病原微生物样本的采集条件是什么

⑴ 微生物检验样品的采集步骤

微生物检验样品的采集步骤

样品的采集是微生物检验的重要组成部分，用于检验的样品数量和状况具有重要意义。这对取样人员和制样人员提出了很高的专业要求，既要保证样品的代表性和一致性，又要保证整个微生物检验过程在无菌操作的条件下进行。微生物检验样品的采集大致分为取样、包装密封、标识、样品的运输、接收、保存几个环节。下面是我为大家带来的关于微生物检验样品的采集步骤的知识，欢迎阅读。

样品的取样

取样是指在一定质量或数量的产品中，取一个或多个代表性样品，用于感官、微生物和理化检验的全过程。

首先在取样之前应确认货、证是否相符。其次取样工具要达到无菌的要求，对取样具和一些试剂材料应提前准备、灭菌。如果使用不合适的采集工具，可能会破坏样品的完整性，甚至使样品采集毫无意义。

应根据不同的样品特征和取样环境，对取样物品和试剂进行事先准备和灭菌等操作。另外要保证样品能够代表整批产品，其检测结果应具有统计学有效性，样品到达实验室时的状况应能反映出取样时产品的真实情况。

取样时应根据不同的产品类型、产品状态等选择不同的取样方法和标准。

① 包装食品：对于直接食用的小包装食品，尽可能取原包装，直到检验前不要开封，以防污染。对于桶装或大容器包装的液体食品，取样前应摇动或用灭菌棒搅拌液体，尽量使其达到均质;取样时应先将取样用具浸入液体内略加漂洗，然后再取所需量的样品，装入灭菌容器的量不应超过其容量的3/4，以便于检验前将样品摇匀;取完样品后，应用消毒的温度计插入液体内测量食品的温度，并作记录。尽可能不用水银温度计测量，以防温度计破碎后水银污染食品;如为非冷藏易腐食品，应迅速将所取样品冷却至0～4℃。对于大块的桶装或大容器包装的冷冻食品，应从几个不同部位用灭菌工具取样，使样品具有充分的代表性;在将样品送达实验室前，要始终保持样品处于冷冻状态样品一旦融化，不可使其再冻，保持冷却即可。

② 生产过程中的取样：划分检验批次，应注意同批产品质量的均一性;如用固定在贮液桶或流水作业线上的.取样龙头取样时，应事先将龙头消毒;当用自动取样器取不需要冷却的粉状或固体食品时，必须履行相应的管理办法，保证产品的代表性不被人为地破坏。

③ 液体产品：通常情况下，液态产品较容易获得代表性样品。液态产品一般盛放在大罐中，取样时，可连续或间歇搅拌，对于较小的容器，可在取样前将液体上下颠倒，使其完全混匀。较大的样品(100～500ml)要放在已灭菌的容器中送往实验室，实验室在取样检测之前应将液体再彻底混匀一次。

④ 固体样品：固态样品常用的取样工具有灭菌的解剖刀、勺子、软木钻、锯子和钳子等。面粉或奶粉等易于混匀的食品，其成品质量均匀、稳定，可以抽取小样品检测(如100 g)。但散装样品就必须从多个点取样，且每个样品都要单独处理，在检测前彻底混匀，并从中取一份样品进行检测。肉类、鱼类的食品既要在表皮取样叉要在深层取样。深层取样时要小心不要被表面污染。有些食品，如鲜肉或熟肉可用灭菌的解剖刀或钳子取样;冷冻食品可在未解冻的状态下可用锯子、木钻或电钻(一般斜角钻人)等获取深层取样样品;全蛋粉等粉末状样品取样时，可用灭菌的取样器斜角插入箱底，样品填满取样器后提出箱外，再用灭菌小勺从上、中、下部位取样。

⑤ 表面取样：通过惰性载体可以将表面样品上的微生物转移到合适的培养基中进行微生物检验，这种惰性载体既不能引起微生物死亡，也不应使其增殖。这样的载体包括清水、拭子、胶带等。取样后，要使微生物长期保存在载体上，既不死亡又不增殖十分困难，所以应尽早地将微生物转接到适当的培养基中。转移前耽误的时间越长，品质评价的可靠性就越差。表面取样技术只能直接转移菌体，不能做系列稀释，只有在菌体数量较多时才适用。其最大优点是检测时不破坏样品。

⑥ 空气样品的采取：空气的取样方法有直接沉降法和过滤法。在检验空气中细菌含量的各种沉降法中，平皿法是最早的方法之一，到目前为止，这种方法在判断空气中浮游微生物分次自沉现象方面仍具有一定的意义。过滤法是使定量的空气通过吸收剂，然后将吸收剂培养，计算出菌落数。

样品的包装密封

为保证样品的完整性，装有样品的包装物应进行封口，以证实其可靠性，即从取样地点至实验室这段时间不发生任何变化。可采用自粘胶、特制的纸黏着剂或者石蜡等封口，封口处应留有填写日期、检验人员和货主签字的地方，然后盖上专用的印章。

样品的标识

取样过程中应对所取样品进行及时、准确的标记。取样结束后，应由取样人写出完整的取样报告。样品应尽可能在原有状态下迅速运送或发送到实验室。

保存的样品应进行必要的清晰的标记，内容包括：样品名称，样品描述，样品批号，企业名称，地址，取样人，取样时间，取样地点，取样温度(必要时)，测试目的等。标记应牢固并具防水性，确保字迹不会被擦掉或脱色。所有盛样容器必须有和样品一致的标记。在标记上应记明产品标志与号码和样品顺序号以及其他需要说明的情况。标记应牢固并具防水性，确保字迹不会被擦掉或脱色。当样品需要托运或由非专职取样人员运送时，必须封死样品容器。

样品的运输

取样结束后应尽快将样品送往实验室检验。如不能及时运送，冷冻样品应存放在-15℃以下的冰箱或冷库内;冷藏和易腐食品存放在0～4℃ 冰箱或冷藏库内;其他食品可放在常温暗处。微生物检验样品应在取样后6 h以内送达实验室进行检验。

样品的运输过程必须有适当的保护措施(如密封、冷藏等)，以保证样品的微生物指标不发生变化。运送冷冻和易腐样品应在包装容器内加适量的冷却剂或冷冻剂，但样品不可与冷却剂或冷冻剂直接接触，保证途中样品不升温或不融化，必要时可于途中补加冷却剂或冷冻剂。运送水样时应避免玻璃瓶摇动，水样溢出后又回流瓶内，从而增加污染。如不能由专人携带送样时，也可托运。托运前必须将样品包装好，应能防破损，防冻结或防易腐和冷冻样品升温或融化。在包装上应注明“防碎”、“易腐”、“冷藏”等字样。同时做好样品运送记录，写明运送条件、日期、到达地点及其他需要说明的情况，并由运送人签字。

样品的接收

在接收样品时，实验室应与送样人共同相互确认样品与委托单上的内容是否一致。确认内容一般包括：品名;检验目的;检验项目;形状和包装状况(同体、粉状、冷冻、冷藏、零售、批发、无菌包装等都不同);抽样数量(个数和质量);抽样日期及送达日期;抽样地点;随货样附带的许可申请单编号;生产国或者生产厂家名称(进口商品);抽样者的单位、姓名及有无封印;其他搬运、储存、检验时的注意事项。

样品的保存

实验室接到样品后应在36 h内进行检测(贝类样品通常要在6 h内检测)，对不能立即进行检测的样品，要采取适当的方式保存，使样品在检测之前维持取样时的状态，即样品的检测结果能够代表整个产品。实验室应有足够和适当的样品保存设施(如冰箱或冰柜等)。保存的样品应进行必要和清晰的标记，内容包括：样品名称，样品描述，样品批号，企业名称、地址，取样人，取样时间，取样地点，取样温度(必要时)，测试目的等;样品在保存过程中应保持密封性，防止引起样品pH值的变化。

不同类型的样品，保存方法不同：

① 易腐样品：要用保温箱或采取必要的措施使样品处于低温状态(0～4℃)，应在取样后尽快送至实验室，并保证样品送至实验室时不变质。易腐的非冷冻食品检测前不应冷冻保存(除非不能及时检测)。如需要短时间保存，应在0～4℃ 冷藏保存，但应尽快检验(一般不应超过36h)，因为保存时间过长会造成样品中嗜冷细菌的生长和嗜中温细菌的死亡。

