在微生物室接到一个标本应该怎么做

⑴ 做微生物实验的步骤

1、准备工作，培养基的配制及灭菌（121-126度灭30分钟高压蒸汽式灭菌），玻璃器皿的灭菌（170度灭2小时干热灭菌，也可用湿热灭菌）若量大可加长灭菌时间。

⑵ 微生物检验标本采集规范

微生物检验标本采集规范

正确采集、运送、保存及处理微生物检验标本，对于保证微生物检验质量至关要，为了准确检出病原菌，避免漏检及误诊，临床医护人员及实验室工作人员应掌握微生物检验标本采集、运送、保存及处理原则。下面是我为大家带来的关于微生物检验标本采集规范的知识，欢迎阅读。

标本采集的`一般原则：

1、早期采集：采集时间最好是病程早期，急性期，且必须在使用抗菌药物(俗称消炎药)之前采集，确保病原菌的检出;

2、无菌操作：采集标本时应尽量减少或避免感染部位附近皮肤或黏膜常居菌群污染和防止外源性细菌污染标本，采集的标本盛于无菌容器内送检。盛装标本的容器不能使用消毒剂处理，标本中也不得添加防腐剂，以免降低病原菌的分离率;

3、适量标本：标本量过少可能导致假阴性结果。

各种标本采集注意事项：

一、呼吸道标本采集

(1) 送检指征：凡是发热、咳嗽和咳痰，痰呈脓性，黏稠或血性，并伴有胸痛，气急，外周血白细胞总数及中性粒细胞比例明显增高，应采集痰液或下呼吸道标本。

(2) 标本采集时间：a、以晨痰为好，患者清晨用凉开水反复漱口后用力自气管咳出第一口痰，将痰采集于无菌容器中尽快送检。b、在应用抗菌药物之前采集标本。

二、脓液及创伤感染分泌物标本采集

(1) 送检指征：红、肿、热、痛和功能障碍是化脓性感染的五个典型特征。

(2) 采集方法：a、开放性脓肿标本：包括眼、耳、扁桃体、术后切口感染等脓性分泌物。首先用无菌生理盐水清洗病灶表面的污染杂菌，然后采取靠近组织部分脓液及病灶深部的分泌物立即送检。b、闭锁性脓肿标本：指有完整脓壁与体腔、与外界不相通的脓肿。闭锁脓肿应采集渗出物和脓肿壁标本。注意不主张用拭子采集标本，对患者病灶局部及皮肤或黏膜消毒后，用无菌注射器将脓肿内容物吸出，然后切开脓肿，引流采集脓汁(大于1ml)用于检验。

(3) 送检时间：标本采集后应在2小时内(室温放置)送至细菌室。一般在患者使用抗菌药物之前或停止用药后1-2日采集。

三、泌尿生殖道标本采集

(1) 送检指征：尿路感染、肾结核、泌尿系结石、肉眼脓尿或血尿，尿常规检查有白细胞或亚硝酸盐阳性，不明原因发热，尿道口有脓性分泌物等。

(2) 采集时间及方法：应选择在抗菌药物应用之前采集尿液，通常应采集晨起第1次尿液送检，确保尿液在膀胱内停留4小时以上。方法是患者留取标本的前一天晚上少饮水，晨起女性先用肥皂水清洗外阴部(男性翻转包皮，清洗尿道口)，再以无菌盐水冲洗尿道口，然后排尿弃去前段，留取中段尿10-15ml于灭菌容器中，立即加盖送检。

四、粪便标本采集

(1) 送检指征：腹泻、大便每日≥3次，粪便的形状异常，可为稀便、水样便、粘液便、脓血便及血便，可伴有恶心、呕吐、食欲不振、发热、腹痛及全身不适等。

(2) 采集方法：自然排便后，挑取有脓血或黏液部位的粪便，液状粪便取絮状物盛于无菌的容器中送检。

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⑶ 请写出制作微生物玻片标本的具体步骤。

制作微生物玻片标本通常采用涂片法，微生物包括细菌和真菌（或包括病毒），细菌个体小，通常用涂片法制作玻片标本。涂片法是装片法制作玻片标本的一种方法。制作方法是，细菌可以用细菌液直接涂布在载玻片上，盖上盖片直接观察或干燥后染色观察，染色观察通常需要洗去染色液后观察。制作真菌标本可以采用涂片法、撕片法、贴片法和切片法，单细胞或孢子或菌丝采用涂片法，大型真菌有较大的组织块，可以采用撕片法（如撕取一部分蘑菇丝）、贴片法（将蘑菇的菌褶贴到载片上）和切片法（切片的方式观察蘑菇的结构）。
制作植物玻片标本方法很多，根据材料不同和观察目的不同采用不同方法。涂片法（观察果实营养组织，如西瓜瓤）、撕片法（观察洋葱表皮、观察导管）、切片法（观察组织、器官结构）、磨片法（坚硬的果核磨成薄片观察）。
切片法分为徒手切片、冰冻切片和石蜡切片等方法。

