物培养基的配制原则有哪些(望详解)

培养基的制备和质量控制-培养基的制备
培养基是微生物测定的基础,培养基的质量因而成了保证微生物实验成功的关键。培养基的制备、合理的贮存、培养基的质量检验,能确保提供持续高质量的培养基。在按照可接受的来源和标准中的配方制备培养基的过程中,重要的是选择正确的培养基和成分。与脱水和制备好的培养基一起的还常常伴有供应商的配方和说明。因为不同的培养基可能有不同的制备要求(如:加热、填加物、
ph值的调节等),按照说明确保制备可接受的培养基是重要的。一份描述效期和建议贮存条件的COA是同制备好的培养基一起的,同时附有用于培养基的促生长试验和灵敏度测试的菌种。
水普遍用于微生物培养基的稀释。纯化水是最常用的,但是在有些情况下,也用去离子水和蒸馏水。稀释用水的体积应该记录。
使用脱水培养基和培养基组分来制备培养基时要准确称量。使用己校正的具有适合的称量范围的天平。使用清洁的容器和工具,防止配方中带入外来物质,改变培养基的最终组成。称量也应该记录。
脱水培养基先在水中分散,并完全溶解和灭菌。如果必要可以加热使溶解,但要防止过度加热,因为所有的培养基或多或少有对热敏感的。用于培养基制备的设备应适于加热控制,持续搅拌,溶质混合。培养基变黑(梅特拉反应和非酶的棕色着色剂)通常显示过度加热。当需要向培养基中添加补充物时,添加后应充分混合。
制备好的培养基应放在清洁无菌的玻璃器具中,也可以加入抑制性物质。抑制性物质可以由器具清洁时产生也可由先前贮存在此器具的物质产生。必须确保清洁过程能有效去除残留和异物,确保清洁剂用纯化水充分清洗。参见《1051玻璃器具的清洗》。
培养基的灭菌应根据供应商提供的参数或用户自己的验证。买来的制备好的培养基应提供其使用的灭菌方法的文件。理想的供应商应提供培养基的灭菌保证水平(SAL),此水平是依靠公认的生物指示剂确定的。湿热高压灭菌是首选的灭菌技术,除了一些为避免培养基中的热敏物质遭到破坏而采用的煮沸方法。通过过滤灭菌对有些配方也是合适的。
培养基的灭菌方法、灭菌条件的效果应通过培养基的灭菌和促生长试验来验证。另外,如果通过湿热灭菌,灭菌周期应经过验证,对选择合适的负载和体积来确保合适的热分布。通常供应商建议采用一个已校正过的灭菌高压锅,在121°灭菌15分钟。通常指培养基达到温度的时间。当灭菌锅负载结构影响加热的速度是时,越多的负载就需要越长的灭菌周期。然而,灭菌的时间取决于培养基的体积和高压锅的负载。灭菌周期中,当温度是慢慢上升时,可能导致培养基的过度加热。因此,必须仔细确认能达到最小的SAL要求的灭菌周期,在过度加热时,抑制培养基降解的趋势。在流体循环完成后,不主张放冷后的培养基中放在灭菌锅中贮存,因为这样可能破坏培养基。不合适的加热或灭菌(对买来的培养基或是内部制备的培养基)可能导致颜色的不同变化,不透明,改变培养基的规格,或是PH发生漂移(与供应商的提议范围)。
通过无菌技术为测试制备的每一批培养基其PH在放冷至室温(25°)后,都应测定。一个扁平的pH计用于培养基表面pH值的测定,浸入式的pH计用于液体的测定。各供应商提供的培养基的pH应该在规定的±0.2的范围内,除非通过验证得到更宽的范围。
制备培养基应对培养皿和试管进行适当如下的检查:
有裂纹的容器和盖子;
容器内不同的填充体积;
有裂纹容器内可导致脱水的结果或是固体培养基表面起皱;
溶血;
额外黑或颜色改变;
可能过冷引起的结晶;
过量的气泡;
微生物的污染;
氧化显示的情况;
批号、效期的检查和记录;
培养基的灭菌。