② 冷冻样品：要用保温箱或采取必要的措施使样品处于冷冻状态，送至实验室前样品不能融解、变质。冰冻样品要密闭后置于冷冻冰箱(通常为-l8℃)，检测前要始终保持冷冻状态，防止样品暴露在二氧化碳气体中。

③ 其他样品：应用塑料袋或类似的材料密封保存，注意不能使其吸潮或水分散失，并要保证从取样到实验室进行检验的过程中其品质不变。必要时可使用冷藏设备

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⑵ 检验科标本采集原则

检验科标本采集原则

检验结果是临床医师在诊疗过程中所需要的重要信息，临床医师可以根据这些检验结果及病人的临床情况来区分疾病的不同阶段，观察疾病的变化，判断预后或观察疗效。所以分析前阶段样本的质量保证是直接关系到检验结果能否真实客观地反应患者当前病情的一个重要环节。下面是我为大家带来的检验科标本采集原则，欢迎阅读。

一、病人准备

1.病人状态

一般需在安静状态下采集标本，如患者处于高度紧张的状态时，可使血红蛋白、白细胞增高。由于劳累或受冷等刺激、也可见白细胞的增高。运动能影响许多项目的测定结果。活动的影响可分暂时和持续性两类。暂时性影响如使血浆脂肪酸含量减少;丙氨酸、乳酸含量增高。持续性影响，如激烈运动后使CK、LDH、ALT、AST和GLU等的测定值升高，有些恢复较慢，如ALT在停止运动1h后测定，其值仍可偏高30%～50%。

2.饮食

多数试验要求在采血前禁食12h，因为饮食中的不同成分可直接影响实验结果。

(1) 餐后血液中TG、ALT、GLU、BUN、Na等均可升高，进食高蛋白或高核酸食物，可以引起血中的尿素氮(BUN)和尿酸(UA)的增高。进食高脂肪食物后采集的血液样本，其血清会出现浑浊，可影响许多检验测定的正确性。甚至喝含咖啡的饮料，可引起淀粉酶(AMS)、AST谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)等升高。但空腹时间过长，会使GLU，蛋白质降低，而胆红素升高。

(2) 高脂餐后2～4h采血，多数人ALP含量增高，主要来自肠源性同工酶，且与血型有密切关系，O型或B型兼为Le+分泌型者增高更为明显。

(3) 高蛋白质饮食可使血浆尿素、血氨增加，但不影响肌酐含量。

(4) 高比例不饱脂肪酸食物，可减低胆固醇含量;香蕉、菠萝、番茄可使尿液5-羟色胺增加数倍。

(5) 含咖啡因饮料，可使血浆游离脂肪酸增加，并使肾上腺和脑组织释放儿茶酚胺。食物如含有动物血液，可引起粪隐血假阳性。

(7) 饮酒后使血浆乳酸、尿酸盐、乙醛、乙酸等增加，长期饮酒者高密度脂蛋白胆固醇偏高、平均血细胞体积增加、谷氨酰转肽酶亦较不饮酒的病人为高，甚至可以将这三项作为嗜酒者的筛选检查。

吸烟：瘾大者血液一氧化碳血红蛋白含量可达8%，而不吸烟者含量在1%以下。此外，儿茶酚胺、血清可的松亦较不吸烟者为高，血液学方面亦有变化，白细胞数增加、嗜酸粒细胞减少、中性粒细胞及单核细胞增多、血红蛋白偏高、平均红细胞体积偏高。吸烟组血浆硫氰酸盐浓度明显高于非吸烟组。

3.药物

药物对检验的影响非常复杂，在采样检查之前，以暂停各种药物为宜，如某种药物不可停用，则应了解可能对检验结果产生的影响。庆大霉素、氨芐青霉素可使谷丙转氨酶活性增高、咖啡因可使胆红素增加、维生素C可使血糖、胆固醇、甘油三脂、尿酸严重降低。

4.体位

体位影响血液循环，由于血液和组织间液因体位不同而平衡改变，则细胞成分和大分子物质的改变较为明显，例如由卧位改为站位，血浆ALB、TP、酶、Ca、胆红素、Tch及TG等浓度增高;Hb、HCT、RBC等亦可增加。由于体位的`因素，在确立参考值时，应考虑门诊和住院病人可能存在的结果差异，故采集标本时要注意保持正确的体位和保持体位的一致性。

5.时间

病人准备还应考虑病人的生物钟规律，特别是激素水平分析，如女性生殖激素与月经周期密切相关;胆固醇则在经前期最高，排卵时最低;纤维蛋白原在经前期最高，血浆蛋白则在排卵时减少。生长激素于入睡后会出现短时高峰。胆红素、血清铁以清晨最高;血浆蛋白在夜间降低;血Ca往往在中午出现最低值。故采血时间应在相同时间进行。

二、标本采集

标本采集是直接关系检验结果的基本要素，如果标本采集不当，即使最好的仪器设备也难以弥补在采集标本时引入的误差和错误。

现将各种标本的采集要点分述如下：

(一) 血液标本

1.标本采集注意事项：

(1) 采静脉血时止血带结扎过久，可引起误差。如以结扎1min的样品结果为基数，则结扎3min，可使血浆总蛋白增加5%，胆固醇增加5%，铁增加6%，胆红素增加8%，乳酸则不能使用止血带。

(2) 血清标本应避免溶血。许多物质红细胞内和血清中(血浆)的含量是不一样的。如ALT红细胞内比血清高出数倍。血钾、AST高出几十倍，而HDH则高出百倍以上，一旦溶血，特别是严重溶血，造成血清(浆)中这些物质的测定值增高，干扰测定结果。

(3) 要特别注意采血不能在输液的同侧进行，更应杜绝在输液管内采血，因输液成分会影响检测结果(使相应的结果偏高，如输K+、Glu时，可使所测K+、Glu明显增高)，或使血液稀释结果偏低。

细胞培养的样品要采用无菌技术，防止污染。

(4) 标本采集后，必须在试管或容器上帖上检验申请单号码、住院病人应有床号、姓名，且应当场核对无误。

(5) 采血顺序 摘自北京协和医院检验科《检验样本留取及采集指南》

推荐采用直针采血方式，顺序如下：

①血培养管，②凝血项目管(蓝帽)，③血沉管(黑帽)，④血清管(红帽或黄帽)，⑤肝素血浆管(绿帽)，⑥EDTA 管(紫帽)，⑦ 抑制血糖酵解管(灰帽)

注：采用注射器采集血培养时，厌氧瓶优先。

特殊情况采用蝶翼方式采血，且无血培养管时，顺序如下：

①白帽管(弃置管，也可送检生化免疫项目)，②凝血项目管(蓝帽)，③血沉管(黑帽)，④血清管(红帽或黄毛)，⑤肝素血浆管(绿帽)，⑥EDTA 管(紫帽)，⑦ 抑制血糖酵解管(灰帽)

注：采用蝶翼方式采集血培养时，需氧瓶优先。

在实际工作中，如患者静脉条件较差，有可能采血不足，血培养优先考虑需氧管，其它管应首先考虑凝血(蓝帽)和血沉(黑帽)检测管，因为这两种标本对血量要求最严格，且二者抗凝剂均为枸橼酸钠。

(二) 尿液标本

根据采集时间可分为清晨空腹尿、随机尿、计时尿(2h、3h、12h、24h等)、午后尿、餐后尿、症状典型时尿等。

(1) 晨尿为住院病人留尿的主要方法，早晨起床后收集第一次尿，可用尿常规检验。

(2) 随机尿多为门诊就诊病人的留尿检验方法。

(3) 餐后尿为收集进餐后2h尿，主要用于了解葡萄糖代谢情况，用以筛查隐性糖尿病或轻症糖尿病。

(4) 计时尿应于计时开始时排空尿液，然后于规定时间内至截止时间留尿，计时尿多用于肾功能和有形成分排出率的评估，亦用于计算淀粉酶或肌酐的排出率。

(三) 粪便标本

采集后及时送检，如作原虫阿米巴检查应保持一定的温度，且立即送检，立即检查，如检查蛲虫则不必送检粪样，而应于晨起时排便前用棉拭擦肛门周围，可得虫卵。粪便标本应不污染容器外表，一般以无滤漏容器留取5～10g即可。

(四) 脑脊液、浆膜腔液、关节液

均由临床医师穿刺采样，检验科应提供专用的各种试管或容器，及时送送检。

(五) 痰液标本

采集晨间第一口痰，多用于细胞学及微生物学检查。采样前应先反复漱口，经深呼吸数次后用力咳痰，不可吐入唾液。微生物培养取样应在抗生素等药物治疗开始之前，如已使用用抗菌药物，则应选血液药物浓度最低水平时采样。