⑷ 院感物表采样后，微生物室怎么操作

物体表面的菌落总数样本，一般是采集在10ml生理盐水管中的。
在微生物室操作时，首先用力振摇试管进行混匀，然后无菌操作取1ml接种于无菌平皿内，倾入灭菌完毕并冷却至45摄氏度左右的营养琼脂，每个稀释度做两块平皿，待琼脂冷却凝固后翻转平板进行培养。

⑸ 微生物检验标本的正确采集及注意事项

微生物检验标本的正确采集及注意事项

正确采集临床微生物标本，直接影响到微生物培养鉴定结果。可靠的检验结果可以指导临床诊断治疗，为临床科学用药和成功的感染控制提供依据，是正确、合理使用抗菌药物，延缓细菌耐药，减少抗菌药物滥用和监测医院感染的第一步，也是最重要的一步。下面是我为大家带来的微生物检验标本的正确采集及注意事项的知识，欢迎阅读。

一、 血液标本的采集

1、 采集方法

（1）75%酒精清洁局部皮肤。

（2）待皮肤干后，再用2%—2。5%碘酒从穿刺点中心部位开始消毒，范围不应小于5cm（直径），且不能用手指触摸消毒后的皮肤。

（3）皮肤碘酒干后（约1min），穿刺采集血液，采血量成人5—10ml，婴幼儿1—5ml。

（4）采血后立即在床旁接种培养瓶，并迅速轻摇，充分混匀防止凝固，但又不可剧震以防溶血。

2、注意事项

（1）怀疑菌血症应尽早采血，体温上升（38。5℃）采血可提高阳性率，但也要防止因等待而延误时机。

（2）对已经使用抗菌药物，而又不能停药者，也应在下次用药前采血。切忌不要在静滴抗菌药物的静脉处采取血标本，也不能从静脉导管及动脉插管中取血。

（3）培养基与血液之比以10：1为宜，以稀释血液中的抗生素，抗体等杀菌物质;有人主张对接受抗菌药物治疗的病人，培养基与采血量之比可为20：1或大于这个比例。

（4）近年研究表明，将血液注入血培养基前，更换针头反而易导致污染。

（5）每例至少采血两次，间隔0。5—1h，以利于提高阳性率和区分感染菌与污染菌。

（6）疑为细菌性心内膜炎及布鲁氏病的病人，以肘动脉或股动脉采血为宜，除在发热期采血外，并要多次采血（24h 3—4次）和增加采血量（可增加10ml）。

（7）采血后立即送检，如不能立即送检可置室温，而不能放置冰箱。

（8）如临床表现很似败血症，而血培养多次阴性者，提示考虑厌氧菌和真菌感染的可能。

二、骨髓的采集

1、采集方法

在病灶部位或髂前（后）上脊处严格消毒后抽取骨髓1ml，注入血培养瓶内。

2、注意事项

（1）骨髓内含有大量的单核巨噬细胞系统的细胞，因而骨髓培养对伤寒病人的.诊断较血培养优越。

（2）用于怀疑细菌性骨髓炎病人。

三、静脉导管标本的采集

1、采集方法

（1）常规导管部位皮肤消毒。

（2）无菌方法从病人体内拔出静脉导管，剪下导管尖端5cm，放入无菌瓶中。

（3）立即（15min内）送检，避免标本干燥。

2、注意事项

（1）剪下的导管立即接种血平皿，可提高阳性率。

（2）肉汤反复冲洗导管腔内，冲洗液做定量培养。

（3）有人将剪下的导管置肉汤增菌液或培养瓶中，此法不能区分导管感染菌与少量定植菌。

（4）卫生部在《医学感染诊断标准》（试行）（2001年1月3日施行）中规定：导管管尖培养其接种方法应取导管尖端5cm，在血平板表面往返滚动一次。细菌≥15cfu/平板，即为阳性。