⑷ 微生物水样,稀释一万倍,要怎么操作

取5ul这个量随机的原样就是你要稀释的水样,稀释一万倍,那么就需要加4995ul的稀释液,这样就是稀释了一万倍。

如果把固体颗粒看作看作质量分数是100%,那么稀释倍数=(100+g)/g,我们可以把这种稀释倍数称为质量稀释倍数,可是这种稀释倍数并不常用。

我们经常用到是体积稀释倍数,它可以这样表示(本题):(100+g/密度)/(g/密度),这样问题随之而来,很多同种固体物质的密度是不同的,例如固体二氧化碳,当它比较松软和坚实时的密度是不同的,那么上式的数值就变化了。所配制出的溶液的浓度就会变化。

国际标准

国际标准分类中,稀释一万倍涉及到废物、饲料、兽医学、危险品防护、实验室医学、香料和调料、食品添加剂、涂料和清漆、水质、建筑物的防护、微生物学、农业和林业、道路工程、核能工程、肉、肉制品和其他动物类食品、医学科学和保健装置综合、石蜡、沥青材料和其他石油产品。

建筑材料、化工产品、塑料、空气质量、焊接、钎焊和低温焊、航空航天制造用材料、润滑剂、工业油及相关产品、燃料、煤、土质、土壤学、词汇、道路车辆内燃机、计量学和测量综合、消防、石油和天然气的开采与加工、原油、液压液、通风机、风扇、空调器。

⑸ 微生物的稀释中为什么常用稀释培养法

因为稀释培养法要菌在培养基上均匀生长,可以充分利用培养基。

⑹ 微生物限度法怎样去稀释级别10倍,100倍,1000倍

很简单。
取1ml吸管,在样品中吸取1ml,放入9ml无菌生理盐水中,就稀释了10倍了。
再取1ml10倍的稀释液,放入9ml无菌生理盐水中,就稀释100倍了。
依此类推,稀释任何倍数都可以。

⑺ 微生物的稀释中为什么常用稀释培养法

前者是要菌在培养基上均匀生长,可以充分利用培养基;而后者菌只在培养基的表面生长,不能充分利用培养基的养分。可是我们做实验一般用后者,因为便于菌后面的分离和纯化。

⑻ 谁知道用固体培养基培养微生物后,要用标准平板计数法计算菌数,但是要怎样稀释啊谢谢...

你怎么用固体来培养啊,你可以用液体培养,在将液体稀释,后再计数啊,在平板上不好计数,

⑼ 微生物稀释用蒸馏水还是无菌水

考点: 测定某种微生物的数量 制备和应用固相化酶 DNA的粗提取和鉴定 专题: 分析: 解答时注意实验中用的是蒸馏水还是无菌水,将大肠杆菌培养液进行系列梯度稀释,防止杂菌污染,必须使用无菌水;破碎鸡血细胞获得含有DNA的滤液用蒸馏水;配制培养大肠杆菌的固体培养基可以用蒸馏水,然后高压蒸汽灭菌;制备固定化酵母细胞时活化干酵母用蒸馏水. A、将大肠杆菌培养液进行系列梯度稀释,防止杂菌污染,必须使用无菌水,A正确;B、破碎鸡血细胞获得含有DNA的滤液用蒸馏水,B错误;C、配制培养大肠杆菌的固体培养基可以用蒸馏水,然后高压蒸汽灭菌,C错误;D、制备固定化酵母细胞时活化干酵母用蒸馏水,D错误.故选:A. 点评: 本题考查了实验操作中材料的使用,考查了学生的实验操作能力和应用能力,试题难度中等.

⑽ 用于稀释微生物的溶液有什么要求

对浓度有要求,还需要灭菌。
用于稀释微生物的溶液需要灭菌,不同物种需要的生理盐水浓度不同。
1、哺乳类的生理盐水浓度是0.9%。称取9克氯化钠,溶解在少量蒸馏水中,稀释到1000毫升。2、鸟类的生理盐水浓度是0.75%。称取7.5克氯化钠,溶解后用蒸馏水稀释到1000毫升。3、两栖类的生理盐水浓度是0.65%。称取6.5克氯化钠,溶解后用蒸馏水稀释到1000毫升。

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