(六) 阴道分泌物

由妇产科医师采样后即时送检，否则影响滴虫动力，易于漏检。

(七) 其他标本

根据具体检验项目而定，临床医师在开申请单前，应同检验科相关部门联系并询问详细后，注明检查要求，再采样并及时送检。

总之，各种检验标本的采集合适与否，直接关系检验质量，应予以重视。

三、标本保存和运送

标本保存和运送是检验质量保证的重要环节之一。由于采集的标本受各种因素的影响，可能使检验结果受或大或小的误差，因此必须正确掌握标本保存和运送。标本采集后尽量立即送检，如在室温放置时间过长会造成血液成分的变化(如血糖及酶活性降低)，也可造成溶血现象。

(1) 采样后须立即送检的常规项目：血氨、血沉、血气分析、酸性磷酸酶、乳酸以及各种细菌培养，特别是厌氧菌培养。

(2) 采样后0.5h内送检的常规项目：血糖、电解质、血液细胞学、凝血试验、体液细胞学、涂片找细菌、霉菌等。

(3) 采样后1～2 h内送检的常规项目：各种蛋白质类、色素类、激素类、脂类、酶类、抗原、抗体测定等。

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⑶ 微生物检验标本的正确采集及注意事项

微生物检验标本的正确采集及注意事项

正确采集临床微生物标本，直接影响到微生物培养鉴定结果。可靠的检验结果可以指导临床诊断治疗，为临床科学用药和成功的感染控制提供依据，是正确、合理使用抗菌药物，延缓细菌耐药，减少抗菌药物滥用和监测医院感染的第一步，也是最重要的一步。下面是我为大家带来的微生物检验标本的正确采集及注意事项的知识，欢迎阅读。

一、 血液标本的采集

1、 采集方法

（1）75%酒精清洁局部皮肤。

（2）待皮肤干后，再用2%—2。5%碘酒从穿刺点中心部位开始消毒，范围不应小于5cm（直径），且不能用手指触摸消毒后的皮肤。

（3）皮肤碘酒干后（约1min），穿刺采集血液，采血量成人5—10ml，婴幼儿1—5ml。

（4）采血后立即在床旁接种培养瓶，并迅速轻摇，充分混匀防止凝固，但又不可剧震以防溶血。

2、注意事项

（1）怀疑菌血症应尽早采血，体温上升（38。5℃）采血可提高阳性率，但也要防止因等待而延误时机。

（2）对已经使用抗菌药物，而又不能停药者，也应在下次用药前采血。切忌不要在静滴抗菌药物的静脉处采取血标本，也不能从静脉导管及动脉插管中取血。

（3）培养基与血液之比以10：1为宜，以稀释血液中的抗生素，抗体等杀菌物质;有人主张对接受抗菌药物治疗的病人，培养基与采血量之比可为20：1或大于这个比例。

（4）近年研究表明，将血液注入血培养基前，更换针头反而易导致污染。

（5）每例至少采血两次，间隔0。5—1h，以利于提高阳性率和区分感染菌与污染菌。

（6）疑为细菌性心内膜炎及布鲁氏病的病人，以肘动脉或股动脉采血为宜，除在发热期采血外，并要多次采血（24h 3—4次）和增加采血量（可增加10ml）。

（7）采血后立即送检，如不能立即送检可置室温，而不能放置冰箱。

（8）如临床表现很似败血症，而血培养多次阴性者，提示考虑厌氧菌和真菌感染的可能。

二、骨髓的采集

1、采集方法

在病灶部位或髂前（后）上脊处严格消毒后抽取骨髓1ml，注入血培养瓶内。

2、注意事项

（1）骨髓内含有大量的单核巨噬细胞系统的细胞，因而骨髓培养对伤寒病人的.诊断较血培养优越。

（2）用于怀疑细菌性骨髓炎病人。

三、静脉导管标本的采集

1、采集方法

（1）常规导管部位皮肤消毒。

（2）无菌方法从病人体内拔出静脉导管，剪下导管尖端5cm，放入无菌瓶中。

（3）立即（15min内）送检，避免标本干燥。

2、注意事项

（1）剪下的导管立即接种血平皿，可提高阳性率。

（2）肉汤反复冲洗导管腔内，冲洗液做定量培养。

（3）有人将剪下的导管置肉汤增菌液或培养瓶中，此法不能区分导管感染菌与少量定植菌。

（4）卫生部在《医学感染诊断标准》（试行）（2001年1月3日施行）中规定：导管管尖培养其接种方法应取导管尖端5cm，在血平板表面往返滚动一次。细菌≥15cfu/平板，即为阳性。

四、呼吸道

1、痰标本

（1）采集方法

①清晨起床后用凉开水漱口多次，以除去口腔内大量杂菌，用力咳出肺深部的脓痰，置于清洁干燥容器中送检。

②痰量极少者可用45℃ 3%—10%的氯化钠溶液约25ml雾化。对于咯痰量少的幼儿，可轻轻压迫胸骨上部的气管，当其咯痰后用无菌棉棒采集标本。

③咳嗽无力或昏迷病人，可用吸痰管经鼻腔或口腔经气管腔内吸引痰液送检。

④气管切开者可以深入透气孔中取痰。

⑤可用支气管镜直接在病灶部位采集高浓度的病原菌。

⑥用无菌导管经鼻腔插入气管镜内，缓慢注入无菌蒸馏水5ml，取出导管。留取患者在3h内咳出的痰液，放入无菌容器中送检。

⑦胃内采痰法。无自觉症状的结核病人。有时可把痰误咽入胃内，因而可采用胃内溶物做结核菌培养，其阳性结果比咯痰高10%左右，该方法于晨起空腹时，把灭菌的胃管，从鼻腔送入胃内，用20ml注射器抽取胃液。

（2）注意事项

①痰标本的采集以晨痰为准，此时患者痰量较多且含菌量也多。

②标本采集后立即送检，若不能及时送检者，可暂存2—8℃冰箱。若晚1—2h接种，会失去苛氧菌，并使得革兰阴性菌过分生长。

③可接受的标本：痰;支气管灌洗液，支气管刷，支气管活检;肺吸出物和肺活检。不能接受的标本：唾液;24h留的痰（结核杆菌培养除外）;拭子。

④ 痰标本的质量评价：（用显微镜筛选）在低倍镜下，检查鳞状上皮细胞，至少10个视野，集中在有白细胞处，合格标本为白细胞与鳞状上皮细胞比例大于2：1。

2、鼻拭子

（1）用湿的拭子（生理盐水）;

（2）需插两个鼻孔;

（3）深入3。3cm左右，转动4—5次;

（4）以上用于诊断金黄色葡萄球菌暴发时的鼻带菌者。

3、咽拭子、口腔拭子

（1）采集方法（到细菌室取专用拭子）

①患者清水漱口后，由检查者将其舌外拉，用棉拭子将咽后壁或悬雍垂的后侧反复擦拭数次;

②化脓性扁桃体炎、口腔念珠菌病时，直接用棉拭子在病灶部位擦拭;

③插入运送培养基中立即送检，防止干燥。

（2）注意事项

①棉拭子应避免触及舌、口腔黏膜和唾液;

②采集标本前数小时不可用消毒药物漱口或接触病灶局部。

五、胃肠道

1、粪便

（1）采集方法

选取脓血、黏液粪便2—3g，液体粪便取絮状物1—2ml。盛于灭菌瓶中或蜡纸盒中及时送检。

（2）注意事项

①标本要采集新鲜的，陈旧标本影响阳性检出率;

②切忌粪尿混合;

③若要分离阿米巴，标本要立即送检并注意保温;

④运送培养基可提高阳性率;

⑤分离难辨梭菌时需选不成形或水样便;

⑥霍乱弧菌、大肠杆菌Ο157感染的腹泻便则为水样便或血性便;

⑦标本在病理早期或治疗前采集;

⑧一般认为用抗菌药三天后，标本培养病原菌阴性。

2、肛拭子

在无法获得粪便的情况下，可用经无菌甘油水或无菌生理盐水湿润的肛拭子插入肛门4—5cm（幼儿2—3cm）处，轻轻旋转擦取直肠表面黏液后取出，置运送培养基中送检。

六、泌尿道

根据卫生部《医学感染诊断标准》（试行）通知，泌尿系统临床诊断为：患者出现尿频、尿急、尿痛等尿路刺激症状，或有下腹触痛、肾区叩痛、伴或不伴发热，并具有下列情况之一：