四、呼吸道

1、痰标本

（1）采集方法

①清晨起床后用凉开水漱口多次，以除去口腔内大量杂菌，用力咳出肺深部的脓痰，置于清洁干燥容器中送检。

②痰量极少者可用45℃ 3%—10%的氯化钠溶液约25ml雾化。对于咯痰量少的幼儿，可轻轻压迫胸骨上部的气管，当其咯痰后用无菌棉棒采集标本。

③咳嗽无力或昏迷病人，可用吸痰管经鼻腔或口腔经气管腔内吸引痰液送检。

④气管切开者可以深入透气孔中取痰。

⑤可用支气管镜直接在病灶部位采集高浓度的病原菌。

⑥用无菌导管经鼻腔插入气管镜内，缓慢注入无菌蒸馏水5ml，取出导管。留取患者在3h内咳出的痰液，放入无菌容器中送检。

⑦胃内采痰法。无自觉症状的结核病人。有时可把痰误咽入胃内，因而可采用胃内溶物做结核菌培养，其阳性结果比咯痰高10%左右，该方法于晨起空腹时，把灭菌的胃管，从鼻腔送入胃内，用20ml注射器抽取胃液。

（2）注意事项

①痰标本的采集以晨痰为准，此时患者痰量较多且含菌量也多。

②标本采集后立即送检，若不能及时送检者，可暂存2—8℃冰箱。若晚1—2h接种，会失去苛氧菌，并使得革兰阴性菌过分生长。

③可接受的标本：痰;支气管灌洗液，支气管刷，支气管活检;肺吸出物和肺活检。不能接受的标本：唾液;24h留的痰（结核杆菌培养除外）;拭子。

④ 痰标本的质量评价：（用显微镜筛选）在低倍镜下，检查鳞状上皮细胞，至少10个视野，集中在有白细胞处，合格标本为白细胞与鳞状上皮细胞比例大于2：1。

2、鼻拭子

（1）用湿的拭子（生理盐水）;

（2）需插两个鼻孔;

（3）深入3。3cm左右，转动4—5次;

（4）以上用于诊断金黄色葡萄球菌暴发时的鼻带菌者。

3、咽拭子、口腔拭子

（1）采集方法（到细菌室取专用拭子）

①患者清水漱口后，由检查者将其舌外拉，用棉拭子将咽后壁或悬雍垂的后侧反复擦拭数次;

②化脓性扁桃体炎、口腔念珠菌病时，直接用棉拭子在病灶部位擦拭;

③插入运送培养基中立即送检，防止干燥。

（2）注意事项

①棉拭子应避免触及舌、口腔黏膜和唾液;

②采集标本前数小时不可用消毒药物漱口或接触病灶局部。

五、胃肠道

1、粪便

（1）采集方法

选取脓血、黏液粪便2—3g，液体粪便取絮状物1—2ml。盛于灭菌瓶中或蜡纸盒中及时送检。

（2）注意事项

①标本要采集新鲜的，陈旧标本影响阳性检出率;

②切忌粪尿混合;

③若要分离阿米巴，标本要立即送检并注意保温;

④运送培养基可提高阳性率;

⑤分离难辨梭菌时需选不成形或水样便;

⑥霍乱弧菌、大肠杆菌Ο157感染的腹泻便则为水样便或血性便;

⑦标本在病理早期或治疗前采集;

⑧一般认为用抗菌药三天后，标本培养病原菌阴性。

2、肛拭子

在无法获得粪便的情况下，可用经无菌甘油水或无菌生理盐水湿润的肛拭子插入肛门4—5cm（幼儿2—3cm）处，轻轻旋转擦取直肠表面黏液后取出，置运送培养基中送检。

六、泌尿道

根据卫生部《医学感染诊断标准》（试行）通知，泌尿系统临床诊断为：患者出现尿频、尿急、尿痛等尿路刺激症状，或有下腹触痛、肾区叩痛、伴或不伴发热，并具有下列情况之一：

（1）尿检白细胞男性≥5个/高倍视野，女性≥10个/高倍视野，插导尿管患者应结合尿培养;

（2）临床已诊断为泌尿道感染，或抗菌治疗有效而认定的泌尿道感染。

1、中段尿

（1）采集方法

①女性 采样前用肥皂水或0。1%的高锰酸钾溶液冲洗外阴，用手指阴x分开排尿，弃其前段尿，不终止排尿，留取中段尿10ml于灭菌容器内。

②男性 用肥皂水清洗尿道口，或0。1%的碘伏溶液消毒尿道口，灭菌纱布擦干，上翻包皮，弃其前段尿，不终止排尿，留取中段尿10ml于灭菌容器内。

（2）注意事项

①导尿虽然可以减少污染，但是多次重复导尿可以造成逆行性感染，因此近年来大多采用中段尿。

②女性病人最好采取膀胱截石位由护士采取标本，减少污染。

③采集标本以晨起第一次尿液为佳。

④采集标本后，若不能在1h内送检，暂放4℃冰箱，但不能超过8h。若尿液标本在室温下放置超过2h，即使接种培养结果细菌数≥104 cfu/ml获103cfu/ml，也不能作为诊断依据，应重新留取标本送检。