（1）尿检白细胞男性≥5个/高倍视野，女性≥10个/高倍视野，插导尿管患者应结合尿培养;

（2）临床已诊断为泌尿道感染，或抗菌治疗有效而认定的泌尿道感染。

1、中段尿

（1）采集方法

①女性 采样前用肥皂水或0。1%的高锰酸钾溶液冲洗外阴，用手指阴x分开排尿，弃其前段尿，不终止排尿，留取中段尿10ml于灭菌容器内。

②男性 用肥皂水清洗尿道口，或0。1%的碘伏溶液消毒尿道口，灭菌纱布擦干，上翻包皮，弃其前段尿，不终止排尿，留取中段尿10ml于灭菌容器内。

（2）注意事项

①导尿虽然可以减少污染，但是多次重复导尿可以造成逆行性感染，因此近年来大多采用中段尿。

②女性病人最好采取膀胱截石位由护士采取标本，减少污染。

③采集标本以晨起第一次尿液为佳。

④采集标本后，若不能在1h内送检，暂放4℃冰箱，但不能超过8h。若尿液标本在室温下放置超过2h，即使接种培养结果细菌数≥104 cfu/ml获103cfu/ml，也不能作为诊断依据，应重新留取标本送检。

⑤疑为尿道炎时可将最初3—4ml尿液收集在灭菌容器内。该尿中即使有少数细菌，如反复检查为同一细菌，也应考虑为病原菌。

⑥儿童在多数情况下，仅冲洗外阴是不够的，故采集标本较为困难。如果尿内细菌明显增多，可以高度怀疑为尿路感染，无菌则可否定。

⑦若细菌培养结果为两种或两种以上细菌，需考虑污染可能，建议重新留取标本送检。

⑧尿液中不得加入防腐剂，消毒剂否则影响阳性检出率。

2、膀胱穿刺采集法

避免污染是很困难的，培养结果与病情不符时，或尿厌氧菌培养，或婴幼儿中段尿采集困难时，可以用耻骨上穿刺膀胱内采尿。

3、留置导尿者采集法

拔去闭式引流的集尿袋，弃去导尿管前段尿液，留无污染的膀胱内尿液10ml送检。不可从集尿袋下端留取标本。

七、脑脊液

1、采集方法

由临床医师以无菌方法收集脑脊液3—5ml（细菌1ml，真菌2ml抗酸杆菌2ml，病毒1ml）盛于无菌试管或小瓶中立即送检。

2、注意事项

（1）采集标本后立即送检，因脑膜炎奈瑟菌离体后迅速自溶，肺炎链球菌及流感嗜血杆菌也易死亡;

（2）疑为上述细菌感染时，应注意保温，不可置冰箱或低温保存。

八、胆汁

1、十二指肠引流法

在无菌操作下，将十二指肠导管吞咽至十二指肠乳头部（距齿65—70cm）时，收集A液（来自总胆管，为橙黄或金黄色），随之注入25%硫酸镁溶液40ml，经1—2min后再采取B液（来自胆囊，为棕黄绿色），随后收取C液（来自肝胆管，为柠檬色），一般认为B液做细菌培养意义较大。

2、胆囊穿刺法

胆囊造影术时，可同时采取胆汁。

3手术采取法

由总胆管、胆囊直接穿刺采取胆汁。

以上采集之标本应立即送检，否则置于4℃冰箱内，采集时需小心，避免被唾液、十二指肠液细菌污染。

九、穿刺液标本

穿刺液包括胸水、腹水、心包液、关节液、鞘膜液。

1、采集方法

由临床医师行穿刺术抽取。胸腹水可收集5—10ml，心包液、关节液收集2—5ml，置于无菌含抗凝剂的试管或小瓶中，充分混匀后，立即送检。抗凝剂10%EDTA二钠盐，标本与抗凝剂之比10：1。

2、注意事项

⑴标本采集应在患者用药之前或停止用药1—2天后进行;

⑵不能立即送检可置4℃冰箱保存;

⑶疑为淋病性关节炎患者的关节液，采集后立即送检，或床旁培养为佳;

⑷不能用棉拭子浸蘸标本送检。

十、脓汁及病灶分泌物

1、伤口

⑴表面伤口拭子采集方法及注意事项

① 仅限于皮肤与皮下组织，包括手术切口、褥疮溃疡、新生儿脐炎、婴儿脓疮病。

②用无菌生理盐水或75%的酒精擦去病灶表面渗液;

③用无菌棉拭子抹去及较深部的脓汁分泌物或组织送检;

④采集褥疮溃疡标本时应采集褥疮边缘的脓性分泌物，拭子放在运送培养基中立即送检，不要采集创口表面的渗液。

⑵伤口、脓肿、窦道、坏疽组织采集方法及注意事项

①闭锁性脓肿用碘酒和酒精消毒皮肤后，用灭菌注射器穿刺抽取全部脓液送检，疑为厌氧菌感染时，排去针管内空气将针头插入灭菌橡胶塞内送检;

②伤口处若有脓及渗出物要用无菌棉签深入各种窦道中擦拭，用小刀刮取，穿刺抽吸或手术切除获得深处伤口标本;

③当创伤出血时，敷有药物在2h以内及烧伤在12h内均不应采集标本，此时获得阳性结果机会甚少。

④采集标本注意观察脓汁及分泌物性状、色泽、气味等。可为培养鉴定提供依据。

⑶烧伤创面

①烧伤创面需要脓性分泌物，焦痂迅速分离变棕黑、黑或紫罗兰色，烧伤边缘水肿。患者发烧>38℃或低体温<36℃，合并低血压。

②用无菌生理盐水冲洗伤口创面。

③由于创面部位不同，细菌种类也不尽相同，要用灭菌棉拭子采集多个部位的炎症区送检。

④采集痂下变黑或变性的不健康区边缘或引流液等做定量培养及组织活检。

2、厌氧伤口拭子

⑴厌氧专用棉棒或玻璃棒触及深部脓汁;

⑵可用注射器抽吸，排去针管内空气将针头插入灭菌橡胶塞内送检;

⑶立即送检，送检过程中必须保持在无氧条件;

⑷不宜做厌氧菌培养的有痰、喉拭子、鼻咽拭子、齿龈拭子、直肠、阴道和宫颈拭子以及回肠、结肠造瘘术的流出物，胃、小肠及大肠内容物等。

3、尿道口分泌物拭子

⑴男性用无菌纱布擦拭和清洗尿道口，然后采取从尿道口溢出的脓性分泌物;

⑵采集前列腺液时，先将尿道、膀胱冲洗，然后从肛门用手指按摩前列腺，促使前列腺液溢出;

⑶女性病人先用灭菌纱布或棉拭子仔细擦拭或清洗尿道口，然后从阴道内诊压迫尿道，使分泌物溢出;

⑷取子宫颈分泌物，先用内窥镜扩张阴道，然后从宫颈口用灭菌棉拭子采取分泌物，尽量避免被阴道宫颈附近正常菌群的污染。

4、蜂窝织炎

⑴用无菌生理盐水或酒精消毒皮肤;

⑵用细针在炎症最显着处穿刺吸引;

⑶抽少量灭菌生理盐水在针管内;

⑷注入无菌试管内送检。

5、组织标本

⑴活体组织采取的微量标本，可直接接种在培养基内;

⑵表浅组织可直接用棉拭子擦拭、小刀刮去;

⑶较大组织块的表面可采用烧灼或浸入沸水中5—10s，然后用灭菌剪刀切开，取其中的脓汁;

⑷深部组织标本可经皮肤穿刺或手术切取送检;

⑸组织标本不可用福尔马x固定;

⑹有时也可将沾有脓汁的最内层敷料放入无菌平皿内送检。

十一、眼标本采集

⑴一般细菌，以无菌棉拭子采集眼分泌物，尤其脓性分泌物;

⑵沙眼衣原体，首先擦去眼结膜上面的分泌物，然后用无菌小刀刮取穹窿部及眼结膜上皮细胞，用链霉素处理后备用;

⑶对于刚治疗或药物冲洗过的患者最好12—24h后采集标本;

⑷对于泪囊炎患者可稍加挤压后以无菌棉拭子采集标本。

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⑷ 食品安全及食品安全问题，如何样本采集与前处理

采集病原微生物样本应当具备下列条件：
（一）具有与采集病原微生物样本所需要的生物安全防护水平相适应的设备；
（二）具有掌握相关专业知识和操作技能的工作人员；
（三）具有有效的防止病原微生物扩散和感染的措施；
（四）具有保证病原微生物样本质量的技术方法和手段。
采集高致病性病原微生物样本的工作人员在采集过程中应当防止病原微生物扩散和感染，并对样本的来源、采集过程和方法等作详细记录。
第十条 运输高致病性病原微生物菌（毒）种或者样本，应当通过陆路运输；没有陆路通道，必须经水路运输的，可以通过水路运输；紧急情况下或者需要将高致病性病原微生物菌（毒）种或者样本运往国外的，可以通过民用航空运输。

⑸ 微生物检验标本采集和运送原则

采样时机

抗生素使用前(停用抗生素3至5天或下次用药前)采样

采样方法

采集无菌部位的标本应严格无菌操作，非无菌部位尽量减少正常菌群的污染，采样量足。

采样容器

专用的无菌，防渗漏，有盖，无酸、碱、防腐剂及消毒剂污染。

送检

尽快送检，一般不超过2小时。

若不能及时送检可于4-8℃保存，但对可疑淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌、肺炎链球菌等对外界环境敏感的苛养菌感染的患者标本应室温保存。

当标本量小于1ml时应于15～30分钟内送检，防止挥发和干燥。

微生物检查的标本采集和运送原则

1.发现感染应及时采集微生物标本作病原学检查。

2.尽量在抗菌药物使用前，或停药3至5天后采集标本，如不能停用抗菌药物，应于下次抗菌药物应用前采集。应在感染的急性期或伤口局部治疗前采集标本。

3.选择正确的解剖部位，并以适当的技术、方法与容器收集足量的标本。

4.采样时应严格执行无菌操作，将污染可能降至最低。

5.收集真正感染的病灶处的标本，且避免邻近区域常居菌群的污染。

6.采用专用无菌容器收集标本。容器须灭菌处理，防止渗漏，但不得使用消毒剂。标本中不可添加防腐剂。

7.采样后应立即送检，最好在2h内。如不能及时送检，应将标本置于适当的储存环境待送，但不超过24小时。对可疑淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌、肺炎链球菌等对外界环境敏感的苛养菌感染的患者标本应室温保存。当标本量小于1ml时应于15～30分钟内送检，防止挥发和干燥。

8.尽量不要以一般棉花拭子收集标本，应使用专用的纤维拭子。

9.每份标本都应贴上标签并标明必要信息，在检验申请单上填写足够的有关临床资料。(要标明病区、病人姓名、感染状况、近期抗菌药物使用情况、标本来源、检验目的、采集部位、采集及送检时间等)

10.同一天同一检测目的、相同标本(血液标本除外)一般只需送检一次(份)。涂片检查最好和细菌培养同时做!

拓展：

1.糖类的分解：细菌分泌胞外酶，将菌体外的多糖分解成单糖(葡萄糖)后再吸收。各种细菌将多糖分解为单糖，进而转化为丙酮酸，这一过程是一致的。丙酮酸的利用，需氧菌和厌氧菌则不相同。需氧菌将丙酮酸经三羧酸循环彻底分解成CO2和水。厌氧菌则发酵丙酮酸，产生各种酸类(如甲酸、乙酸、丙酸、丁酸、乳酸、琥珀酸等)、醛类(如乙醛)、醇类(如乙醇、乙酸甲基甲醇、异丙醇、丁醇等)、酮类(如丙酮)。不同细菌具有不同的酶，对糖类的分解能力和代谢产物也不同，借此可以鉴别细菌。

2.蛋白质的分解：蛋白质分子在细菌分泌的蛋白质水解酶的作用下，在肽键处断裂，生成多肽和二肽。多肽和二肽在肽酶的作用下水解，生成各种氨基酸。二肽和氨基酸可被细菌吸收，氨基酸在体内脱氨基酶的作用下，经脱氨基作用生成氨。不同种细菌在不同的条件下所进行的脱氨基作用的方式(氧化脱氨基、水解脱氨基、还原脱氨基)及代谢产物也不同。可借此鉴别细菌。如有些细菌能使色氨酸氧化脱氨基，生成吲哚、C02和H20.细菌还可以用脱羧酶使氨基酸脱羧，生成胺类(如组胺)和C02.

3.细菌对其他物质的分解：细菌除能分解糖和蛋白质外，对一些有机物和无机物也可分解利用。各种细菌产生的.酶不同，其代谢的基质不同，代谢的产物也不一样，故可用于鉴别细菌。

(1)对其他有机物的分解：如变形杆菌具有尿素酶，可以水解尿素，产生氨。乙型副伤寒沙门菌和变形杆菌都具有脱硫氢基作用，使含硫氨基酸(胱氨酸)分解成氨和H2S.

(2)对其他无机物的分解：产气肠杆菌分解柠檬酸盐生成碳酸盐，并分解培养基中的铵盐生成氨。细菌还原硝酸盐为亚硝酸盐，氨和氮气的作用，称为硝酸盐还原作用。

4.细菌合成代谢产物的意义

(1)热原质：大多数为革兰阴性菌合成的菌体脂多糖。注入人体或动物体内能引起发热反应，故称热原质。

(2)毒素和侵袭性酶：细菌产生毒素，包括内毒素和外毒素。内毒素为草兰阴性菌的脂多糖。外毒素是革兰阳性菌产生的蛋白质，毒性强且有高度的选择性。有些细菌还能产生具有侵袭性的酶，如卵磷脂酶、透明质酸酶等。毒素和侵袭袭性酶在细菌致病性中甚为重要。

(3)色素：有水溶性色素(铜绿假单胞菌的色素)和脂溶性色素(金黄色葡萄球菌的色素)。不同细菌产生不同的色素，在鉴别细菌上有一定意义。

(4)抗生素：是由某些微生物代谢过程中产生的、能抑制或杀死另一些微生物和癌细胞的微量生物活性物质。

(5)细菌素：某些细菌菌株产生的一类具有抗菌作用的蛋白质，细菌素作用范围狭窄，仅对与产生该种细菌素的细菌有近缘关系的细菌才能起作用，如大肠菌素、绿脓菌素、变形菌素和弧菌素等。

⑹ 微生物标本采集方法及注意事项

一、粪便标本采集和处理

(1)采集方法

1.自然排便法：取新鲜粪便的黏液、脓血、或絮状物等有意义成分，2～3g或 1～2 m1，盛无菌容器内或置于保存液或增茵液内送检;若疑似霍乱者应置于碱性蛋白胨水中(PH8.6)。

2. 直肠拭子法：难以获得粪便或排便困难患者及幼儿可采用此法，将拭子前端用无菌甘油或生理盐水湿润,然后插入肛门约 4～5cm(幼儿 2～3cm)，轻轻在直肠内旋转。擦取直肠表面粘液后取出，盛于无菌试管中或保存液中送检。

(2) 注意事项

1.尽可能在抗生素使用之前采集标本。

2.所挑取的粪便不应接触其他部位(如便盆)，粪便样本中不应混入尿液及其他异物，采集过程应尽量无菌操作。

3.不应用厕纸收集粪便。

4.对同一病人在同一天不宜重复送检。

5.宜在感染急性期(通常是5d-7d内)采集标本。

6.下列腹泻患者应连续3d送检标本

--社区获得性腹泻(入院前或72h内出现症状)

--医院腹泻(入院72h后出现症状)，且至少有下列情况之一：大于65岁并伴有内科疾病、HIV感染、粒缺(中性粒细胞<0.5)及疑似院内暴发。

--怀疑肠道感染的非腹泻性表现。

7.肠炎和发热病人建议做血培养。

8.伤寒沙门菌感染时骨髓培养高出血培养。

9新鲜粪便标本应在采集后尽快送检，不应超过2h。

(3)标本拒收

干燥的.拭子、含钡粪便、黄软成形便、干便、明显污染的粪便、一日内重复送检的标本，应设法与临床医师联系，可要求重新留取标本，并做好记录，在没有与医师沟通之前标本不应丢弃，仍按实验室标本保存原则存放。

二 、尿液标本采集和处理

(1)采集方法

1. 中段尿采集法： 清晨起床后用肥皂水清洗尿道口和外阴部，再用清水冲洗尿道口周围，然后排尿弃去前段尿液，收集中段尿 5～10ml盛于带盖的无菌容器内立即送检，采集后于0.5h内进行接种。