⑤疑为尿道炎时可将最初3—4ml尿液收集在灭菌容器内。该尿中即使有少数细菌，如反复检查为同一细菌，也应考虑为病原菌。

⑥儿童在多数情况下，仅冲洗外阴是不够的，故采集标本较为困难。如果尿内细菌明显增多，可以高度怀疑为尿路感染，无菌则可否定。

⑦若细菌培养结果为两种或两种以上细菌，需考虑污染可能，建议重新留取标本送检。

⑧尿液中不得加入防腐剂，消毒剂否则影响阳性检出率。

2、膀胱穿刺采集法

避免污染是很困难的，培养结果与病情不符时，或尿厌氧菌培养，或婴幼儿中段尿采集困难时，可以用耻骨上穿刺膀胱内采尿。

3、留置导尿者采集法

拔去闭式引流的集尿袋，弃去导尿管前段尿液，留无污染的膀胱内尿液10ml送检。不可从集尿袋下端留取标本。

七、脑脊液

1、采集方法

由临床医师以无菌方法收集脑脊液3—5ml（细菌1ml，真菌2ml抗酸杆菌2ml，病毒1ml）盛于无菌试管或小瓶中立即送检。

2、注意事项

（1）采集标本后立即送检，因脑膜炎奈瑟菌离体后迅速自溶，肺炎链球菌及流感嗜血杆菌也易死亡;

（2）疑为上述细菌感染时，应注意保温，不可置冰箱或低温保存。

八、胆汁

1、十二指肠引流法

在无菌操作下，将十二指肠导管吞咽至十二指肠乳头部（距齿65—70cm）时，收集A液（来自总胆管，为橙黄或金黄色），随之注入25%硫酸镁溶液40ml，经1—2min后再采取B液（来自胆囊，为棕黄绿色），随后收取C液（来自肝胆管，为柠檬色），一般认为B液做细菌培养意义较大。

2、胆囊穿刺法

胆囊造影术时，可同时采取胆汁。

3手术采取法

由总胆管、胆囊直接穿刺采取胆汁。

以上采集之标本应立即送检，否则置于4℃冰箱内，采集时需小心，避免被唾液、十二指肠液细菌污染。

九、穿刺液标本

穿刺液包括胸水、腹水、心包液、关节液、鞘膜液。

1、采集方法

由临床医师行穿刺术抽取。胸腹水可收集5—10ml，心包液、关节液收集2—5ml，置于无菌含抗凝剂的试管或小瓶中，充分混匀后，立即送检。抗凝剂10%EDTA二钠盐，标本与抗凝剂之比10：1。

2、注意事项

⑴标本采集应在患者用药之前或停止用药1—2天后进行;

⑵不能立即送检可置4℃冰箱保存;

⑶疑为淋病性关节炎患者的关节液，采集后立即送检，或床旁培养为佳;

⑷不能用棉拭子浸蘸标本送检。

十、脓汁及病灶分泌物

1、伤口

⑴表面伤口拭子采集方法及注意事项

① 仅限于皮肤与皮下组织，包括手术切口、褥疮溃疡、新生儿脐炎、婴儿脓疮病。

②用无菌生理盐水或75%的酒精擦去病灶表面渗液;

③用无菌棉拭子抹去及较深部的脓汁分泌物或组织送检;

④采集褥疮溃疡标本时应采集褥疮边缘的脓性分泌物，拭子放在运送培养基中立即送检，不要采集创口表面的渗液。

⑵伤口、脓肿、窦道、坏疽组织采集方法及注意事项

①闭锁性脓肿用碘酒和酒精消毒皮肤后，用灭菌注射器穿刺抽取全部脓液送检，疑为厌氧菌感染时，排去针管内空气将针头插入灭菌橡胶塞内送检;

②伤口处若有脓及渗出物要用无菌棉签深入各种窦道中擦拭，用小刀刮取，穿刺抽吸或手术切除获得深处伤口标本;