2. 耻骨上膀胱穿刺法：评估膀胱内细菌感染的“金标准”。培养结果与临床病情矛盾时可采用此法，一般较少应用。

3. 导尿法：采用无菌技术用注射器经导尿管抽取尿液，导取 10～15ml 尿液，置无菌容器中送检，尿液标本不能通过收集袋引流管口流出的方式采集。长期留置导尿管的患者进行常规尿培养意义不大，这些患者通常会培养出大量定植菌。

(2)注意事项

正常人的尿液是无菌的，除外尿道有正常菌群外，还有条件致病菌，而这些细菌又是尿路感染中常见的致病菌，故应该注意无菌采集。

(3)标本拒收

1.标本取自导尿患者尿袋。

2.标本送检时容器有渗漏。

3.未用无菌容器采集标本。

4.除耻骨上膀胱穿刺法外，采用其他方法采集标本申请做厌氧菌培养

三、 痰及下呼吸道标本采集和处理

(1)采集方法

1.自然咳痰法：①晨痰为佳;②先冷开水洗漱、清洁、口腔和牙齿;③再用力咳出呼吸道深部的痰，吐至无菌容器中;④痰量不得少于1ml;⑤痰咳出困难 时可先雾化吸入 NaCl溶液(100g/L，加温到45℃)使痰容易咳出。查结核分枝杆菌，应留取24小时痰。

2. 小儿取痰法：用弯压舌板向后压舌，将拭子深入咽部，小儿因压舌板刺激引起咳嗽，喷出的肺或气管分泌物粘在拭子上即可送检。

3.支气管镜、支气管穿刺、支气管肺胞灌洗等采集法，此采集方法必须由医生操作。

(2)注意事项

1.痰经过口腔，所以患者应用清水漱口数次，尽量排除口腔内大量杂菌。

2.用无菌防漏容器收集标本，应在2h内(室温)送至微生物实验室。若延长送检，将导致非苛养的口咽部定植菌过度生长，有临床意义的病原菌数量相对减少。

(3)筛选并拒收的标本

1.24h内重复采集的痰细菌培养标本。

2.唾液。

3.未经保护套管收集的支气管刷培养标本。

4.痰的厌氧菌培养标本。

四、血培养标本采集和处理

(1)血培养标本采集指征

对入院的危重患者未进行系统性抗生素治疗前，应及时进行血液培养，患者出现以下体征可作为血培养的重要指征：

1.发热(≥38℃)或低热(≤36℃)

2. 寒热

3. 白细胞增多(>10×109/L，特别是在有“核左移”未成熟的或带状的白细胞增多时)

4.粒细胞减少(成熟的多核白细胞<1×109/L)

5. 血小板减少

6.皮肤粘膜出血

7.昏迷

8.多器官衰竭

(2)注意事项

1.血液在正常情况下为无菌标本，应严格按照无菌操作，避免杂菌污染。

2.培养瓶分为需氧瓶和厌氧瓶两种。每瓶需要 8～10ml。儿童瓶为需氧瓶每瓶需血液1～3ml.

3.血瓶接种顺序：用注射器或针采血时，应先接种厌氧瓶;用蝶形针采血时，应先接种需氧瓶;采血量不够时先接种需氧瓶，剩余量再接种厌氧瓶。

4.采血后尽快送至微生物室，如有耽搁，室温放置，不要冷藏。

⑺ 在食品微生物检验中，对样品的采集方案有哪些要求

食品卫生微生物检验样品的采集和处理
一、范围
适用于各类食品样品的采样。
二、采样用品
灭菌探子、铲子、匙、采样器、试管、吸管、广口瓶、剪子、开罐器等。
三、样品的采集
在食品检验中，所采集的样品必须有代表性。食品中因其加工批号、原料情况（来源、种类、地区、季节等）、加工方法、运输、保藏条件、销售中的各个环节（例如有无防蝇、防污染、防蟑螂及防鼠等设备）及销售人员的责任心和卫生认识水平等均可影响食品卫生质量，因此必须考虑周密。
1、采样数量
每批样品要在容器的不同部位采取，一般定型包装食品采取一袋/瓶（不少于250g）及散装食品采取250g.
2、采样方法
(1)
采样必须在无菌操作下进行。
(2)
根据样品种类，袋装、瓶装和罐装食品，应采完整的未开封的样品。如果样品很大，则需要无菌采样器
取样；固体粉末样品，应边取边混合；液体样品通过振摇混匀；冷冻食品应保持冷冻状态（可放在冰内、冰箱的冷盒内或低温冰箱内保存），非冷冻食品需在1℃～5℃中保存。
3、
采样标签
采样前或后应贴上标签，每件样品必须标记清楚(如品名、来源、数量、采样地点、采样人及采样时间等)。
四、送检
样品送到微生物检验室应越快越好。如果路途遥远，可将不需冷冻样品保持在1℃～5℃环境中(如冰壶)。如需保持冷冻状态，则需保存在泡沫塑料隔热箱内（箱内有干冰可维持在0℃以下）。送检时，必须认真填写申请单，以供检验人员参考。
五、检验
微生物检验室接到送检申请单，应立即登记，填写实验序号，并按检验要求，立即将样品放在冰箱或冰盒中，积极准备条件进行检验。
各食品微生物检验室必须备有专用冰箱存放样品。一般阳性样品，发出报告后3d(特殊情况
适当延长)，方能处理样品。进口食品的阳性样品，需保存6个月，方能处理。阴性样品可及时处理。
检验完后，检验人员应及时填写原始记录，签名后，送质控办出具检验报告。

⑻ 食品检验样品采集需要遵循的原则

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食品检验样品的采集

采样(Sampling)从产品中抽取少量的、有一定代表性的样品，供检验分析用，这一过程称为采样。
一、食品检验样品采集的原则
1. 采样前的一些准备工作
– 干冰：制冷剂。也可以用湿冰。
– 盒子或制冷皿：贮藏、运输样品。
– 灭菌容器：从塑料袋到灭菌的加仑漆桶等。
– 取样工具：茶匙、角匙、尖嘴钳、镊子、 量筒和烧杯等。
– 灭菌手套：
– 无菌棉拭子：一般用于拭取仪器设施和工厂环境区域。
– 灭菌全包装袋：装样品用。
• 当样品收集时，样品采集时的条件例如产品的温度、地点等，连同扦样样品号唛头，一并记录入检验员的注释说明中。
• 当采集无菌样品时，一条最重要的规则是：千万别污染样品。这需要样品采集人非常小心地采集所有附加样品，确保不违反这条规则。
2. 食品检样采集的原则
1)所采样品应具有代表性。
2)采样必须符合无菌操作的要求，防止一切外来污染
– 一件用具只能用于一个样品，防止交叉污染。
3)在保存和运送过程中应保证样品中微生物的状态不发生变化
– 采集的非冷冻食品一般在0～5℃冷藏，不能冷藏的食品立即检验。一般在36h内进行检验。
4)采样标签应完整、清楚
– 每件样品的标签须标记清楚，尽可能提供详尽的资料。
二、食品检验样品的采集方法
一)取样方案
一般说来，进出口贸易合同对食品抽样量有明确规定的，按合同规定抽样；无具体抽样规定的，可根据检验目的、产品及被抽样品的性质和分析方法确定抽样方案。
目前最为流行的抽样方案为(国际食品微生物学标准委员会)ICMSF推荐的抽样方案和随机抽样方案。
无论采取何种方法抽样，每批货物的抽样数量不得少于5件。对于需要检验沙门氏菌的食品，抽样数量应适当增加，最低不少于8件。
二)样本选择
三)抽样(采样)方法
国际食品微生物标准委员International Commission on Microbiological Specifications for Foods， ICMSF
ICMSF方法是从统计学角度来考虑，对一批产品检查多少个检样才能够有代表性，才能客观地反映该批产品质量的设想采样的
ICMSF提出的采样基本原则，是根据以下考虑来规定不同的采样数:
(1) 各种微生物本身对人的危害程度各有不同；
(2) 食品经不同条件处理后，其危害程度可分为3种情况：危害度降低；危害度未变；危害度增加。
ICMSF是将微生物的危害度、食品的特性及处理条件三者综合在一起进行食品中微生物危害度分类的。这个设想是很科学的，符合实际情况的，对生产厂及消费者来说都是比较合理的。
ICMSF的采样方案:ICMSF方法中包括二级法及三级法2种。二级法只设有n、c及m值，三级法则有n、c、m及M值。
– n：系指一批产品的采样个数。 c：系指该批产品中检样菌数超过限量的检样数。
– m：系指合格菌数限量。 M：系指附加条件后判定为合格的菌数限量 。
在中等或严重危害的情况下使用二级抽样方案，对健康危害低的则建议使用三级抽样方案。
1)二级法：
只设定合格判定标准m值，超过m值的，则为不合格品。通过检查在检样中是否有超过m值的，来判定该批是否合格。
如生食鱼片中细菌总数标准为n=5，c=0，m=100cfu / g。其中m=100cfu / g即为限量标准，n=5即取样5个，c=0即表示在该批5个检样中，若未见有超过m值为100cfu / g的检样，则该批产品为合格品。
cfu：colony forming unit, 菌落形成单位
2)三级法：
设有微生物标准值m及M值，如同二级法，超过m值的检样为该检样不合格。所有检样均小于m值，该批产品为合格；在m值到M值范围内的检样数在c值范围内，即为附加条件合格，否则为不合格；凡有检样超过M值者，则该批产品为不合格。
如澳大利亚冷冻糖制食品的大肠菌群标准为n=5，c=2，m=100，M=1000，其含义是从一批产品中，取5个检样，若所有检样大肠菌群结果均小于m=100，则判定为该批产品合格；若≤2个检样的结果位于m与M值之间(即100～1000之间)，则判定为附加条件合格；若有3个及以上检样的结果位于m与M值之间，判定为该批产品不合格；若有任一检样大肠菌群数超过M值(即1000)者，则判定该批产品不合格。
表3-1 ICMSF按微生物的危害度及食品处理进行情况分类
二)样本选择
样本选择可以分为有针对性选择和随机选择两种。
1、在现场抽样时，可利用随机抽样表进行随机抽样。
2、有针对性选择是根据已掌握的情况，如怀疑某种食物可能是食物中毒的原因食品，或者感观上已初步判定出该食品存在卫生质量问题，而有针对性地选择采集样本。
三)抽样(采样)方法
随机采样，即用一种能使总体的每一部分有同等机会出现在样品中的方法，从大批样品中抽出若干部分。
代表性采样(针对性采样)，即使用系统抽样法采样，以使所取的每一部分代表食品的相应部分。
随机抽样表系用计算机随机编制而成，包括1千、1万或10万个数字。其使用方法如下：
a.先将一批产品的各单位产品(如箱、包、盒等)按顺序编号。如将一批600包的产品编为1、2……600。
b.随意在表上点出一个数。查看该数字所在的行和列。如点在第18行、第10列的数字上。
c.根据单位产品编号的最大位数(比如，最大为三位数)，查出所在行的连续列数字，则编号与该数相同的那一份单位产品，即为一件应抽取的样品。
d.继续查下一行的相同连续列数字。该数字所代表的单位产品为另一件应抽取的样品。
e.依次按上述方法查下去。当遇到所查数超过最大编号数量，则舍去此数，继续查下一行相同列数，直到完成应抽样品件数为止。
三)抽样(采样)方法
1)、重量法 采取一定重量的食品作为一个样品。采取屠宰后两腿内侧肌或背最长肌100g/只；蛋、蛋制品样品，每份不少于200g。
2)、拭子法 拭子法采样不损害肉的完整性，操作简便。但是检出的活菌总数不高。
3)、灌洗法 对于全净膛光禽最好在洗涤后立即采样。本法比拭子法检出率高。
抽样方法对抽样方案的有效执行和保证样品的有效性代表性至关重要。
抽样必须遵循无菌操作程序，抽样工具如整套不锈钢勺子、镊子、剪刀等应当高压灭菌，防止一切可能的外来污染。容器必需清洁、干燥、防漏、广口、灭菌，大小适合盛放检样。抽样全过程中，应采取必要的措施防止食品中固有微生物的数量和生长能力发生变化。 应注意产品的均质性和来源，确保检样的代表性。
微生物检验时样品的制备 均匀食品：用四分法缩分；肉类、水产类食品：灭菌剪刀剪碎，四分法缩分。

⑼ 医学检验标本采集原则

医学检验标本采集原则

检验结果是临床医师在诊疗过程中所需要的重要信息，临床医师可以根据这些检验结果及病人的临床情况来区分疾病的不同阶段，观察疾病的变化，判断预后或观察疗效。所以分析前阶段样本的质量保证是直接关系到检验结果能否真实客观地反应患者当前病情的一个重要环节。下面是我为大家带来的关于医学检验标本采集原则的知识，欢迎阅读。

一、病人准备

1.病人状态

一般需在安静状态下采集标本，如患者处于高度紧张的状态时，可使血红蛋白、白细胞增高。由于劳累或受冷等刺激、也可见白细胞的增高。运动能影响许多项目的测定结果。活动的影响可分暂时和持续性两类。暂时性影响如使血浆脂肪酸含量减少;丙氨酸、乳酸含量增高。持续性影响，如激烈运动后使CK、LDH、ALT、AST和GLU等的测定值升高，有些恢复较慢，如ALT在停止运动1h后测定，其值仍可偏高30%～50%。

2.饮食

多数试验要求在采血前禁食12h，因为饮食中的不同成分可直接影响实验结果。

(1) 餐后血液中TG、ALT、GLU、BUN、Na等均可升高，进食高蛋白或高核酸食物，可以引起血中的尿素氮(BUN)和尿酸(UA)的增高。进食高脂肪食物后采集的血液样本，其血清会出现浑浊，可影响许多检验测定的正确性。甚至喝含咖啡的饮料，可引起淀粉酶(AMS)、AST谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)等升高。但空腹时间过长，会使GLU，蛋白质降低，而胆红素升高。

(2) 高脂餐后2～4h采血，多数人ALP含量增高，主要来自肠源性同工酶，且与血型有密切关系，O型或B型兼为Le+分泌型者增高更为明显。

(3) 高蛋白质饮食可使血浆尿素、血氨增加，但不影响肌酐含量。

(4) 高比例不饱脂肪酸食物，可减低胆固醇含量;香蕉、菠萝、番茄可使尿液5-羟色胺增加数倍。

(5) 含咖啡因饮料，可使血浆游离脂肪酸增加，并使肾上腺和脑组织释放儿茶酚胺。食物如含有动物血液，可引起粪隐血假阳性。

(7) 饮酒后使血浆乳酸、尿酸盐、乙醛、乙酸等增加，长期饮酒者高密度脂蛋白胆固醇偏高、平均血细胞体积增加、谷氨酰转肽酶亦较不饮酒的病人为高，甚至可以将这三项作为嗜酒者的筛选检查。

吸烟：瘾大者血液一氧化碳血红蛋白含量可达8%，而不吸烟者含量在1%以下。此外，儿茶酚胺、血清可的松亦较不吸烟者为高，血液学方面亦有变化，白细胞数增加、嗜酸粒细胞减少、中性粒细胞及单核细胞增多、血红蛋白偏高、平均红细胞体积偏高。吸烟组血浆硫氰酸盐浓度明显高于非吸烟组。

3.药物

药物对检验的影响非常复杂，在采样检查之前，以暂停各种药物为宜，如某种药物不可停用，则应了解可能对检验结果产生的影响。庆大霉素、氨芐青霉素可使谷丙转氨酶活性增高、咖啡因可使胆红素增加、维生素C可使血糖、胆固醇、甘油三脂、尿酸严重降低。

4.体位

体位影响血液循环，由于血液和组织间液因体位不同而平衡改变，则细胞成分和大分子物质的改变较为明显，例如由卧位改为站位，血浆ALB、TP、酶、Ca、胆红素、Tch及TG等浓度增高;Hb、HCT、RBC等亦可增加。由于体位的因素，在确立参考值时，应考虑门诊和住院病人可能存在的结果差异，故采集标本时要注意保持正确的体位和保持体位的一致性。

5.时间

病人准备还应考虑病人的生物钟规律，特别是激素水平分析，如女性生殖激素与月经周期密切相关;胆固醇则在经前期最高，排卵时最低;纤维蛋白原在经前期最高，血浆蛋白则在排卵时减少。生长激素于入睡后会出现短时高峰。胆红素、血清铁以清晨最高;血浆蛋白在夜间降低;血Ca往往在中午出现最低值。故采血时间应在相同时间进行。