③当创伤出血时，敷有药物在2h以内及烧伤在12h内均不应采集标本，此时获得阳性结果机会甚少。

④采集标本注意观察脓汁及分泌物性状、色泽、气味等。可为培养鉴定提供依据。

⑶烧伤创面

①烧伤创面需要脓性分泌物，焦痂迅速分离变棕黑、黑或紫罗兰色，烧伤边缘水肿。患者发烧>38℃或低体温<36℃，合并低血压。

②用无菌生理盐水冲洗伤口创面。

③由于创面部位不同，细菌种类也不尽相同，要用灭菌棉拭子采集多个部位的炎症区送检。

④采集痂下变黑或变性的不健康区边缘或引流液等做定量培养及组织活检。

2、厌氧伤口拭子

⑴厌氧专用棉棒或玻璃棒触及深部脓汁;

⑵可用注射器抽吸，排去针管内空气将针头插入灭菌橡胶塞内送检;

⑶立即送检，送检过程中必须保持在无氧条件;

⑷不宜做厌氧菌培养的有痰、喉拭子、鼻咽拭子、齿龈拭子、直肠、阴道和宫颈拭子以及回肠、结肠造瘘术的流出物，胃、小肠及大肠内容物等。

3、尿道口分泌物拭子

⑴男性用无菌纱布擦拭和清洗尿道口，然后采取从尿道口溢出的脓性分泌物;

⑵采集前列腺液时，先将尿道、膀胱冲洗，然后从肛门用手指按摩前列腺，促使前列腺液溢出;

⑶女性病人先用灭菌纱布或棉拭子仔细擦拭或清洗尿道口，然后从阴道内诊压迫尿道，使分泌物溢出;

⑷取子宫颈分泌物，先用内窥镜扩张阴道，然后从宫颈口用灭菌棉拭子采取分泌物，尽量避免被阴道宫颈附近正常菌群的污染。

4、蜂窝织炎

⑴用无菌生理盐水或酒精消毒皮肤;

⑵用细针在炎症最显着处穿刺吸引;

⑶抽少量灭菌生理盐水在针管内;

⑷注入无菌试管内送检。

5、组织标本

⑴活体组织采取的微量标本，可直接接种在培养基内;

⑵表浅组织可直接用棉拭子擦拭、小刀刮去;

⑶较大组织块的表面可采用烧灼或浸入沸水中5—10s，然后用灭菌剪刀切开，取其中的脓汁;

⑷深部组织标本可经皮肤穿刺或手术切取送检;

⑸组织标本不可用福尔马x固定;

⑹有时也可将沾有脓汁的最内层敷料放入无菌平皿内送检。

十一、眼标本采集

⑴一般细菌，以无菌棉拭子采集眼分泌物，尤其脓性分泌物;

⑵沙眼衣原体，首先擦去眼结膜上面的分泌物，然后用无菌小刀刮取穹窿部及眼结膜上皮细胞，用链霉素处理后备用;

⑶对于刚治疗或药物冲洗过的患者最好12—24h后采集标本;

⑷对于泪囊炎患者可稍加挤压后以无菌棉拭子采集标本。

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⑹ 观察水中的微生物十怎样做一个标本观察

初学者可以制作 洋葱内表皮细胞

准备

1.擦拭载玻片， 在上面滴清一滴清水

2.制作临时装片 用镊子撕取洋葱内表皮 ， 展平 ，放在载玻片上， 盖盖玻片

3.染色 在载玻片一旁滴一滴碘液，在另一边用吸水纸吸取 其他的植物也类似，如用锋利刀片切幼嫩的茎或者叶片，记住要薄，多切几片，放在清水里，再用毛笔去蘸取，放在载玻片上， 我是学生物的，你有这些仪器已经可以做简单的显微观察了．例如，洋葱表皮细胞观察和细胞失水实验 方法是，现在载波片上滴一滴清水（有条件的用蒸馏水），然后取新鲜的洋葱，在紫色区用镊子撕下一小块表皮，在水滴上展平，盖上盖玻片，注意斜着盖这样可以不留气泡，盖好后就可以放在载物台上进行观察，注意细胞形态，如果需要更进一步还可以在载玻片一侧滴上一滴盐水或是糖水，将玻片倾斜，让盐水将整个洋葱切片浸润，然后观察，可以看到细胞失水；再用清水洗玻片再观察，细胞重新吸水还原．

1.对光

2.撕取植物表皮薄膜放置载玻片上

3.盖上盖玻片（注意从一侧，慢慢放下，避免气泡出现）

4.滴碘酒，再从另一侧拿吸水纸吸引

5.可以观察了!