二、标本采集

标本采集是直接关系检验结果的基本要素，如果标本采集不当，即使最好的仪器设备也难以弥补在采集标本时引入的误差和错误。

现将各种标本的采集要点分述如下：

(一) 血液标本

1.标本采集注意事项：

(1) 采静脉血时止血带结扎过久，可引起误差。如以结扎1min的样品结果为基数，则结扎3min，可使血浆总蛋白增加5%，胆固醇增加5%，铁增加6%，胆红素增加8%，乳酸则不能使用止血带。

(2) 血清标本应避免溶血。许多物质红细胞内和血清中(血浆)的含量是不一样的。如ALT红细胞内比血清高出数倍。血钾、AST高出几十倍，而HDH则高出百倍以上，一旦溶血，特别是严重溶血，造成血清(浆)中这些物质的`测定值增高，干扰测定结果。

(3) 要特别注意采血不能在输液的同侧进行，更应杜绝在输液管内采血，因输液成分会影响检测结果(使相应的结果偏高，如输K+、Glu时，可使所测K+、Glu明显增高)，或使血液稀释结果偏低。

细胞培养的样品要采用无菌技术，防止污染。

(4) 标本采集后，必须在试管或容器上帖上检验申请单号码、住院病人应有床号、姓名，且应当场核对无误。

(5) 采血顺序

推荐采用直针采血方式，顺序如下：

①血培养管，②凝血项目管(蓝帽)，③血沉管(黑帽)，④血清管(红帽或黄帽)，⑤肝素血浆管(绿帽)，⑥EDTA 管(紫帽)，⑦ 抑制血糖酵解管(灰帽)

必须指出的是，各种标本都必须严格贴好标签。

(二) 尿液标本

根据采集时间可分为清晨空腹尿、随机尿、计时尿(2h、3h、12h、24h等)、午后尿、餐后尿、症状典型时尿等。

(1) 晨尿为住院病人留尿的主要方法，早晨起床后收集第一次尿，可用尿常规检验。

(2) 随机尿多为门诊就诊病人的留尿检验方法。

(3) 餐后尿为收集进餐后2h尿，主要用于了解葡萄糖代谢情况，用以筛查隐性糖尿病或轻症糖尿病。

(4) 计时尿应于计时开始时排空尿液，然后于规定时间内至截止时间留尿，计时尿多用于肾功能和有形成分排出率的评估，亦用于计算淀粉酶或肌酐的排出率。

(三) 粪便标本

采集后及时送检，如作原虫阿米巴检查应保持一定的温度，且立即送检，立即检查，如检查蛲虫则不必送检粪样，而应于晨起时排便前用棉拭擦肛门周围，可得虫卵。粪便标本应不污染容器外表，一般以无滤漏容器留取5～10g即可。

(四) 脑脊液、浆膜腔液、关节液

均由临床医师穿刺采样，检验科应提供专用的各种试管或容器，及时送送检。

(五) 痰液标本

采集晨间第一口痰，多用于细胞学及微生物学检查。采样前应先反复漱口，经深呼吸数次后用力咳痰，不可吐入唾液。微生物培养取样应在抗生素等药物治疗开始之前，如已使用用抗菌药物，则应选血液药物浓度最低水平时采样。

(六) 阴道分泌物

由妇产科医师采样后即时送检，否则影响滴虫动力，易于漏检。

(七) 其他标本

根据具体检验项目而定，临床医师在开申请单前，应同检验科相关部门联系并询问详细后，注明检查要求，再采样并及时送检。

总之，各种检验标本的采集合适与否，直接关系检验质量，应予以重视。

三、标本保存和运送

标本保存和运送是检验质量保证的重要环节之一。由于采集的标本受各种因素的影响，可能使检验结果受或大或小的误差，因此必须正确掌握标本保存和运送。标本采集后尽量立即送检，如在室温放置时间过长会造成血液成分的变化(如血糖及酶活性降低)，也可造成溶血现象。

(1) 采样后须立即送检的常规项目：血氨、血沉、血气分析、酸性磷酸酶、乳酸以及各种细菌培养，特别是厌氧菌培养。

(2) 采样后0.5h内送检的常规项目：血糖、电解质、血液细胞学、凝血试验、体液细胞学、涂片找细菌、霉菌等。

(3) 采样后1～2 h内送检的常规项目：各种蛋白质类、色素类、激素类、脂类、酶类、抗原、抗体测定等。

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⑽ 下呼吸道感染微生物检验的标本留取和运送的要求

下呼吸道感染微生物检验的标本留取和运送的要求

你对下呼吸道感染微生物检验的标本留取和运送的要求了解吗?你知道下呼吸道感染微生物检验的标本留取和运送的要求是怎样的吗?下面是我为大家带来的下呼吸道感染微生物检验的标本留取和运送的要求的知识，欢迎阅读。

1.纤维支气管镜标本的采集要求

纤维支气管镜可采集到感染部位的标本，包括BAL、BS、PSB及支气管穿刺活检标本，均应由呼吸科医师或经培训医师采集;为防止污染，应采用吸入麻醉剂，勿从支气管镜的工作腔中吸取灌洗液标本;标本采集顺序为：BS、BAL、PSB和活检标本，应避免带血。

2.痰、气管吸出物标本的留取

当有下呼吸道细菌感染指征时，患者在医护人员的指导下先用无菌生理盐水漱口，可减少口腔污染菌的数量，如有假牙应先摘掉;咳出清晨第一口深部痰，留至带螺旋盖的防漏无菌痰杯内。仅当插管患者出现肺炎症状时(如发热或浸润)采集气管吸出物，因气管在插管24 h后即有定植菌，在无肺部感染症状时吸痰送检，培养结果往往与疾病不符。婴幼儿和小龄儿童可吸取气管和支气管的分泌物，常用于诊断细菌性肺炎。

3.标本的运送要求

临床采集的标本均应尽快送至实验室，实验室对来自急诊、新入院患者和有创方法采集的标本(如：BAL和肺活检标本)要尽快处理，以保证致病菌的活性，避免造成重复采集标本。通常做细菌学检验的标本应在2 h内(室温)送至微生物实验室。延误送检将导致口咽部定植菌过度生长，有临床意义的病原菌数量减少。如需远程运送，建议将标本放置2-8 ℃环境(不超过24 h)，但培养分离到肺炎链球菌等苛养菌的机会和数量将会减少。实验室应在报告中对标本延迟送检或经低温冷藏予以说明，并指出可能对培养结果造成的影响。

4.拒收的标本

实验室接收标本后，首先筛选并拒收以下不合格标本：24 h内重复采集的痰培养标本、唾液、鼻冲洗液和分泌物、鼻孔拭子、咽部标本、未经保护套管收集的支气管刷培养标本及痰的厌氧菌培养标本。除支气管穿刺吸出物、PSB、活检标本、胸水或其他未经污染的标本外，其余类型的标本均不适合做厌氧菌培养。

5.涂片革兰染色判断标本的.合格性

肺部感染的最常见机制是肺泡内吸入了口咽部定植菌，培养方法的局限性在于敏感性低，且无法判断分离菌是感染或定植。因此，实验室需借助涂片革兰染色方法评估痰标本的质量。此外，涂片还可提高下呼吸道感染病原学诊断的特异性和敏感性，并发现培养不能生长的细菌，是既快速又低成本的方法，但需要实验室人员的丰富经验。

通常标本中上皮细胞的数量代表污染程度，白细胞内或外的优势菌(非黏附在鳞状上皮细胞上)有助于预测肺部致病菌。可接受做培养的痰、支气管吸出物标本包括涂片革兰染色所见：(1)<10个鳞状上皮细胞(SEC)/低倍视野(LPF)，大量多形核白细胞(WBC>25个/LPF)，且存在肺泡巨噬细胞和柱状上皮细胞均提示来自深部痰标本;(2)WBC>25个/LPF，SEC<25个/LPF;(3)WBC∶SEC>10∶1，单一形态的细菌量达到3+-4+。不适合做培养的判断：当SEC>10个/LPF，提示标本被唾液污染;还包括当吸痰涂片未见细菌时。

6.涂片可提示与感染相关的信息

通过涂片革兰染色，实验室应报告临床提示感染的信息，虽然由两种致病菌同时引起的感染不常见，但当两种形态的细菌均与白细胞相关时要报告;即使涂片未见细菌时仍有助于评价患者状况，可能隐藏着某些特殊菌，如军团菌、内源性真菌、结核分枝杆菌或其他可引起非典型肺炎的致病菌;质量合格的标本中，涂片有正常菌群及多种细菌(通常白细胞内有空泡或液泡)，特别当培养生长正常菌群时，报告要提示有吸入性肺炎等。

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